Uproszczona izolacja i obsługa ludzkich pułapek zewnątrzkomórkowych neutrofilów (NET)

Ogólnym celem poniższego eksperymentu jest zademonstrowanie prostego protokołu izolowania neutrofili, pułapek zewnątrzkomórkowych lub sieci z ludzkiej krwi pełnej przy użyciu łatwo dostępnych odczynników. Osiąga się to poprzez wyizolowanie neutrofili z ludzkiej krwi pełnej, a drugim krokiem jest technika wirowania różnicowego. Wyizolowane neutrofile są stymulowane PMA w celu indukowania tworzenia siatki, zwanej również NETosis.

Następnie przygotowuje się płytkę z bezkomórkowym izolatem siatki i dodaje komórki rakowe, aby zademonstrować, jak siatki wpływają na adhezję komórek. Wyniki pokazują, że dodanie monowarstwy siatki poprawia adhezję 5 49 komórek nowotworowych i że adhezja ta zmniejsza się, gdy siatki ulegają degradacji. Korzystanie z DNAS one Wizualna demonstracja tej metody ma kluczowe znaczenie.