Name: Przeciąganie łap: nowatorska, czuła analiza testu cylindra myszy (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-04-29T16:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 14 s
Description: Poznaj nowatorską analizę przeciągania łap w teście cylindra myszy, która pozwala wykrywać nawet drobne uszkodzenia mózgu niewidoczne tradycyjnymi metodami. Ta technika poprawia ocenę deficytów motorycznych w modelach udarowych.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dziękujemy Panu/Pani Johnowi Crowellowi i Panu Terry'emu Upshallowi za ich wiedzę techniczną i pomoc przy fotografowaniu i filmowaniu. Prace te były wspierane przez granty operacyjne dla JLV z Kanadyjskich Instytutów Badań nad Zdrowiem i Korporacji Badawczo-Rozwojowej Nowej Fundlandii oraz grant Heart & Stroke Foundation of Canada Canadian Partnership for Stroke Recovery Catalyst. RBR otrzymał stypendium Keith Griffiths Memorial Heart & Stroke Foundation Graduate Scholarship.

Oświadczenie etyczne: Wszystkie eksperymenty zostały zatwierdzone przez Komitet Etyki ds. Opieki nad Zwierzętami Uniwersytetu Memorial of Newfoundland zgodnie z wytycznymi Kanadyjskiej Rady ds. Opieki nad Zwierzętami.
1. Myszy
<ol>
	<li>Użyj dorosłych myszy. W tym badaniu wykorzystano dorosłe samce myszy FVBN (n=10) w wieku 2-4 miesięcy. Myszy domowe w odwróconym cyklu światła i ciemności o godzinie 12:12 i zapewniają standardową karmę dla gryzoni i wodę ad libitum.</li>
</ol>
2. Materiały wymagane do testu cylindra
<ol>
	<li>Zaopatrz się w stół z przezroczystym blatem, aby sfilmować test cylindra. Wymiary stołu nie mają znaczenia, blat musi być z pleksi lub szkła, a pod stołem musi być wystarczająco dużo miejsca, aby umieścić lustro. Pozwala to na filmowanie myszy od dołu. Użyj lustra pod stołem, aby odbić obraz przez cylinder. Alternatywnie użyj odwróconej kamery, jeśli jest dostępna. Wymiary stołu użytego w tym protokole to 54 x 56 x 66,5 cm (szer. x dł. x wys.) z blatem o wymiarach 51 x 51 cm (szer. x dł.).</li>
	<li>Zdobądź lustro. Wymiary lustra użytego w tym protokole to 34 x 58cm (szer. x dł.).</li>
	<li>Zaopatrz się w przezroczysty/pleksiszklany cylinder, w którym mysz będzie mogła działać. Wymiary cylindra użytego w tym protokole to 17,5 cm wysokości, 8,8 cm średnicy wewnętrznej, 9,5 cm średnicy zewnętrznej przy grubości ścianki 0,35 cm. W przypadku bardziej aktywnych odmian myszy może być wymagany wyższy cylinder.</li>
	<li>Umieść cylinder na blacie stołu i sfilmuj odbicie w lustrze poniżej.</li>
	<li>Wymagana jest kamera wideo i statyw. Nagrywaj filmy z prędkością około 650 Kb/s, czyli około 190 Mb na 5 minut filmu cylindrycznego. Upewnij się, że kamera ma funkcję zoomu, aby upewnić się, że cylinder obejmuje całe pole view. 
	UWAGA: Kamera wideo używana w tym protokole to Sony DCR-SR42, 40-krotny zoom optyczny, 2,000-krotny zoom cyfrowy, 680 kpix, która wykorzystuje wideo z przeplotem NTSC o standardowej rozdzielczości.)</li>
	<li>Zaopatrz się w oprogramowanie do analizy – odtwarzacz multimedialny z obsługą wideo i modulacją prędkości odtwarzania. Odtwarzacz multimedialny używany w tym protokole to VLC Media Player v2.1.2.</li>
	<li>Zaopatrz się w komputer z systemem operacyjnym zdolnym do uruchomienia odtwarzacza multimedialnego i monitora.</li>
	<li>Wymagane jest elektroniczne przechowywanie filmów. Pobieraj filmy na zewnętrzny dysk twardy lub kopiuj je na płyty DVD w celu długoterminowego przechowywania. 
	UWAGA: Przy 190 MB na film 84 sesje zmieszczą się na karcie SD o pojemności 16 GB, a 168 sesji zmieści się na karcie SD o pojemności 32 GB. Ze względu na stosunkowo niską cenę nośników SD i niepewność co do tego, ile czasu niektóre myszy potrzebują na ukończenie 20 tylnych części, zalecana jest karta o pojemności 32 GB. W obecnym badaniu filmy zostały skopiowane z kamery na zewnętrzny dysk twardy o pojemności 2 TB, a następnie ponownie skopiowane na płyty DVD jako kopia zapasowa.</li>
</ol>
3. Eksperymentalna konfiguracja testu cylindra
<ol>
	<li>Przymocuj lustro pod stołem pod kątem 45 stopni do blatu. Zrób to za pomocą dwóch wsporników przymocowanych do nóg stołu, aby podeprzeć odpowiednio górną i dolną część lustra. Położenie nawiasów jest zaznaczone w widoku stołu z boku (Rysunek 1A) i widoku stołu z przodu (Rysunek 1B).</li>
	<li>Umieść cylinder na środku stołu. Narysuj cztery równoodległe linie w miejscu, w którym cylinder znajduje się na stole, za pomocą czarnego znacznika (Sharpie), aby cylinder można było podnieść i przywrócić do tej samej pozycji (Rysunek 2). Narysowanie ich na spodniej stronie przezroczystego blatu pozwala na czyszczenie blatu między testami na zwierzętach bez rozpuszczania tuszu markera.</li>
	<li>Zamocuj aparat i statyw. Skieruj aparat na lustro tak, aby obraz patrzył bezpośrednio przez lufę cylindra. Upewnij się, że cała wewnętrzna ścianka cylindra jest widoczna i nie jest zasłonięta przez podstawę (Rysunek 3). Zobacz widok z boku na konfigurację, w tym względny kąt ustawienia kamery i lusterka, z góry (Rysunek 4A) i z poziomu stołu, w tym z podnoszeniem myszy (Rysunek 4B).</li>
	<li>Przygotuj karty z wskazówkami, aby zidentyfikować każdą mysz przed filmowaniem. Upewnij się, że karty zazwyczaj zawierają numer identyfikacyjny każdej myszy, punkt czasowy testu (np. 3 dni po zabiegu) oraz datę sesji filmowania. Nie dołączaj grupy leczonej do karty sygnału, aby upewnić się, że eksperymentator jest zaślepiony.</li>
	<li>Film w standardowych warunkach oświetlenia wewnętrznego, ponieważ ten poziom światła jest wymagany, aby wyraźnie widzieć ruchy myszy wokół cylindra. 
	UWAGA: Jeśli to możliwe, filmowanie w ciemności za pomocą kamery z czerwonym światłem może wystarczyć, jednak najpierw należy sprawdzić, czy dotknięcia i przeciągnięcia łapą są wyraźnie widoczne do oceny ilościowej.</li>
</ol>
4. Wykonanie
<ol>
	<li>Rozpocznij filmowanie. Wyświetl odpowiednią kartę sygnatury myszy przed obiektywem aparatu.</li>
	<li>Opuść mysz do cylindra z otwartej góry natychmiast po sfilmowaniu karty cue.</li>
	<li>Rozpocznij filmowanie myszy. W tym czasie zminimalizuj hałas, ponieważ myszy mogą stracić zainteresowanie eksploracją, jeśli zostaną zaskoczone.</li>
	<li>Obserwuj myszy z tyłu, aby zbadać cylinder. Nagrywaj wideo, aż mysz wykona co najmniej dwadzieścia tylnych ruchów. 
	UWAGA: Tył występuje, gdy obie przednie łapy tracą kontakt z podłogą, a mysz staje na tylnych łapach.</li>
	<li>Przetrzyj blat i cylinder odpowiednim roztworem czyszczącym między każdą myszą, aby zdezynfekować i usunąć zapachy myszy.</li>
	<li>Zamrożenie ma miejsce, gdy myszy przestają eksplorować i pozostają cicho siedzące na czworakach przez około 5 minut. Jeśli myszy zamarzną przed pojawieniem się dwudziestu odosobnień, może być konieczne wyjęcie ich z cylindra na 10-20 minut przed wznowieniem testu. Jeśli myszy nie wykonają dwudziestu rearów, są usuwane z badania. 
	UWAGA: Z naszego doświadczenia wynika, że myszy nigdy nie musiały być wykluczane z powodu niezbadania cylindra.</li>
</ol>
5. Ocena testu cylindra za pomocą analizy przeciągania łapą
<ol>
	<li>Odtwarzaj wideo z szybkością od 0,25x do 0,67x normalną, w zależności od tego, jak szybko mysz bada cylinder. Użyj odtwarzacza multimedialnego, który oferuje wolniejsze prędkości odtwarzania.</li>
	<li>Określ ilościowo całkowitą liczbę dotknięć łapą. Dotknięcie łapą występuje, gdy mysz cofa się (Rysunek 5A), dotyka boku cylindra (Rysunek 5B), a następnie zsiada z niego obiema łapami jednocześnie (Rysunek 5C) i ląduje (Rysunek 5D). Łapa może, ale nie musi, stykać się ze ścianką cylindra pełną dłonią, ale musi wystąpić pewien kontakt ze ścianką cylindra. Oceń dotyk łapy, licząc, ile razy mysz dotyka (bez względu na to, jak krótko) ze ścianą cylindra jedną lub obiema przednimi łapami, stojąc na tylnych kończynach. 
	Należy pamiętać, że kontakt ze ścianką cylindra jest liczony jako "dotyk łapy" lub "przeciąganie łapą" tylko wtedy, gdy mysz znajduje się w pozycji tylnej – stoi na tylnych kończynach z obiema przednimi łapami poza blatem. Jeśli mysz pozostaje w postawie 3-punktowej – obie tylne kończyny i jedna przednia łapa na blacie stołu i przechodzi do dotykania ściany wolną łapą – nie jest to liczone jako dotyk łapy. Myszy mogą stanąć dęba i dotknąć ścianki cylindra jedną przednią łapą, co jest liczone jako dotyk łapy. Uwaga: mysz może również poruszać ciałem wokół cylindra podczas cofania, nawiązując więcej niż dwa kontakty. Kontakty te są zliczane – jeden dla każdego dotknięcia lewej przedniej łapy i jeden dla każdego dotknięcia prawej przedniej łapy.</li>
	<li>Określ ilościowo liczbę przeciągnięć łapą. Ciągnięcie łapą różni się od normalnego dotykania łapą.
	<ol>
		<li>Jeśli łapa zetknie się ze ścianką cylindra z całkowicie otwartą dłonią (ryc. 6B), powoli odejdzie od ściany, często z lekkim drżeniem. Ruch rozpoczyna się od tego, że palce ciągną się po ściance cylindra w kierunku przyśrodkowym lub w dół (Rysunek 6C), zanim całkowicie opadną (Rysunek 6D). Mysz następnie zsiada z wierzchowca z nienaruszoną łapą (Rysunek 6E), zanim wyląduje na czworakach (Rysunek 6F). Jest to uważane za przeciąganie łapą i powinno być liczone w zestawieniu.</li>
		<li>Jeśli łapa nie styka się ze ścianką cylindra z całkowicie otwartą dłonią, ociera się o ściankę cylindra palcami, zanim spadnie ze ścianki cylindra. Podobnie mysz może przeciągnąć łapą po ściance cylindra, ale nie zwolnić jej całkowicie przed zejściem z wierzchowca. Są one zarówno uważane za przeciąganie łapą, jak i dotknięcia i powinny być liczone jako oba w zestawieniu.</li>
		<li>Łapa może również ciągnąć się wzdłuż ścianki cylindra, podczas gdy mysz bada cylinder. W takim przypadku łapa będzie podążać za skrętem tułowia myszy, gdy bada ona lewo lub prawo od swojej pierwotnej pozycji (Rysunek 7A-D) przed zejściem z wierzchowca (Rysunek 7E). Nie jest to uważane za przeciąganie łapą, ponieważ zależy to od losowego wyboru kierunku eksploracji przez mysz i nie zależy od tego, która półkula korowa została uszkodzona.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Przeciąganie łapą jest wyrażone jako procent przeciągnięć łapą na całkowitą liczbę dotknięć łapą podczas sesji. Wyraź liczbę pociągnięć łapą jako procent całkowitej liczby kontaktów łapą dla każdej kończyny przedniej z osobna.</li>
	<li>Dotknięcia skutkujące przeciągnięciem łapą liczą się jednocześnie jako przeciągnięcie łapą i dotknięcie. Tak więc, jeśli mysz przeciąga łapą za każdym razem, gdy jej łapa styka się ze ścianką cylindra, procent przeciągania łapy jest wyrażony jako 100%.</li>
</ol>
6. Dodatkowe propozycje projektów eksperymentalnych
<ol>
	<li>Aby zminimalizować zmienne dodatkowe:
	<ol>
		<li>Przetestuj myszy o tej samej porze w każdym dniu testowym. Przetestuj myszy podczas ich cyklu budzenia. Utrzymywanie myszy w 12-godzinnym cyklu światła wstecznego ułatwia wydajność.</li>
		<li>Myszy mogą niechętnie eksplorować cylinder, jeśli są zestresowane hałasem lub nowym środowiskiem. Testowanie myszy w pomieszczeniu, w którym trzymają zwierzęta lub w pomieszczeniu, z którym zostały zaznajomione, zmniejsza stres. Może się to zdarzyć, jeśli w pomieszczeniu jest głośno, jeśli mysz została popchnięta przed wejściem do cylindra lub z powodu przyzwyczajenia. 
		UWAGA: Badanie należy przeprowadzić raz przed manipulacją eksperymentalną, aby służyło jako odczyt bazowy. Po manipulacji, dni testowania zależą od uznania eksperymentatora, chociaż zaleca się unikanie nadmiernej liczby ekspozycji na cylinder w krótkim okresie czasu.</li>
		<li>Myszy mogą stać się niechętne do wychowywania się po 6-7 ekspozycjach na cylinder. W obecnym badaniu myszy były testowane w cylindrze łącznie siedem razy, przed niedokrwieniem oraz w dniach 1, 3, 7, 14, 21 i 28 po operacji><.
		UWAGA: W tym badaniu użyliśmy szczepu myszy FVBN. Wcześniej testowaliśmy myszy C57Bl/6 w cylindrze i zaobserwowaliśmy zachowanie ciągnięcia łap po urazie niedokrwiennym ET-1 (dane nie pokazane). Myszy C57BL/6 były bardziej aktywne niż myszy FVBN podczas odchowu i często wskakiwały na krawędź cylindra przed wyjściem na zewnątrz. Wyższe cylindry powinny być używane, jeśli myszy próbują uciec, skacząc.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
7. Chirurgia endoteliny-1 i pomiary objętości zawału
<ol>
	<li>Wykonaj operację Endothelin-1 i pomiary objętości zawału zgodnie z wcześniej opublikowanymi protokołami4 . Aby celować w korę ruchową kończyn przednich kończyn przednich, każda mysz powinna otrzymać trzy wstrzyknięcia ET-1 w następujących współrzędnych: (i) +0,7 przednia tylna (AP)/1,5 przyśrodkowo-boczna (ml)/-1,2 grzbietowo-brzuszna (DV), (ii) +0,4 AP/1,25 ml/- 1,2 DV i (iii) +0,1 AP/1,75 ml/-1,2 DV4 .</li>
</ol>
8. Analiza statystyczna
<ol>
	<li>Dwukierunkowa analiza wariancji powtarzanych miar (ANOVA) jest zalecana w celu przeanalizowania procentu przeciągania łap dla dotkniętych i niedotkniętych łap w różnych punktach czasowych.</li>
</ol>

<ol><li>Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CNS+plasticity+and+assessment+of+forelimb+sensorimotor+outcome+in+unilateral+rat+models+of+stroke%2C+cortical+ablation%2C+parkinsonism+and+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury.</a> Neuropharmacology. 39, 777-787 (2000).</li>
<li>Kolb, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+factor-stimulated+generation+of+new+cortical+tissue+and+functional+recovery+after+stroke+damage+to+the+motor+cortex+of+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Growth factor-stimulated generation of new cortical tissue and functional recovery after stroke damage to the motor cortex of rats.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 27 (5), 983-997 (2007).</li>
<li>Windle, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+analysis+of+four+different+methods+of+producing+focal+cerebral+ischemia+with+endothelin-1+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">An analysis of four different methods of producing focal cerebral ischemia with endothelin-1 in the rat.</a> Exp Neurol. 201 (2), 324-334 (2006).</li>
<li>Roome, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+reproducible+Endothelin-1+model+of+forelimb+motor+cortex+stroke+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">A reproducible Endothelin-1 model of forelimb motor cortex stroke in the mouse.</a> J Neurosci Methods. 233, 34-44 (2014).</li>
<li>Tennant, K. A., Jones, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensorimotor+behavioral+effects+of+endothelin-1+induced+small+cortical+infarcts+in+C57BL%2F6+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Sensorimotor behavioral effects of endothelin-1 induced small cortical infarcts in C57BL/6 mice.</a> J Neurosci Methods. 181 (1), 18-26 (2009).</li>
<li>Wang, Y., Jin, K., Greenberg, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurogenesis+associated+with+endothelin-induced+cortical+infarction+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Neurogenesis associated with endothelin-induced cortical infarction in the mouse.</a> Brain Res. 1167, 118-122 (2007).</li>
<li>Baskin, Y. K., Dietrich, W. D., Green, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+effective+behavioral+tasks+for+evaluating+sensorimotor+dysfunction+following+traumatic+brain+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Two effective behavioral tasks for evaluating sensorimotor dysfunction following traumatic brain injury in mice.</a> J Neurosci Methods. 129 (1), 87-93 (2003).</li>
<li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+behavioral+testing+after+focal+ischemia+in+the+mouse%3A+functional+recovery+and+the+effects+of+gender%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Chronic behavioral testing after focal ischemia in the mouse: functional recovery and the effects of gender.</a> Exp Neurol. 187 (1), 94-104 (2004).</li>
<li>Clarke, J., Ploughman, M., Corbett, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+qualitative+and+quantitative+analysis+of+skilled+forelimb+reaching+impairment+following+intracerebral+hemorrhage+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">A qualitative and quantitative analysis of skilled forelimb reaching impairment following intracerebral hemorrhage in rats.</a> Brain Res. , 204-212 (2007).</li>
<li>Montoya, C. P., Campbell-Hope, L. J., Pemberton, K. D., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+%27staircase+test%27%3A+a+measure+of+independent+forelimb+reaching+and+grasping+abilities+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">The 'staircase test': a measure of independent forelimb reaching and grasping abilities in rats.</a> J Neurosci Methods. 36 (2-3), 219-228 (1991).</li>
<li>Farr, T. D., Whishaw, I. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+and+qualitative+impairments+in+skilled+reaching+in+the+mouse+%28Mus+musculus%29+after+a+focal+motor+cortex+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Quantitative and qualitative impairments in skilled reaching in the mouse (Mus musculus) after a focal motor cortex stroke.</a> Stroke. 33 (7), 1869-1875 (2002).</li>
<li>Tennant, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+vermicelli+and+capellini+handling+tests%3A+simple+quantitative+measures+of+dexterous+forepaw+function+in+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">The vermicelli and capellini handling tests: simple quantitative measures of dexterous forepaw function in rats and mice.</a> J Vis Exp. (41), (2010).</li>
<li>Clarkson, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AMPA+receptor-induced+local+brain-derived+neurotrophic+factor+signaling+mediates+motor+recovery+after+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">AMPA receptor-induced local brain-derived neurotrophic factor signaling mediates motor recovery after stroke.</a> J Neurosci. 31 (10), 3766-3775 (2011).</li>
<li>Clarkson, A. N., Huang, B. S., Macisaac, S. E., Mody, I., Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reducing+excessive+GABA-mediated+tonic+inhibition+promotes+functional+recovery+after+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Reducing excessive GABA-mediated tonic inhibition promotes functional recovery after stroke.</a> Nature. 468 (7321), 305-309 (2010).</li>
</ol>

Autorzy nie mają konkurencyjnych interesów finansowych.

Kluczowe punkty, które należy ustalić przy ilościowym określaniu zachowania polegającego na przeciąganiu łapami w teście cylindrycznym, są następujące: i) ilościowe określenie liczby pociągnięć łapą w stosunku do całkowitej liczby dotknięć łapą dla każdej łapy przed uszkodzeniem mózgu w celu ustalenia punktu odniesienia; ii) określić ilościowo liczbę pociągnięć łapą w stosunku do całkowitej liczby dotknięć łapą dla każdej łapy po urazie niedokrwiennym; oraz iii) rozróżniać między przeciąganiem łapy a bocznym ruchem łapy ...

Celem strategii regeneracji neuronów jest zademonstrowanie zarówno naprawy tkanek, jak i funkcjonalnego odzyskiwania. Powrót do zdrowia funkcjonalnego jest zazwyczaj oceniany za pomocą testów behawioralnych, które mierzą deficyty funkcjonalne, w tym przypadku dotyczące umiejętności motorycznych, które są związane z uszkodzeniem określonych obszarów mózgu. Urazowe uszkodzenie mózgu lub niedokrwienne uszkodzenie czuciowo-ruchowego obszaru kończyny przedniej kory mózgowej można wykazać za pomocą szeregu testów behawioralnych. Jeden z takich testów, test cylindryczny, jest szeroko stosowany u szczurów do oceny deficytów funkcjonalnych w aktywności kończyn przednich1. Test charakteryzuje się niskimi kosztami konfiguracji, wymagającym jedynie cylindra, kamery i stołu z przezroczystym blatem. Jest łatwy do podania, ponieważ opiera się na naturalnym zachowaniu eksploracyjnym gryzoni, więc nie jest wymagane wstępne szkolenie i pozbawianie jedzenia lub nagrody. Pomimo tych licznych zalet, test cylindryczny jest niedostatecznie wykorzystywany do oceny deficytów kończyn przednich u myszy po ogniskowych urazach kory czuciowo-ruchowej kończyn przednich, co przypisujemy analizie zachowania myszy w teście cylindrycznym. Asymetria kończyn przednich jest klasyczną miarą analizy w teście cylindrycznym. Po umieszczeniu w cylindrze gryzonie w naturalny sposób eksplorują ściany cylindra, opierając się na tylnych kończynach i dotykając ścianek cylindra łapami kończyn przednich, aby zachować równowagę postawy. Liczba dotknięć łapą ściany każdą kończyną przednią jest łatwa do oszacowania, filmując gryzonie podczas tej eksploracji cylindra. Asymetria kończyn przednich występuje, gdy dotknięta chorobą łapa kończyny przedniej ma mniej dotknięć ścianą niż niedotknięta łapa kończyny przedniej i wskazuje na uszkodzenie przeciwległej kory czuciowo-ruchowej. U szczurów wstrzyknięcia dokorowe środka zwężającego naczynia krwionośne, endoteliny (ET-1), do kory czuciowo-ruchowej kończyny przedniej powoduje ogniskową zmianę niedokrwienną, która powoduje deficyty behawioralne w przeciwległej kończynie przedniej. Deficyty w używaniu kończyn przednich po przeciwnej stronie są łatwo wykrywane jako zmiany w asymetrii kończyn przednich w teście cylindrycznym u szczurów1-3. Jednak w przeciwieństwie do szczurów, zmiany w asymetrii kończyn przednich są zmienne i mniej spójne u myszy po porównywalnych wstrzyknięciach ET-14-6. W tym miejscu przedstawiamy nowatorską analizę zachowania kończyn przednich w teście cylindrycznym – analizę zachowania polegającego na przeciąganiu łap. Wcześniej wykazaliśmy, że analiza ciągnięcia łapami jest bardziej czułą miarą uszkodzenia kory czuciowo-ruchowej kończyn przednich u myszy niż klasyczna analiza asymetrii kończyn przednich i dlatego ma zastosowanie do różnych modeli ogniskowych uszkodzeń kory mózgowej.
Badanie, w jaki sposób przednia łapa styka się ze ścianą cylindra po niedokrwiennym uszkodzeniu kory czuciowo-ruchowej kończyny przedniej, ujawniło nowe zachowanie u myszy - przeciąganie łap4. Przeciąganie łapą występuje, gdy mysz staje na tylnych nogach, aby zbadać ścianę cylindra, a następnie przeciąga dotkniętą (przeciwstawną) łapę wzdłuż ściany cylindra w kierunku linii środkowej lub w dół ściany, podczas gdy jej nienaruszona przednia łapa zapewnia podparcie postawy przy ścianie. Przeciąganie łapą rzadko występuje u nieuszkodzonych myszy, dlatego pojawienie się przeciągania łapą jest pozytywnym wskaźnikiem uszkodzenia kory czuciowo-ruchowej kończyn przednich4. Wcześniej określiliśmy ilościowo zachowanie ciągnięcia łapami u myszy po niedokrwiennym uszkodzeniu kory czuciowo-ruchowej kończyn przednich kończyn przednich i wykazaliśmy utrzymujące się zachowanie ciągnięcia łapami u myszy do dwóch tygodni po udarze4. Tutaj pokazujemy, że ciągnięcie łapami utrzymuje się do czterech tygodni po udarze. Analiza zachowań związanych z przeciąganiem łap stanowi nowatorskie i czułe narzędzie do oceny ogniskowego uszkodzenia niedokrwiennego kory czuciowo-ruchowej kończyn przednich u myszy. Niedroga konfiguracja, łatwość podawania i ocenianie sprawiają, że jest to proste, ale użyteczne narzędzie do szybkiej oceny deficytów behawioralnych kończyn przednich u myszy.

<table><tbody><tr>Cylinder <td></td><td></td> z <td>pleksi</td><td>17,5 cm wysokości, 9,5 cm średnicy zewnętrznej, 8,8 cm średnicy wewnętrznej, grubość ścianki 0,35 cm (lub 3,5 mm)</td></tr><tr><td>stół</td><td></td><td></td> widokowy <td>54x56x66,5 cm (szerokość x długość x wysokość), blat stołu to arkusz pleksi o wymiarach 51x51 cm.</td></tr><tr><td>lustro</td><td></td><td></td><td>34x58 cm lustrzana</td></tr><tr><td>kamera wideo</td><td>Sony</td><td>DCR-SR42</td><td>Kamera wideo z wbudowaną pamięcią, funkcją SD, 40-krotnym zoomem optycznym</td></tr><tr><td>komputer</td><td></td><td>Dell Optiplex 760</td><td>Procesor: Intel, 3,0 GHz, pamięć 4,00 GB (RAM)&nbsp;</td></tr><tr><td>monitor komputerowy</td><td>Samsung</td><td>S22C350H</td><td></td></tr><tr><td>Excel (Microsoft Office Professional Plus)</td><td>Microsoft</td><td>v14.0.7106.5003</td><td></td></tr><tr><td>VLC Media Player</td><td>Video LAN</td><td>v2.1.2</td><td>Odtwarzacz multimedialny z modulacją prędkości odtwarzania i obsługą wideo</td></tr><tr><td>Zewnętrzny dysk twardy</td><td>Western Digital</td><td>WDBAAU0020HBK-01</td><td>2 TB</td></tr></tbody></table>

przeciąganie łap: nowatorska, czuła analiza testu cylindra myszy

Paw-Dragging: a Novel, Sensitive Analysis of the Mouse Cylinder Test

Test cylindryczny jest rutynowo stosowany do przewidywania ogniskowego uszkodzenia niedokrwiennego kory ruchowej kończyn przednich u gryzoni. Po umieszczeniu w cylindrze gryzonie eksplorują, podnosząc i dotykając ścianek cylindra łapami kończyn przednich w celu podparcia postawy. Po niedokrwiennym uszkodzeniu kory czuciowo-ruchowej kończyny przedniej szczury w większym stopniu polegają na nieuszkodzonej łapie kończyny przedniej w celu wsparcia postawy, co skutkuje mniejszą liczbą dotknięć dotkniętą łapą, co nazywa się asymetrią kończyn przednich. W przeciwieństwie do tego, ogniskowe uszkodzenie niedokrwienne w mózgu myszy nie powoduje porównywalnych stałych deficytów asymetrii kończyn przednich. Podczas gdy deficyty asymetrii kończyn przednich są rzadko obserwowane, myszy wykazują nowe zachowanie po udarze zwane "przeciąganiem łap". Przeciąganie łapą to tendencja myszy do przeciągania dotkniętej chorobą łapy wzdłuż ściany cylindra, zamiast bezpośrednio odpychać się od ściany podczas zsiadania z tylnego siedzenia do pozycji czworonożnej. Wcześniej wykazaliśmy, że ciągnięcie łapami jest bardzo wrażliwe na małe korowe urazy niedokrwienne kory ruchowej kończyn przednich. Tutaj przedstawiamy szczegółowy protokół analizy przeciągania łapy. Definiujemy, czym jest przeciąganie łapą i pokazujemy, jak określić ilościowo zachowanie związane z przeciąganiem łapą. Test butelkowy jest prostym i niedrogim testem do przeprowadzenia i nie wymaga wstępnego treningu ani strategii deprywacji żywności. Wykorzystując analizę przeciągania łapy z testem cylindrycznym, wypełnia niszę w przewidywaniu uszkodzeń niedokrwiennych kory mózgowej, takich jak zakrzepica i niedokrwienie wywołane endoteliną-1 (ET-1) – dwa modele, które zyskują na popularności i powodują mniejsze urazy ogniskowe niż niedrożność tętnicy środkowej mózgu. Wreszcie, pomiar zachowania polegającego na ciągnięciu łapami w teście cylindrycznym pozwoli na badania funkcjonalnej regeneracji po urazie kory mózgowej przy użyciu szerokiej kohorty transgenicznych szczepów myszy, w przypadku których wcześniejsza analiza asymetrii kończyn przednich nie wykryła stałych deficytów.

Wcześniej wykazaliśmy, że zachowanie polegające na przeciąganiu łapy pojawia się po ogniskowym uszkodzeniu niedokrwiennym kory sensorimotorycznej kończyny przedniej i jest pozytywnym wskaźnikiem uszkodzenia4. W celu wywołania zmiany niedokrwiennej zastosowano wewnątrzkorowe iniekcje ET-1 do kory sensorimotorycznej kończyny przedniej (Rycina 8A,B). W niniejszym badaniu sprawdzono, czy zachowanie polegające na przeciąganiu łapy utrzymuje się dłużej niż 14 dni po urazie, co mogłoby umożliwić jego...

Klasyczna analiza asymetrii kończyn przednich w teście cylindrycznym jest rutynowo używana do oceny deficytów behawioralnych u szczurów po urazie mózgu lub udarze; jednak nie wykrywa stałych deficytów u myszy. Badanie to pokazuje, że ilościowe określenie zachowania polegającego na ciągnięciu łapami jest bardziej czułą analizą uszkodzenia mózgu u myszy.

Przeciąganie łap: nowatorska, czuła analiza testu cylindra myszy

The cylinder test is routinely used to predict focal ischemic damage to the forelimb motor cortex in rodents. When placed in the cylinder, rodents explore ...

Witam, jestem dr Jackie Vander Loot. Cześć, nazywam się Brian Room. Dzisiaj omówimy analizę wrażliwości testu cylindra w zakresie przeciągania łapy.Test cylindra jest testem funkcji motorycznych kończyn u gryzoni. W teście tym myszy eksplorują pleksiglasowy cylinder, wznosząc się na tylnych łapach i wykorzystując wszystkie cztery łapy do podparcia posturalnego o ściankę cylindra. Obserwacja wykorzystania czterech łap podczas eksploracji cylindra pozwala określić, czy mysz wykazuje deficyty motoryczne.W szczególności porównujemy użycie każdej z czterech łap przed i po udarze. Po wystąpieniu udaru łapa znajdująca się po stronie przeciwległej do uszkodzonej półkuli jest używana rzadziej. Ta zmiana w wykorzystaniu dotkniętej udarem łapy w stosunku do łapy nieobjętej uszkodzeniem stanowi miarę asymetrii kończyn.Obecnie analiza asymetrii czterech kończyn jest stosowana u myszy i szczurów po rozległych urazach niedokrwiennych, takich jak zamknięcie środkowej tętnicy mózgowej, jako behawioralny wyznacznik udaru. W przeciwieństwie do rozległych urazów, asymetrii czterech kończyn nie obserwuje się u myszy z małymi ogniskowymi urazami niedokrwiennymi. Może to wynikać z faktu, że analiza asymetrii czterech kończyn w teście cylindra jest czuła na rozległe urazy, ale nie jest przydatna w wykrywaniu mniejszych uszkodzeń.Małe ogniskowe uszkodzenia niedokrwienne, takie jak fototrombóza i niedokrwienie indukowane endoteliną-1, stają się coraz popularniejsze w większości modeli. Podkreśla to potrzebę stosowania funkcjonalnych testów behawioralnych w celu oceny tych mniejszych uszkodzeń korowych. W moim laboratorium Brian Room opracował nową analizę testu cylindra, którą nazywamy przeciąganiem łapą.Badając sposób, w jaki cztery łapy myszy stykają się ze ścianką cylindra po jednowymiarowym niedokrwieniu śródbłonka, zaobserwowaliśmy nowy rodzaj zachowania dotkniętej łapy. W przypadku przeciągania łapy myszy nieuszkodzone stykają się ze ścianką cylindra jedną lub obiema łapami, podczas gdy podczas wspięcia mysz mocno opiera cztery łapy o ściankę dla uzyskania podparcia podczas eksploracji, a następnie używa łap, aby odepchnąć się od ścianki. W momencie powrotu do pozycji na czterech łapach, po jednowymiarowym niedokrwieniu śródbłonka, dotknięta łapa nie zapewnia stabilnego podparcia mimo kontaktu ze ścianką cylindra.Zamiast tego, po kontakcie wnętrze dłoni unosi się, a palce szurają po ścianie cylindra, zanim całkowicie się od niej odseparują. Ten ruch szurania łapą występuje albo w kierunku poziomym, w stronę linii środkowej ciała, albo w kierunku pionowym, w stronę podłoża. Wcześniej ilościowo określiliśmy zachowanie szurania łapami u myszy po niedokrwieniu w modelu inphi one i wykazaliśmy zwiększone nasilenie szurania łapą dotkniętą uszkodzeniem do dwóch tygodni po wystąpieniu niedokrwienia.Ponadto nasze dane wykazały, że zachowanie polegające na przeciąganiu łusek koreluje z uszkodzeniem czwartej kory ruchowej. W tym filmie pokażemy, jak przygotować test cylindra oraz jak analizować zachowanie przeciągania łusek w nagranych materiałach wideo. Test cylindra jest łatwy do przygotowania i przeprowadzenia, a jego koszty operacyjne są niskie.Niezbędny jest stół z otworem w centralnej części, który jest przykryty płytą z pleksiglasu. Pozwala to na filmowanie głównie od dołu. Cylinder z pleksiglasu zostaje umieszczony na blacie stołu.Na spodzie blatu narysowano cztery czarne linie wskazujące położenie cylindra. Służy to jako pomoc, dzięki której cylinder można wyjmować i wkładać z powrotem pomiędzy próbami bez zmiany jego pozycji. Na kadrach wideo znaki te znajdują się również pod spodem stołu, aby czyszczenie blatu 70%ethanol nie zmazało tuszu.Aby sfilmować mysz od dołu za pomocą kamery i statywu, umieszczamy lustro pod kątem około 45 stopni pod blatem stołu. Pozwala nam to uniknąć komplikacji związanych z budową osobnego urządzenia do zamocowania kamery pod blatem. Lustro jest utrzymywane na miejscu za pomocą wsporników, jak pokazano tutaj i tutaj.Wielkość uchwytów oraz rozmiar lustra będą zależeć od wymiarów przestrzeni między nogami stołu. Kamerę i statyw umieszcza się w takiej odległości, aby cała ścianka cylindra była widoczna w polu widzenia. Odległość ta zazwyczaj nie przekracza kilku stóp, ale może się różnić w zależności od kąta nachylenia lustra, wysokości statywu i możliwości zoomu kamery.Aby przeprowadzić test, myszy umieszcza się w cylindrze od góry przed rozpoczęciem filmowania. Do oznaczenia myszy poddawanej badaniu używa się kart informacyjnych. Mogą one zawierać numer myszy lub nazwę kodową, aby osoba oceniająca nagrania z cylindra nie wiedziała, jaką grupę traktowania reprezentuje dane zwierzę.Na karcie można również wpisać datę nagrania oraz numer próby. Myszy są nagrywane do momentu, aż wykonają 20 wzniesień. Przy takim liczeniu obie łapy muszą oderwać się od podłoża; wzniesienia niepełne nie są wliczane.Jeśli mysz dotyka ściany jedną łapą, podczas gdy druga pozostaje na ziemi, nagrania z cylindra analizuje się za pomocą odtwarzacza VLC media player. Choć można użyć dowolnego odtwarzacza multimedialnego z funkcją modulacji prędkości odtwarzania, liczbę prób podciągania można zliczać za pomocą liczników mechanicznych lub zapisując kreski na papierze. Wyniki zapisujemy na papierze, a następnie przenosimy dane do arkusza kalkulacyjnego.Odtwarzanie wideo z prędkością 0,5 normy. Zaleca się taką prędkość, aby móc skutecznie zliczać. W niektórych momentach konieczne może być zatrzymanie i ponowne odtworzenie filmu z mniejszą prędkością.Należy zauważyć, że mysz może również przemieszczać ciało wokół cylindra podczas cofania się, nawiązując więcej niż dwa kontakty. Kontakty te są sumowane: jeden dla każdego dotknięcia lewą przednią łapą i jeden dla każdego dotknięcia prawą przednią łapą. Przeciąganie łap jest obliczane jako procent całkowitej liczby dotknięć ścianki cylindra łapami. Dla każdej łapy dotknięcia są oceniane poprzez zliczanie liczby razy, gdy mysz nawiązuje kontakt ze ścianką cylindra jedną lub obiema przednimi łapami.Należy zauważyć, że mysz może również przemieszczać ciało wokół cylindra podczas cofania się, nawiązując więcej niż dwa kontakty. Kontakty te są zliczane: jeden dla każdego dotknięcia lewą przednią łapą i jeden dla każdego dotknięcia prawą przednią łapą. Kwantyfikacja zachowania polegającego na przeciąganiu łap jest odrębna od kwantyfikacji normalnych dotknięć łapami; przeciąganie łap może odbywać się w sposób pionowy lub poziomy.Wleczenie często wiąże się z lekkim drżeniem dotkniętej łapy w momencie odrywania jej od ścianki cylindra, co sugeruje osłabienie i brak kontroli motorycznej. Często obserwuje się wariacje stereotypowego wleczenia łapy. Przykładem jest niepełne wleczenie, podczas którego wnętrze dłoni unosi się, a palce wciąż szorują o cylinder, jednak obie łapy ostatecznie przerywają kontakt ze ścianką w tym samym czasie. Podczas oceny zachowania polegającego na wleczeniu łap ważne jest, aby nie pomylić bocznego ruchu eksploracyjnego myszy wokół cylindra z deficytem funkcji motorycznych kończyn.Podczas eksploracji bocznej mysz przemieszcza się bokiem wokół cylindra, a tylna łapa jest przeciągana zgodnie z kierunkiem ruchu tułowia myszy. Na przykład mysz wspina się i dotyka ściany obiema łapami, zmienia położenie jednej z łap, a następnie przesuwa się bokiem w stronę nowego miejsca postawienia łapy. W takim przypadku tylne łapy są przeciągane wzdłuż ściany, aż zostaną ponownie postawione dla uzyskania podparcia.Skręcanie tułowia myszy jest kolejnym sygnałem lateralnego zachowania eksploracyjnego. Zachowanie to wyraźnie różni się od przeciągania łapy, ponieważ przeciąganie łapy nie wiąże się z ruchem bocznym wzdłuż ścianki cylindra podczas lub bezpośrednio przed samym przeciąganiem. W naszych badaniach analizowano przeciąganie łapy po niewielkim ogniskowym niedokrwieniu w korze ruchowej kończyn.W niniejszej pracy wykazujemy, że zachowanie polegające na przeciąganiu łapy z dotkniętą czteropunktową szczytowością P osiąga maksimum w pierwszym dniu po udarze i spada do siódmego dnia po udarze, kiedy to stabilizuje się na poziomie podwyższonym aż do czterech tygodni po udarze, gdyż deficyt wydaje się być przedłużony. Pozwoli to badaczom na analizę skutków przewlekłego udaru po niewielkim uszkodzeniu kory mózgowej. Co więcej, w przypadku myszy z niewielkimi uszkodzeniami kory mózgowej możliwe jest badanie metod leczenia udaru w perspektywie krótkoterminowej lub długoterminowej.Nasza nowa analiza przeciągania PO w teście komórkowym wykazuje potencjał jako test behawioralny w przypadku ogniskowego udaru niedokrwiennego u myszy, np. wywołanego fototrombozą lub endofiliną. Może być stosowana u myszy z uszkodzeniami takimi jak zamknięcie tętnicy środkowej mózgu, gdzie większość czasu występuje asymetria kończyn przednich. Przeciąganie POD może być wykorzystywane do określania stopnia mniejszych uszkodzeń i podobnych zmian.Eksperymenty wykazują, że przeciąganie tylnych łap (pod dragging) utrzymuje się do 28. dnia po udarze włącznie. Metoda ta ma potencjał do zastosowania w różnych krótkoterminowych i długoterminowych badaniach nad leczeniem udaru.

paw-dragging-a-novel-sensitive-analysis-of-the-mouse-cylinder-test

Research

JoVE Journal

Behavior

Zachowanie

Przeciąganie łap: nowatorska, wrażliwa analiza testu cylinderu mysiego

Testy manipulacji Vermicelli i Capellini służące do oceny sprawności przednich łap wykorzystują naturalną skłonność gryzoni do manipulowania produktami spożywczymi za pomocą precyzyjnych ruchów przednich łap i palców. Zwierzęta są nagrywane podczas manipulowania krótkimi nitkami surowego, suchego makaronu. Odtwarzanie wideo w zwolnionym tempie umożliwia ilościową ocenę korekt ułożenia przednich łap.

Testy manipulacji nitkami vermicelli i capellini: proste ilościowe pomiary sprawności chwytnej przedniej łapy u szczurów i myszy

Przedstawiono protokoły dla dwóch uznanych zadań koordynacji ruchowej: rotarod z przyspieszeniem oraz poprzecznej belki, a także dwóch testów opracowanych niedawno w Oxfordzie: prętów statycznych i równoległych drążków. Testy te pozwalają wykryć zaburzenia motoryczne, które mogą być istotne same w sobie, a także mogą stanowić zmienne w badaniach nad innymi obszarami zachowania.

Pomiar koordynacji ruchowej u myszy

Model mysi stwardnienia zanikowego bocznego (ALS) poddano badaniu klinicznemu i behawioralnemu. Jako warunek wstępny dla towarzyszącej analizy immunohistologicznej szczegółowo przedstawiono przygotowanie rdzenia kręgowego.

Badania kliniczne i usuwanie rdzenia kręgowego w modelu mysim stwardnienia zanikowego bocznego (ALS)

W chorobie Parkinsona i ogólnie w zaburzeniach ruchowych, czułe i wiarygodne testy behawioralne są niezbędne do testowania nowych potencjalnych terapii. W tym miejscu opisujemy łatwą do opanowania baterię testów sensomotorycznych dla myszy, które są wrażliwe na różne stopnie uszkodzenia układu nigrostriatal i przydatne w badaniach przedklinicznych.

Ocena funkcji sensomotorycznych w mysich modelach choroby Parkinsona

Prezentowany jest zwięzły zestaw testów motorycznych noworodków na myszach. Za pomocą tych testów można wykazać deficyty motoryczne noworodków w różnych zaburzeniach motorycznych noworodków. Dysponując ustandaryzowanym zestawem testów, można porównywać wyniki różnych badań, co pozwala na lepsze i dokładniejsze raportowanie między grupami.

Zestaw testów motorycznych w mysim modelu mózgowego porażenia dziecięcego u noworodków

Aby zrozumieć patofizjologię udaru, ważne jest korzystanie z wiarygodnych modeli. W artykule opisano jeden z najczęściej stosowanych modeli udaru u myszy, określany jako model niedrożności tętnicy środkowej mózgu (MCAo) (określany również jako model włókna śródświetlnego lub szewu) z reperfuzją.

Podejście chirurgiczne do niedrożności tętnicy środkowej mózgu i udaru wywołanego reperfuzją u myszy

Precyzyjna ocena reakcji na ból w neuropatycznym modelu zwierzęcym jest kluczowa dla zbadania patofizjologii chorób bólowych i opracowania nowych leków przeciwbólowych. Przedstawiamy czułą i obiektywną metodę określania funkcji sensorycznej tylnej łapy gryzonia za pomocą zautomatyzowanego systemu analizy chodu.

Zautomatyzowana analiza chodu u myszy z przewlekłym urazem zwężenia

Opisujemy ustanowienie mysiego modelu choroby Parkinsona za pomocą MPTP, oraz oceny behawioralne za pomocą testów cylindrycznych i otwartych do pomiaru funkcji motorycznych. Następnie używamy L-DOPA jako jednego z przykładów, aby pokazać, jak zastosować ten model w badaniu leków na chorobę Parkinsona.

Behawioralna ocena spontanicznej lokomocji w mysim modelu choroby Parkinsona wywołanym MPTP

Niskokosztowy protokół składający się z analizy śladu i testu wiszącego pudełka po naprężeniu ograniczającym jest przydatny do oceny zaburzeń ruchowych modelu mysiego.

Tani protokół analizy śladu i testu wiszącego pudełka dla myszy zastosował przewlekły stres związany z ograniczeniem

Mechaniczny test unikania konfliktów jest używany jako nierefleksyjny odczyt wrażliwości na ból u myszy, który może być wykorzystany do lepszego zrozumienia reakcji afektywno-motywacyjnych w różnych modelach bólu myszy.

Mechaniczny test unikania konfliktów do pomiaru zachowania bólowego u myszy

Ten artykuł przedstawia protokół realizacji wysoce translacyjnej i niezależnie sprawdzonej koncepcji mysiej jednostki uderzenia (mSU) u myszy o dużym skoku. Zapewnia również ustandaryzowany protokół wykonywania ogniskowej eksperymentalnej skali udaru u myszy, która ocenia deficyty ogniskowe udaru wykryte nawet długotrwale.

Protokół jednostki udaru myszy ze standaryzowaną punktacją neurologiczną do translacyjnych badań udarów myszy

Poznaj nowatorską analizę przeciągania łap w teście cylindra myszy, która pozwala wykrywać nawet drobne uszkodzenia mózgu niewidoczne tradycyjnymi metodami. Ta technika poprawia ocenę deficytów motorycznych w modelach udarowych.

Przeciąganie łap: nowatorska, czuła analiza testu cylindra myszy

Przeglądaj więcej filmów