Obrazowanie na żywo indukowanej nikotyną sygnalizacji wapnia i uwalniania neuroprzekaźników wzdłuż brzusznych aksonów hipokampa

Ogólnym celem tej procedury jest wygenerowanie chimerycznego preparatu genowego brzusznego obwodu półleżącego hipokampa in vitro, który umożliwia bezpośrednie obrazowanie na żywo w celu identyfikacji i analizy zarówno pre, jak i postsynaptycznych składników transmisji synaptycznej. Osiąga się to poprzez najpierw wypreparowanie pasków tkanki brzusznej hipokampa zawierających CA jeden region CIC. Drugim krokiem jest pocięcie brzusznych pasków hipokampa na małe cienkie plasterki, a następnie umieszczenie tych mikro plasterków na środku szkiełka nakrywkowego wewnątrz 24-dołkowej płytki do hodowli tkankowej przez noc.

Następnie wypreparuj jądro półleżące z tkanek mózgowych. Ostatnim krokiem jest dysocjacja pasków jądra półleżącego na neurony rozproszone za pomocą trypsyny i dodanie neuronów jądra półleżącego do szkiełka nakrywkowego pokrytego brzusznymi implantami hipokampa i inkubacja przez pięć do siedmiu dni. Ostatecznie presynaptyczna lokalizacja nikotynowych receptorów acetylocholiny i nikotynowego receptora acetylocholiny pośredniczyła w sygnalizacji wapniowej i uwalnianiu neuroprzekaźników.