Name: Charakterystyka stanu metabolicznego u naczelnych innych niż ludzie za pomocą dożylnego testu tolerancji glukozy (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-11-13T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 59 s
Description: Poznaj metodę IVGTT do oceny kontroli glikemii u makaków w badaniach metabolicznych. Technika ta umożliwia stratyfikację zwierząt według stanu metabolicznego i wspiera badania nad insulinoopornością oraz cukrzycą.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Autorzy pragną podziękować za silne wsparcie ze strony personelu opieki nad zwierzętami DHMRI CLAS, Kierownika Obiektu, Pana Daniela Peralty i lekarza weterynarii, Dr. Glicerio Ignacio, DVM MRCVS.

Wszystkie procedury na zwierzętach zostały zatwierdzone przez Instytut Badawczy Davida H. Murdocka IACUC zlokalizowany na Kampusie Badawczym Karoliny Północnej (NCRC), zgodnie z protokołem 14-017, Charakterystyka modelu cukrzycy i stanu przedcukrzycowego/insulinooporności oraz skuteczność terapii poprawiających wrażliwość na insulinę i funkcje metaboliczne.
1. Selekcja zwierząt i przygotowanie do badań
<ol>
	<li>Wybierz zwierzęta o stabilnej diecie i wadze na podstawie miesięcznego spożycia pokarmu i zapisów masy ciała. 
	UWAGA: Zwierzęta, które wykazały niedawny spadek apetytu, nie powinny być charakteryzowane, dopóki ich spożycie pokarmu nie ustabilizuje się.
	<ol>
		<li>W przypadku zwierząt dojrzałych (> 5 - 6 lat) nie wybieraj zwierząt, których masa ciała między kolejnymi miesiącami różni się o więcej niż 10%, bez uprzedniego zbadania małpy i wykluczenia przyczyn innych niż zmiana statusu metabolicznego dla dramatycznej zmiany masy ciała.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>W przypadku analitów glukozy, insuliny i peptydu c należy przygotować probówki do pobierania próbek K2EDTA z inhibitorem proteazy (aprotyniną i DPP4I). 
	UWAGA: Koktajl DPP4I + Aprotynina zapewnia szerokie spektrum hamowania proteazy, jeśli jest to wymagane dla dodatkowych analitów (glukagon, GLP-1). W przypadku, gdy dodatkowe anality nie zostaną pobrane, probówki z krwią należy przygotować w ten sam sposób, aby zachować spójność w pobieraniu próbek. Próbki do badań, które nie zostały zwalidowane dla tej metody, należy pobierać oddzielnie, zgodnie z zaleceniami producenta.
	<ol>
		<li>Przygotuj koktajl inhibitorów proteazy, mieszając 100 mg liofilizowanej aprotyniny z 10 ml DPP4I. Dodać 10 μl mieszaniny Aprotynina + DPP4I do każdej probówki z krwią na każdy mililitr pobranej krwi.</li>
		<li>Dodaj dodatkowe 10 μl koktajlu inhibitorów proteazy do każdej probówki w celu ewentualnego nadmiaru kolekcji. Probówki z krwią poddaną działaniu substancji należy przechowywać w temperaturze -20 °C do czasu użycia. Podczas zabiegu probówki należy przechowywać na mokrym lodzie i wirować w temperaturze 4 °C.</li>
		<li>Użyj probówki separatora surowicy, aby pobrać próbkę krwi na początku badania do standardowej analizy biochemicznej surowicy. Do pełnej morfologii krwi (CBC) należy użyć standardowego K2EDTA bez inhibitorów proteazy. Za pomocą kriowialiów należy podzielić osocze i surowicę po odwirowaniu próbek krwi.</li>
		<li>Oznacz probówki z krwią i kriowiale odpowiednio danymi identyfikacyjnymi zwierzęcia, datą, procedurą, punktem czasowym i objętością próbki. Oznaczyć kriowiale analitem (analitami) w osoczu w celu przeprowadzenia odpowiednich testów.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Przygotować płukanie solą fizjologiczną z heparyną, wstrzykując 0,15 ml 1000 jednostek USP na ml heparyny do worka o pojemności 250 ml soli fizjologicznej. Otrzymać roztwór 0,06 mg heparyny/ml. Pobrać 40 - 60 ml tego roztworu do śluzy soli fizjologicznej w celu przepłukania między próbkami. Pobrać dodatkowe 1 ml i 5 ml do oddzielnych strzykawek w celu przepłukania portu infuzji dekstrozy odpowiednio przed i po infuzji.</li>
</ol>
2. Uspokojenie i przygotowanie zwierząt
<ol>
	<li>Usunąć pokarm z klatki zwierzęcia nie mniej niż 14 godzin przed zabiegiem i nie później niż 18 godzin. 
	UWAGA: Ważne jest, aby zwierzęta były na czczo przed zabiegiem, aby uniknąć jakichkolwiek poposiłkowych zmian wartości glikemii. Jest to również środek ostrożności, aby uniknąć niedomykalności i aspiracji treści żołądkowej podczas znieczulenia.</li>
	<li>Na czas zabiegu IVGTT należy uspokoić zwierzęta ketaminą podawaną domięśniowo w znieczuleniu ogólnym w dawce 10 mg/kg. Dodatkową ketaminę (5 - 10 mg/kg) należy podawać w odstępach 20 - 30 minut lub w razie potrzeby w trakcie zabiegu.
	<ol>
		<li>Zważ zwierzę poddane sedacji. Umieść zwierzę w pozycji bocznej leżącej na podgrzewanym stole zabiegowym.</li>
		<li>Monitoruj parametry kliniczne co 15 do 20 minut, aby upewnić się, że zwierzę znajduje się w stabilnej płaszczyźnie znieczulenia. Zmierz tętno (100 - 200 uderzeń na minutę) i SPO2 (> 92%) za pomocą pulsoksymetru. Zmierz częstość oddechów (20 - 50 oddechów/min) za pomocą stopera, licząc oddechy wizualnie lub ręcznie w ciągu piętnastu sekund i mnożąc przez cztery. Zmierz temperaturę (> 97 °F) doodbytniczo. Monitoruj kolor błony śluzowej wokół dziąseł i warg (wilgotny, różowy).</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Przygotuj dwa miejsca na kaniulę. Użyj maszynki do strzyżenia włosów, aby przyciąć włosy z obszaru zainteresowania, w którym zostanie wprowadzony cewnik, i wysterylizuj cały obszar naprzemiennymi peelingami z chlorheksydyny i 70% alkoholu.
	<ol>
		<li>Umieścić jeden cewnik w okolicy lewej lub prawej żyły głowowej lub odpiszczelowej i podłączyć go do płukania soli fizjologicznej heparyny (0,06 mg heparyny/ml) za pomocą trójdrożnego kranu odcinającego. To jest miejsce pobierania próbek.</li>
		<li>Umieść drugi cewnik w innej nodze lub ramieniu w okolicy żył głowowych lub odpiszczelowych i podłącz port. Użyj tej strony do naparu z dekstrozy. Użyj małego, 1 ml płukania heparynizowaną solą fizjologiczną, aby zachować patent na kaniulę przed infuzją dekstrozy.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. Procedura IVGTT
UWAGA: Procedura IVGTT składa się z 8 punktów czasowych pobierania próbek krwi (Tabela 1).
<ol>
	<li>Pobrać próbkę wyjściową i użyć ręcznego glukometru, aby zmierzyć poziom glukozy we krwi na czczo. Należy pobrać próbkę surowicy do standardowej analizy biochemicznej, a także próbkę krwi pełnej do morfologii krwi w celu oceny ogólnego stanu zdrowia zwierzęcia. Pobrać próbki osocza w celu oznaczenia poziomu glukozy i insuliny z próbki wyjściowej za pomocą zestawu zatwierdzonego do stosowania z makakami zgodnie z instrukcjami producenta 8, 9. 
	UWAGA: Ważne jest, aby przed pobraniem jakiejkolwiek próbki do pobrania krwi pobrać 0,5 ml z kaniuli w celu usunięcia resztek krwi lub heparyny z martwej przestrzeni kaniuli.</li>
	<li>Po uzyskaniu próbki podstawowej należy podać dawkę 50% dekstrozy (250 mg/kg) w ciągu 30 sekund do portu infuzji dekstrozy. 
	UWAGA: Można stosować modele z wyższymi dawkami (500 mg/kg), chociaż dawka powinna być ustalona dla wszystkich procedur w celu dokonania porównań podłużnych.
	<ol>
		<li>Przepłukać port infuzyjny 5 ml heparynizowanego roztworu soli fizjologicznej, aby upewnić się, że w porcie nie pozostała dekstroza. Końcem infuzji jest T0. Poproś technika o wymianę rękawiczek, ponieważ resztki dekstrozy z infuzji mogą zanieczyścić kolejne próbki krwi.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Pierwszy punkt czasowy próbki po infuzji to T3 min, od zakończenia infuzji dekstrozy, następnie T5 min, T7 min, T10 min, T15 min, T20 min, a ostatni punkt czasowy próbki to T30 min. Pobrać osocze z każdego punktu czasowego, aby oznaczyć poziomy glukozy i insuliny z próbką wyjściową (patrz krok 3.1).
	<ol>
		<li>W punkcie czasowym T3 min użyj ręcznego glukometru, aby ponownie sprawdzić poziom glukozy we krwi. 
		UWAGA: Odczyty glukometru na początku badania i T3 służą jedynie do potwierdzenia infuzji dekstrozy. Poziom glukozy we krwi w punkcie czasowym T3 min powinien być o ~ 100 mg/dl wyższy w porównaniu z wyjściowym poziomem glukozy w osoczu na czczo.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
4. Odzyskiwanie zwierząt i przetwarzanie próbek
<ol>
	<li>Wyjmij kaniule i uciskaj miejsca cewnikowania w celu hemostazy po upływie 30 min punktu czasowego. Monitoruj zwierzę, dopóki nie odzyska przytomności i nie zacznie siadać. Podawaj karmę, gdy zwierzę w pełni wyzdrowieje.</li>
	<li>Natychmiast umieścić każdą próbkę krwi pełnej w probówkach K2EDTA na lodzie. Odwirować z prędkością 3 000 obr./min w temperaturze 4 °C w ciągu 10 minut od pobrania. Próbki osocza podsycić do kriowialiów, zamrozić i przechowywać w temperaturze -80 °C do czasu analizy.
	<ol>
		<li>Pozostawić krew w probówce surowicy do standardowej analizy biochemicznej surowicy w temperaturze pokojowej nie krócej niż 20 minut i nie dłużej niż 30 minut przed odwirowaniem z prędkością 3000 obr./min w temperaturze pokojowej. Próbki surowicy należy zamrozić do czasu oznaczenia w ciągu 48 godzin od pobrania><.
		UWAGA: Próbki krwi pełnej pobrane do analizy morfologii krwi należy przechowywać w lodówce do momentu oznaczenia w ciągu 24 godzin od pobrania.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
5. Przetwarzanie danych
<ol>
	<li>Po ustaleniu krzywych insuliny i stężenia glukozy w osoczu należy określić szybkość klirensu glukozy K od nachylenia logarytmu naturalnego wartości stężenia glukozy powyżej linii podstawowej 16, 17, 
	UWAGA: Można oczekiwać, że zdrowy NHP będzie miał wskaźnik klirensu glukozy K znacznie powyżej 1, często większy niż 2 lub więcej, ponieważ zdrowe zwierzę często powraca do wyjściowych wartości glukozy w ciągu 30 minut. Wraz ze spadkiem produkcji insuliny wskaźnik klirensu glukozy K spadnie bardziej dramatycznie, spadając poniżej 1.</li>
	<li>Obliczyć AUC jako całość, jako sumę całkowitych powierzchni trapezów reprezentujących obszar pod krzywą każdego odcinka linii między punktami czasowymi, do T30 16, 17. 
	UWAGA: Tradycyjnie, AUC z pierwszych dziesięciu minut procedury jest uważane za ostrą odpowiedź insulinową na glukozę (AIR), podczas gdy AUC z ostatnich 20 minut procedury jest uważane za późną odpowiedź insulinową (LIR). W miarę jak zwierzę staje się bardziej dysmetaboliczne, AUC insuliny wzrasta, odzwierciedlając kompensację rosnącej niewrażliwości na insulinę. Jednak w miarę jak zwierzę przechodzi w jawną cukrzycę, AUC zmniejsza się, często początkowo w ostrej fazie insuliny, wychwyconej przez AIR.</li>
</ol>

<ol><li>Bergman, R., Phillips, L., Cobelli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiologic+evaluation+of+factors+controlling+glucose+tolerance+in+man%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Physiologic evaluation of factors controlling glucose tolerance in man.</a> J. Clin. Invest. 68, 1456-1457 (1981).</li>
<li>Bergman, R., Prager, R., Volund, A., Olefsky, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Equivalence+of+the+insulin+sensitivity+index+in+man+derived+by+the+minimal+model+and+the+euglycemic+glucose+clamp%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Equivalence of the insulin sensitivity index in man derived by the minimal model and the euglycemic glucose clamp.</a> J. Clin. Invest. 79, 790-800 (1987).</li>
<li>Hovorka, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Partitioning+glucose+distribution%2Ftransport%2C+disposal%2C+and+endogenous+production+during+IVGTT%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Endocrinol.+Metab%22%5BJournal%5D)">Partitioning glucose distribution/transport, disposal, and endogenous production during IVGTT.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 282, E992-E1007 (2002).</li>
<li>Salinari, S., Guidone, C., Bertuzzi, A., Manco, M., Asnaghi, S., Mingrone, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First-phase+insulin+secretion+restoration+and+differential+response+to+glucose+load+depending+on+the+route+of+administration+in+type+2+diabetic+subjects+after+beriatric+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Care%22%5BJournal%5D)">First-phase insulin secretion restoration and differential response to glucose load depending on the route of administration in type 2 diabetic subjects after beriatric surgery.</a> Diabetes Care. 32 (3), 375-380 (2009).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Clinical+Diabetes+Research%3A+Methods+and+Techniques%22">Clinical Diabetes Research: Methods and Techniques</a>. Roden, M. , John Wiley & Sons. (2007).</li>
<li>Cobelli, C., Pacini, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+secretion+and+hepatic+extraction+in+humans+by+minimal+modeling+of+c-peptide+and+insulin+kinetics%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Insulin secretion and hepatic extraction in humans by minimal modeling of c-peptide and insulin kinetics.</a> Diabetes. 37, 223-231 (1988).</li>
<li>Lorenzo, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disposition+index%2C+glucose+effectiveness%2C+and+conversion+to+type+2+diabetes%3A+the+insulin+resistance+atherosclerosis+study%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Care%22%5BJournal%5D)">Disposition index, glucose effectiveness, and conversion to type 2 diabetes: the insulin resistance atherosclerosis study.</a> Diabetes Care. 33, 2098-2103 (2010).</li>
<li>Hansen, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigation+and+treatment+of+type+2+diabetes+in+nonhuman+primates%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Investigation and treatment of type 2 diabetes in nonhuman primates.</a> Methods Mol Biol. 933, 177-185 (2012).</li>
<li>Hansen, B. C., Bodkin, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardization+of+IVGTT.+Importance+of+method+used+to+calculate+glucose+disappearance%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Care%22%5BJournal%5D)">Standardization of IVGTT. Importance of method used to calculate glucose disappearance.</a> Diabetes Care. 16 (5), 847(1993).</li>
<li>Hardwood, J. H., Listrani, P., Wagner, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonhuman+primates+and+other+animal+models+in+diabetes+research%5BTitle%5D)+AND+%22J+Diabetes+Sci+Tech%22%5BJournal%5D)">Nonhuman primates and other animal models in diabetes research.</a> J Diabetes Sci Tech. 3, 503-514 (2012).</li>
<li>De Koning, E. J., Bodkin, N. L., Hansen, B. C., Clark, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetes+mellitus+in+Macaca+mulatta+monkeys+is+characterized+by+islet+amyloidosis+and+reduction+in+beta-cell+population%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">Diabetes mellitus in Macaca mulatta monkeys is characterized by islet amyloidosis and reduction in beta-cell population.</a> Diabetologia. 36, 378-384 (1993).</li>
<li>Letiexhe, M. R., Scheen, A. J., Gerard, P. L., Desaive, C., Lefebvre, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+secretion%2C+clearance+and+action+before+and+after+gastroplasty+in+severely+obese+subjects%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Obes+Relat+Metab+Disord%22%5BJournal%5D)">Insulin secretion, clearance and action before and after gastroplasty in severely obese subjects.</a> Int J Obes Relat Metab Disord. 18, 295-300 (1994).</li>
<li>Letiexhe, M. R., Scheen, A. J., Gerard, P. L., Desaive, C., Lefebvre, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postgastroplasty+recovery+of+ideal+body+weight+normalizes+glucose+and+insulin+metabolism+in+obese+women%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">Postgastroplasty recovery of ideal body weight normalizes glucose and insulin metabolism in obese women.</a> J Clin Endocrinol Metab. 80, 364-369 (1995).</li>
<li>Kim, S. H., Abbasi, F., Chu, J. W., McLaughlin, T. L., Lamendola, C., Polonsky, K. S., Reaven, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rosiglitazone+reduces+glucose-stimulated+insulin+secretion+rate+and+increases+insulin+clearance+in+nondiabetic%2C+insulin-resistant+individuals%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Rosiglitazone reduces glucose-stimulated insulin secretion rate and increases insulin clearance in nondiabetic, insulin-resistant individuals.</a> Diabetes. 54, 2447-2452 (2005).</li>
<li>Toffolo, G., Breda, E., Cavaghan, M. K., Ehrmann, D. A., Polonsky, K. S., Cobelli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+indexes+of+beta-cell+function+during+graded+up+and+down+glucose+infusion+from+C-peptide+minimal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">Quantitative indexes of beta-cell function during graded up and down glucose infusion from C-peptide minimal models.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 280, E2-E10 (2001).</li>
<li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+beta-cell+insulin+secretory+function+using+a+graded+glucose-infusion+with+C-peptide+deconvolution+in+dysmetabolic%2C+and+diabetic+cynomolgus+monkeys%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetology+and+Metabolic+Syn%22%5BJournal%5D)">Quantification of beta-cell insulin secretory function using a graded glucose-infusion with C-peptide deconvolution in dysmetabolic, and diabetic cynomolgus monkeys.</a> Diabetology and Metabolic Syn. 5, 40(2013).</li>
<li>Xiao, Y. F., Wang, B., Wang, X., Du, F., Benzinou, M., Wang, Y. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xylazine-induced+reduction+of+tissue+sensitivity+to+insulin+leads+to+acute+hyperglycemia+in+diabetic+and+normoglycemic+monkeys%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Xylazine-induced reduction of tissue sensitivity to insulin leads to acute hyperglycemia in diabetic and normoglycemic monkeys.</a> Anesthesiology. 13 (33), (2013).</li>
<li>Porte, D., Kahn, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B2-cell+dysfunction+and+failure+in+type+2+diabetes+potential+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">β-cell dysfunction and failure in type 2 diabetes potential mechanisms.</a> Diabetes. 50, Suppl 1. S160-S163 (2001).</li>
<li>DeFronzo, R. A., Tobin, J. D., Andres, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucose+clamp+technique%3A+a+method+for+quantifying+insulin+secretion+and+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Glucose clamp technique: a method for quantifying insulin secretion and resistance.</a> American Journal of Physiology. 237 (3), G214-G223 (1979).</li>
<li>Ferrannini, E., Gastaldelli, A., Miyazaki, Y., Matsuda, M., Mari, A., DeFronzo, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B2-cell+function+in+subjects+spanning+the+range+from+normal+glucose+tolerance+to+overt+diabetes%3A+a+new+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">β-cell function in subjects spanning the range from normal glucose tolerance to overt diabetes: a new analysis.</a> J Clin Endocrinol Metab. 90 (1), 493-500 (2005).</li>
<li>Vaughan, K. L., Szarowicz, M. D., Herbert, R. L., Mattison, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+anesthesia+protocols+for+intravenous+glucose+tolerance+testing+in+rhesus+monkeys%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Primatol%22%5BJournal%5D)">Comparison of anesthesia protocols for intravenous glucose tolerance testing in rhesus monkeys.</a> J Med Primatol. 43, 162-168 (2014).</li>
<li>Kemnitz, J. W., Kraemer, G. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+glucoregulation+in+rhesus+monkeys+sedated+with+ketamine%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Primatology%22%5BJournal%5D)">Assessment of glucoregulation in rhesus monkeys sedated with ketamine.</a> American Journal of Primatology. 3, 201-210 (1982).</li>
<li>Dutton, C. J., Parvin, C. A., Gronowski, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+glycated+hemoglobin+percentages+for+use+in+the+diagnosis+and+monitoring+of+diabetes+mellitus+in+nonhuman+primates%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Vet+Res%22%5BJournal%5D)">Measurement of glycated hemoglobin percentages for use in the diagnosis and monitoring of diabetes mellitus in nonhuman primates.</a> Am J Vet Res. 64, 562-568 (2003).</li>
<li>Rai, V., Iyer, U., Mani, I., Mani, U. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serum+biochemical+changes+in+insulin+dependent+and+non-insulin+dependent+diabetes+mellitus+and+their+role+in+the+development+of+secondary+complications%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Diab+Dev+Countries%22%5BJournal%5D)">Serum biochemical changes in insulin dependent and non-insulin dependent diabetes mellitus and their role in the development of secondary complications.</a> Int J Diab Dev Countries. 17, 33-37 (1997).</li>
<li>Shirasaki, Y., Yoshioka, N., Kanazawa, K., Maekawa, T., Horikawa, T., Hayashi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+physical+restraint+on+glucose+tolerance+in+cynomolgus+monkeys%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Primatol%22%5BJournal%5D)">Effect of physical restraint on glucose tolerance in cynomolgus monkeys.</a> J Med Primatol. 42, 165-168 (2013).</li>
</ol>

Autorzy są powiązani z organizacją prowadzącą badania na zlecenie (Crown Bioscience) działającą w dziedzinie chorób metabolicznych.

IVGTT ocenia zdolność uwalniania insuliny stymulowanej glukozą przez pojedynczy wlew dekstrozy na podstawie masy ciała 5, 12, 13. Na podstawie testu uzyskuje się poziom glukozy we krwi na czczo i poziom insuliny, co pozwala na ocenę zdolności zwierzęcia do uwalniania insuliny i powrotu podwyższonego poziomu glukozy do wartości wyjściowej. Dostarcza to użytkownikowi informacji pozwalających scharakteryzować zwierzę jako zdrowe zwierzę z prawidłowym poziomem glukozy i insuliny, zwierzę dysmetaboliczne z hiperins...

IVGTT to wygodny test funkcjonalny, który jest rutynowo używany do określania funkcji komórek β u ludzi na różnych stanach metabolicznych 5, 7. W zwierzęcych modelach cukrzycy typu 2 jest dobrze rozpoznawany jako narzędzie do charakteryzowania zwierząt, które wykazują postęp choroby metabolicznej od zdrowego do dysmetabolicznego stanu hiperglikemii 8, 9. Najbliższy zwierzęcy model cukrzycy typu 2 wykazano u naczelnych innych niż ludzie (NHP), z których godnymi uwagi przykładami są makaki rezusy i cynomolgus. U tych zwierząt naturalnie rozwija się cukrzyca typu 2 z tymi samymi czynnikami ryzyka, takimi jak wiek i otyłość, które przyczyniają się do jej występowania, jak u ludzi 10. Co więcej, istnieje podobna progresja choroby i patologia trzustki, które wykazują złogi amyloidu w miarę postępu choroby dysmetabolicznej 11.
Tutaj opisujemy naszą standardową metodę przeprowadzania IVGTT u NHP jako część naszej charakterystyki stanu metabolicznego kolonii u tych zwierząt. Ta metoda jest łatwa do wykonania w porównaniu z innymi, bardziej czasochłonnymi i kosztownymi technikami 2. IVGTT jest przydatny do szybkiego i częstego charakteryzowania dużej kolonii zwierząt. Biorąc pod uwagę poziom hemoglobiny glikowanej (HbA1C), dietę zwierzęcia i historię spożycia pokarmu, a także ich procentową masę beztłuszczową i tkankę tłuszczową, IVGTT jest zwykle wystarczający do scharakteryzowania stanu metabolicznego zwierzęcia i progresji w kierunku jawnej cukrzycy 6, 8.
HbA1C reprezentuje średni poziom glikemii w ciągu życia czerwonej krwinki, dostarczając wiarygodnego pomiaru poziomu glukozy w ciągu ostatnich sześciu tygodni do trzech miesięcy. Wartość ta, mierzona na podstawie wyjściowej próbki krwi na czczo z IVGTT, zapewnia wgląd w kontrolę glikemii w miesiącach między zabiegami. Jeśli zwierzę przeszło od fazy dysmetabolicznej do cukrzycowej od czasu ostatniego IVGTT, wartość HbA1C znacznie wyższa niż poprzednia wartość wskazywałaby, że przejście rozpoczęło się wkrótce po ostatnim IVGTT, podczas gdy wartość HbA1C bliższa poprzedniej wartości wskazywałaby, że przeszło dopiero niedawno. Ogólnie rzecz biorąc, u makaków rezusów wartości HbA1C większe niż 6% są uważane za nieprawidłowe i wskazują na słabą kontrolę glikemii 10, 23.
Poziomy glikemii powinny być interpretowane w kontekście zachowania i ogólnego stanu zdrowia zwierzęcia jako całości. Makaki z cukrzycą - podobnie jak ludzie - wykazują hiperfagię, polidypsję i wielomocz. Grupowe trzymanie zwierząt stanowi poważne wyzwanie dla pomiaru tych wskaźników i indywidualnej opieki wymaganej w przypadku małp z dysmetabolicznym i cukrzycą. Zalecamy trzymanie zwierząt pojedynczo, aby zapewnić im bardziej spersonalizowaną opiekę i łatwiej monitorować behawioralne markery zdrowia małp 8. Dodatkowo makaki z cukrzycą będą wykazywać utratę masy ciała, a także podwyższony profil lipidowy (podwyższony poziom cholesterolu, hipertriglicerydemia) oraz zaburzony metabolizm minerałów w surowicy. Ważne jest, aby mierzyć markery czynności wątroby i nerek w chemii surowicy, ponieważ uszkodzenie tych narządów jest często powikłaniem postępującej choroby metabolicznej/cukrzycy i może być współczynnikiem determinantów zaburzeń równowagi glikemicznej, lipidowej i mineralnej 9, 11, 18, 24.
Podczas korzystania z tej metody, wartości historyczne generowane z wielu, częstych charakterystyk w ciągu życia małpy mają szczególną wartość. Jeśli inne procedury, takie jak zacisk glukozowy lub stopniowany wlew glukozy (GGI), są potrzebne do pełnej oceny stanu zdrowia zwierzęcia, zwykle jest to spowodowane wstępną charakterystyką, gdy jego historia jest niedostępna. Jednak po ustaleniu poziomu wyjściowego powtarzanie IVGTT z częstotliwością co trzy miesiące jest zwykle wystarczające do śledzenia postępów zwierzęcia. Jest to szczególnie ważne, gdy zwierzęta są włączane do wielu badań w ciągu roku kalendarzowego w oparciu o ich status metaboliczny. Podczas gdy ich zdrowie może pozostawać względnie stabilne przez lata, gdy stan metaboliczny zwierzęcia pogarsza się, dramatyczny wzrost insulinooporności i nietolerancji glukozy może nastąpić bardzo szybko. Wartości HbA1C pozwalają na pewną interpolację pogorszenia lub poprawy stanu zdrowia zwierzęcia między zabiegami zaplanowanymi w odstępie trzech miesięcy. Z tego powodu metoda ta idealnie nadaje się do charakteryzowania zwierząt wykorzystywanych w wielu badaniach podłużnych w trakcie ich naturalnego życia.

<table><tbody><tr>Osocze wirówki <td></td><td></td><td>Allegra X-15R</td><td>: 4 &#176; C przy 3,000 obr./min przez 10 min</td></tr><tr>Surowica wirówkowa <td></td><td></td><td>Sorvall ST16R</td><td>: 22 &#176; C przy 3,000 obr./min przez 10 min</td></tr><tr><td>Thermo Scientific -86 &#176; C Zamrażarka, seria Forma 88000</td><td>Model: 88500A Dekstroza</td><td></td>50% (D50)Webster 07-8008986 Dożylny infuzat glukozy 3 ml Strzykawka Luer Lock Midwest Veterinary Suppy seryjne pobieranie krwi 5 ml Strzykawka Luer Lock Midwest Veterinary Suppy heparynizowany roztwór soli fizjologicznej 10 ml Strzykawka Luer Lock Midwest Veterinary Suppy <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td> dostawa gąbek z gazy <td>I.V. D50</td></tr><tr><td>2 x 2</td><td>Midwest Veterinary Suppy</td><td>366.23000.4</td><td>Używane suche, z 70% alkoholem i 2% roztworem chloroheksu 4</td></tr><tr><td>ml probówki do separatora surowicy&nbsp;</td><td>Midwest Veterinary Supply</td><td>366.45000.4</td><td>probówka do pobierania krwi do panelu superchemicznego</td></tr><tr><td>K2EDTA, 2 ml</td><td>VWR</td><td>95057-239</td><td>probówki do pobierania krwi</td></tr><tr><td>Aprotynina, 100 mg</td><td>Sigma</td><td>A1153-100MG</td><td>probówka do pobierania krwi dodatek proteazy</td></tr><tr><td>22 G x 1" Cewniki</td><td>Midwest Veterinary Suppy</td><td>193.75250.2</td><td>Cewnik dożylny&nbsp;</td></tr><tr><td>Korek iniekcyjny z nasadką</td><td>Midwest Veterinary Suppy</td><td>001.11500.2</td><td>%50 port infuzyjny dekstrozy</td></tr><tr><td>Taśma Porus, 1/2" x 10 jardów</td><td>Midwest Veterinary Suppy</td><td>001.85000.2</td><td>utrzymuje przyleganie cewników i hep. Zamki</td></tr><tr><td>Roztwór chlorheksydyny 2%</td> <td>Midwest Veterinary Suppy</td><td>193.08855.3</td> miejsce <td>przygotowania cewnika</td></tr><tr><td>70% etanolu</td><td>VWR</td><td>71001-654</td><td>miejsce przygotowania cewnika</td></tr><tr><td>opaska uciskowa</td><td>Webster</td><td>07-8003432</td><td></td></tr><tr><td>3-drogowy kran</td><td>Midwest Veterinary Supply</td><td>366.28510.4</td><td>hep. lock</td></tr><tr><td>37" zestaw przedłużający</td><td>Webster</td><td>07-8454200</td><td>hep. lock</td></tr><tr><td>Exel 50-60cc LL Strzykawki</td><td>Midwest Veterinary Suppy</td><td>001.12250.2</td><td>Heparynizowana sól fizjologiczna do spłukiwania</td></tr><tr><td>250 ml worek 0,9% soli fizjologicznej</td><td>Webster</td><td>07-8365593</td><td>płukanie</td></tr><tr><td>1,000 U Heparyna, 10 ml</td><td>Webster</td><td>07-883-4916</td><td></td></tr><tr><td>Ketamina (Ketaset) 100&nbsp; mg / ml</td><td>Fort Dodge</td> <td>(zamówione AV)</td><td></td></tr> <tr><td>Paski testowe do pomiaru glukozy Precision Xtra 50 / bx</td><td>Abbott (amerykańska hurtownia diabetologiczna)</td> <td>9381599728K7</td><td>test baseline/T3 poziom glukozy we krwi</td></tr><tr><td>Masimo Rad 57</td><td>DRE</td><td>6052057V</td><td>pulsoksymetr</td></tr><tr><td>Pavia termometr doodbytniczy</td><td>Patterson</td><td>07-8391335</td><td></td></tr><tr><td>Precyzyjny glukometr Xtra</td><td>Abbott</td><td>9381599728K7</td><td>Glukometr ręczny</td></tr></tbody></table>

charakterystyka stanu metabolicznego u naczelnych innych niż ludzie za pomocą dożylnego testu tolerancji glukozy

Characterization of Metabolic Status in Nonhuman Primates with the Intravenous Glucose Tolerance Test

Dożylny test tolerancji glukozy (IVGTT) odgrywa kluczową rolę w charakterystyce homeostazy glukozy. Biorąc pod uwagę profile biochemiczne surowicy, w tym poziom glukozy we krwi zarówno po posiłku, jak i na czczo, HbA1c, poziom insuliny, historię kliniczną diety, skład ciała i stan masy ciała, można dokonać oceny prawidłowej i nieprawidłowej kontroli glikemii. Interpretacja IVGTT odbywa się poprzez pomiar zmian poziomu glukozy i insuliny w czasie w odniesieniu do prowokacji dekstrozą. Kluczowymi elementami, które należy wziąć pod uwagę, są: szczytowe poziomy glukozy i insuliny osiągnięte w odniesieniu do T0 (koniec infuzji glukozy), szybkość klirensu glukozy K wynikająca z nachylenia szybkiego klirensu glukozy w ciągu pierwszych 20 minut (T1 do T20), czas powrotu do wartości wyjściowej glukozy oraz obszar pod krzywą (AUC). Te pomiary IVGTT pokażą charakterystyczne zmiany, gdy homeostaza glukozy przechodzi ze stanu zdrowego do choregostanu metabolicznego 5. W tym miejscu opiszemy charakterystykę naczelnych innych niż ludzie (makaki Rh i Cynomolgus), które są najistotniejszym zwierzęcym modelem cukrzycy typu II (T2D) u ludzi oraz IVGTT i profile kliniczne tych zwierząt od szczupłego, zdrowego do otyłego, dysmetabolicznego i T2D 8, 10, 11.

Wyniki przedstawione na Ryc. 1 obrazują typowe krzywe poziomu glukozy i insuliny u dojrzałych, zdrowych oraz chorych na cukrzycę makaków cynomolgus w trakcie 30-minutowego IVGTT. Dane od małp zdrowych i z zaawansowaną cukrzycą zostały zestawione, aby ukazać wyraźne różnice między zwierzętami z obu ekstremalnych końców zakresu charakterystyki metabolicznej. Ten protokół IVGTT był z sukcesem stosowany przez autorów u makaków rezus, dając podobne wyniki.
<p class="jove_c...

Celem tego protokołu jest przedstawienie standardowej metody przeprowadzania dożylnych testów tolerancji glukozy (IVGTT) w celu oceny kontroli glikemii u naczelnych innych niż ludzie i oceny ich statusu metabolicznego od zdrowego do dysmetabolicznego.

Charakterystyka stanu metabolicznego u naczelnych innych niż ludzie za pomocą dożylnego testu tolerancji glukozy

The intravenous glucose tolerance test (IVGTT) plays a key role in the characterization of glucose homeostasis. When taken together with serum biochemical ...

Ogólnym celem tego dożylnego testu tolerancji glukozy (IVGTT) jest charakterystyka postępu choroby metabolicznej u makaków, od stanu zdrowego do stanu dysmetabolicznego i hiperglikemicznego. Metoda ta może być wykorzystana do tworzenia kohort osobników uwarstwionych według stanu metabolicznego w celu przeprowadzenia badań dietetycznych lub farmakologicznych nad skutecznością terapeutyczną leczenia insulinooporności w cukrzycy. Główną zaletą tej techniki jest łatwość jej wykonania w porównaniu z innymi, bardziej czasochłonnymi i kosztownymi metodami.Od 14 do 18 godzin przed rozpoczęciem procedury należy usunąć pokarm z klatki makaka, aby uniknąć poposiłkowych wahań wartości glikemii. Następnego ranka zważone należy zważyć uspokojone zwierzę. Następnie należy ułożyć naczelnego w pozycji bocznej na podgrzewanym stole zabiegowym.Co 15 do 20 minut należy użyć pulsoksymetru do pomiaru tętna oraz obwodowego wysycenia krwi tlenem. Do pomiaru częstości oddechów należy użyć stopera, a do pomiaru temperatury rektalnej – termometru. Podczas każdej kontroli parametrów klinicznych należy również potwierdzić, że błony śluzowe dziąseł i warg są wilgotne i różowe.Po potwierdzeniu podstawowego stanu zdrowia zwierzęcia, należy użyć maszynki do strzyżenia, aby usunąć sierść z obszarów, w które zostaną wprowadzone cewniki, a następnie wysterylizować oba regiony, naprzemiennie przemywając je chlorheksydyną i 70% alkoholem. Po przygotowaniu miejsc wkłucia, wprowadź pierwszy cewnik i połącz końcówkę z systemem do płukania solą fizjologiczną z heparyną za pomocą trójdrożnego kurka. Jest to miejsce pobierania próbek krwi.Przyklej kranik, aby przymocować go do nogi. Umiejscowienie cewnika ma kluczowe znaczenie dla zachowania drożności i precyzyjnego pobierania seryjnych próbek krwi. Dlatego ważne jest, aby rozważyć przyśrodkowy i bardziej proksymalny odcinek żyły saphrenous, aby łatwo przymocować i obsługiwać system płukania z heparyną typu in-lock.Następnie wprowadź drugi cewnik i podłącz port do infuzji dekstrozy, a następnie podaj 1 mL soli fizjologicznej z heparyną, aby zachować drożność kaniuli do czasu rozpoczęcia infuzji dekstrozy. Przymocuj port do ramienia za pomocą taśmy, aby go ustabilizować. Po wprowadzeniu obu cewników pobierz próbkę wyjściową i użyj glukometru przenośnego do pomiaru poziomu glukozy we krwi na czczo.Pobierz próbkę surowicy do standardowej analizy biochemicznej oraz próbkę krwi pełnej do morfologii krwi w celu oceny ogólnego stanu zdrowia zwierzęcia. Odwróć probówkę z krwią pełną. Po każdym pobraniu krwi wymieszaj próbki w probówkach z EDTA z inhibitorami proteaz.Po pobraniu próbek wyjściowych, podaj dawkę 50% glukozy w czasie 30 sekund przez port do infuzji glukozy. Następnie przepłucz port pięcioma mililitrami soli fizjologicznej z heparyną, aby w porcie nie pozostała glukoza. Po zakończeniu infuzji zmień rękawiczki, ponieważ pozostałości glukozy z infuzji mogą zanieczyścić kolejne próbki krwi.Pierwszy punkt czasowy pobrania próbek po infuzji przypada w trzeciej minucie od zakończenia wlewu dekstrozy, a kolejne próbki pobiera się w T 5, 7, 10, 15 i 20 minucie, przy czym ostatnią próbkę pobiera się w T 30 minucie. Próbki przeznaczone do analizy poziomu glukozy i insuliny należy odwirować w ciągu 10 minut od pobrania, a następnie rozdzielić plazmę do krioprobek w celu zamrożenia i przechowywania w temperaturze -80 °C do czasu przeprowadzenia dalszych analiz. Podczas pobierania próbki w T 3 należy użyć przenośnego glukometru, aby sprawdzić poziom glukozy we krwi w celu potwierdzenia skuteczności infuzji dekstrozy.Po pobraniu ostatniej próbki należy usunąć kaniule, wywierając ucisk w miejscach kaniulacji w celu uzyskania hemostazy, a następnie monitorować zwierzę do czasu pełnego wybudzenia. Przedstawiono tutaj typowe krzywe glukozy i insuliny u dojrzałych, zdrowych oraz cukrzycowych makaków cynomolgus w przebiegu 30-minutowego IVGTT. Wartości bazowe glukozy na czczo u zdrowych makaków mogą być tak niskie jak 50 do 60 mg/dL, przy czym początkowy wzrost poziomu glukozy w osoczu obserwuje się w punkcie czasowym T 3 minuty.Jest to wartość znacznie niższa niż typowy skok poziomu glukozy w osoczu obserwowany u zwierząt z cukrzycą. W trakcie trwania procedury poziomy glukozy u zdrowych zwierząt często wracają do wartości wyjściowych, podczas gdy u zwierząt z zaburzeniami metabolicznymi i cukrzycą nie następuje taki powrót. Towarzysząca temu krzywa insulinowa dla zdrowego zwierzęcia wykazuje dwa piki, co odpowiada początkowemu gwałtownemu spadkowi glukozy we krwi, w znacznym stopniu zapośredniczonemu przez obwodowe efekty działania insuliny na transport i wychwyt glukozy.Siła tych efektów obwodowych, nawet podczas pierwszej fazy odpowiedzi insulinowej, nie równa się wkładowi wątroby w obniżanie poziomu glukozy, który podczas mniejszego, lecz bardziej trwałego drugiego szczytu insulinowego ma największy wpływ na poziom glikemii poprzez supresję endogennej produkcji glukozy. Gdy zwierzę stanie się zbyt zaawansowaną postacią cukrzycy, produkcja insuliny w odpowiedzi na bolus dekstrozy gwałtownie spada. Poziom glikemii pozostanie podwyższony w trakcie trwania procedury.Podobnie jak w przypadku glukozy, klirens jest obecnie mediowany niemal w całości przez mechanizmy niezależne od insuliny. Po przeprowadzeniu tej procedury można zastosować inne metody, takie jak stopniowa infuzja glukozy lub clamp hiperinsulinemiczno-euglikemiczny, aby odpowiedzieć na dodatkowe pytania dotyczące wrażliwości na insulinę. Należy pamiętać, że praca z igłami wystawionymi na kontakt z krwią makaków może być niezwykle niebezpieczna ze względu na ryzyko ekspozycji na wirusa herpes B.Podczas wykonywania tej procedury należy zawsze przestrzegać środków ostrożności, takich jak stosowanie odpowiedniego sprzętu ochrony osobistej oraz zachowanie szczególnej uwagi podczas obchodzenia się z przedmiotami ostrymi.

characterization-metabolic-status-nonhuman-primates-with-intravenous

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Clamp hiperinsulinemiczno-euglikemiczny, lub clamp insulinowy, jest złotym standardem w ocenie działania insuliny in vivo. Opisano metodę przeprowadzania clampów insulinowych u myszy. Obejmuje ona metodę cewnikowania tętniczego, która pozwala na wykonywanie eksperymentów na świadomych, nieskrępowanych myszach przy minimalnym stresie.

Zaciski hiperinsulinemiczno-euglikemiczne u świadomych, nieunieruchomionych myszy

Ten film pokazuje, jak przeprowadzić doustny test tolerancji glukozy na myszy laboratoryjnej.

Doustny test tolerancji glukozy (OGTT): pomiar metabolizmu glukozy u myszy

Obecny artykuł opisuje generację i charakterystykę metaboliczną myszy karmionych dietą wysokotłuszczową jako model insulinooporności i otyłości wywołanej dietą. Ponadto zawiera szczegółowe protokoły do wykonywania doustnego testu tolerancji glukozy i testu tolerancji insuliny, monitorując zmiany metabolizmu glukozy w całym organizmie in vivo.

Badanie metabolizmu glukozy in vivo u myszy karmionych dietą wysokotłuszczową przy użyciu doustnego testu tolerancji glukozy (OGTT) i testu tolerancji insuliny (ITT)

Częstość występowania otyłości wzrasta i zwiększa ryzyko przewlekłych chorób płuc. Aby ustalić podstawowe mechanizmy i strategie zapobiegawcze, potrzebne są dobrze zdefiniowane modele zwierzęce. W tym miejscu przedstawiamy trzy metody (test tolerancji glukozy, pletysmografia ciała i stabilizacja płuc) w celu zbadania wpływu otyłości na wyniki płucne u myszy.

Dootrzewnowy test tolerancji glukozy, pomiar czynności płuc i zespolenie płuc w celu zbadania wpływu otyłości i upośledzonego metabolizmu na wyniki płucne

Ten protokół opisuje użycie analizatora składu ciała i systemu monitorowania metabolizmu zwierząt do charakteryzowania składu ciała i parametrów metabolicznych u myszy. Jako przykład zastosowania tych technik podaje się model otyłości wywołanej przez żywienie wysokotłuszczowe.

Analiza składu ciała i metabolicznego umieszczania w klatkach u myszy karmionych wysokotłuszczowo

Obecny artykuł opisuje szczegółowy protokół przerywanego postu izokalorycznego 2:1 w celu ochrony i leczenia przed otyłością i upośledzonym metabolizmem glukozy u myszy typu dzikiego i ob/ob.

Ocena skutków metabolicznych izokalorycznego postu przerywanego 2:1 u myszy

Ten protokół demonstruje dokładny i powtarzalny pomiar zużycia tlenu w wyspach trzustkowych naczelnych innych niż ludzie. Techniki ładowania wysepek i powlekania mikropłytki zapewniają ramy dla skutecznego pomiaru oddychania w innych typach sferoid hodowlanych.

Analiza zużycia tlenu przez wyspy trzustkowe naczelnych

To badanie opisuje bezpośredni pomiar produkcji glukozy w wątrobie w mysim modelu zespołu policystycznych jajników przy użyciu stabilnego izotopowego znacznika glukozy przez żyłę ogonową zarówno na czczo, jak i w stanie bogatym w glukozę w tandemie.

Ocena produkcji glukozy w wątrobie w mysim modelu zespołu policystycznych jajników

Tutaj prezentujemy protokół do ilościowego określenia fizjologicznego znaczenia wpływu aktywności brunatnej tkanki tłuszczowej (BAT) na metabolizm człowieka. Osiąga się to poprzez połączenie obciążenia węglowodanami i kalorymetrii pośredniej z pomiarami zmian temperatury nadobojczykowej. To nowatorskie podejście może pomóc w opracowaniu celu farmakologicznego dla termogenezy BAT u ludzi.

Wykorzystanie kombinacji kalorymetrii pośredniej, termografii w podczerwieni i poziomu glukozy we krwi do pomiaru termogenezy brunatnej tkanki tłuszczowej u ludzi

Opisano zestaw testowy (IMAP) służący do pogłębionej oceny zdolności słuchowych i poznawczych wpływających na umiejętności słuchania. Jest on szybki w przeprowadzeniu, przyjazny dla dzieci i wolny od zakłóceń językowych. Generowanie bodźców oraz zarządzanie protokołem są kontrolowane za pomocą platformy programowej (IHR-STAR), co zapewnia powtarzalność procedur.

Zrozumienie procesu słuchania: zestaw testów IMAP

Poznaj metodę IVGTT do oceny kontroli glikemii u makaków w badaniach metabolicznych. Technika ta umożliwia stratyfikację zwierząt według stanu metabolicznego i wspiera badania nad insulinoopornością oraz cukrzycą.

Charakterystyka stanu metabolicznego u naczelnych innych niż ludzie za pomocą dożylnego testu tolerancji glukozy

Przeglądaj więcej filmów