Protokoły solidnych testów odporności na herbicydy u różnych gatunków chwastów

Ogólnym celem tej procedury jest przetestowanie i potwierdzenie odporności na herbicydy w szerokim zakresie gatunków chwastów i herbicydów, a także określenie poziomów odporności na herbicydy. Osiąga się to poprzez najpierw przerwanie spoczynku nasion zebranych z roślin, które przetrwały zabieg herbicydowy, aby uzyskać jednoczesne kiełkowanie i wschody siewek. Wymagany jest okres wernalizacji nasion trwający od kilku dni do ponad tygodnia.

Drugim krokiem jest wlanie podłoża ślimakowego z azotanem potasu do plastikowych naczyń. Nasiona Vern są następnie umieszczane na zestalonym ślimaku, a szalki są przenoszone do szafki do kiełkowania, w której panują optymalne warunki dla każdego gatunku chwastów. Następnie od 15 do 20 sadzonek przesadza się do plastikowych tacek wypełnionych standardową mieszanką doniczkową.

Do każdej tacki przypisywany jest kod kreskowy, zawierający wszystkie informacje umożliwiające jej unikalną identyfikację, a tace umieszcza się w ogrzewanej szklarni, aż sadzonki osiągną fazę od dwóch do trzech liści. Ostatnim krokiem jest zabieg herbicydowy przy użyciu precyzyjnego opryskiwacza stołowego, wszystkie herbicydy są stosowane jako preparaty handlowe z zalecanymi środkami powierzchniowo czynnymi w dwóch dawkach zalecanej dawki polowej, a trzy razy więcej trzy do czterech tygodni po zabiegu przeprowadzana jest ostateczna ocena. Czytnik kodów kreskowych służy do rejestrowania liczby ocalałych roślin oraz wizualnej szacowanej biomasy na jednostkę doświadczalną.

Dane są następnie pobierane do komputera i analizowane w celu określenia stanu odporności na herbicydy. Główna przewaga tej metody nad przesiewowymi testami diagnostycznymi in vivo lub in vitro polega na jej solidności i elastyczności. Innymi słowy, metoda jest niezawodna i można ją łatwo dostosować do szerokiej gamy gatunków poprzez niewielkie adaptacje.

Metoda ta pomaga odpowiedzieć na kluczowe pytania związane z badaniem i zarządzaniem populacjami chwastów odpornych na herbicydy na polach CRO, takie jak wzór i poziom odporności. Pozwala to również na właściwe zaplanowanie dalszych etapów eksperymentalnych, takich jak eksperymenty z odpowiedzią. Ogólnie rzecz biorąc, naukowcy, którzy są nowicjuszami w testowaniu odporności na herbicydy, będą mieli trudności z powodu wielu etapów i aspektów, które należy wziąć pod uwagę i dostosować do konkretnych warunków eksperymentalnych.

Zacznij od zebrania próbki nasion od jednego gatunku na raz i przypisania unikalnego kodu. Oczyść nasiona, usuwając plewy i odciągając nasiona. Wypełnij formularz dla każdej próbki, wskazując przypisany unikalny kod.

Nazwa gatunku, data zbioru, współrzędne GPS, gmina, imię i nazwisko rolnika, wielkość pola, poziom porażenia, herbicydy stosowane w sezonie oraz historyczne zapisy pola. Przechowuj nasiona w niezamkniętych papierowych torebkach oznaczonych przypisanym unikalnym kodem. Pozwól, aby wilgoć odparowała, ale nie wystawiaj nasion na działanie wysokiej temperatury lub ekstremalnych wahań temperatury.

Aby uniknąć indukcji wtórnego spoczynku. Oczyszczone nasiona przechowuj w temperaturze czterech stopni Celsjusza w ciemnym pomieszczeniu, aby umożliwić wernalizację. Wlej trochę wody dejonizowanej do plastikowych naczyń.

Wytnij dwa krążki i pasek bibuły filtracyjnej, który poprzez kapilarnę utworzy most między wodą a dwoma krążkami. Namocz bibułę filtracyjną w wodzie i umieść ją w plastikowych naczyniach. Następnie umieść wysuszone na powietrzu nasiona na papierze.

Przenieś plastikowe naczynia do czterech stopni Celsjusza na wymagany okres czasu, w zależności od gatunku. Następnie przygotuj roztwór świdra o stężeniu 0,6% zawierającym 0,1% azotanu potasu za pomocą wody dejonizowanej, rozpuść ślimak w kuchence mikrofalowej i wlej roztwór ślimaka do plastikowych naczyń. Gdy podłoże ostygnie, umieść nasiona Vern do wykiełkowania na zestalonym ślimaku.

Umieść plastikowe naczynia w komorze do kiełkowania, czas wernalizacji, a także warunki świetlne i temperaturowe różnią się w zależności od gatunku chwastów. Przesadzanie zamiast bezpośredniego szycia pozwala na uzyskanie jednolitego stanowiska roślin na tym samym etapie wzrostu, co jest ważnym warunkiem wstępnym optymalizacji wydajności zabiegu herbicydowego Przeszczep od 15 do 20 sadzonek do plastikowych tacek wypełnionych standardową mieszanką doniczkową składającą się z 60% gliny pylastej, gleby, 15% piasku, 15% perlitu rolniczego, i 10% torfu. Zidentyfikuj każdą tackę za pomocą kodu kreskowego, w tym wszystkich informacji dotyczących niepowtarzalnego kodu identyfikacyjnego populacji badanego herbicydu, numeru repliki i numeru tacki progresywnej.

Umieść tace w ogrzewanej szklarni i podlewaj rośliny w razie potrzeby, aby utrzymać podłoże na poziomie lub w pobliżu pojemności pola. Temperatura wzrostu różni się w zależności od gatunku chwastów dla herbicydów powschodowych. Rośliny opryskowe, gdy osiągną fazę dwóch do trzech liści, przygotowują roztwór środka powierzchniowo czynnego luzem zgodnie z instrukcjami na etykiecie, końcowe stężenie jest zwykle wyrażane jako procent końcowej objętości, czy też objętość ma być rozprowadzona na jednostkę powierzchni?

Obliczyć ilość produktu handlowego, która ma być rozpuszczona w roztworze środka powierzchniowo czynnego. Korzystając z tego równania, dawkę herbicydu oblicza się, mnożąc zalecaną dawkę polową przez maksymalną badaną dawkę, a końcową objętość roztworu dzieli się przez objętość dostarczoną przez opryskiwacz stołowy. Przygotuj najbardziej skoncentrowany roztwór herbicydu Najpierw trzykrotnie rozcieńczyć roztwór herbicydu, aby przygotować mniej stężony roztwór.

Procedura ta zmniejsza ryzyko popełnienia błędów podczas ważenia lub pipetowania herbicydów. Roztwór herbicydu. Stężenie jest wyrażone jako objętość, która ma być rozłożona na jednostkę powierzchni.

Rozpocznij sekwencję leczenia od mniejszej dawki herbicydu. W ten sposób nie ma potrzeby mycia szafki opryskiwacza między dwoma zabiegami tym samym herbicydem. Rozprowadzić roztwór herbicydu za pomocą precyzyjnego opryskiwacza stołowego, dostarczając 300 litrów na hektar pod ciśnieniem 215 kilo paskali i prędkością 0,75 metra na sekundę za pomocą belki wyposażonej w trzy płaskie dysze hydrauliczne wentylatora.

Po zmianie herbicydu umyj dwukrotnie szafkę opryskową za pomocą 1% wybielacza, a następnie spłucz. Dokonaj oceny trzy lub cztery tygodnie po zabiegu, w zależności od zapisu testowanych herbicydów, liczby roślin, które przeżyły zabieg, a także wizualnie oszacowanej biomasy lub VEB za pomocą czytnika kodów kreskowych, który automatycznie identyfikuje każdą tacę. Rośliny są oceniane jako martwe, jeśli nie wykazują aktywnego wzrostu, niezależnie od koloru lub innego wyglądu.

VEB uzyskuje się poprzez wizualne porównanie biomasy roślinnej między kontrolą tej samej populacji poddanej działaniu środka i niepoddanej działaniu środka. Każdemu poddawanemu działaniu herbicydu przyznaje się wynik w zakresie od 10 dla roślin, które nie są dotknięte herbicydem, do zera, gdy rośliny są wyraźnie martwe. Oceń ogólną skuteczność leczenia, włączając do wszystkich doświadczeń populację podatną, taką jak populacja zebrana w miejscu, w którym nigdy lub rzadko stosowano herbicydy.

Wyraż przeżywalność roślin jako procent liczby roślin poddanych działaniu herbicydu, licząc tuż przed zabiegiem herbicydowym i oblicz błąd standardowy. Wartość Perme przypisuje populacje do czterech kategorii w oparciu o wyniki uzyskane z zabiegów dwiema dawkami herbicydów podatnymi, gdy mniej niż 5% roślin przeżywa dawkę herbicydu. Jeden x lekko odporny, gdy przeżyli wahał się od 5% do 20% przy dawce herbicydu.

Jeden x odporny, gdy ponad 20% roślin przetrwa dawkę herbicydu. Jeden x i wysoka odporność, gdy osoby, które przeżyły, są większe niż 20% przy dawce herbicydu jeden x i więcej niż 10% przy dawce herbicydu. Przedstawiono trzy x reprezentatywne wyniki leczenia herbicydami panolam na czterech populacjach iopa.

Podatność była całkowicie kontrolowana, podczas gdy populacja 1410 została sklasyfikowana jako lekko odporna, ponieważ przeżyło mniej niż 20% roślin. Populacja 1411 była kontrolowana przy dawce trzeciej x, ale przeżywalność roślin po dawce pierwszej x była wyższa niż 20% i dlatego przypisano ją naszemu statusowi. Wreszcie, populacja 1412 nie była kontrolowana ani zalecaną dawką polową raz x, ani trzy razy wyżej, więc została przypisana do kategorii wysoce opornej.

Drugi przykład dotyczący wizualnego szacowania biomasy w roślinach pop lub rehas traktowanych metylem trien Ron pokazano tutaj. Wynik 10 jest przypisywany do nieleczonej kontroli, podczas gdy tace z roślinami całkowicie kontrolowanymi mają VEB równy zero. Do tac przypisywany jest pośredni wynik wynoszący pięć.

Posiadające całkowitą biomasę roślin, która stanowi połowę roślin niepoddanych działaniu środka, przy czym rośliny o biomasie porównywalnej z kontrolą niepoddaną działaniu środka, w której rośliny nie zostały poddane działaniu herbicydów, a zatem uzyskały wysoką odporność, mają VEB równy 10. Podejmując się tej procedury, należy pamiętać, że jakość nasion chwastów, które powinny być zebrane, gdy są dojrzałe, a następnie przywrócone, ma duży wpływ na powodzenie eksperymentów przeprowadzanych zgodnie z tą procedurą. Inne metody, takie jak response byas, mogą być wykonywane w celu precyzyjnej odpowiedzi na dodatkowe pytania związane z poziomem oporu.

Po obejrzeniu tego filmu powinieneś dobrze zrozumieć, jak podejść do testów odporności na herbicydy i jak dostosować różne kroki do różnych gatunków chwastów. W szczególności hamowanie CY nasion i kiełkowanie nasion. Nie zapominaj, że praca z herbicydami lub stężonymi kwasami może być bardzo niebezpieczna, należy zachować środki ostrożności, takie jak noszenie masek, rękawiczek i innych środków ochrony osobistej podczas wykonywania tej procedury.