Name: Biopsja mięśni szkieletowych mięśnia obszernego bocznego człowieka przy użyciu konchotomu Weila-Blakesleya (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-03-04T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 16 s
Description: Poznaj technikę biopsji mięśnia obszernego bocznego człowieka przy użyciu konchotomu Weila-Blakesleya. Metoda zapewnia bezpieczne pobranie wystarczającej ilości tkanki do analizy histochemicznej i molekularnej przy minimalnym dyskomforcie pacjenta.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Pragniemy podziękować uczestnikom badania za umożliwienie tej pracy oraz personelowi NIHR Southampton Biomedical Research Centre i Wellcome Trust Clinical Research Facility, University Hospital Southampton za pomoc w pomiarach badania.
Ta praca była wspierana przez NIHR Southampton Biomedical Research Centre, Nutrition, MRC Lifecourse Epidemiology Unit oraz University of Southampton. Niniejszy raport jest niezależnym badaniem przeprowadzonym przez NIHR BRC Funding Scheme. Poglądy wyrażone w tej publikacji są poglądami autorów, a niekoniecznie poglądami NHS, NIHR lub Departamentu Zdrowia. AMB jest wspierany przez NIHR Clinical Research Fellowship, HPP jest wspierany przez NIHR Southampton Biomedical Research Centre.

Oświadczenie etyczne: Poniżej znajduje się opis procedury biopsji mięśni, którą stosujemy w naszej instytucji. Procedura biopsji mięśni jest stosowana w badaniu Hertfordshire Sarcopenia, które zostało zatwierdzone przez Hertfordshire Research Committee o numerze 07/Q0204/68. Wszyscy uczestnicy wyrazili pisemną świadomą zgodę 20. 
UWAGA: Zabieg może wykonać jeden operator, wspomagany przez asystenta, który może zaangażować uczestnika w rozmowę, aby zmniejszyć niepokój i upewnić się, że przez cały czas czuje się komfortowo. Sala zabiegowa powinna być wyposażona w zlewozmywak, leżankę z regulacją wysokości, czyste powierzchnie oraz wózek zabiegowy.
1. Przygotuj uczestnika (Rysunek 2)
<ol>
	<li>Poproś uczestnika, aby położył się wygodnie na wznak na kanapie. Odsłoń preferowane udo od załamania pachwiny. Rozłóż jednorazowy arkusz chłonny pod odsłoniętym udem. Upewnij się, że noga pozostaje wyprostowana i zrelaksowana przez cały zabieg, ale udo jest chwilowo napięte, aby zarysować obszerny boczny.</li>
	<li>Zaznacz miejsce zabiegu około dwóch trzecich w dół wyimaginowanej linii od przedniego górnego kręgosłupa biodrowego do rzepki.</li>
</ol>
2. Przygotuj skórę (Rysunek 2)
<ol>
	<li>Ogolić skórę do średnicy około 4 cm otaczającą proponowane miejsce biopsji za pomocą sterylnego ostrza do golenia i oczyść skórę wacikiem nasączonym alkoholem. 
	UWAGA: Ma to na celu zapobieżenie późniejszemu uwięzieniu włosów w ranie podczas procesu gojenia. Ten krok jest opcjonalny zgodnie z preferencjami operatora.</li>
	<li>Naciekać skórę i przylegającą powięź w znieczuleniu miejscowym. Użyj igły 25 G, aby podnieść podskórny pęcherzyk 2% lidokainy, a następnie wniknij głębiej w tkankę podskórną za pomocą igły 23 G. Staraj się wniknąć do co najmniej pół do jednego cala w zależności od zawartości tkanki podskórnej w miejscu biopsji. Ta głębokość powinna być wystarczająca, aby zapewnić znieczulenie leżącej nad nią powięzi. Odczekaj 2 - 5 minut, aby środek znieczulający zaczął działać. Potwierdź znieczulenie, delikatnie badając skórę końcówką igły lub ostrza skalpela.</li>
</ol>
3. Przygotowanie sterylnego pola (Rysunek 2)
<ol>
	<li>Umyj ręce mydłem i utrzymuj ręce w czystości do momentu założenia sterylnego fartuchu. Przykryj ręce sterylnymi rękawiczkami przed utworzeniem sterylnego pola na wózku zabiegowym.</li>
	<li>Wysterylizuj miejsce biopsji 2% roztworem chlorheksydyny/alkoholu izopropylowego lub środkiem do dezynfekcji skóry na bazie jodu. Zastosuj sterylną serwetę z otworem samoprzylepnym, aby odsłonić miejsce biopsji, ale także utrzymać sterylne pole.</li>
</ol>
4. Wykonaj procedurę (Rysunek 2)
<ol>
	<li>Za pomocą skalpela w rozmiarze 11 wykonaj nacięcie o średnicy 5 - 10 mm na skórze i w dół oraz przez leżącą nad nią powięź. Włóż zamkniętą końcówkę gryzącą konchotomu przez nacięcie pod kątem prostym do długiej osi kości udowej, na głębokość średnio od pół do jednego cala. W razie potrzeby wolną ręką przytrzymaj i podeprzyj udo otaczające miejsce biopsji, podczas gdy końcówka konchotomu jest otwierana i zamykana w mięśniu.</li>
	<li>Obróć konchotomię o 90 - 180°, aby przeciąć mięsień. Wyjmij konchotomizm i otwórz końcówkę na sterylnej gazie zwilżonej sterylną solą fizjologiczną. W razie potrzeby powtórz procedurę w obrębie pojedynczego miejsca rany, aby uzyskać wystarczającą ilość tkanki mięśniowej. Przenieś gazę do pojemnika umieszczonego na lodzie. Przenieś pojemnik do laboratorium przygotowawczego w celu przetworzenia mięśnia zgodnie z lokalnym protokołem instytucjonalnym.</li>
</ol>
5. Procedura po (Rysunek 2)
<ol>
	<li>Wywieraj bezpośredni nacisk na ranę przez maksymalnie 5 minut. Zamknij ranę paskami steri, umieszczając je równolegle do rany, a nie pod kątem prostym, aby uniknąć potencjalnego usunięcia tkanki bliznowatej i ponownego otwarcia rany, jeśli paski steri-strips zostaną przypadkowo usunięte. Umieść sterylny opatrunek chłonny na paskach steri-strips i zawiąż dwuwarstwowy bandaż do ucisku i zabezpiecz taśmą.</li>
	<li>Wyjaśnij uczestnikowi metodę opatrunku, ponieważ będzie on musiał wykonać zmianę opatrunku 3 - 4 dni po zabiegu. Upewnij się, że uczestnik zdejmie bandaż uciskowy przed pójściem spać późnym wieczorem.</li>
</ol>
6. Porady dotyczące biopsji
<ol>
	<li>Poinformuj uczestnika, że często występuje pewna sztywność ud, która może być złagodzona przez delikatne ćwiczenia (np. chodzenie). Stosuj proste środki przeciwbólowe, takie jak paracetamol. Ostrzeż uczestnika o przejściowym drętwieniu wokół miejsca biopsji, które może utrzymywać się do dwóch tygodni, a także o potencjalnym powikłaniu zakażenia rany.</li>
</ol>
7. Instrukcje dotyczące procedury postu tematu
<ol>
	<li>Poproś uczestnika, aby przez 72 godziny unikał intensywnych aktywności (takich jak wspinaczka, bieganie, podnoszenie ciężarów). Poproś uczestnika, aby unikał zanurzania się w wodzie przez 48 - 72 godziny. Należy jednak poinstruować uczestnika, aby podczas kąpieli pod prysznicem owinął miejsce biopsji folią spożywczą lub podobnym materiałem, aby opatrunek był suchy.</li>
	<li>Poproś uczestnika o zmianę opatrunku po 3-4 dniach i usunięcie pasków steri-strips po tygodniu. 
	UWAGA: Uczestnik powinien otrzymać pisemne instrukcje dotyczące opieki po biopsji, zapasowe opatrunki oraz dane kontaktowe zespołu odpowiedzialnego za wykonanie zabiegu w nagłych wypadkach.</li>
</ol>

<ol><li>Dubowitz, V., Sewry, C. A., Oldfords, A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDubowitz%2C+V+%22Muscle+Biopsy%3A+A+Practical+Approach%22">Muscle Biopsy: A Practical Approach</a>. , 4th ed, Saunders Elsevier. China. (2013).</li>
<li>Parent, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Duchenne+De+Boulogne%3A+a+pioneer+in+neurology+and+medical+photography%5BTitle%5D)+AND+%22Can+J+Neurol+Sci%22%5BJournal%5D)">Duchenne De Boulogne: a pioneer in neurology and medical photography.</a> Can J Neurol Sci. 32 (3), 369-377 (2005).</li>
<li>Hayot, M., Michaud, A., Koechlin, C., Caron, M. A., Leblanc, P., Prefaut, C., Maltais, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletal+muscle+microbiopsy%3A+a+validation+study+of+a+minimally+invasive+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">Skeletal muscle microbiopsy: a validation study of a minimally invasive technique.</a> Eur Respir J. 25 (3), 431-440 (2005).</li>
<li>O'Rourke, K. S., Blaivas, M., Ike, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Utility+of+needle+muscle+biopsy+in+a+university+rheumatology+practice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Rheumatol%22%5BJournal%5D)">Utility of needle muscle biopsy in a university rheumatology practice.</a> J Rheumatol. 21 (3), 413-424 (1994).</li>
<li>O'Rourke, K. S., Ike, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+biopsy%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Rheumatol%22%5BJournal%5D)">Muscle biopsy.</a> Curr Opin Rheumatol. 7 (6), 462-468 (1995).</li>
<li>Bergstrom, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+electrolytes+in+man%5BTitle%5D)+AND+%22Scand+J+Clin+Lab+Invest%22%5BJournal%5D)">Muscle electrolytes in man.</a> Scand J Clin Lab Invest. 14, Suppl 68. (1962).</li>
<li>Edwards, R., Young, A., Wiles, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Needle+biopsy+of+skeletal+muscle+in+the+diagnosis+of+myopathy+and+the+clinical+study+of+muscle+function+and+repair%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Needle biopsy of skeletal muscle in the diagnosis of myopathy and the clinical study of muscle function and repair.</a> N Engl J Med. 302 (5), 261-271 (1980).</li>
<li>Edwards, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Percutaneous+needle-biopsy+of+skeletal+muscle+in+diagnosis+and+research%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Percutaneous needle-biopsy of skeletal muscle in diagnosis and research.</a> Lancet. 2 (7724), 593-595 (1971).</li>
<li>Edwards, R. H., Round, J. M., Jones, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Needle+biopsy+of+skeletal+muscle%3A+a+review+of+10+years+experience%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Needle biopsy of skeletal muscle: a review of 10 years experience.</a> Muscle Nerve. 6 (9), 676-683 (1983).</li>
<li>Shanely, R. A., Zwetsloot, K. A., Triplett, N. T., Meaney, M. P., Farris, G. E., Nieman, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+skeletal+muscle+biopsy+procedures+using+the+modified+Bergstrom+technique%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Human skeletal muscle biopsy procedures using the modified Bergstrom technique.</a> J Vis Exp. (91), e51812(2014).</li>
<li>Coggan, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+biopsy+as+a+tool+in+the+study+of+aging%5BTitle%5D)+AND+%22J+Gerontol+A+Biol+Sci+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Muscle biopsy as a tool in the study of aging.</a> J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 50, 30-34 (1995).</li>
<li>Henriksson, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%27Semi-open%27+muscle+biopsy+technique.+A+simple+outpatient+procedure%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neurol+Scand%22%5BJournal%5D)">'Semi-open' muscle biopsy technique. A simple outpatient procedure.</a> Acta Neurol Scand. 59 (6), 317-323 (1979).</li>
<li>Dorph, C., Nennesmo, I., Lundberg, I. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Percutaneous+conchotome+muscle+biopsy.+A+useful+diagnostic+and+assessment+tool%5BTitle%5D)+AND+%22J+Rheumatol%22%5BJournal%5D)">Percutaneous conchotome muscle biopsy. A useful diagnostic and assessment tool.</a> J Rheumatol. 28 (7), 1591-1599 (2001).</li>
<li>Poulsen, M. B., Bojsen-Moller, M., Jakobsen, J., Andersen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Percutaneous+conchotome+biopsy+of+the+deltoid+and+quadricep+muscles+in+the+diagnosis+of+neuromuscular+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Neuromuscul+Dis%22%5BJournal%5D)">Percutaneous conchotome biopsy of the deltoid and quadricep muscles in the diagnosis of neuromuscular disorders.</a> J Clin Neuromuscul Dis. 7 (1), 36-41 (2005).</li>
<li>Dietrichson, P., Mellgren, S. I., Skre, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+biopsy+with+the+percutaneous+conchotome+technique%5BTitle%5D)+AND+%22J+Oslo+City+Hosp%22%5BJournal%5D)">Muscle biopsy with the percutaneous conchotome technique.</a> J Oslo City Hosp. 30 (5), 73-79 (1980).</li>
<li>Dietrichson, P., Coakley, J., Smith, P. E., Griffiths, R. D., Helliwell, T. R., Edwards, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conchotome+and+needle+percutaneous+biopsy+of+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol+Neurosurg+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Conchotome and needle percutaneous biopsy of skeletal muscle.</a> J Neurol Neurosurg Psychiatry. 50 (11), 1461-1467 (1987).</li>
<li>Andonopoulos, A. P., Papadimitriou, C., Melachrinou, M., Meimaris, N., Vlahanastasi, C., Bounas, A., Georgiou, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Asymptomatic+gastrocnemius+muscle+biopsy%3A+an+extremely+sensitive+and+specific+test+in+the+pathologic+confirmation+of+sarcoidosis+presenting+with+hilar+adenopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Exp+Rheumatol%22%5BJournal%5D)">Asymptomatic gastrocnemius muscle biopsy: an extremely sensitive and specific test in the pathologic confirmation of sarcoidosis presenting with hilar adenopathy.</a> Clin Exp Rheumatol. 19 (5), 569-572 (2001).</li>
<li>Helliwell, T. R., Coakley, J., Smith, P. E., Edwards, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+morphology+and+morphometry+of+the+normal+human+tibialis+anterior+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropathol+Appl+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">The morphology and morphometry of the normal human tibialis anterior muscle.</a> Neuropathol Appl Neurobiol. 13 (4), 297-307 (1987).</li>
<li>Patel, H. P., Jameson, K. A., Syddall, H. E., Martin, H. J., Stewart, C. E., Cooper, C., Sayer, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+influences%2C+muscle+morphology%2C+and+sarcopenia+in+community-dwelling+older+men%5BTitle%5D)+AND+%22J+Gerontol+A+Biol+Sci+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Developmental influences, muscle morphology, and sarcopenia in community-dwelling older men.</a> J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 67 (1), 82-87 (2012).</li>
<li>Patel, H. P., Syddall, H. E., Martin, H. J., Stewart, C. E., Cooper, C., Sayer, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hertfordshire+Sarcopenia+Study%3A+design+and+methods%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Geriatrics%22%5BJournal%5D)">Hertfordshire Sarcopenia Study: design and methods.</a> BMC Geriatrics. 10 (1), 43(2010).</li>
<li>Anderson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+the+biopsy+procedure+and+assessment+of+skeletal+muscle+biopsies%5BTitle%5D)+AND+%22Virchows+Arch%22%5BJournal%5D)">Recommendations for the biopsy procedure and assessment of skeletal muscle biopsies.</a> Virchows Arch. 431 (4), 227-233 (1997).</li>
<li>Patel, H. P., Syddall, H. E., Martin, H. J., Cooper, C., Stewart, C., Sayer, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Feasibility+and+Acceptability+of+Muscle+Biopsy+in+Epidemiological+Studies%3A+Findings+from+the+Hertfordshire+Sarcopenia+Study+%28HSS%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nutr+Health+Aging%22%5BJournal%5D)">The Feasibility and Acceptability of Muscle Biopsy in Epidemiological Studies: Findings from the Hertfordshire Sarcopenia Study (HSS).</a> J Nutr Health Aging. 15 (1), 10-15 (2011).</li>
<li>Charifi, N., Kadi, F., Feasson, L., Costes, F., Geyssant, A., Denis, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancement+of+microvessel+tortuosity+in+the+vastus+lateralis+muscle+of+old+men+in+response+to+endurance+training%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Enhancement of microvessel tortuosity in the vastus lateralis muscle of old men in response to endurance training.</a> J Physiol. 554 (Pt 2), 559-569 (2004).</li>
<li>Frontera, W. R., Suh, D., Krivickas, L. S., Hughes, V. A., Goldstein, R., Roubenoff, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletal+muscle+fiber+quality+in+older+men+and+women%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Skeletal muscle fiber quality in older men and women.</a> Am J Physiol Cell Physiol. 279 (3), C611-C618 (2000).</li>
<li>He, J., Watkins, S., Kelley, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletal+muscle+lipid+content+and+oxidative+enzyme+activity+in+relation+to+muscle+fiber+type+in+type+2+diabetes+and+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Skeletal muscle lipid content and oxidative enzyme activity in relation to muscle fiber type in type 2 diabetes and obesity.</a> Diabetes. 50 (4), 817-823 (2001).</li>
<li>Patel, H. P., Al-Shanti, N., Davies, L. C., Barton, S. J., Grounds, M. D., Tellam, R. L., Stewart, C. E., Cooper, C., Sayer, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lean+mass%2C+muscle+strength+and+gene+expression+in+community+dwelling+older+men%3A+findings+from+the+Hertfordshire+Sarcopenia+Study+%28HSS%29%5BTitle%5D)+AND+%22Calcif+Tissue+Int%22%5BJournal%5D)">Lean mass, muscle strength and gene expression in community dwelling older men: findings from the Hertfordshire Sarcopenia Study (HSS).</a> Calcif Tissue Int. 95 (4), 308-316 (2014).</li>
<li>Peterson, C. M., Johannsen, D. L., Ravussin, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletal+muscle+mitochondria+and+aging%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22J+Aging+Res%22%5BJournal%5D)">Skeletal muscle mitochondria and aging: a review.</a> J Aging Res. 2012, 194821(2012).</li>
</ol>

Żaden nie zadeklarował.

Aby zapewnić bezpieczeństwo uczestnikom i skutecznie przeprowadzić biopsję mięśni, należy zwrócić uwagę na kluczowe kroki w protokole.
Uczestnicy muszą zostać wybrani po dokładnym rozważeniu kryteriów wykluczenia, aby uniknąć powikłań, takich jak krwawienie i słabe gojenie się ran. Niezbędna jest ścisła aseptyka podczas całej procedury. Zastosowanie prawidłowej techniki zapewni komfort uczestnika, zminimalizuje niepożądane urazy tkanek uczestnika i pozwoli na uzyskanie wystarczającej ilości pr...

Uzyskanie mięśni szkieletowych do diagnozy miopatii i innych chorób zwyrodnieniowych nerwowo-mięśniowych opiera się na bezpiecznych i skutecznych metodach, które są akceptowalne i nie obezwładniają pacjentów 1. Dawniej metody pozyskiwania tkanki mięśniowej do analizy obejmowały otwarte biopsje wykonywane w znieczuleniu ogólnym lub pośmiertnie. Techniki te pozwoliły na bezpośrednią wizualizację mięśnia i pozwoliły na biopsję większego fragmentu mięśnia. Biorąc pod uwagę potencjalne niedogodności, jakie techniki te mają dla pacjenta pod względem pobytu w szpitalu i rekonwalescencji, jako alternatywę wprowadzono metody przezskórnej "półotwartej" biopsji mięśni. Technika ta została po raz pierwszy zastosowana przez Duchenne'a (1806-1875), który użył samodzielnie skonstruowanej igły z trokarem i był w stanie uzyskać próbkę mięśni od żywego osobnika bez znieczulenia ogólnego 2. Od tego czasu stosuje się różne formy igieł do biopsji 3,4,5 . Jednak igła do biopsji opracowana przez Bergstrom w 1962 roku jest najczęściej stosowana w praktyce klinicznej; zarówno u dzieci, jak i dorosłych, a także w badaniach 6,7,8,9,10. Posiada ostry trokar, kaniulę tnącą i pręt popychający do wydalania tkanki po biopsji. Stwierdzono, że wydajność mięśni uzyskana w wyniku tej procedury waha się od 25 do 293 mg po wielokrotnym pobraniu próbek 11,9.
Henriksson wprowadził konchotomię Weila-Blakesleya w 1979 roku jako alternatywną metodę półotwartej biopsji mięśni (Ryc. 1) 12. Instrument jest pojedynczą konstrukcją, w przeciwieństwie do konstrukcji Bergstrom i jest zaprojektowany jak kleszcz z ostrą końcówką do gryzienia. Rozmiar końcówki może wynosić od 4 mm do 6 mm szerokości. Kiedy dwie krawędzie końcówki gryzącej przeciwstawiają się, tworzy się wgłębienie, które zapewnia uchwycenie mięśnia. Konchotomia jest wprowadzana przez nacięcie skóry o średnicy 5 - 10 mm i pozwala uniknąć konieczności penetracji mięśnia i powięzi leżącej nad nim, ponieważ skalpel może być użyty do wykonania ścieżki w dół do mięśnia.
Ta metoda pozwala na kontrolowaną penetrację tkanek z wysokim stopniem manewrowości 13,14 . Jest to szczególnie przydatne w miejscach, w których nadmierny nacisk mógłby potencjalnie uszkodzić struktury nerwowo-naczyniowe lub leżące pod nimi struktury kostne, np. w miejscu kości piszczelowej przedniej 15,14. Wydajność mięśni przy użyciu konchotomu może być zmienna i w naszej praktyce po wielokrotnym pobraniu próbek uzyskano 20 - 200 mg mięśni. Jedną z potencjalnych zalet konchotomu w porównaniu z igłą Bergstrom, oprócz wysokiego stopnia zwrotności, jaki oferuje, jest to, że końcówka do gryzienia nie musi być ostrzona ani wymieniana tak często, jak trokar konstrukcji Bergstrom 16 .
Ogólnym celem biopsji mięśni przy użyciu konchotomu Weila Blakesleya jest uzyskanie wystarczającej ilości tkanki mięśniowej, aby umożliwić histochemię i analizę molekularną zarówno do diagnostyki, jak i badań naukowych. Jest to prosta i bezpieczna procedura, której można się łatwo nauczyć. Dzięki tej technice mięśnie odpowiednie do biopsji obejmują biceps, triceps, naramiennik, mięsień łydny, piszczel przedni, płaszczkowaty i krzyżowo-rdzeniowe 17,15,7,18,14 . Najbardziej zewnętrzna część mięśnia obszernego bocznego jest najczęstszym miejscem wykorzystywanym do biopsji, ponieważ omija główne struktury nerwowo-naczyniowe w obrębie uda. Identyfikuje się go około dwóch trzecich wyimaginowanej linii łączącej przedni górny kręgosłup biodrowy i rzepkę. Dane dotyczące morfologii mięśni, na przykład obszar włókien mięśniowych, proporcje włókien mięśniowych, gęstość naczyń włosowatych uzyskana z pobrania próbek obszernych bocznych są szeroko dostępne w literaturze umożliwiającej porównanie między badaniami 11,19 .

<table><tbody><tr><td>Weil-Blakesley conchotome</td><td>Gebr&uuml; der Zepf Medizintechnik, D&uuml; rbheim, Niemcy</td><td>Brak</td><td>Końcówka do gryzienia 6 mm</td></tr><tr><td>5 ml 2% lidokainy</td><td>Zastosowanie ogólne</td><td>Brak</td><td>Jedna fiolka o pojemności 5 ml powinna wystarczyć do odpowiedniego znieczulenia</td></tr><tr><td>Wacik nasączony alkoholem</td><td>Zastosowanie ogólne</td><td>Brak</td><td></td></tr><tr><td>Strzykawka 5 ml</td><td>Zastosowanie ogólne</td><td>Brak</td><td></td></tr><tr><td>Igły sterylne 25 G i 23 G</td><td>Zastosowanie ogólne</td><td>Brak</td><td></td></tr><tr><td>Sterylny skalpel rozmiar 11</td><td>Zastosowanie ogólne</td><td>Brak</td><td></td></tr><tr><td>Kątowniki z gazy sterylnej</td><td>Zastosowanie ogólne</td><td>Brak</td><td></td></tr><tr><td>Chlorek sodu 0,9% 10 ml</td><td>Fannin</td><td>1122/002/001</td><td></td></tr><tr><td>Steri-Drape&trade; Mała serweta z otworem samoprzylepnym</td><td>3M</td><td>1020</td><td></td></tr><tr><td>ChloraPrep 2% w/v /70% v/v roztwór skórny&nbsp;</td><td>CareFusion</td><td>270400</td><td>Dwa</td></tr><tr><td>paski Steri-Strip&trade; 1/4 cala x 3 cale Wzmocnione samoprzylepne zamknięcia skóry</td><td>3M</td><td>R1541</td><td></td></tr><tr><td>PRIMAPORE Sterylny opatrunek 15 cm x 8 cm</td><td>Smith & &nbsp; Nephew 66000318</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bandaż z krepy bawełnianej Hospicrepe 233 7,5 cm x 4,5 m</td><td>Hartmann</td><td>915562</td><td></td></tr><tr><td>Elastyczny bandaż kohezyjny Co-Plus LF</td><td>BSN medyczny</td><td>2904565</td><td></td></tr><tr><td>Jednorazowy arkusz chłonny</td><td>Zastosowanie ogólne</td><td>Brak</td><td></td></tr><tr><td>Taśma mikroporowa lub transporowa</td><td>Zastosowanie ogólne</td><td>Brak</td><td></td></tr><tr><td>Sterylny fartuch ze sterylnym papierem </td><td>ręczniki Zastosowanie ogólne</td><td>Brak</td><td></td></tr><tr><td>Rękawiczki sterylne</td><td>Zastosowanie ogólne</td><td>Brak</td><td></td></tr></tbody></table>

biopsja mięśni szkieletowych mięśnia obszernego bocznego człowieka przy użyciu konchotomu weila-blakesleya

Human Vastus Lateralis Skeletal Muscle Biopsy Using the Weil-Blakesley Conchotome

Przezskórna biopsja mięśni przy użyciu konchotomu Weila-Blakesleya jest dobrze znana zarówno w praktyce klinicznej, jak i naukowej. Jest to bezpieczna, skuteczna i dobrze tolerowana technika. Konchotomizm Weila-Blakesleya ma ostrą, gryzącą końcówkę z wgłębieniem o szerokości 4 - 6 mm. Jest wprowadzany przez nacięcie skóry o średnicy 5 - 10 mm i może być manewrowany w celu kontrolowanej penetracji tkanki. Końcówka jest otwierana i zamykana w tkance, a następnie obracana o 90 -180°, aby przeciąć mięsień. Ilość mięśni uzyskanych po wielokrotnym pobraniu próbek może wahać się od 20 mg do 290 mg, które mogą być przetwarzane zarówno do badań histologicznych, jak i molekularnych. Rana musi być sucha, a intensywna aktywność fizyczna ograniczona do minimum przez około 72 godziny, chociaż normalny poziom aktywności może zostać wznowiony natychmiast po zabiegu. Procedura ta jest bezpieczna i skuteczna, gdy zwraca się szczególną uwagę na dobór badanych, pełną aseptykę i opiekę pozabiegową. Zarówno prawy, jak i lewy obszerny boczny nadaje się do biopsji w zależności od preferencji uczestnika.

Opisana powyżej procedura jest bezpieczna i dopuszczalna zarówno w warunkach klinicznych, jak i badawczych. Gdy biopsja jest wykonywana w ramach procesu diagnostycznego, mięsień należy dobrać zgodnie z objawami i oznakami osłabienia mięśni u pacjenta. Miejsce biopsji powinno być wolne od wcześniejszych urazów, przykurczów lub instrumentacji 21,1. W badaniach mogą być wymagane ustandaryzowane warunki, takie jak bycie na czczo lub wykluczenie pacjentów z cukrzycą 19. P...

Ten film demonstruje technikę przezskórnej biopsji mięśnia obszernego bocznego człowieka przy użyciu konchotomu Weila-Blakesleya.

Biopsja mięśni szkieletowych mięśnia obszernego bocznego człowieka przy użyciu konchotomu Weila-Blakesleya

Percutaneous muscle biopsy using the Weil-Blakesley conchotome is well established in both clinical and research practice. It is a safe, effective and ...

Ogólnym celem tej metody jest wprowadzenie bezpiecznej, skutecznej i dobrze tolerowanej techniki biopsji mięśnia obszernego bocznego, w celu uzyskania wystarczającej ilości tkanki do histochemii i analizy molekularnej zarówno w badaniach diagnostycznych, jak i naukowych. Ta metoda może pomóc badaczom uzyskać wystarczającą ilość tkanki mięśniowej przy minimalnym dyskomforcie i urazie dla uczestnika. Główną zaletą tej techniki jest to, że jest bezpieczna i akceptowalna zarówno w warunkach klinicznych, jak i badawczych.Powikłania są niewielkie, a dyskomfort jest ograniczony do minimum, gdy zabieg jest wykonywany przy użyciu standardowej techniki. Na początek poproś uczestnika, aby położył się wygodnie na kanapie w pozycji leżącej. Odsłoń preferowane udo od załamania pachwiny i rozłóż jednorazowy chłonny arkusz pod odsłoniętym udem.Upewnij się, że noga pozostaje prosta i rozluźniona przez cały zabieg, ale udo jest chwilowo napięte, aby zarysować obszerny boczny. Zaznacz miejsce zabiegu około 2/3 w dół wyimaginowanej linii od przedniego górnego kręgosłupa biodrowego do rzepki. Aby przygotować skórę, użyj sterylnego ostrza do golenia, aby ogolić około czterech centymetrów średnicy otaczającej proponowane miejsce biopsji, u mężczyzn, jeśli jest to wymagane.Użyj wacika nasączonego alkoholem, aby oczyścić skórę. Użyj znieczulenia miejscowego, aby nacieknąć skórę i przylegającą do niej powięź, a następnie za pomocą igły o rozmiarze 25 podnieś podskórny pęcherzyk 2% lidokainy. Następnie użyj igły o rozmiarze 23G, aby wniknąć głębiej w tkankę podskórną, dążąc do penetracji co najmniej 1/2 cala, w zależności od zawartości podskórnej w miejscu biopsji.Odczekaj od dwóch do pięciu minut, aż znieczulenie zacznie działać, i potwierdź znieczulenie, używając końcówki igły lub ostrza skalpela, aby delikatnie sondować skórę. Aby przygotować sterylne pole, umyj ręce wodą z mydłem i utrzymuj je w czystości do momentu założenia sterylnego fartuchu. Przykryj ręce sterylnymi rękawiczkami przed utworzeniem sterylnego pola na wózku zabiegowym.Za pomocą 2% roztworu alkoholu izopropylowego chlorheksydyny lub środka do dezynfekcji skóry na bazie jodu wysterylizuj miejsce biopsji. Nałożyć sterylną serwetę z otworem samoprzylepnym, aby odsłonić miejsce biopsji i utrzymać sterylne pole. Pierwszym krytycznym krokiem jest nakłucie skóry i wykonanie wystarczająco głębokiej ścieżki do i poza powięź.Aby wykonać procedurę biopsji, za pomocą skalpela w rozmiarze 11 wykonaj od pięciu do 10 milimetrowych nacięć na skórze i przez leżącą nad nią powięź. Trzymając i podtrzymując udo otaczające miejsce biopsji, włóż zamkniętą końcówkę gryzącą konchotomu przez nacięcie, pod kątem prostym do długiej osi kości udowej, na głębokość około 1/2 do jednego cala. Następnie obróć konchotomię od 90 do 180 stopni, aby przeciąć mięsień, a następnie wyjmij konchotom i otwórz końcówkę na sterylnej gazie zwilżonej sterylną solą fizjologiczną.Przenieś gazę do pojemnika umieszczonego na lodzie. Drugim krytycznym krokiem jest włożenie konchotomu do toru, manewrowanie konchotomem w celu upewnienia się, że uzyskano wystarczającą ilość mięśni. W razie potrzeby zabieg można powtórzyć w obrębie toru i pojedynczego miejsca rany, aby uzyskać wystarczającą ilość tkanki mięśniowej.Po zabiegu należy bezpośrednio uciskać ranę przez okres do pięciu minut. Następnie umieść sterylne paski równolegle do rany, aby ją zamknąć. Umieść sterylny opatrunek chłonny na paskach Steri-Strips i nałóż dwuwarstwowy bandaż do ucisku, używając taśmy do zabezpieczenia.Wyjaśnij uczestnikowi metodę opatrunku na ranę, aby mógł go wykonać trzy do czterech dni po zabiegu. Poinstruuj uczestnika, aby zdjął bandaż uciskowy przed pójściem spać później tego wieczoru. Wyjaśnij, że często odczuwa się pewną sztywność ud, którą można złagodzić poprzez delikatne ćwiczenia, takie jak chodzenie.Wyjaśnij, że mogą użyć paracetamolu na ból. Jak pokazano w tej tabeli, w badaniu sarkopenii w Hertfordshire, wynik bólu jest mierzony za pomocą wizualnej skali analogowej bólu od zera milimetrów do bólu tak silnego, jak to tylko możliwe, były zazwyczaj niskie, z medianą siedmiu milimetrów podczas zabiegu i czterema milimetrami dzień po zabiegu. Sugeruje to, że osoby biorące udział w tym badaniu uznały zabieg za minimalnie bolesny.Pokazano reprezentatywne próbki tkanek uzyskane za pomocą przezskórnej biopsji mięśni z konchotomem Weila-Blakesleya. Uzyskane próbki powinny przypominać tkankę mięśniową w tym panelu. Istnieje jednak duże prawdopodobieństwo uzyskania podskórnej tkanki tłuszczowej, co widać w tym panelu.Ten rysunek przedstawia szeregowy przekrój poprzeczny z różnicowym barwieniem włókien. Ciemno zabarwione włókna reprezentują szybkie włókna typu drugiego wykryte za pomocą przeciwciała szybkiego anty-miozyny. Po opanowaniu tej techniki można ją wykonać w 20 minut, jeśli zostanie wykonana prawidłowo.Próbując wykonać tę procedurę, należy pamiętać o utrzymaniu sterylnego pola i utrzymaniu zaangażowania uczestnika. Po tej procedurze można wykonać inne metody, takie jak histochemia i ekstrakcja DNA lub RNA, a wszystko to odpowie na dodatkowe pytania, takie jak jakie są zmiany komórkowe i molekularne, które zachodzą w starzejących się mięśniach? Po jej opracowaniu, technika ta utorowała drogę naukowcom zajmującym się biologią mięśni i starzeniem się, aby zbadać zmiany w tkance mięśniowej wraz z sarkopenią, związanym z wiekiem spadkiem masy i funkcji mięśniowej.Po obejrzeniu tego filmu powinieneś dobrze zrozumieć, jak wykonać biopsję mięśnia obszernego bocznego przy użyciu konchotomu Weila-Blakesleya, prostej, skutecznej i dobrze tolerowanej procedury. Nie zapominaj, że praca z ostrymi igłami i narzędziami może być niebezpieczna, a podczas wykonywania tej procedury należy zawsze zachować standardowe środki ostrożności, a także ścisłą aseptykę.

human-vastus-lateralis-skeletal-muscle-biopsy-using-weil-blakesley

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Celem tego filmu jest przedstawienie zmodyfikowanej techniki biopsji mięśni szkieletowych Bergströma na ludziach.

Procedury biopsji mięśni szkieletowych człowieka z wykorzystaniem zmodyfikowanej techniki Bergströma

Głównymi typami komórek przylegających pochodzących z ludzkich mięśni są komórki miogenne i fibroblasty. W tym przypadku populacje komórek są wzbogacane za pomocą sortowania komórek aktywowanego magnetycznie na podstawie antygenu CD56. Późniejsze znakowanie immunologiczne za pomocą specyficznych przeciwciał i zastosowanie technik analizy obrazu pozwala na ilościowe określenie cech cytoplazmatycznych i jądrowych w poszczególnych komórkach.

Izolacja i ilościowa charakterystyka immunocytochemiczna pierwotnych komórek miogennych i fibroblastów z ludzkich mięśni szkieletowych

Opisano metody biopsji mięśnia obszernego bocznego, przygotowania oczyszczonych mitochondriów i profilowania respirometrycznego. Wykorzystanie małej objętości mięśniowej sprawia, że technika ta nadaje się do zastosowań w badaniach klinicznych.

Przygotowanie i ocena respirometryczna mitochondriów wyizolowanych z tkanki mięśni szkieletowych uzyskana metodą przezskórnej biopsji igłowej

Tutaj prezentujemy protokół do sekcji kości długich kończyn tylnych (kości udowych i piszczelowych) od myszy laboratoryjnej. Dalej opisujemy szybką technikę izolacji szpiku kostnego od tych kości, która wykorzystuje wirowanie do usuwania szpiku kostnego z przestrzeni szpiku kostnego.

Mysia kończyna tylna Sekcja kości długich i izolacja szpiku kostnego

Obrazowanie ultrasonograficzne 3D (3DUS) umożliwia szybką i tanią morfometrię tkanek mięśniowo-szkieletowych. Przedstawiamy protokół pomiaru objętości mięśni i długości pęczków za pomocą 3DUS.

Obrazowanie ultrasonograficzne 3D: szybka i opłacalna morfometria tkanki mięśniowo-szkieletowej

Immunohistochemiczne barwienie izoform łańcucha ciężkiego miozyny stało się najnowocześniejszym dyskryminatorem włókien mięśni szkieletowych typu (tj. typu I, typu IIA, typu IIX, typu IIB). W tym miejscu przedstawiamy protokół barwienia wraz z nowatorskim półautomatycznym algorytmem, który ułatwia szybką ocenę rodzaju włókien i morfologii włókien.

Półautomatyczna analiza morfologii mięśni szkieletowych myszy i składu włókien

Przedstawiamy szczegółowe protokoły przeprowadzania eksperymentów dyfrakcji rentgenowskiej pod małym kątem przy użyciu nienaruszonych mięśni szkieletowych myszy. Dzięki szerokiej dostępności transgenicznych modeli myszy w chorobach ludzkich, ta eksperymentalna platforma może stanowić użyteczne stanowisko testowe do wyjaśnienia strukturalnych podstaw genetycznych chorób...

Dyfrakcja rentgenowska nienaruszonych mięśni szkieletowych myszy jako narzędzie do badania strukturalnych podstaw choroby mięśni

Prezentujemy techniki izolacji, hodowli, charakterystyki i różnicowania ludzkich pierwotnych komórek progenitorowych mięśni (hMPC) uzyskanych z tkanki biopsji mięśni szkieletowych.  hMPC uzyskane i scharakteryzowane za pomocą tych metod mogą być wykorzystane do późniejszego rozwiązywania problemów badawczych związanych z ludzką miogenezą i regeneracją mięśni szkieletowych.

Izolacja, hodowla, charakterystyka i różnicowanie ludzkich komórek progenitorowych mięśni na podstawie procedury biopsji mięśni szkieletowych

Opisany tutaj jest protokół bezpośredniego znakowania immunologicznego martwiczych włókien mięśniowych w kriosekcjach mięśni. Komórki martwicze są przepuszczalne dla białek surowicy, w tym immunoglobuliny G (IgG). Ujawnienie wychwytu IgG przez włókna mięśniowe umożliwia identyfikację i ilościowe określenie włókien mięśniowych, które ulegają martwicy niezależnie od stanu mięśni.

Znakowanie immunologiczne zwyrodnienia włókien mięśniowych w biopsjach mięśni

Ten raport techniczny opisuje odmianę zmodyfikowanej techniki Bergströma do biopsji mięśnia piszczelowego przedniego, która ogranicza uszkodzenia włókien.

Pobieranie biopsji mięśni szkieletowych z górnego przedziału mięśnia piszczelowego ludzkiego mięśnia piszczelowego przedniego w celu oceny mechanicznej

Ten protokół ma na celu izolację i oczyszczenie pęcherzyków zewnątrzkomórkowych mięśni szkieletowych (SkM-EVs) z tkanek mięśni gryzoni poprzez mechaniczne oderwanie, dysocjację enzymatyczną, filtrację i ultrawirowanie różnicowe. Świadczy o spójności i niezawodności. Wyizolowane SkM-EV dostarczają informacji na temat homeostazy i chorób mięśni, z potencjalnymi zastosowaniami jako biomarkery diagnostyczne lub nośniki terapeutyczne.

Enzymatyczna izolacja śródmiąższowych pęcherzyków zewnątrzkomórkowych mięśni szkieletowych

Poznaj technikę biopsji mięśnia obszernego bocznego człowieka przy użyciu konchotomu Weila-Blakesleya. Metoda zapewnia bezpieczne pobranie wystarczającej ilości tkanki do analizy histochemicznej i molekularnej przy minimalnym dyskomforcie pacjenta.

Biopsja mięśni szkieletowych mięśnia obszernego bocznego człowieka przy użyciu konchotomu Weila-Blakesleya

Przeglądaj więcej filmów