Izolacja naciekających leukocytów ze skóry myszy za pomocą trawienia enzymatycznego i separacji gradientowej

Ogólnym celem tej procedury jest wyizolowanie leukocytów naciekających skórę za pomocą trawienia enzymatycznego i separacji w gradiencie gęstości. Metoda ta może być stosowana do badania mechanizmów komórkowych i molekularnych w wielu mysich modelach patologii skóry, w tym atopowego zapalenia skóry. Chociaż metoda ta może dostarczyć informacji na temat biologii leukocytów naciekających skórę, można ją również zastosować do badania innych populacji komórek rezydentnych.

Ogólnie rzecz biorąc, osoby, które dopiero zaczynają korzystać z tej metody, będą miały problemy z zbieraniem skóry, które obejmuje całkowite usunięcie nadmiaru tkanki tłuszczowej i łącznej. Wizualna demonstracja tej metody ma kluczowe znaczenie, ponieważ zbieranie skór i obsługa gradientu gęstości są trudne do nauczenia i wymagają precyzji oraz praktyki. W odpowiednim momencie po leczeniu użyj 10-centymetrowych nożyczek chirurgicznych, aby ostrożnie wyciąć obszar ogolonej skóry boku o wymiarach 25 na 25 milimetrów od dorosłej ośmio- lub dwunastotygodniowej samicy myszy szwajcarskiej-Webster ND4.