Uproszczona metoda długoterminowej hodowli pierwotnych neuronów hipokampa o bardzo niskiej gęstości

Ogólnym celem tej procedury jest ustanowienie zdrowych, długoterminowych kultur pierwotnych mysich neuronów hipokampa o bardzo niskiej gęstości, aby ułatwić znakowanie immunocytochemiczne i badanie autonomicznych mechanizmów komórek neuronalnych. Badanie to może pomóc w zrozumieniu niektórych kluczowych pytań w dziedzinie badań neurobiologicznych, takich jak badania nad specyficznością białka w neuromorfologii funkcji rozwoju. Główną zaletą tej techniki jest to, że pozwala neuronom rosnąć w bardzo niskiej gęstości na szkiełku nakrywkowym bez wsparcia warstwy zasilającej glej.

Procedurę zademonstruje Mariel Piechowicz, studentka z mojego laboratorium. Przygotuj dwie płytki 24-dołkowe o dużej gęstości i dwie płytki 24-dołkowe o małej gęstości. Za pomocą igły o rozmiarze 28 wytraw spód płytek 24-dołkowych, tak aby przemieszczone tworzywa sztuczne działały jako podpora dla szkiełek nakrywkowych, na których rosną neurony o niskiej gęstości.