Badanie funkcji koroniny A we wczesnej reakcji głodowej Dictyostelium discoideum za pomocą testów agregacyjnych

Ogólnym celem tej eksperymentalnej procedury jest zbadanie zależnej od koroniny-A wczesnej odpowiedzi głodowej Dictyostelium discoideum. Metoda ta może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania w dziedzinie biologii rozwoju, takie jak identyfikacja szlaków sygnałowych i czynników zaangażowanych we wczesny rozwój Dictyostelium discoideum. Główną zaletą tej techniki jest to, że może ona stanowić narzędzie do zautomatyzowanych i wysokoprzepustowych badań przesiewowych czynników indukujących rozwój i białek zaangażowanych we wczesną sygnalizację rozwojową.

Ogólnie rzecz biorąc, osoby, które są nowe w tej metodzie, będą zmagać się z wieloma zmiennymi nieodłącznie związanymi z testem, takimi jak gęstość komórek, czas przylegania i czas rozwoju. Aby rozpocząć tę procedurę, hoduj komórki DH1,10 lub komórki z niedoborem korA w kolbie Erlenmeyera zawierającej pożywkę HL-5, w temperaturze 22 stopni Celsjusza, w inkubatorze z wytrząsaniem przy 160 obr./min. Utrzymuj komórki w gęstości od jednego razy 10 do czterech i dwa razy 10 do sześciu komórek na mililitr.