Name: Alternatywna metoda usuwania otolitów z jesiotra (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-06-27T15:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 7 s
Description: Poznaj alternatywną metodę ekstrakcji otolitów z jesiotrów, która zachowuje integralność struktur anatomicznych. Technika ta umożliwia badanie wieku i wzrostu zagrożonych gatunków ryb bez uszkodzenia delikatnych kości słuchowych.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Specjalne podziękowania dla St. Regis Mohawk Environmental Division, Welaka National Fish Hatchery, US Fish and Wildlife Service Research Unit, Southern Illinois University, US Fish and Wildlife Service Northeast Fisheries Center, Sterling Caviar, University of California-Davis, Garrison Dam National Fish Hatchery, Bears Bluff National Fish Hatchery, oraz US Fish and Wildlife Service Panama City Fisheries Resource Office za pomoc w dostarczeniu jesiotra do tego projektu. Ten artykuł jest wkładem USGS Great Lakes Science Center z 2013 roku.

Ważna uwaga: Ze względu na status chroniony wszystkich gatunków jesiotrów w Stanach Zjednoczonych, pozwolenia na pozyskiwanie i obchodzenie się z rybami zostały uzyskane przed procedurą laboratoryjną. Wszystkie okazy zostały pozyskane ze źródeł wylęgarniowych pośmiertnie z przyczyn naturalnych i zutylizowane zgodnie ze standardową procedurą.
1. Przygotowanie próbki
<ol>
	<li>Przed jakimkolwiek nacięciem ułóż tuszę jesiotra na boku i za pomocą miarki zmierz całkowitą długość od pyska do końca ogona z dokładnością do 1 mm. (Rysunek 1A)</li>
	<li>Zważyć tuszę jesiotra na tarowanej wadze z dokładnością do 1 g. Ocenić tuszę pod kątem wszelkich zewnętrznych znaczników lub znaków i zapisać.</li>
</ol>
2. Ekstrakcja otolitu
<ol>
	<li>Wykonaj pionowe nacięcie dużym nożem do filetowania między podstawą czaszki a pierwszym grzbietowym przecięciem przez ciało, aby oddzielić głowę od ciała (ryc. 1B). Po zdjęciu głowy obróć głowę tak, aby usta były skierowane do góry (Rysunek 1C).</li>
	<li>Usuń tkankę miękką jamy ustnej i skrzeli za pomocą noża do filetowania, aby przeciąć wzdłuż brzusznej strony czaszki (ryc. 1D). Wykonaj nacięcie elektryczną piłą do kości od czubka pyska do podstawy czaszki, aby całkowicie przeciąć głowę na pół (ryc. 1E). Oddziel dwie połówki ręcznie, aby odsłonić jamę mózgu (ryc. 2A).</li>
	<li>Usuń i wyrzuć materię mózgową (czerwona ramka po lewej) za pomocą kleszczy, aby wyświetlić kanały półkoliste (czerwona ramka po prawej) w jamie mózgu (ryc. 2B).</li>
	<li>Usuń półkolistą chrząstkę kanałową z jamy mózgu za pomocą kleszczy (ryc. 2C). Ostrożnie nakłuć chrząstkę kanału półkolistego końcówką kleszczy i usunąć otolit (ryc. 2D). Usuń otolit (twardą strukturę kostną wewnątrz chrząstki) za pomocą kleszczy z chrząstki kanału półkolistego (ryc. 2E).</li>
	<li>Powtórz kroki 2.3 - 2.4, aby usunąć otolit z drugiej połowy czaszki.</li>
	<li>Zanurz otolity w 92% etanolu na 5 sekund, aby usunąć wszelkie chrząstki. Umieść otolity w otwartej 25 ml fiolce scyntylacyjnej do wyschnięcia na 24 godziny.</li>
</ol>

<ol><li>Auer, N. A. Conservation. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAuer%2C+NA+%22Sturgeons+and+Paddlefish+of+North+America%22">Sturgeons and Paddlefish of North America</a>. LeBreton, G. T. O., Beamish, F. W. H., McKinley, R. S. 27, Kluwer Academic Publishers. 252-276 (2004).</li>
<li>Sturgeon Specialists Group, sturgeon conservation. IUCN (International Union for the Conservation of Nature). , Source: 
 <a target="_blank" href="www.iucn.org">www.iucn.org</a> (2008).</li>
<li>Campana, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accuracy%2C+precision+and+quality+control+in+age+determination%2C+including+a+review+of+the+use+and+abuse+of+age+validation+methods%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Fish+Biology%22%5BJournal%5D)">Accuracy, precision and quality control in age determination, including a review of the use and abuse of age validation methods).</a> Journal of Fish Biology. 59, 197-242 (2001).</li>
<li>Bruch, R. M., Campana, S. E., Davis-Foust, S. L., Hansen, M. J., Janssen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lake+Sturgeon+age+validation+using+bomb+radiocarbon+and+known-age+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fisheries+Society%22%5BJournal%5D)">Lake Sturgeon age validation using bomb radiocarbon and known-age fish.</a> Transactions of the American Fisheries Society. 138, 361-372 (2009).</li>
<li>Baremore, I. E., Rosati, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+validated%2C+minimally+deleterious+method+for+ageing+sturgeon%5BTitle%5D)+AND+%22Fishery+Bulletin%22%5BJournal%5D)">A validated, minimally deleterious method for ageing sturgeon.</a> Fishery Bulletin. 112, 274-282 (2014).</li>
<li>Stevensen, J. T., Secor, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age+determination+and+growth+of+Hudson+River+Atlantic+sturgeon%2C+Acipenser+oxyrhynchus%5BTitle%5D)+AND+%22Fishery+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Age determination and growth of Hudson River Atlantic sturgeon, Acipenser oxyrhynchus.</a> Fishery Bulletin. 97, 153-166 (1999).</li>
<li>Brennan, J. S., Cailliet, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+age-determination+techniques+for+white+sturgeon+in+California%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fishery+Society%22%5BJournal%5D)">Comparative age-determination techniques for white sturgeon in California.</a> Transactions of the American Fishery Society. 118, 296-310 (1989).</li>
<li>Rossiter, A., Noakes, D. L. G., Beamish, F. W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+age+estimation+for+the+lake+sturgeon%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fisheries+Society%22%5BJournal%5D)">Validation of age estimation for the lake sturgeon.</a> Transactions of the American Fisheries Society. 124, 777-781 (1995).</li>
<li>Chalupnicki, M. A., Dittman, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((North+American+Sturgeon+Otolith+Morphology%5BTitle%5D)+AND+%22Copeia%22%5BJournal%5D)">North American Sturgeon Otolith Morphology.</a> Copeia. , 260-266 (2016).</li>
<li>Secor, D. H., Dean, J. M., Laban, E. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSecor%2C+DH+%22Manual+for+otolith+removal+and+preparation+for+microstructural+examination%22">Manual for otolith removal and preparation for microstructural examination</a>. , Barach Press. Columbia, South Carolina. (1991).</li>
</ol>

Jakiekolwiek użycie nazw handlowych, produktów lub firm służy wyłącznie celom opisowym i nie oznacza poparcia ze strony rządu Stanów Zjednoczonych.

Szczegółowo omówiono alternatywną metodę ekstrakcji otolitów z tusz jesiotra. Ważne jest, aby pamiętać, że należy zwrócić szczególną uwagę na umieszczenie bocznego nacięcia na linii środkowej czaszki, aby równomiernie przeciąć czaszkę, aby nie uszkodzić otolitów podczas sekcji. Jeśli nacięcie nie jest wystarczająco głębokie, aby całkowicie przeciąć czaszkę na pół, bardzo trudno będzie odsłonić jamę mózgu, w której lokalizacja otolitów jest wyraźnie widoczna. Z doświadczenia wynika, że ogólna technika jest stosunkowo pros...

Populacje jesiotra (Acipenseridae) na całym świecie zmniejszają się od ponad stu lat z powodu utraty siedlisk, fragmentacji populacji i przełowienia, tak że wiele populacji jest chronionych przez prawa stanowe i federalne1,2. Agencje zarządzające w Stanach Zjednoczonych i na świecie zidentyfikowały jesiotra jako gatunek docelowy do odbudowy i odbudowy1. Charakterystyka populacji (wzrost, rekrutacja, dieta) większości populacji jesiotra została zbadana w celu lepszego zrozumienia podstawowych cech biologii i historii życia1. Ze względu na chroniony status większości populacji jesiotra, ocena wieku jest trudna w małych zagrożonych populacjach, w których nie jest uzasadnione składanie ofiar ani krzywdzenie osobników.
Ekstrakcja struktur kostnych w celu oszacowania wieku i analizy wzrostu była powszechną techniką3. Wykorzystanie przekrojów promieni płetw do określenia wieku jesiotra stało się praktyczną metodą nieletalną, ale weryfikacja tej techniki była ograniczona, a wiek może być bardzo trudny do rozszyfrowania u starszych osobników (> 15 lat)4. Naukowcy oceniający wykorzystanie wielu struktur kostnych u jesiotra w celu ich wykorzystania do walidacji wieku jesiotra zatokowego (Acipenser oxyrinchus desoti)5, jesiotra atlantyckiego (A. o. oxyrinchus)6, jesiotra białego (A. transmontanus)7 i jesiotra jeziornego (A. fluvescens)8 doszli do wniosku, że pierwsza brzeżna promień płetwy piersiowej zapewnia najdokładniejszy wiek, ale doszli do wniosku, że ta inwazyjna procedura jest szkodliwa dla większych Osób. Obecnie trwają prace nad wykorzystaniem wskaźników kształtu otolitu do rozróżniania gatunków jesiotrów w Ameryce Północnej z bardzo wysokim wskaźnikiem sukcesu9. Szczegóły dotyczące procesu usuwania otolitu z grzbietowym poprzecznym nacięciem u podstawy czaszki jest powszechną metodą ekstrakcji otolitu znajdującą się w literaturze i wyraźnie szczegółowo opisaną przez Secor i in. (1991)10. Jednak ta metoda jest trudna do zastosowania w przypadku jesiotrów, które mają bardzo grube czaszki z otolitami, które są małe i delikatne i mają tendencję do pękania. Dalszy przegląd piśmiennictwa nie wykazał żadnej innej szczegółowej metodyki procesu usuwania otolitów w przypadku jesiotra. Celem pracy było przedstawienie alternatywnej metody ekstrakcji otolitów z jesiotra poprzez wejście do jamy mózgowej od strony brzusznej.

<table><tbody><tr><td>Tablica</td><td></td><td></td> pomiarowa <td>Preferowany jest miernik metryczny</td></tr><tr><td>Waga</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr>Nóż <td></td><td></td><td></td>do<td>filetowania</td></tr><tr><td>Kleszcze</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>do skalpela</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fiolki na</td><td></td><td></td> próbki <td>Fiolki scyntylacyjne 25 ml działają dobrze</td></tr></tbody></table>

alternatywna metoda usuwania otolitów z jesiotra

Alternative Method of Removing Otoliths from Sturgeon

Wydobycie otolitów (kości usznych) z ryb o bardzo grubych czaszkach może być trudne i bardzo czasochłonne. Powszechna praktyka wykonywania poprzecznego pionowego nacięcia na szczycie czaszki za pomocą piły ręcznej lub elektrycznej może uszkodzić otolit, jeśli nie zostanie wykonana prawidłowo. Jesiotry (Acipenseridae) to w szczególności jedna z rodzin, która ma bardzo dużą i grubą czaszkę. Nowa metoda laboratoryjna polegająca na wnikaniu do jamy mózgowej od strony brzusznej ryby w celu odsłonięcia otolitów była łatwiejsza niż inne metody ekstrakcji otolitów znalezione w literaturze. Metody recenzowane w literaturze są przeznaczone do pracy w terenie i są bardziej wydajne w szybkim przetwarzaniu dużych ilości ryb. Jednak ta nowa technika została zaprojektowana tak, aby lepiej nadawała się do warunków laboratoryjnych, gdy czas nie nagli, a udana ekstrakcja z każdej próbki ma kluczowe znaczenie. Sukces w znajdowaniu i usuwaniu otolitów przy użyciu tej techniki jest bardzo wysoki i w żaden sposób nie narusza struktury. Ta alternatywna technika ma zastosowanie do innych podobnych gatunków ryb do ekstrakcji otolitów.

Rozmiar dorosłych jesiotrów na całym świecie znacznie się różni, jednak położenie otolitów jest stałe. Ustalono, że użycie ostrego noża do filetowania pozwala na łatwe usunięcie tkanek miękkich pyska, co przedstawiono na Rysunku 1D. Preferowanym narzędziem do nacięcia bocznego w celu odsłonięcia jamy mózgowej jest elektryczna piła do kości, jak pokazano na Rysunku 1E. Należy jednak zwrócić uwagę na przecięcie wzdłuż linii środkowej czaszki, w przeciwnym r...

Celem protokołu jest pokazanie skutecznej metody ekstrakcji otolitów z tusz jesiotra.

Alternatywna metoda usuwania otolitów z jesiotra

Extracting the otoliths (ear bones) from fish that have very thick skulls can be difficult and very time consuming. The common practice of making a ...

Ogólnym celem tej metody jest zapewnienie skutecznej alternatywnej techniki wyodrębniania nieuszkodzonych otolitów u zagrożonych gatunków ryb, takich jak jesiotr kanadyjski. Ta metoda ekstrakcji otolitów może pomóc w odpowiedzi na kluczowe pytania dotyczące wieku i wzrostu ryb, rozmieszczenia kostek słuchowych w odniesieniu do morfologii mózgu oraz mikrochemii skorelowanej ze środowiskiem życia. Zaletą tej techniki jest to, że w przypadku ryb o grubej czaszce i kruchych otolitach otwarcie jamy czaszki nie uszkadza otolitów ani nie narusza innych krytycznych struktur.Koncepcja tej metody została opracowana podczas badań nad ekologią renowacyjną zagrożonych jesiotrów. W przypadku populacji reliktowych rzadko udaje się pozyskać okazy do nekropsji i analiz laboratoryjnych. Dlatego skuteczne określanie wieku oraz innych informacji o poszczególnych osobnikach ma kluczowe znaczenie dla uzupełnienia luk w danych dotyczących tych gatunków.Mark przeprowadzi procedurę usuwania otolitów z jesiotra jeziornego. Aby wyodrębnić otolity, najpierw połóż jesiotra na brzuchu i za pomocą taśmy mierniczej określ całkowitą długość od pyska do końca ogona z dokładnością do 1 mm. Następnie zważ zwierzę na

alternative-method-of-removing-otoliths-from-sturgeon

Research

JoVE Journal

Environment

Środowisko

Celem tego filmu jest zaprezentowanie procedur pozyskiwania zdrowych, nienaruszonych komórek rzęskowych z organów ucha wewnętrznego dorosłych danio pręgowanych, a następnie wykorzystania ich w badaniach metodą patch clamp w celu scharakteryzowania właściwości biofizycznych ich kanałów sterowanych napięciem.

Rejestracje metodą patch-clamp w komórkach rzęsatych ucha wewnętrznego wyizolowanych z ryby danio-ostrobramowej

Ten manuskrypt opisuje protokół śledzenia redystrybucji rozgałęzionych jonacytów i ich unerwienia za pomocą techniki barwienia różnicowego w czasie połączonej z pełnym obustronnym odnerwieniem skrzeli.

Technika barwienia różnicowego w czasie w połączeniu z pełnym obustronnym denerwacją skrzelową w celu badania jonocytów u ryb

Mierzenie wpływu zanieczyszczeń środowiska na zachowanie ryb jest często subiektywne i trudne, szczególnie gdy mamy do czynienia z subletalnymi punktami końcowymi. Opisujemy metody, w tym technologię wideo, do ilościowego określania zachowania pływackiego jesiotra białego (Acipenser transmontanus) we wczesnym stadium życia podczas i po 96-godzinnej ostrej ekspozycji na różne stężenia miedzi.

Kwantyfikacja zachowań ryb podczas pływania w odpowiedzi na ostre narażenie na wodną zawartość miedzi przy użyciu wspomaganego komputerowo wideo i cyfrowej analizy obrazu

Szkielet rozgałęziony, w tym grabie skrzelowe, zęby gardłowe i kości skrzelowe, służy jako główne miejsce przetwarzania żywności u większości ryb. Tutaj opisujemy protokół preparowania i płaskiego montażu tego wewnętrznego szkieletu u cierników trójgrzbietowych. Ta metoda ma również zastosowanie do wielu innych gatunków ryb.

Rozwarstwienie i płaskie ułożenie szkieletu skrzelowego ciernika trójkolcowego

Woreczek amerykańskiej żaby (Rana catesbeiana) pozwala na bezpośrednie badanie fizjologii komórek rzęsatych. Opisano tutaj sekcję i przygotowanie worka żaby do badań biofizycznych. Pokazujemy reprezentatywne eksperymenty z tymi komórkami rzęsa, w tym obliczenie relacji siła-przemieszczenie wiązki i pomiar jej niewymuszonego ruchu.

Fizjologiczne przygotowanie komórek rzęsatych z worka żaba białopłetwego (Rana catesbeiana)

Zdrowie dzikich ryb może być używane jako wskaźnik zdrowia ekosystemu wodnego. Oceny stanu zdrowia ryb oparte na sekcji zwłok dostarczają dokumentacji widocznych zmian lub nieprawidłowości, danych wykorzystywanych do obliczania wskaźników stanu, a także możliwości pobrania tkanek do oceny mikroskopowej, ekspresji genów i innych bardziej szczegółowych analiz.

Ocena stanu zdrowia dzikich ryb na podstawie sekcji zwłok

To jest protokół do modelowania spektrum wielkości (relacji skalowania między indywidualną masą a gęstością populacji) dla połączonych danych o rybach i bezkręgowcach ze strumieni i rzek, w których można brodzić. Metody obejmują: techniki terenowe do ilościowego pobierania próbek ryb i bezkręgowców; metody laboratoryjne do standaryzacji danych terenowych; i statystyczna analiza danych.

Modelowanie spektrum wielkości makrobezkręgowców i ryb w ekosystemach strumieni

W tym badaniu prezentujemy protokół ekstrakcji kortyzolu z płetwy i szczęki jesiotra. Poziom kortyzolu w płetwach i szczękach badano dalej, porównując dwa rozpuszczalniki do mycia, a następnie testy ELISA. W ramach tego badania pilotażowo sprawdzono wykonalność kortyzolu w kości szczęki jako nowego wskaźnika stresu.

Ekstrakcja kortyzolu z matryc płetw jesiotra i szczęk

Celem protokołu jest dostarczenie uprzemysłowionej techniki fermentacji ryb opartej na inokulacji Saccharomyces cerevisiae.

Przygotowanie wysokiej jakości fermentowanego produktu rybnego

Zewnątrzkomórkowy zapis wielopunktowy z nerwu węchowego jest czułą, solidną i powtarzalną metodą oceny wrażliwości węchowej u ryb morskich. Rejestruje pierwotne bodźce sensoryczne i jest niezależny od zewnętrznego zasolenia.

Zewnątrzkomórkowy zapis wielojednostkowy z nerwu węchowego teleostów

Artykuł opisuje szybki protokół gonadektomii i pobierania próbek krwi od małych ryb teleost, używając japońskiej medaki (Oryzias latipes) jako modelu, w celu zbadania roli sterydów płciowych w fizjologii zwierząt.

Zabiegi gonadektomii i pobierania krwi w małym modelu teleost japońskiej Medaka (Oryzias latipes)

Poznaj alternatywną metodę ekstrakcji otolitów z jesiotrów, która zachowuje integralność struktur anatomicznych. Technika ta umożliwia badanie wieku i wzrostu zagrożonych gatunków ryb bez uszkodzenia delikatnych kości słuchowych.

Alternatywna metoda usuwania otolitów z jesiotra

Przeglądaj więcej filmów