Wykorzystanie indukowanej analizy sektora somatycznego (ISSA) do badania genów i promotorów zaangażowanych w tworzenie drewna i wtórny rozwój łodyg

Ogólnym celem Analizy Indukowanego Sektora Somatycznego jest dostarczenie techniki o średniej i wysokiej przepustowości do funkcjonalnej charakterystyki konstruktów genów i promotorów w wtórnej tkance pnia drzewa w stosunkowo krótkich ramach czasowych. Metoda ta może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania dotyczące tego, gdzie i kiedy wyraża się niebezpieczeństwo, a także ich roli w biologicznie ważnych procesach, takich jak tworzenie drewna i wtórny rozwój pnia. Główną zaletą tej techniki jest to, że jest to wydajna, łatwa i stosunkowo szybka procedura, która ma zastosowanie do szerokiej gamy gatunków drzew.

Na początek przygotuj czystą, 50-mililitrową tubkę z nakrętką z 19 mililitrami świeżej pożywki LB o temperaturze 28 stopni Celsjusza z odpowiednimi antybiotykami do selekcji bakterii. Dodać jeden mililitr kultury A. tumefaciens i sprawdzić gęstość optyczną lub OD na 600 nanometrach. Jeśli średnica zewnętrzna jest wyższa niż 0,1, rozcieńczyć dalej ciepłym LB. Umieść kulturę A.tumefaciens w inkubatorze do wytrząsania, aż OD 600 znajdzie się między 0,4 a 0,6.