Migracja i prędkość fagosomów mierzona w żywych pierwotnych ludzkich makrofagach zakażonych wirusem HIV-1

Ogólnym celem tej analizy jest ilościowe określenie prędkości fagosomów w makrofagach zakażonych wirusem HIV-1 przy użyciu prostej metody ręcznego śledzenia. Zaletą tego protokołu jest zapewnienie łatwej metody obliczania względnych ruchów grup obiektów w komórce, które mogą być ruchome lub zdeformowane. Metoda ta zapewnia wgląd w ruch fagosomów w makrofagach zakażonych GFP, ale może być stosowana do innych przedziałów międzykomórkowych w komórkach znakowanych fluorescencyjnie.

Po zakażeniu ludzkich makrofagów pochodzących z monocytów i opsonizacji komórek krwi wyhodowanych przez owce, zgodnie z protokołem tekstowym, należy przeprowadzić test fagocytozy za pomocą systemu obrazowania konfokalnego, takiego jak mikroskop z wirującym dyskiem, wyposażony w komorę grzewczą o temperaturze 37 stopni Celsjusza, z dwutlenkiem węgla. Przed eksperymentem włącz komorę grzewczą, aby podgrzać stolik mikroskopu do 37 stopni Celsjusza. Następnie włącz mikroskop i komputer, a następnie załaduj oprogramowanie do obrazowania.