Name: Rozwój limfocytów T regulatorowych specyficznych dla antygenu macierzystego przeciwko autoimmunizacji (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-11-08T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 10 s
Description: Poznaj metodę generowania antygenowo-specyficznych limfocytów T regulatorowych z iPSC do immunoterapii autoimmunologicznego zapalenia stawów. Technika zapewnia jednorodną populację komórek o potencjale supresyjnym.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Ten projekt został częściowo sfinansowany z grantów od National Institutes of Health (R01AI121180, R21AI109239 i K18CA151798), American Diabetes Association (1-16-IBS-281) oraz Pennsylvania Department of Health (Tobacco Settlement Funds) dla J.S.

<ol><li>Firestein, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolving+concepts+of+rheumatoid+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Evolving concepts of rheumatoid arthritis.</a> Nature. 423, 356-361 (2003).</li>
<li>Ferraro, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interindividual+variation+in+human+T+regulatory+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Interindividual variation in human T regulatory cells.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 111, E1111-E1120 (2014).</li>
<li>Tang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro-expanded+antigen-specific+regulatory+T+cells+suppress+autoimmune+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">In vitro-expanded antigen-specific regulatory T cells suppress autoimmune diabetes.</a> J Exp Med. 199, 1455-1465 (2004).</li>
<li>van Herwijnen, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulatory+T+cells+that+recognize+a+ubiquitous+stress-inducible+self-antigen+are+long-lived+suppressors+of+autoimmune+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Regulatory T cells that recognize a ubiquitous stress-inducible self-antigen are long-lived suppressors of autoimmune arthritis.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 109, 14134-14139 (2012).</li>
<li>Wright, G. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adoptive+therapy+with+redirected+primary+regulatory+T+cells+results+in+antigen-specific+suppression+of+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Adoptive therapy with redirected primary regulatory T cells results in antigen-specific suppression of arthritis.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 106, 19078-19083 (2009).</li>
<li>Schmitt, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+T+cell+development+and+establishment+of+T+cell+competence+from+embryonic+stem+cells+differentiated+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Immunol%22%5BJournal%5D)">Induction of T cell development and establishment of T cell competence from embryonic stem cells differentiated in vitro.</a> Nat Immunol. 5, 410-417 (2004).</li>
<li>La Motte-Mohs, R. N., Herer, E., Zuniga-Pflucker, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+T-cell+development+from+human+cord+blood+hematopoietic+stem+cells+by+Delta-like+1+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Induction of T-cell development from human cord blood hematopoietic stem cells by Delta-like 1 in vitro.</a> Blood. 105, 1431-1439 (2005).</li>
<li>Lei, F., Haque, R., Weiler, L., Vrana, K. E., Song, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((T+lineage+differentiation+from+induced+pluripotent+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Immunol%22%5BJournal%5D)">T lineage differentiation from induced pluripotent stem cells.</a> Cell Immunol. 260, 1-5 (2009).</li>
<li>Lei, F., Haque, R., Xiong, X., Song, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Directed+differentiation+of+induced+pluripotent+stem+cells+towards+T+lymphocytes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Directed differentiation of induced pluripotent stem cells towards T lymphocytes.</a> J Vis Exp. , e3986(2012).</li>
<li>Lei, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+programming+of+tumor+antigen-specific+T+lymphocytes+from+pluripotent+stem+cells+to+promote+cancer+immunosurveillance%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">In vivo programming of tumor antigen-specific T lymphocytes from pluripotent stem cells to promote cancer immunosurveillance.</a> Cancer Res. 71, 4742-4747 (2011).</li>
<li>Haque, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Programming+of+regulatory+T+cells+from+pluripotent+stem+cells+and+prevention+of+autoimmunity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Programming of regulatory T cells from pluripotent stem cells and prevention of autoimmunity.</a> J Immunol. 189, 1228-1236 (2012).</li>
<li>Chi, V., Chandy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunohistochemistry%3A+paraffin+sections+using+the+Vectastain+ABC+kit+from+vector+labs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Immunohistochemistry: paraffin sections using the Vectastain ABC kit from vector labs.</a> J Vis Exp. , (2007).</li>
<li>Lu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+role+of+all-trans+retinoic+acid+in+stabilizing+human+natural+regulatory+T+cells+under+inflammatory+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Critical role of all-trans retinoic acid in stabilizing human natural regulatory T cells under inflammatory conditions.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 111, E3432-E3440 (2014).</li>
<li>Wu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Galectin-9-CD44+interaction+enhances+stability+and+function+of+adaptive+regulatory+T+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Galectin-9-CD44 interaction enhances stability and function of adaptive regulatory T cells.</a> Immunity. 41, 270-282 (2014).</li>
<li>Di Stasi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inducible+apoptosis+as+a+safety+switch+for+adoptive+cell+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Inducible apoptosis as a safety switch for adoptive cell therapy.</a> N Engl J Med. 365, 1673-1683 (2011).</li>
<li>Ramos, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+inducible+caspase+9+suicide+gene+to+improve+the+safety+of+mesenchymal+stromal+cell+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">An inducible caspase 9 suicide gene to improve the safety of mesenchymal stromal cell therapies.</a> Stem Cells. 28, 1107-1115 (2010).</li>
<li>Haque, R., Lei, F., Xiong, X., Wu, Y., Song, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FoxP3+and+Bcl-xL+cooperatively+promote+regulatory+T+cell+persistence+and+prevention+of+arthritis+development%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">FoxP3 and Bcl-xL cooperatively promote regulatory T cell persistence and prevention of arthritis development.</a> Arthritis Res Ther. 12, R66(2010).</li>
<li>van Loenen, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mixed+T+cell+receptor+dimers+harbor+potentially+harmful+neoreactivity%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Mixed T cell receptor dimers harbor potentially harmful neoreactivity.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 107, 10972-10977 (2010).</li>
<li>Kim, Y. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineered+antigen-specific+human+regulatory+T+cells%3A+immunosuppression+of+FVIII-specific+T-+and+B-cell+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Engineered antigen-specific human regulatory T cells: immunosuppression of FVIII-specific T- and B-cell responses.</a> Blood. 125, 1107-1115 (2015).</li>
<li>Himburg, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pleiotrophin+regulates+the+expansion+and+regeneration+of+hematopoietic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Pleiotrophin regulates the expansion and regeneration of hematopoietic stem cells.</a> Nat Med. 16, 475-482 (2010).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

W tym protokole krytycznym etapem jest różnicowanie in vitro iPSC transdukowanych genem TCR/FoxP3. Metody in vitro Sygnalizacja Notch indukuje rozwój w kierunku linii limfocytów T. Aby zróżnicować iPSC w limfocyty Treg CD4 + FoxP3 + , użyliśmy limfocytówb OP9-DL1 / DL4 / I-A, które wykazują wysoką ekspresję cząsteczek MHC II (I-Ab). Większość iPSC różnicuje się w komórki CD4+ . Jednak po powierzchniowej ekspresji TCR wiele zróżnicowanych komórek pre...

Autoimmunologiczne zapalenie stawów jest chorobą ogólnoustrojową charakteryzującą się przerostem tkanki maziowej i postępującym niszczeniem chrząstki stawowej, kości i więzadeł1. Wadliwe wytwarzanie lub funkcja limfocytów Treg w autoimmunologicznym zapaleniu stawów przyczynia się do przewlekłego stanu zapalnego i uszkodzenia tkanek, ponieważ limfocyty Treg odgrywają kluczową rolę w zapobieganiu rozwojowi autoreaktywnych komórek odpornościowych. 
Manipulacja limfocytami Treg jest idealną strategią dla rozwoju terapii tłumiących stan zapalny w sposób zależny od Ag. W przypadku immunoterapii opartej na limfocytach Treg swoistość przenoszonych limfocytów Treg jest ważna w leczeniu trwającej choroby autoimmunologicznej2. Aby wykazywać aktywność supresyjną, limfocyty Treg muszą migrować i być zatrzymywane w dotkniętym regionie, co może być kierowane przez specyfikę TCR dla Ag w tej lokalizacji3. Chociaż poliklonalne Treg mogą zawierać niewielką populację zawierającą tę specyficzność Ag z ich TCR, liczba tych Treg specyficznych dla Ag jest zwykle niska. W związku z tym terapie komórkowe z wykorzystaniem poliklonalnych limfocytów Treg przeciwko chorobom autoimmunologicznym wymagają adoptywnych transferów dużej liczby limfocytów Treg4,5. Ponieważ pluripotencjalne komórki macierzyste (PSC) mają zdolność przekształcania się w dowolny typ komórek, specyficzne dla Ag PSC-Treg mogą okazać się dobrymi kandydatami do immunoterapii opartej na Treg. Wcześniejsze badania wykazały pomyślny rozwój limfocytów T pochodzących z PSC, w tym Tregs6-8. 
Tutaj opisujemy protokół do tworzenia specyficznych dla Ag iPSC-Tregs. Dalej opisujemy terapię komórkową autoimmunologicznego zapalenia stawów w modelu mysim przy użyciu takich limfocytów Treg. Metoda ta opiera się na genetycznie modyfikowanych mysich iPSC za pomocą TCR specyficznych dla Ag i czynnika transkrypcyjnego FoxP3. Zmodyfikowane iPSC następnie różnicują się w specyficzne dla Ag Treg na komórkach zrębu OP9 eksprymujących ligandy Notch DL1, DL4 i cząsteczki MHC-II (I-A b) w obecności cytokin mFlt3L i mIL-7. Te specyficzne dla Ag iPSC-Treg mogą wytwarzać cytokiny supresyjne, takie jak TGF-β i IL-10, gdy są stymulowane przez Ag, a adoptywny transfer takich Treg ma zdolność tłumienia rozwoju AIA w modelu mysim. Opisany protokół może być wykorzystany do opracowania limfocytów Treg specyficznych dla Ag pochodzących z komórek macierzystych do potencjalnych interwencji terapeutycznych.

<table><tbody><tr><td>Myszy C57BL/6j</td><td>Jackson Laboratory</td><td>664</td><td></td></tr><tr><td>B6.129S7 Rag1tm1Mom/J</td><td>Jackson Laboratory</td><td>2216</td><td></td></tr><tr><td>Przeciwciało anty-CD3 (2C11)</td><td>BD Pharmingen</td><td>553058</td><td></td></tr><tr><td>Przeciwciało anty-CD28 (37.51)</td><td>Przeciwciało Pharmingen</td><td>553295</td><td></td></tr><tr><td>Anti-CD4 (GK1.5)</td><td>Biolegend</td><td>100417</td><td></td></tr><tr><td>Anty-CD8 ( 53&ndash; 6.7) przeciwciało</td><td>Biolegend</td><td>100714</td><td></td></tr><tr><td>przeciwciało anty-CD25 (3C7)</td><td>Biolegend</td><td>101912</td><td></td></tr><tr><td>Anti-TCR-&beta; (H57597) przeciwciało</td><td>Biolegend</td><td>109220</td><td></td></tr><tr><td>Anti-IL10</td><td>Biolegend</td><td>505010</td><td></td></tr><tr><td>Anti-TGF&beta;</td><td>Biolegend</td><td>141402</td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Invitrogen</td><td>ABCD1234</td><td></td></tr><tr><td>&alpha;-MEM</td><td>Invitrogen</td><td>A10490-01</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>Hyclone</td><td>SH3007.01</td><td></td></tr><tr><td>Brefeldin A</td><td>Sigma</td><td>B7651</td><td></td></tr><tr><td>Polybrene</td><td>Sigma</td><td>107689</td><td></td></tr><tr><td>Genejammer</td><td>Zintegrowana nauka</td><td>204130</td><td></td></tr><tr><td>ACK Bufor do lizy</td><td>Lonza</td><td>10-548E</td><td></td></tr><tr><td>mFlt-3L</td><td>peprotech</td><td>250-31L</td><td></td></tr><tr><td>mIL-7</td><td>peprotech</td><td>217-17</td><td></td></tr><tr><td>Żelatyna</td><td>Sigma</td><td>G9391</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehyd</td><td>Sigma</td><td>P6148-500G</td><td>Uwaga: Alergenne, rakotwórcze, toksyczne</td></tr><tr><td>Bufor permeabilizacji</td><td>Biolegend</td><td></td><td></td>421002</tr><tr><td>mBSA</td><td>Sigma</td><td>A7906</td><td></td></tr><tr><td>Albumina Ova</td><td>Avantor</td><td>0440-01</td><td></td></tr><tr><td>CFA</td><td>Difco</td><td>2017014</td><td></td></tr><tr><td>Ogranicznik Tailveiner</td><td>Braintree scientific</td><td>RTV 150-STD</td><td></td></tr></tbody></table>

rozwój limfocytów t regulatorowych specyficznych dla antygenu macierzystego przeciwko autoimmunizacji

Development of Stem Cell-derived Antigen-specific Regulatory T Cells Against Autoimmunity

Choroby autoimmunologiczne powstają z powodu utraty samotolerancji immunologicznej. Limfocyty T regulatorowe (Treg) są ważnymi mediatorami samotolerancji immunologicznej. Tregi reprezentują około 5-10% subpopulacji dojrzałych limfocytów T CD4 + u myszy i ludzi, przy czym około 1 - 2% tych limfocytów Treg krąży we krwi obwodowej. Indukowane pluripotencjalne komórki macierzyste (iPSC) mogą być różnicowane w funkcjonalne limfocyty Treg, które mogą być stosowane w terapiach komórkowych chorób autoimmunologicznych. W tym miejscu przedstawiamy metodę wytwarzania limfocytów Treg specyficznych dla antygenu (Ag) z iPSC (tj. iPSC-Treg). Metoda opiera się na włączeniu czynnika transkrypcyjnego FoxP3 i receptora limfocytów T specyficznego dla Ag (TCR) do iPSC, a następnie różnicowaniu się na komórkach zrębu OP9 wykazujących ekspresję ligandów Notch delta-podobnych (DL) 1 i DL4. Po różnicowaniu in vitro iPSC-Treg wykazują ekspresję CD4, CD8, CD3, CD25, FoxP3 i TCR specyficznego dla Ag i są w stanie reagować na stymulację Ag. Metoda ta została z powodzeniem zastosowana w terapii komórkowej autoimmunologicznego zapalenia stawów w modelu mysim. Adoptywne przeniesienie tych specyficznych dla Ag iPSC-Treg do myszy z zapaleniem stawów wywołanym przez Ag (AIA) ma zdolność zmniejszania stanu zapalnego i obrzęku stawów oraz zapobiegania utracie masy kostnej.

Jak pokazano tutaj, w 28. dniu Ag-specyficzne Tregs wykazywały znaczną ekspresję CD3 oraz Ag-specyficznego TCR, czyli dwóch markerów limfocytów T. Populacja CD3+TCRVβ5+ wykazywała ekspresję CD4. Większość komórek CD3+TCRVβ5+CD4+ wykazywała również ekspresję CD25, CD127 oraz CTLA-4, które są zazwyczaj wyrażane na podwyższonym poziomie w naturalnie występujących Tregs (nTregs) oraz w limfocytach T ektopowo ekspresyjnych dla F...

Prezentujemy tutaj metodę rozwoju funkcjonalnych limfocytów T regulatorowych specyficznych dla antygenu (Ag) (Treg) z indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych (iPSC) do immunoterapii autoimmunologicznego zapalenia stawów w modelu mysim.

Rozwój limfocytów T regulatorowych specyficznych dla antygenu macierzystego przeciwko autoimmunizacji

Autoimmune diseases arise due to the loss of immunological self-tolerance. Regulatory T cells (Tregs) are important mediators of immunologic ...

Ogólnym celem tego eksperymentu jest opracowanie nowej metody generowania regulatorowych limfocytów T związanych ze stanem zapalnym stawów, pochodzących z komórek macierzystych, do immunoterapii przeciwreumatycznej w autoimmunologicznym zapaleniu stawów. Metoda ta może pomóc w udzieleniu odpowiedzi na kluczowe pytania w dziedzinie autoimmunologii dotyczące potencjalnych środków immunoterapeutycznych w leczeniu autoimmunologicznego zapalenia stawów. Główną zaletą tej techniki jest to, że regulatorowe limfocyty T pochodzące z komórek macierzystych są nyped i należą do jednego typu.Zacznij od rozcieńczenia odpowiednich komórek zasilających do minimalnej gęstości 1 × 10⁴ komórek na centymetr kwadratowy w pożywce OP9, a następnie wysiej 1 × 10⁶ komórek zasilających na szalkę o średnicy 10 cm. Gdy komórki osiągną 80–90% konfluencji, usuń pożywkę z kultur i wysiej w każdej szalce od 0,5 do 1 × 10⁵ indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych (iPSCs) transdukowanych retroviralnie w pożywce OP9. Po pięciu dniach odessij pożywkę i przemyj komórki 10 ml PBS.Następnie odklej komórki, stosując cztery mililitry trypsyny na każdą płytkę, w temperaturze 37 °C. Po 10 minutach zatrzymaj rea

development-stem-cell-derived-antigen-specific-regulatory-t-cells

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologia i infekcje

Limfocyty T regulatorowe: potencjał terapeutyczny w leczeniu odrzutów przeszczepów i cukrzycy typu I

Opisujemy metodę generowania limfocytów T regulatorowych, pamięci oraz naiwnych od jednego ludzkiego dawcy krwi. Spolaryzowane limfocyty Treg mogą być następnie porównywane z innymi subpopulacjami w różnych zastosowaniach genetycznych i funkcjonalnych przy zachowaniu homogeniczności genetycznej, w tym w teście supresji, który również został tutaj szczegółowo opisany.

Generowanie indukowanych limfocytów T regulatorowych z pierwotnych ludzkich naiwnych limfocytów T oraz limfocytów T pamięci

Generowanie limfocytów T z indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych (iPS) stanowi alternatywne podejście do wykorzystania embrionalnych komórek macierzystych w immunoterapii opartej na limfocytach T. Metoda ta wykazuje, że dzięki zastosowaniu systemu indukcji in vitro lub in vivo, komórki iPS są zdolne do różnicowania się zarówno w konwencjonalne, jak i antygenowo swoiste limfocyty T.

Kierunkowe różnicowanie indukowanych pluripotentnych komórek macierzystych w kierunku limfocytów T

Ten film prezentuje terapię komórkową autoimmunologicznego zapalenia stawów u myszy. Komórkom regulatorowym T pochodzącym z iPSC, wyrażającym receptory specyficzne dla albuminy jaja kurzego, wstrzykuje się metylowaną albuminę surowicy bydlęcej (mBSA) emulgowaną w adiuwancie. Mysie komórki prezentujące antygen (APC) przetwarzają i prezentują mBSA limfocytom T, wywołując aktywację limfocytów T i migrację do błony maziowej stawu kolanowego. Kolejne wstrzyknięcia obejmują samo mBSA w lewym kolanie...

Terapia komórkowa autoimmunologicznego zapalenia stawów w modelu mysim

Transfer genu adenowirusowego do naiwnych limfocytów T CD4 z transgeniczną ekspresją receptora adenowirusa Coxsackie umożliwia molekularną analizę różnicowania regulatorowych limfocytów T in vitro.

Transdukcja adenowirusowa naiwnych limfocytów T CD4 w celu zbadania różnicowania limfocytów Treg

Ten artykuł opisuje nowatorską metodę generowania indukowanych indukowanych pluripotencjalnych emigrantów grasicy pochodzących z komórek macierzystych (iTE) za pomocą trójwymiarowego (3D) systemu hodowli grasicy. iTE to jednorodny podzbiór limfocytów T blisko spokrewniony z naiwnymi limfocytami T ze zdolnością do proliferacji, tworzenia pamięci i supresji guza.

Trójwymiarowy system hodowli grasicy do generowania indukowanych przez mysie pluripotencjalnych emigrantów grasicy pochodzących z antygenu nowotworowego specyficznych dla antygenu macierzystego

Ten artykuł opisuje protokół generowania specyficznych dla antygenu limfocytów T CD8 i ich ekspansji in vitro, w celu uzyskania dużej liczby funkcjonalnych limfocytów T do użycia in vitro i in vivo.

Wysokowydajne wytwarzanie pierwotnych cytotoksycznych limfocytów T myszy specyficznych dla antygenu do testów funkcjonalnych w autoimmunologicznym modelu cukrzycy

Ten artykuł opisuje metodę generowania funkcjonalnych, specyficznych dla antygenu nowotworowego, indukowanych, indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych pochodzących z CD8αβ+ dodatnich limfocytów T przy użyciu systemu kohodowli OP9/DLL1.

Wykorzystanie ludzkich indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych do wytwarzania limfocytów T specyficznych dla antygenu nowotworowego

Prezentowany tutaj jest protokół skutecznego tłumienia replikacji wirusa zapalenia wątroby typu B (HBV) u myszy poprzez wykorzystanie adoptywnego transferu komórek (ACT) limfocytów T specyficznych dla antygenu wirusowego (Ag) pochodzących z komórek macierzystych. Procedura ta może być dostosowana do potencjalnej immunoterapii zakażenia HBV opartej na ACT.

Limfocyty T specyficzne dla wirusa Ag pochodzące z komórek macierzystych hamują replikację HBV u myszy

Ten protokół zapewnia usprawniony przepływ pracy do generowania i testowania ludzkich limfocytów regulatorowych receptora antygenu chimerycznego (Treg CAR).

Wytwarzanie ludzkich limfocytów T regulatorowych receptora antygenu chimerycznego

Poznaj metodę generowania antygenowo-specyficznych limfocytów T regulatorowych z iPSC do immunoterapii autoimmunologicznego zapalenia stawów. Technika zapewnia jednorodną populację komórek o potencjale supresyjnym.

Rozwój limfocytów T regulatorowych specyficznych dla antygenu macierzystego przeciwko autoimmunizacji

Przeglądaj więcej filmów