Trójwymiarowa mikroskopia superrozdzielcza włókien F-aktyny za pomocą interferometrycznej mikroskopii lokalizacji aktywowanej światłem (iPALM)

Ogólnym celem tej procedury jest wizualizacja cytoszkieletu aktynowego w przylegających komórkach ssaków na poziomie ultrastrukturalnym, przy użyciu trójwymiarowej metody mikroskopii super rozdzielczości o nazwie iPALM. Obrazowanie iPALM zapewnia rozdzielczość przestrzenną poniżej trendu nanometrowego we wszystkich trzech wymiarach. Umożliwia to wizualizację ultrastruktur za pomocą sond fluorescencyjnych, co pozwala na wysoką specyficzność znakowania.

Procedura przedstawiona w tym filmie powinna być szybko adaptowalna i pouczająca w zakresie wizualizacji innych cech ultrastrukturalnych w komórkach poprzez lokalizację pojedynczej cząsteczki w oparciu o mikroskopię superrozdzielczości. Rozpocznij tę procedurę od przygotowania komórek na szkiełkach nakrywkowych na płytce sześciodołkowej. Aby złożyć próbkę do obrazowania, użyj cienkich kleszczyków, aby delikatnie usunąć szkło nakrywkowe próbki ze studzienki buforowej.