Mysi model zmęczenia wywołanego promieniowaniem obwodowym

Ogólnym celem tej procedury jest pomiar zachowania podobnego do zmęczenia wywołanego promieniowaniem obwodowym. Metoda ta może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania dotyczące zmęczenia, a w szczególności zmęczenia związanego z napromieniowaniem. Na przykład może być wykorzystany do zbadania różnych ról układu odpornościowego i ośrodkowego układu nerwowego w zmęczeniu po napromieniowaniu.

Główną zaletą tej techniki jest to, że wykorzystuje ona promieniowanie obwodowe, aby wpłynąć na zasadniczo napędzane zmęczenie zachowanie. Zacznij od randomizacji myszy do grup kontrolnych pozorowanych lub napromieniowanych. Następnie zidentyfikuj pięciotygodniowe samce myszy po tatuażu ogona i przypisz każdą mysz do indywidualnej, standardowej wentylowanej klatki dla myszy.

Pozwól myszom zaaklimatyzować się w klatkach przez co najmniej trzy kolejne dni, delikatnie dotykając każdej myszy przez okres trzech minut dziennie. Następnie zapoznaj myszy z indywidualnymi, dobrowolnymi ruchami na kółkach lub klatkami VWRA, z których każda jest wyposażona w koło do biegania połączone z elektronicznym licznikiem do ciągłego rejestrowania. Rozpocznij nagrywanie VWRA za pomocą interfejsu oprogramowania komputerowego.

Ustaw interwały nagrywania na jedną godzinę, a czas trwania na co najmniej pięć dni. Na koniec, po pięciu dniach, przerwij nagrywanie VWRA za pomocą interfejsu oprogramowania i przywróć myszy do ich standardowych klatek bez kół do biegania. Po znieczuleniu myszy potwierdź, że znieczulenie było skuteczne, szczypiąc palec u nogi.

Użyj maści na oczy, aby zapobiec wysuszeniu. Następnie przenieś znieczuloną mysz do urządzenia ekranującego ołowianie. Ułóż mysz w osłonie tak, aby odsłonięta była tylko dolna część brzucha i miednicy.

Następnie użyj taśmy medycznej, aby zabezpieczyć podstawę ogona myszy na miejscu w osłonie, aby upewnić się, że pozycja nie zmieni się podczas napromieniowania. Jeśli mysz znajduje się w grupie napromieniającej, dostarcz 800 centygryków przy dawce około 110 centygrejów na minutę. Jeśli mysz znajduje się w grupie kontrolnej pozorowanego napromieniowania, pozostaw mysz w nieaktywnym promienniku na równoważny czas.

Po zakończeniu naświetlania wyjmij mysz z promiennika i osłony, a następnie umieść ją z powrotem w oryginalnej standardowej klatce. Monitoruj mysz w sposób ciągły, aż odzyska wystarczającą przytomność, aby utrzymać pozycję leżącą mostka. Po trzech kolejnych dniach napromieniania należy przenieść myszy do ich indywidualnych klatek VWRA.

Na koniec, aby uchwycić zmęczenie wywołane promieniowaniem, należy rejestrować VWRA przez 15 dni. Efekt był istotny przez pierwsze siedem dni po napromieniowaniu, przy czym najmniejsza średnia odległość VWRA wystąpiła w trzeciej dobie po promieniowaniu. W tym miejscu przedstawiono rozkład zmian w VWRA przed i po napromieniowaniu.

Podczas gdy większość badanych myszy wykazywała objawy podobne do zmęczenia, niewielka liczba myszy wykazywała niewielkie zmiany lub nawet wzrost VWRA. Podczas wykonywania tej procedury ważne jest, aby upewnić się, że myszy są całkowicie znieczulone podczas napromieniania, ponieważ wszelkie ruchy mogą wpływać na ukierunkowanie i dawkę napromieniania. Po obejrzeniu tego filmu powinieneś dobrze zrozumieć, jak używać promieniowania ukierunkowanego obwodowo w celu wywołania u myszy zachowania przypominającego zmęczenie.