Przygotowanie i obserwacja grubych próbek biologicznych metodą skaningowej transmisyjnej tomografii elektronowej

Ogólnym celem tej procedury jest uzyskanie trójwymiarowej rekonstrukcji z odzyskiem głębi ostrości grubej próbki biologicznej za pomocą skaningowej tomografii elektronowej ze skaningiem konwergentnym. Metoda ta może odpowiedzieć na kluczowe pytania z zakresu biologii strukturalnej dotyczące tomografii elektronowej grubych próbek biologicznych. Główną zaletą tej techniki jest to, że obrazy mogą być pozyskiwane w trybie bitów konwergentnych, a przetwarzanie danych może odbywać się na większości programów dedykowanych do tomografii.

Aby rozpocząć przygotowywanie próbki do hodowli komórkowej, należy odwirować próbkę o masie 5000 x g przez pięć minut. Używaj tych parametrów wirowania podczas przygotowywania próbki. Wyrzuć supernatant i ponownie zawieś komórki w jednym mililitrze PBS wzbogaconym o 4% paraformaldehyd i 2% aldehyd gluterowy.