Name: Model WinCF - niedrogi i łatwy w obsłudze mikrokosmos oskrzelika zatkanego śluzem do badania mikrobiologii infekcji płuc (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-05-08T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 57 s
Description: Poznaj metodę WinCF do badania mikrobiologii dróg oddechowych przy użyciu sztucznego śluzu w kapilarach. System symuluje płucne mikrośrodowisko z zatkanymi oskrzelikami, umożliwiając kontrolowaną manipulację warunkami chemicznymi i obserwację aktywności mikroorganizmów w mukowiscydozie oraz innych chorobach płuc.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Autorzy chcieliby podziękować Vertex Pharmaceuticals i Cystic Fibrosis Research Innovation Award za sfinansowanie R. Quinna oraz NIH/NIAID za sfinansowanie grantu 1 U01 AI124316-01, podejścia biologii systemowej do leczenia patogenów opornych na wiele leków. Chcielibyśmy również podziękować Wydziałowi Inżynierii Mechanicznej i Lotniczej na studiach licencjackich inżynierii mechanicznej UCSD za ułatwienie współpracy w zakresie inżynieryjnych aspektów tej pracy.

<ol><li>Quinn, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Winogradsky-based+culture+system+shows+an+association+between+microbial+fermentation+and+cystic+fibrosis+exacerbation%5BTitle%5D)+AND+%22ISME+J+%22%5BJournal%5D)">A Winogradsky-based culture system shows an association between microbial fermentation and cystic fibrosis exacerbation.</a> ISME J . 9, 1024-1038 (2015).</li>
<li>Quinton, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cystic+fibrosis%3A+impaired+bicarbonate+secretion+and+mucoviscidosis%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Cystic fibrosis: impaired bicarbonate secretion and mucoviscidosis.</a> Lancet. 372 (9636), 415-417 (2008).</li>
<li>Harrison, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbial+ecology+of+the+cystic+fibrosis+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiology%22%5BJournal%5D)">Microbial ecology of the cystic fibrosis lung.</a> Microbiology. 153 (Pt 4), 917-923 (2007).</li>
<li>Caverly, L. J., Zhao, J., LiPuma, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cystic+fibrosis+lung+microbiome%3A+Opportunities+to+reconsider+management+of+airway+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+pulmonol%22%5BJournal%5D)">Cystic fibrosis lung microbiome: Opportunities to reconsider management of airway infection.</a> Pediatr pulmonol. 50, Suppl 4. S31-S38 (2015).</li>
<li>Blainey, P. C., Milla, C. E., Cornfield, D. N., Quake, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+analysis+of+the+human+airway+microbial+ecology+reveals+a+pervasive+signature+for+cystic+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Quantitative analysis of the human airway microbial ecology reveals a pervasive signature for cystic fibrosis.</a> Sci Transl Med. 4 (153), 153ra130(2012).</li>
<li>Willner, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+distribution+of+microbial+communities+in+the+cystic+fibrosis+lung%5BTitle%5D)+AND+%22ISME+J%22%5BJournal%5D)">Spatial distribution of microbial communities in the cystic fibrosis lung.</a> ISME J. 6 (2), 471-474 (2012).</li>
<li>Delhaes, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+airway+microbiota+in+cystic+fibrosis%3A+a+complex+fungal+and+bacterial+community--implications+for+therapeutic+management%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">The airway microbiota in cystic fibrosis: a complex fungal and bacterial community--implications for therapeutic management.</a> PloS one. 7 (4), e36313(2012).</li>
<li>Rogers, G. B., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC179861/">D. Bacterial diversity in cases of lung infection in cystic fibrosis patients: 16S ribosomal DNA (rDNA) length heterogeneity PCR and 16S rDNA terminal restriction fragment length polymorphism profiling.</a> J clin microbiol. 41 (8), 3548-3558 (2003).</li>
<li>Stenbit, A. E., Flume, P. A. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21881509">Pulmonary exacerbations in cystic fibrosis.</a> Curr Opin Pulm Med. 17 (6), 442-447 (2011).</li>
<li>Twomey, K. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbiota+and+metabolite+profiling+reveal+specific+alterations+in+bacterial+community+structure+and+environment+in+the+cystic+fibrosis+airway+during+exacerbation%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">Microbiota and metabolite profiling reveal specific alterations in bacterial community structure and environment in the cystic fibrosis airway during exacerbation.</a> PloS one. 8 (12), e82432(2013).</li>
<li>Carmody, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+cystic+fibrosis+airway+microbiota+at+pulmonary+exacerbation%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Am.+Thorac.+Soc%22%5BJournal%5D)">Changes in cystic fibrosis airway microbiota at pulmonary exacerbation.</a> Ann. Am. Thorac. Soc. 10 (3), 179-187 (2013).</li>
<li>Worlitzsch, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+reduced+mucus+oxygen+concentration+in+airway+Pseudomonas+infections+of+cystic+fibrosis+patients%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Effects of reduced mucus oxygen concentration in airway Pseudomonas infections of cystic fibrosis patients.</a> J. Clin. Invest. 109 (3), 317-325 (2002).</li>
<li>Cowley, E. S., Kopf, S. H., LaRiviere, A., Ziebis, W., Newman, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pediatric+Cystic+Fibrosis+Sputum+Can+Be+Chemically+Dynamic%2C+Anoxic%2C+and+Extremely+Reduced+Due+to+Hydrogen+Sulfide+Formation%5BTitle%5D)+AND+%22mBio%22%5BJournal%5D)">Pediatric Cystic Fibrosis Sputum Can Be Chemically Dynamic, Anoxic, and Extremely Reduced Due to Hydrogen Sulfide Formation.</a> mBio. 6 (4), e00767-e00715 (2015).</li>
<li>Sriramulu, D. D., Lünsdorf, H., Lam, J. S., Römling, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microcolony+formation%3A+a+novel+biofilm+model+of+Pseudomonas+aeruginosa+for+the+cystic+fibrosis+lung%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Med.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Microcolony formation: a novel biofilm model of Pseudomonas aeruginosa for the cystic fibrosis lung.</a> J. Med. Microbiol. 54 (Pt 7), 667-676 (2005).</li>
<li>Quinn, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biogeochemical+forces+shape+the+composition+and+physiology+of+polymicrobial+communities+in+the+cystic+fibrosis+lung%5BTitle%5D)+AND+%22mBio%22%5BJournal%5D)">Biogeochemical forces shape the composition and physiology of polymicrobial communities in the cystic fibrosis lung.</a> mBio. 5 (2), (2014).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Skład mikrobiologiczny płuc z mukowiscydozą obejmuje dużą różnorodność organizmów, ale warunki panujące w płucach prawdopodobnie mają znaczący wpływ na to, jakie rodzaje drobnoustrojów mogą przetrwać i rozwijać się13,15. Konkretne mechanizmy, za pomocą których zmieniają się te warunki, i dokładny wpływ, jaki wywierają na mikrobiom płuc, są obecnie na ogół niejasne. W niniejszej metodzie eksperymentalnej przedstawiono analizę zmian mikrobiologicznych w oparciu o z...

Metoda opisana w tym manuskrypcie nazywa się systemem WinCF1. Ogólnym celem WinCF jest dostarczenie eksperymentalnej konfiguracji zdolnej do symulacji środowiska wypełnionego śluzem oskrzelika płucnego. Pozwoli to na stworzenie elastycznego systemu do badania patogenów mikrobiologicznych chorób płuc o fenotypie nadmiernego wydzielania śluzu, w tym mukowiscydozy (CF), przewlekłej obturacyjnej choroby płuc (POChP), astmy i innych. Procedura została opracowana specjalnie do badania mukowiscydozy, która charakteryzuje się mutacjami, które powodują, że wydzieliny płucne stają się gęste i trudne do usunięcia, ostatecznie wypełniając oskrzeliki i inne małe kanały śluzem2. Takie zatory w płucach hamują wymianę gazową, ponieważ wdychane powietrze nie jest już w stanie dotrzeć do wielu pęcherzyków płucnych, a także stanowi siedlisko dla kolonizacji bakteryjnej3,4. Brak możliwości zapobieżenia rozwojowi drobnoustrojów w nadmiarze śluzu płucnego ostatecznie prowadzi do rozwoju złożonych przewlekłych infekcji dróg oddechowych. Społeczności te zawierają różne organizmy, w tym wirusy, grzyby i bakterie, takie jak Pseudomonas aeruginosa, które wchodzą ze sobą w interakcje5,6,7,8. Uważa się, że aktywność mikrobiomu płuc mukowiscydozy jest zaangażowana w zaostrzenia objawów zwane zaostrzeniami płuc1,9,10,11. WinCF umożliwia badanie zachowań społeczności drobnoustrojów w związku z tymi zaostrzeniami i jest obecnie rozszerzany, aby działać jako podstawowy system eksperymentalny do badania ekologii mikrobiologicznej płuc. Tradycyjnie, zaostrzenia badano poprzez bezpośrednią analizę próbek pobranych z płuc. Wiele czynników zakłócających sprawia, że bezpośrednia analiza zachowania drobnoustrojów w płucach jest trudna, dzięki systemowi WinCF wiele z tych czynników jest usuwanych, a zachowanie mikrobiomu płuc można badać bardziej bezpośrednio, co pozwala na dokładniejszą analizę aktywności bakteryjnej w oskrzelkach zatkanych śluzem.
System WinCF zapewnia metodę hodowli i analizy bakterii w sposób, który skutecznie naśladuje środowisko płuc. Tradycyjne metody hodowli bakterii płuc często polegały na hodowaniu próbek na tradycyjnych płytkach agarowych. Metody te pozostawiają próbki otwarte na działanie tlenu atmosferycznego, zaniedbując uwzględnienie warunków niedotlenienia i często niedotlenienia występujących w oskrzelkach płuc zatkanych śluzem12,13. Hodowla na agarze w warunkach tlenowych w niczym nie przypomina środowiska płuc mukowiscydozy i może wprowadzać w błąd klinicystów i badaczy co do zachowania patogenów, które próbują leczyć. Ponadto składniki odżywcze dostępne dla bakterii na płytkach agarowych są niepodobne do tych dostępnych w rzeczywistej plwocinie, która jest uwzględniana w WinCF poprzez wykorzystanie sztucznej pożywki z plwociny (ASM). Jak wykazały kultury Pseudomonas w Sriramulu i wsp.14, ASM zawiera specyficzny zestaw komponentów, który naśladuje zasoby dostępne dla mikrobów plwociny, a także replikuje fizyczną konsystencję plwociny. Ponieważ chore płuca mają specyficzny mikrobiom, badanie takich mikroorganizmów powinno odbywać się idealnie również w określonych warunkach płuc.
System WinCF umożliwia szybką analizę i łatwą manipulację warunkami eksperymentalnymi, aby obserwować zmiany mikrobiologiczne podobne do tych, które występują w rzeczywistych oskrzelkach płucnych. Technika ta pozwala na inokulację niezliczonych powiązanych typów próbek, w tym plwociny, śliny, innych wydzielin ciała oraz czystych lub mieszanych kultur bakterii. Charakter układu eksperymentalnego pozwala na natychmiastową wizualną interpretację zachowań społeczności drobnoustrojów i jest zaprojektowany tak, aby umożliwić łatwe zastosowanie wielu procedur mikrobiologicznych i omicznych. Takie badania są ważne, ponieważ skład społeczności bakteryjnej zmienia się w zależności od warunków fizykochemicznych ich środowiska. Dzięki WinCF można manipulować warunkami chemicznymi pożywki w celu analizy wpływu na aktywność bakterii. Na przykład, kwasowość pożywki może być zmieniona przed inokulacją próbki. Po inkubacji można bezpośrednio porównać aktywność bakteryjną w każdym z tych warunków i wyciągnąć wnioski na temat tego, jak bakterie w tych próbkach plwociny zachowują się w odpowiedzi na zmieniające się pH. W tym miejscu przedstawiamy procedury stosowania systemu WinCF oraz przykłady, w jaki sposób można manipulować chemią pożywek w celu zbadania wpływu na mikrobiom płuc.

<table><tbody><tr><td>Oznaczone kolorami rurki kapilarne</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-260943</td><td></td></tr><tr><td>Środek uszczelniający rurkę Cha-seal</td><td>Kimble-Chase</td><td>43510</td><td></td></tr><tr><td>Mucyna z żołądka świni</td><td>Sigma</td><td>M1778</td><td></td></tr><tr><td>Ferrytyna, kationowana ze śledziony konia</td><td>Sigma</td><td>F7879</td><td></td></tr><tr><td>DNA plemników łososia Sól sodowa (sonifikowana)</td><td>AppliChem Panreac</td><td>A2159</td><td></td></tr><tr><td>MEM Aminokwasy</td><td>endogenne Corning cellgro</td><td>25-025-CI</td><td></td></tr><tr><td>MEM Aminokwasy</td><td>Cellgro</td><td>25-030-CI</td><td></td></tr><tr><td>Emulsja z żółtka jaja, 50%</td> <td>Dalynn Biologicals</td><td>VE30-100</td><td></td></tr><tr><td>Chlorek potasu</td><td>Fisher Scientific</td><td>P2157500</td><td></td></tr><tr><td>Chlorek sodu</td><td>Fisher Scientific</td><td>S271500</td><td></td></tr><tr><td>Probówki wirówkowe 15 ml z nadrukowaną podziałką i płaskimi nakrętkami</td><td>VWR</td><td>89039-666</td><td></td></tr><tr><td>Probówki wirówkowe 50 ml z nadrukowaną podziałką i płaskimi nakrętkami</td><td>VWR</td><td>89039-656</td><td></td></tr><tr><td>Probówki do mikrowirówek 1,5 ml</td><td>Corning</td><td>MCT-150-R</td><td></td></tr><tr><td>Probówki do mikrowirówek 2,0 ml</td><td>Corning</td><td>MCT-200-C</td><td></td></tr></tbody></table>

model wincf - niedrogi i łatwy w obsłudze mikrokosmos oskrzelika zatkanego śluzem do badania mikrobiologii infekcji płuc

The WinCF Model - An Inexpensive and Tractable Microcosm of a Mucus Plugged Bronchiole to Study the Microbiology of Lung Infections

Wiele przewlekłych chorób dróg oddechowych powoduje zatkanie dróg oddechowych śluzem. Płuca osoby z mukowiscydozą są przykładowym przypadkiem, w którym ich skrzeliki zatkane śluzem tworzą korzystne środowisko dla kolonizacji mikrobiologicznej. W tym środowisku rozwijają się różne patogeny, które wchodzą ze sobą w interakcje i powodują wiele objawów związanych z mukowiscydozą. Jak w przypadku każdego zbiorowiska drobnoustrojów, warunki chemiczne ich siedliska mają znaczący wpływ na strukturę i dynamikę zbiorowiska. Na przykład różne mikroorganizmy rozwijają się przy różnych poziomach tlenu lub innych stężeń substancji rozpuszczonych. Dotyczy to również płuc z mukowiscydozą, gdzie uważa się, że stężenie tlenu wpływa na fizjologię i strukturę społeczności. Opisane tutaj metody mają na celu naśladowanie środowiska płuc i hodowlę patogenów w sposób bardziej podobny do tego, w jaki wywołują chorobę. Manipulacja chemicznym otoczeniem tych drobnoustrojów jest następnie wykorzystywana do badania, w jaki sposób chemia infekcji płuc rządzi ich ekologią mikrobiologiczną. Metoda, zwana systemem WinCF, opiera się na sztucznej pożywce z plwociną i wąskich rurkach kapilarnych, które mają zapewnić gradient tlenu podobny do tego, który występuje w oskrzelkach zatkanych śluzem. Manipulowanie warunkami chemicznymi, takimi jak pH pożywki plwociny lub ciśnienie antybiotyków, pozwala na wizualizację różnic mikrobiologicznych w tych próbkach za pomocą kolorowych wskaźników, obserwowanie produkcji gazu lub biofilmu lub ekstrakcję i sekwencjonowanie zawartości kwasów nukleinowych w każdej próbce.

Wzrost mikrobiologiczny w zależności od różnych warunków chemicznych wywołanych w próbkach różnił się w niektórych przypadkach drastycznie, a w innych bardziej subtelnie. Wiele zmian w aktywności miało charakter wizualny i stało się wyraźnie widocznych natychmiast po zakończeniu okresu inkubacji. W przykładzie manipulacji pH próbki w całym zakresie pH różniły się znacznie, co wykazało wiele czynników ujawnionych po inkubacji. Gdy do pożywek nie dodano próbek plwociny, jedyną zmianą zaobse...

Drogi oddechowe pacjentów z mukowiscydozą (CF) są idealnym środowiskiem dla rozwoju patogenów mikrobiologicznych. W manuskrypcie opisano nowatorską metodę badania mikrobiomu płuc mukowiscydozy w środowisku, które naśladuje miejsce, w którym powodują one chorobę i w jaki sposób zmiany warunków chemicznych mogą wpływać na dynamikę drobnoustrojów.

Model WinCF - niedrogi i łatwy w obsłudze mikrokosmos oskrzelika zatkanego śluzem do badania mikrobiologii infekcji płuc

Many chronic airway diseases result in mucus plugging of the airways. Lungs of an individual with cystic fibrosis are an exemplary case where their ...

Ogólnym celem tej procedury jest naśladowanie środowiska płuc i hodowla patogenów w sposób bardziej zbliżony do warunków, w których wywołują one chorobę. Metoda ta może pomóc w uzyskaniu odpowiedzi na kluczowe pytania w dziedzinie mikrobiologii dróg oddechowych, takie jak sposób interakcji różnorodnych patogenów bakteryjnych w płucach przy mukowiscydozie. Główną zaletą tej techniki jest fakt, że umożliwia ona łatwą manipulację warunkami eksperymentalnymi.Aby zaobserwować reakcje drobnoustrojów zbliżone do tych, które występują w rzeczywistych oskrzelach płucnych. Procedurę zaprezentuje Will Comstock z naszego laboratorium. Aby przygotować sztuczną pożywkę plwocin, połączyć 16 mililitrów wcześniej przygotowanego roztworu zapasowego muceum, 2 mililitry roztworu zapasowego chlorku potasu, 2 mililitry roztworu zapasowego chlorku sodu, 200 µL emulsji żółtka jaja, 5,6 mililitra roztworu zapasowego DNA, 120 µL roztworu zapasowego ferrytyny, 5,78 mililitra roztworu niezbędnych aminokwasów, 5,78 mililitra roztworu aminokwasów nieistotnych oraz 2,44 mililitra wody sterylnej.Staranne przygotowanie sterylnego sztucznego medium plwociny jest niezwykle istotne, ponieważ jakiekolwiek zanieczyszcz

the-wincf-model-an-inexpensive-tractable-microcosm-mucus-plugged

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologia i infekcje

Źródło: Nielsen, T. B. i in., Model aspiracji orofaryngealnej myszy bakteryjnego zapalenia płuc związanego z respiratorem i nabytego w szpitalu. J. Vis. Exp. (2018)Ten film pokazuje procedurę dostarczania bakterii przez gardło do płuc znieczulonej myszy, aby wywołać infekcję płuc i wywołać odpowiedź immunologiczną.

Przygotowanie modelu aspiracji orofarygealnej u myszy w celu wykrycia bakteryjnych infekcji płuc

Source: Montefusco-Pereira, C. V. et al. P. aeruginosa Infected 3D Co-Culture of Bronchial Epithelial Cells and Macrophages at Air-Liquid Interface for Preclinical Evaluation of Anti-Infectives. J. Vis. Exp.(2020)This video demonstrates a co-culture model of bronchial epithelial cells and macrophage-like cells at the air-liquid interface to study host-pathogen interactions. Pathogenic bacterial infection compromises epithelial membrane integrity, triggering macrophage-like cell activation and...

Establishing a Co-Culture Model to Study Host-Pathogen Interactions at the Air-Liquid Interface

Ten film opisuje protokół tworzenia ex vivo modelu płuc świni z biofilmu bakteryjnego na zakażonej tkance oskrzelików. Biofilmy to agregaty bakteryjne osadzone w matrycy przylegającej do powierzchni. Model ten służy do badania wrażliwości bakterii na antybiotyki na różnych etapach tworzenia biofilmu.

Model biofilmu płuc świni ex vivo: technika opracowywania modelu płuc do badania biofilmów bakteryjnych w tkance oskrzelików świni

Podczas gdy badania in vitro interakcji gospodarz-patogen pozwalają na scharakteryzowanie specyficznych odpowiedzi immunologicznych, modele in vivo są wymagane do obserwacji efektów złożonych odpowiedzi. Wykorzystując ekspozycję na Candida albicans, a następnie infekcję płuc za pośrednictwem Pseudomonas aeruginosa, ustaliliśmy mysi model interakcji mikrobiologicznych zaangażowanych w patogenność zapalenia płuc związaną z respiratorem.

Badanie społeczności drobnoustrojów in vivo: model interakcji między Candida albicans i Pseudomonas aeruginosa w drogach oddechowych za pośrednictwem gospodarza

Miękka litografia została wykorzystana do stworzenia reprezentatywnego modelu pęcherzyków płucnych w prawdziwej skali, które okresowo rozszerzają się i kurczą, naśladując fizjologiczne ruchy oddechowe. Platforma ta odtwarza oddychające przepływy groniaste na chipie i oczekuje się, że ułatwi eksperymentalne badanie dynamiki wdychanego aerozolu i depozycji w ziarniasce płucnej.

Mikroprzepływowy model biomimetycznie oddychających zrazikowych dróg oddechowych płuc

Zakaźne zapalenie płuc jest jedną z najczęstszych infekcji u ludzi. Odpowiedni model in vivo ma kluczowe znaczenie dla zrozumienia patogenezy choroby i testowania skuteczności nowych terapii. Dzięki temu mysiemu modelowi aspiracyjnego zapalenia płuc w jamie ustnej i gardle można zbadać patogenezę i nowe metody leczenia tych śmiertelnych infekcji.

Mysi model aspiracji jamy ustnej i gardła bakteryjnego zapalenia płuc związanego z respiratorem i nabytego w szpitalu

Opisujemy protokół dla trójwymiarowego modelu kohodowli zakażonych dróg oddechowych, wykorzystującego komórki CFBE41o, makrofagi THP-1 i Pseudomonas aeruginosa, ustalony na granicy powietrze-ciecz. Model ten zapewnia nową platformę do jednoczesnego testowania skuteczności antybiotyków, funkcji bariery nabłonkowej i markerów stanu zapalnego.

P. aeruginosa (P. aeruginosa) Zakażona kohodowla 3D komórek nabłonka oskrzeli i makrofagów na granicy faz powietrze-ciecz w celu przedklinicznej oceny środków przeciwinfekcyjnych

Ten manuskrypt opisuje stworzenie zakaźnego modelu zapalenia płuc u myszy i odpowiednią charakterystykę leczenia urazów wraz z metodami hodowli bakterii i wkraplania dotchawiczego. Opisano również nowatorskie podejście wykorzystujące wysokowymiarową cytometrię przepływową do oceny krajobrazu immunologicznego.

Eksperymentalny model do oceny ustąpienia zapalenia płuc

Modele płuc na chipie przewyższają tradycyjne hodowle 2D, naśladując granicę powietrze-ciecz i perfuzję komórek śródbłonka, symulując przepływ krwi i wymianę składników odżywczych, co jest kluczowe dla badań nad fizjologią płuc. Zwiększa to znaczenie badań nad płucami, oferując dynamiczne, fizjologicznie dokładne środowisko, które pomaga w lepszym zrozumieniu i leczeniu infekcji dróg oddechowych.

Immunokompetentny model pęcherzyka płucnego na chipie do badania odpowiedzi immunologicznej błony śluzowej pęcherzyków płucnych

Ten protokół opisuje czterogatunkowy model wielogatunkowego biofilmu polimikrobiologicznego dla płuc związanego z mukowiscydozą (CF), który może być wykorzystany do zbadania wpływu interakcji międzygatunkowych bakterii.

Hodowla biofilmu wielodrobnoustrojowego istotnego dla mukowiscydozy w celu zbadania fenotypów społeczności

Ta metodologia pozwala na stworzenie modelu wielomikrobiologicznego biofilmu w mukowiscydozie do testowania wrażliwości na środki przeciwdrobnoustrojowe w laboratoriach badawczych i klinicznych. Model ten zapewnia dokładne i wiarygodne wyniki w szerokim zakresie danych wyjściowych.

Opracowanie wielomikrobiologicznego modelu biofilmu kolonijnego do badania środków przeciwdrobnoustrojowych w mukowiscydozie

Poznaj metodę WinCF do badania mikrobiologii dróg oddechowych przy użyciu sztucznego śluzu w kapilarach. System symuluje płucne mikrośrodowisko z zatkanymi oskrzelikami, umożliwiając kontrolowaną manipulację warunkami chemicznymi i obserwację aktywności mikroorganizmów w mukowiscydozie oraz innych chorobach płuc.

Model WinCF - niedrogi i łatwy w obsłudze mikrokosmos oskrzelika zatkanego śluzem do badania mikrobiologii infekcji płuc

Przeglądaj więcej filmów