Name: Protokół pomiaru reaktywności sygnałów w szczurzym modelu zaburzeń związanych z używaniem kokainy (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-06-18T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 51 s
Description: Poznaj metodę pomiaru reaktywności sygnałów w szczurzym modelu uzależnienia od kokainy. Protokół ten pozwala oceniać ryzyko nawrotu i testować farmakoterapie modyfikujące nawrót.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Wszystkie testy behawioralne zostały przeprowadzone w Centrum Oceny Gryzoni In Vivo (RIVA) Uniwersytetu Medycznego Teksańskiego (UTMB), kierowanym przez dr Kelly Dineley i mieszczącym się w Centrum Badań nad Uzależnieniami, kierowanym przez dr Kathryn Cunningham. Wsparcie dla tej pracy pochodziło z Peter F. McManus Charitable Trust, National Institute of Environmental Health Sciences Center for Environmental Toxicology na UTMB (T32ES007254), Institute for Translational Sciences na UTMB (UL1TR001439), Mitchell Center for Neurodegenerative Diseases i Center for Addiction Research at UTMB (DA007287, DA070087, oraz fundusze na badania pilotażowe).

Wszystkie manipulacje ze zwierzętami są przeprowadzane zgodnie z Przewodnikiem opieki i użytkowania zwierząt laboratoryjnych (2011) oraz za zgodą Komitetu ds. Opieki i Użytkowania Zwierząt.
1. Zwierzęta
<ol>
	<li>Aklimatyzować samce szczurów Sprague Dawley w wieku około 8-9 tygodni (250-260 g) przez minimum siedem dni w pomieszczeniu kolonijnym utrzymywanym w temperaturze 21-23 °C i wilgotności 45-50% w 12-godzinnym cyklu jasno-ciemnym (światła włączone 6:00-18:00).</li>
	<li>Szczury domowe dwa w klatce i dotykają się codziennie przez cały czas trwania badania. Zapewnij jedzenie i wodę ad libitum w klatce domowej przez wszystkie fazy badania. 
	UWAGA: Ograniczenie jedzenia zwiększa istotność kokainy reward48, nasila aktywność lokomotoryczną wywołaną przez kokainę49 i działa jako stresor dla przywrócenia50, a zatem może również wpływać na reaktywność cue.</li>
	<li>Losowo przypisz szczury do grup leczenia solą fizjologiczną lub kokainą.</li>
</ol>
2. Chirurgia
<ol>
	<li>Umieść szczura pod narkozą za pomocą koktajlu zawierającego 8,6 mg/kg ksylazyny, 1,5 mg/kg acepromazyny i 43 mg/kg ketaminy zawieszonej w bakteriostatycznym roztworze soli fizjologicznej. Upewnij się, że szczur jest wystarczająco znieczulony, szczypiąc go w palec u nogi i monitorując odruchy motoryczne i oddychanie. Nakładaj maść okulistyczną bezpośrednio na oczy, aby zapobiec wysuszeniu oczu. 
	UWAGA: Jeśli szczur nie jest wystarczająco znieczulony, będzie wykazywał reakcję motoryczną na uszczypnięcie palca u nogi, a częstość oddechów szczura może gwałtownie wzrosnąć.
	<ol>
		<li>Stosując technikę aseptyczną, gdy szczur jest pod narkozą, wszczepić cewnik dożylny do żyły szyjnej połączonej z tylnym mocowaniem za pomocą kaniuli. Po chirurgicznym wszczepieniu implantu pozwól szczurom dojść do siebie przez 5-7 dni 28,36,37,51. 
		UWAGA: Samodzielne podawanie kokainy ludziom drogą dożylną powoduje gwałtowny wzrost poziomu kokainy w mózgu52,53. Tak więc, w jednym z najczęstszych wariantów przedklinicznych, szczury są szkolone do samodzielnego podawania kokainy przez cewnik wewnątrzszyjny.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Utrzymuj drożność cewnika podczas codziennego płukania roztworem 0,1 ml bakteriostatycznej soli fizjologicznej zawierającej heparynę sodową (10 j./ml), streptokinazę (0,67 mg/ml i tikarcylinę disodową (66,67 mg/ml). Płukanie cewnika należy rozpocząć następnego dnia po zabiegu i kontynuować każdego dnia po sesjach samodzielnego podawania.
	<ol>
		<li>Napełnij strzykawkę roztworem i podłącz tylny uchwyt do strzykawki za pomocą rurki polietylenowej w celu przepłukania.</li>
		<li>Okresowo przez cały czas trwania eksperymentu sprawdzać prawidłowe działanie cewnika poprzez dożylne podawanie 10 mg/kg metoheksitalu sodu. 
		UWAGA: Jest to dawka wystarczająca do krótkotrwałego znieczulenia zwierzęcia tylko wtedy, gdy jest podawana dożylnie.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. Samodzielna administracja
<ol>
	<li>Użyj oprogramowania do wygenerowania 4 oddzielnych programów, jak opisano poniżej.
	<ol>
		<li>Koduj dwa programy do samodzielnego podawania według harmonogramu o stałym stosunku (FR) 1, tj. gdzie jedno aktywne naciśnięcie dźwigni powoduje jedną infuzję. W przypadku programu #1 zakoduj lewą dźwignię jako dźwignię aktywną; Dla programu #2 zakoduj prawą dźwignię jako aktywną dźwignię. Skonstruuj oba programy tak, aby trwały 180 minut i dostarczaj bodziec kokainowy oraz dyskretny kompleks wskazówek w następujący sposób:
		<ol>
			<li>Jedno aktywne naciśnięcie dźwigni spowoduje jednoczesne podświetlenie zarówno światła domu, jak i światła stymulacyjnego nad aktywną dźwignią.</li>
			<li>Po upływie 1 sekundy pompa infuzyjna powinna podać 0,1 ml roztworu w ciągu 6 sekund.</li>
			<li>Lampka bodźca powinna zgasnąć po 7 sekundach (dezaktywując się w tym samym czasie co pompa infuzyjna).</li>
			<li>Wyłącz światło w domu po 27 sekundach, przy czym ostatnie 20 sekund oznacza przerwę w grze, podczas której aktywne naciśnięcia dźwigni nie mają zaplanowanych konsekwencji, ale są one nadal rejestrowane.</li>
			<li>Aby uzyskać dane wyjściowe, zbieraj infuzje, aktywne naciśnięcia dźwigni, nieaktywne naciśnięcia dźwigni i opóźnienie do pierwszego aktywnego naciśnięcia dźwigni.</li>
		</ol>
		</li>
		<li>Zakoduj dwa kolejne programy do samodzielnego podawania zgodnie z harmonogramem FR5, tj. w sytuacji, gdy pięć naciśnięć dźwigni powoduje jedną infuzję. Ponownie wykonaj jeden program z aktywną dźwignią po lewej stronie i jeden program z aktywną dźwignią po prawej stronie. Oba programy powinny trwać 180 minut, a wzmacniacz i dyskretny kompleks cue powinny być dostarczane w następujący sposób:
		<ol>
			<li>Pięć aktywnych naciśnięć dźwigni powoduje jednoczesne podświetlenie zarówno światła domu, jak i światła stymulacyjnego nad aktywną dźwignią.</li>
			<li>Powtórz kroki od 3.1.1.2 do 3.1.1.5.</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Szkolenie w zakresie samodzielnego administrowania
	<ol>
		<li>Roztwór kokainy należy przygotowywać codziennie w sterylnym 0,9% NaCl w dawce 0,75 mg/kg/0,1 ml. 
		UWAGA: W czasie każdej 180-minutowej sesji samodzielnego podawania szczury podają około 4-5 ml roztworu kokainy, dlatego aby przygotować się w nadmiarze, należy spodziewać się około 8 ml / szczur dziennie.</li>
		<li>Napełnij strzykawkę z cewnikiem (10 ml) co najmniej 8 ml roztworu kokainy lub soli fizjologicznej. Po upewnieniu się, że roztwór kokainy/soli fizjologicznej płynie, należy włożyć strzykawki do pompy infuzyjnej i podłączyć do rurki polietylenowej otoczonej metalową sprężyną na smyczy na początku każdej sesji samodzielnego podawania. Ostrożnie wyregulować strzykawkę w każdej pompie infuzyjnej tak, aby roztwór był równomiernie i całkowicie rozprowadzony w rurkach polietylenowych przed podłączeniem do każdego cewnika.</li>
		<li>Umieść szczury w odpowiednich standardowych komorach kondycjonowania pracy umieszczonych w wentylowanych, wyciszających kabinach z wentylatorami. Konsekwentnie umieszczaj każdego szczura w tej samej komorze operacyjnej i utrzymuj aktywną dźwignię po tej samej stronie przez wszystkie eksperymenty. Przypisanie przeciwwagi szczurów między lewą i prawą dźwignią czynną. 
		UWAGA: Każda komora jest wyposażona w pojemnik na pelety otoczony dwiema wysuwanymi dźwigniami reakcji, lampką stymulacyjną nad każdą dźwignią odpowiedzi i lampką domową naprzeciwko dźwigni. Strzykawki z kokainą/solą fizjologiczną są podłączone do igły o wadze 23 g (spiłowanej, aby uniknąć przebijania rurki) przymocowanej do rurki polietylenowej zamkniętej w metalowej smyczy sprężynowej, która łączy się z cewnikiem każdego szczura i jest obsługiwana na krętliku z płynem. Strzykawki umieszcza się w pompach infuzyjnych znajdujących się w sąsiedztwie kabiny.</li>
		<li>Trenuj szczury, aby używały dźwigni do wlewów kokainy (0,75 mg/kg/0,1 ml naparu) lub wlewów soli fizjologicznej (0,1 ml) podczas codziennych 180-minutowych sesji przy użyciu ustalonych metod28,36,37,51. 
		UWAGA: Ten trening jest wykonywany po prostu poprzez umieszczenie szczura w komorze operacyjnej i umożliwienie mu naciśnięcia dźwigni; Naciśnięcie aktywnej dźwigni spowoduje otrzymanie dyskretnego kompleksu wskazówek i infuzji kokainy, podczas gdy naciśnięcie nieaktywnej dźwigni nie pociąga za sobą żadnych zaplanowanych konsekwencji.
		<ol>
			<li>Wypełnianie harmonogramu na aktywnej dźwigni skutkuje dostarczaniem naparu kokainy lub soli fizjologicznej w okresie 6 sekund w połączeniu z zapaleniem światła w domu i światłem bodźcowym nad aktywną dźwignią i aktywacją pompy infuzyjnej (jest to dyskretny kompleks wskazówek w połączeniu z dostarczaniem kokainy); nieaktywne naciśnięcia dźwigni nie powodują zaplanowanych konsekwencji. Po podaniu wzmacniacza (kokainy) światło bodźca oraz pompa infuzyjna są dezaktywowane; Lampka domu pozostaje włączona przez dodatkowe 20 sekund, aby wskazać limit czasu, w którym naciśnięcia dźwigni nie mają zaplanowanych konsekwencji. 
			UWAGA: Opis, jak to skonfigurować, znajduje się w krokach 3.1.1.1-3.1.1.4</li>
		</ol>
		</li>
		<li>Po zakończeniu 180-minutowej sesji wyjmij każdego szczura z jego komory kondycjonowania instrumentalnego i przepłucz jego cewnik (krok 2.2). Ostrożnie czyść komory między sesjami, wycierając każdą powierzchnię 70% roztworem etanolu. 
		UWAGA: Szczury, które otrzymują kokainę podczas sesji samodzielnego podawania, mogą być trudne do usunięcia z komory i są bardziej skłonne do agresji. Używaj powolnych, ostrożnych ruchów, aby odłączyć każdego szczura od uwięzi.</li>
		<li>Trenuj szczury zgodnie z harmonogramem wzmacniania FR1 i przejdź do harmonogramu FR5 po osiągnięciu kryterium siedmiu infuzji/h przy mniej niż 10% zmienności całkowitej liczby infuzji na sesję przez trzy kolejne dni. Kontynuuj sesje samodzielnego podawania, aż szczury osiągną łącznie 14 dni treningu samodzielnego podawania. 
		UWAGA: Jest to jeden z wariantów uczenia się instrumentalnego; niektóre protokoły preferują, aby szczury pozostawały w FR1 przez cały czas trwania eksperymentu. Zmiany w harmonogramie stałych proporcji z FR1 na FR5 nie mają wpływu na liczbę infuzji, które zwierzę podaje samodzielnie54,55. Jednak zwiększenie rozmiaru stałego współczynnika pomaga zapewnić stabilność odpowiedzi u szczura i może zwiększyć istotność reward56. Dodatkowo, jeśli pożądane jest leczenie podczas wymuszonej abstynencji, szczury powinny być pseudolosowo przydzielane do grup leczonych po osiągnięciu stabilności (mniej niż 10% zmienności w całkowitej liczbie infuzji na sesję przez co najmniej 3 kolejne dni) według schematu FR5. Ponadto szczury z solą fizjologiczną nie przejdą z FR1 do FR5, ponieważ znaczenie soli fizjologicznej nie jest wystarczające do osiągnięcia stabilności wymaganej do przejścia z FR1 do FR5.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
4. Wymuszona abstynencja
<ol>
	<li>Poddaj szczury przymusowej abstynencji przez 30 dni, to znaczy nie daj im możliwości samodzielnego podawania kokainy lub soli fizjologicznej przez okres 30 dni. Co ważne, w tym okresie nie należy wracać szczurów do komór operacyjnych (poprzedni kontekst samodzielnego podawania). Należy jednak usunąć szczury z klatek domowych do codziennego obchodzenia się i ważenia, jako miarę ogólnego stanu zdrowia. 
	UWAGA: Czas trwania wymuszonej abstynencji można zmienić, ale ważne jest, aby wybrać czas trwania, który jest wystarczający, aby uniknąć efektów sufitu i podłogi. Czynniki, które należy wziąć pod uwagę przy wyborze czasu trwania wymuszonego okresu abstynencji, obejmują szczep gryzoni, wiek, długość i czas trwania sesji samodzielnego podawania, lek, dawkę leku i czas trwania infuzji oraz płeć zwierzęcia.</li>
</ol>
5. Reaktywność sygnałów kokainy
<ol>
	<li>Zakoduj dwa programy dla zadania reaktywności cue zgodnie z harmonogramem FR1; jeden program z lewą dźwignią jako aktywną dźwignią, a drugi z prawą dźwignią jako aktywną dźwignią. Skonstruuj każdy program tak, aby zbierał dane o naciskaniu dźwigni przez 60 minut i dostarczał dyskretny kompleks wskazówek, jak opisano poniżej.
	<ol>
		<li>Powtórz kroki 3.1.1.1-3.1.1.4</li>
		<li>Aby uzyskać dane wyjściowe, zbierz prezentacje cue (wcześniej znane jako infuzje), poprzednio aktywne naciśnięcia dźwigni, nieaktywne naciśnięcia dźwigni i opóźnienie do pierwszego naciśnięcia dźwigni.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Sesja testu reaktywności sygnałów kokainy
	<ol>
		<li>Oceń reaktywność sygnału w 30 dniu wymuszonej abstynencji w 60-minutowej sesji testu operacyjnego. Rozłóż czasy startu szczurów, aby ułatwić szybkie ścięcie głowy i pobranie mózgu. Co ważne, w teście reaktywności sygnału nie należy umieszczać strzykawki w pompie infuzyjnej w taki sposób, aby dźwięk pompy infuzyjnej służył jako sygnał dźwiękowy, ale nie było dostarczane wzmocnienie kokainą. 
		UWAGA: Reaktywność wskazówek może być oceniana w dniach innych niż 30 dzień wymuszonej abstynencji, jednak fakt, że reagowanie na sygnały sparowane z kokainą zmienia się w czasie34 powinien być brany pod uwagę przy wyborze daty testu reaktywności sygnału.</li>
		<li>Umieść każdego szczura w komorze do samodzielnego podawania, w której został przeszkolony i przywiąż go do kaniuli, tak jak podczas codziennych sesji samodzielnego podawania. Naciśnięcia dźwigni, która wcześniej dostarczała kokainę lub sól fizjologiczną, są teraz wzmacniane tylko przez dostarczenie dyskretnego kompleksu sygnałowego (tj. światło bodźca i dom są oświetlone, a pompa infuzyjna jest aktywowana) zgodnie z harmonogramem FR1 (tj. jeden dyskretny kompleks sygnałowy jest prezentowany na aktywne naciśnięcie dźwigni); Policz prezentacje cue i poprzednio aktywne naciśnięcia dźwigni podczas jednej 60-minutowej sesji, a także rejestruj liczbę nieaktywnych naciśnięć dźwigni. Jednak, podobnie jak w przypadku samodzielnego podawania, nieaktywne naciśnięcia dźwigni nie powodują zaplanowanych konsekwencji. 
		UWAGA: Dodatkową opcją sterowania jest rejestrowanie wcześniej aktywnych i nieaktywnych naciśnięć dźwigni w przypadku braku zaplanowanych konsekwencji (tj. brak dyskretnego wzmacniacza kompleksu wskazówek).</li>
		<li>Po zakończeniu sesji testu reaktywności sygnału, natychmiast poddaj szczury eutanazji, aby uchwycić biochemiczne skutki ponownego wystawienia na działanie komory kondycjonowania i dyskretnego kompleksu wskazówek.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
6. Gromadzenie, organizacja i analiza danych
<ol>
	<li>Podziel dane na trzy konwencjonalne kategorie: ogólny stan zdrowia, samodzielne zarządzanie i reaktywność sygnału.
	<ol>
		<li>Należy monitorować ogólny stan zdrowia (np. wagę zwierzęcia, stan sierści) przez cały czas trwania eksperymentu i w razie potrzeby zapewnić zwierzętom opiekę weterynaryjną lub usunąć z badania, jeśli wydaje się, że naciskanie dźwigni ma wpływ na zdrowie.</li>
		<li>Zbieraj dane dotyczące samodzielnego administrowania w ciągu 14 dni samodzielnego administrowania. Użyj niesparowanego, dwustronnego testu t, aby określić różnice statystyczne między grupami samodzielnego podawania kokainy i soli fizjologicznej dla całkowitej liczby infuzji, aktywnych naciśnięć dźwigni, nieaktywnych naciśnięć dźwigni i opóźnienia do pierwszego aktywnego naciśnięcia dźwigni. 
		UWAGA: Dane dotyczące samodzielnego podawania muszą być przeanalizowane przed wymuszoną abstynencją, jeśli ktoś chce zbadać wpływ leczenia podczas wymuszonej abstynencji na reaktywność sygnału (tak, aby grupy mogły mieć równą średnią liczbę wlewów, a także aktywne i nieaktywne naciśnięcia dźwigni). W przypadku wyboru modelu "dwa na dwa" (leczenie ± kokainą, sól fizjologiczna ± leczenie), do analizy tych danych należy zastosować dwukierunkową analizę typu ANOVA z odpowiednią analizą post hoc.</li>
		<li>Do zbierania i analizowania danych o reaktywności cue dla całkowitej liczby prezentacji cue, poprzednio aktywnych naciśnięć dźwigni, nieaktywnych naciśnięć dźwigni i opóźnienia do pierwszego naciśnięcia dźwigni. Przeanalizuj również te dane za pomocą niesparowanego, dwustronnego testu t, aby określić różnice między zwierzętami samodzielnie podającymi kokainę a tymi, które samodzielnie podają sól fizjologiczną. 
		UWAGA: Ponownie, jeśli wybrano konstrukcję dwa na dwa (leczenie kokainą ±, sól fizjologiczna ± leczenie), do analizy tych danych należy użyć dwukierunkowej ANOVA z odpowiednią analizą post hoc.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

Autorzy nie mają do ujawnienia żadnych konfliktów interesów.

Narażenie na sygnały sparowane z narkotykami i zmiany fizjologiczne w odpowiedzi na te sygnały16 są związane z nawrotem choroby,11,16 a test reaktywności wskazówek kokainy zastosowany powyżej warunkowo przedstawia sygnały sparowane z kokainą przy braku narkotyku; W związku z tym zachowanie związane z poszukiwaniem narkotyków w postaci wcześniej aktywnych naciśnięć dźwigni służy jako miara podatności na nawroty. Opisany w niniejszym dokumen...

Zaburzenie związane z używaniem kokainy (CUD) podąża trajektorią powtarzającego się samodzielnego administrowania, podczas którego wcześniej neutralne bodźce zyskują wartość motywacyjną1. Reaktywność sygnału to wrażliwość na sygnały wcześniej związane z doświadczeniem zażywania narkotyków i odgrywa znaczącą rolę w ludzkim pragnieniu2,3,4,5. Uważa się, że ryzyko progresji do CUD, a także nawrotu podczas abstynencji, jest wyższe u osób, które wyrażają wysoką wrażliwość na sygnały związane z narkotykami6,7. Zarówno konteksty środowiskowe (np. ludzie, budynki, gatunki muzyczne), jak i dyskretne bodźce związane z narkotykami (np. akcesoria) stają się związane z nagrodą w postaci kokainy; Narażenie na te sygnały może wywołać zmiany w fizjologii obwodowej (np. tętnie, temperaturze skóry i odporności skóry), plastyczności mózgu i funkcjonalnej łączności mózgu2,8,9,10. Innymi słowy, ponowna ekspozycja na sygnały związane z kokainą aktywuje obwody korowo-ruchomo-skórne w celu wywołania uwarunkowanych reakcji fizjologicznych i subiektywnych, które napędzają zachowanie w poszukiwaniu pożądawczego (poszukiwania narkotyków)11,12,13,14,15.
Reaktywność cue mierzona za pomocą funkcjonalnych analiz obrazowania mózgu jest predyktorem podatności na nawroty u osób z CUD16. Pomiary reaktywności sygnałów w modelach gryzoni służą jako zastępcza miara ryzyka nawrotu i mogą być wykorzystywane w badaniach translacyjnych. W związku z tym farmakoterapia, która zmniejsza reaktywność sygnałów u gryzoni, może być kontynuowana jako leczenie zapobiegające nawrotom w badaniach klinicznych na ludziach. Modele przedkliniczne o niezbędnej wartości translacyjnej i trafności predykcyjnej są szczególnie ważne, ponieważ obecnie nie ma zatwierdzonych przez FDA farmakoterapii dla CUD17.
Procedura samodzielnego podawania leków przez gryzonie jest złotym standardem, modelem translacyjnym z trafnością predykcyjną dla przyjmowania narkotyków przez ludzi18 i niezwykle ważna dla zrozumienia procesów molekularnych i fizjologicznych leżących u podstaw CUD. Dostarczanie kokainy niezależne od odpowiedzi powoduje wyraźne efekty behawioralne, molekularne i neurochemiczne w stosunku do ekspozycji na kokainę zależną od odpowiedzi; Na przykład, niezależna od odpowiedzi dostawa kokainy powoduje znacznie wyższą śmiertelność19. Co więcej, neurochemiczne konsekwencje abstynencji od samodzielnego podawania kokainy zależnej od odpowiedzi różnią się od tych wywołanych abstynencją od niezależnego od odpowiedzi dostarczania kokainy20,21. W związku z tym modele CUD oparte na zależnym od odpowiedzi dostarczaniu kokainy są lepszymi modelami translacyjnymi przy ocenie reaktywności sygnałów i związanych z nimi mechanizmów działania.
W protokole opisanym poniżej, kokaina jest dostarczana dożylnie przez zamontowany na stałe cewnik wewnątrzszyjny. Opracowano jednak alternatywne metody samodzielnego podawania leku drogą doustną i wziewną. Co ważne, gryzonie kontrolują dostarczanie leku, analogicznie do ludzi, poprzez reakcje instrumentalne. W związku z tym istnieje wysoka zgodność między lekami podawanymi samodzielnie przez gryzonie i ludzi22. Poniższa przedkliniczna procedura samodzielnego podawania leku wykorzystuje naciskanie dźwigni, wzmocnione podawaniem leku, w celu zmotywowania wskaźników odpowiedzi wyższych niż kontrola nośnika. Zachowania związane z poszukiwaniem narkotyków są trenowane poprzez łączenie pierwotnie "neutralnych" sygnałów (np. światła lub tonu bodźca oraz środowiska kontekstowego, w którym następuje samodzielne podawanie kokainy) z wlewem kokainy; te wskazówki stają się uwarunkowanymi wzmocnieniami (dla przeglądu: Cunningham & Anastasio, 201423). Późniejsza ponowna ekspozycja na sygnały związane z kokainą wyzwala zachowania związane z poszukiwaniem narkotyków u gryzoni (tj. próby dostarczenia kokainy poprzez naciśnięcie wcześniej aktywnej dźwigni), a także głód i nawrót u osób z CUD24,25,26,27.
Zazwyczaj, przedkliniczne badania na gryzoniach dotyczące zachowań związanych z poszukiwaniem narkotyków po samodzielnym podaniu kokainy wykorzystują szkolenie w zakresie wygaszania i/lub przywracania narkotyków prowadzone w środowisku związanym z narkotykami28,29,30,31,32. Naciśnięcia poprzednio aktywnej dźwigni, w przypadku braku podania leku i/lub sygnału, zazwyczaj stanowią miarę przywrócenia po wygaśnięciu33,34,35. Wręcz przeciwnie, zachowanie związane z poszukiwaniem narkotyków w reaktywności na sygnał jest oceniane po wymuszonej abstynencji bez wcześniejszego treningu w zakresie wymierania28,36,37,38,39.
Miary wyników i zmienne eksperymentalne zostały starannie wybrane i zweryfikowane w celu zbadania różnych aspektów neurobiologii poszukiwania narkotyków i zachowań podobnych do nawrotów, i jest dobrze ustalone, że neuroadaptacje różnią się między modelami z treningiem wymierania i bez niego 40,41,42,43. Ponadto, z perspektywy translacyjnej, trening wymierania gryzoni nie jest odzwierciedlony w warunkach klinicznych dla CUD, ponieważ wskazówki związane z narkotykami obejmują stany nastroju, miejsca i ludzi44; Unikalna kombinacja tych wskazówek prawdopodobnie nie jest dostępna w środowisku klinicznym45,46,47. W związku z tym opisany tutaj model gryzonia działa jako lepsza paralela do kondycji ludzkiej niż wiele obecnie dostępnych modeli.
Poniżej opisano sprawdzony trening samodzielnego podawania kokainy, wymuszoną abstynencję i protokół testu reaktywności sygnałów dla szczurów. Krótko mówiąc, szczurom wszczepia się cewniki wewnątrzszyjne, szkoli się je do samodzielnego podawania kokainy lub soli fizjologicznej za pomocą "aktywnego" nacisku dźwigniowego, a otrzymywanie bodźca kokainowego lub soli fizjologicznej jest połączone z dyskretnymi sygnałami świetlnymi i dźwiękowymi, które służą jako warunkowe wzmacniacze. Po 14 dniach samodzielnego podawania kokainy, szczury są poddawane 30-dniowej przymusowej abstynencji, a następnie 60-minutowemu testowi reaktywności, w którym mierzy się naciśnięcie dźwigni. Test reaktywności sygnałowej jest środkiem zastępczym dla podatności na nawroty kokainy u ludzi.

<table><tbody><tr><td>< mocny>Sprzęt< / mocny></td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>Rurka cewnika: 0,50 mm ID x 0,94 mm OD x 0,2 mm szerokości</td><td>Fisher Scientific, Hampton, NH, USA</td><td>11-189-15A</td><td>1/eksperyment</td></tr><tr><td>Cue Light</td><td>Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA</td><td>ENV-229M</td><td>2/komora narzędziowa</td></tr><tr><td>Kaniule prowadzące (rozmiar 22, rozmiar cokołu-8 mm, długość cięcia 11 mm, 5 mm nad cokołem)</td><td>Plastics One, Roanoke, VA, Stany Zjednoczone</td><td>8IC313G5UPXC</td><td>1/rat</td></tr><tr><td>House Light</td><td>Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA</td><td>ENV-227M</td><td>1/komora operacyjna</td></tr><tr><td>Pompa infuzyjna</td><td>Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA</td><td>PHM-100</td><td>1/komora operacyjna</td></tr><tr><td>Levers</td><td>Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA</td><td>ENV-110M</td><td>2/komora operacyjna</td></tr><tr><td>Płynne krętliki</td><td>Instech, Plymouth Meeting, PA, USA</td><td>375/22</td><td>1/komora operacyjna</td></tr><tr><td>Pakiet MED-PC z oprogramowaniem pompy infuzyjnej</td><td>Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA</td><td>SOF-735 (oprogramowanie do infuzji SOF-700RA-10 wersja 1.04)</td><td>1</td></tr><tr><td>Metalowa smycz sprężynowa</td><td>Plastics One, Roanoke, VA, USA</td><td>C313CS/SPC</td><td>1/igła do komory operacyjnej</td></tr><tr><td>(23g, 1 in)</td><td>Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ, USA</td><td>305193</td><td>1/ komora operacyjna</td></tr><tr><td>Nitex Mesh (arkusz siatki tkanej 6/6, 12 "x12", grubość 500 mikronów, 38% otwarta przestrzeń)</td> <td>Amazon, Seattle, WA, USA</td><td>CMN-0500-C, B000FMUNE6</td> <td>~ 1 arkusz / 100 szczurów</td></tr><tr><td>Pakiet interfejsu PCI</td><td>Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA</td><td>DIG-700P2-R2, MED-SYST-16</td><td>1/16 komór operacyjnych</td></tr><tr><td>Zasilacz do modułów interfejsu</td><td>Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA</td><td>SG-6510D</td><td>1/16 komór operacyjnych</td></tr><tr><td>Kabina wyciszająca</td> Med <td>Associates Inc., St. Albans, VT, USA</td><td>ENV-018V</td><td>1/komora narzędziowa</td></tr><tr><td>Strzykawki, 10 mL Luer-Lok&trade; końcówka</td><td>Fisher Scientific, Hampton, NH, USA</td><td>14-827-52</td><td>1 przypadek/eksperyment (1/komora operacyjna)</td></tr><tr><td>Tygon Rurka do spłukiwania: 0,51 mm ID x 1,52 mm OD 0,51 mm szerokość x 152,4 m długość</td><td>Fisher Scientific, Hampton, NH, USA</td><td>14-170-15B</td><td>1/ eksperyment</td></tr><tr><td>Chemicals</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Acepromazyna (10 mg / ml)</td><td>Henry Schein (zdrowie zwierząt), Melville, NY, USA</td><td>003845</td> <td>~ 0,5 mg / szczur*</td></tr> <tr><td>Żywica naprawcza Acraweld</td><td>Henry Schein (dental), Melville, NY, USA</td><td>1013959</td><td>1 / eksperyment</td></tr><tr><td>Altalube (maść okulistyczna)</td><td>Henry Schein (dentalna), Melville, NY, USA</td><td>6050059</td><td>1 / eksperyment</td></tr><tr><td>Kokaina</td><td>NIDA North Bethesda, MD, USA</td><td>N / A</td> <td>~ 350 mg / szczur dla całego eksperymentu *; wymaga licencji DEA</td></tr><tr><td>Heparyna (10 000 jednostek USP / 10 ml)</td> <td>Sagent Pharmaceuticals, Schaumburg, IL, USA</td><td>NDC 25021-400-10</td><td>1 / eksperyment (~ 21 jednostek / szczur *)</td></tr> <tr><td>Jet Liquid</td><td>Henry Schein (dental), Melville, NY, USA</td><td>1256401</td><td>1 / eksperyment</td></tr><tr><td>Ketamina (100 mg / ml, 10 ml)</td><td>Henry Schein (Dental), Melville, NY, USA</td><td>1049007</td><td>~15 mg / szczur *; wymaga licencji DEA</td></tr><tr><td>Methohexital Sodium (Brevital&reg;, 500 mg/50 mL)</td><td>Patterson Dental, Saint Paul, MN, USA</td><td>043-5461</td><td>1/eksperyment; wymaga licencji DEA</td></tr><tr><td>Saline (0,9%, USP)</td><td>Baxter, Deerfield, IL, USA</td><td>2B1307</td><td>1 przypadek/eksperyment</td></tr><tr><td>Streptokinaza z &beta;-hemolitycznego Streptococcus (grupa Lancefielda C) &ge; 3,000 jednostek/mg</td><td>Sigma Aldrich, St. Louis, MO, USA</td><td>S3134-250KU</td><td>1 fiolka/eksperyment (~1,5 mg/szczur/eksperyment*)</td></tr><tr><td>Ticarcillin Disodium Salt</td><td>Fisher Scientific, Hampton, NH, USA</td><td>50-213-695</td><td>~4 fiolki/exeriment lub kup fiolkę 25g kat.# 50-489-093 (~150mg/szczur/eksperyment*)</td></tr><tr><td>Ksylazyna (100mg/mL)</td><td>Henry Schein (Zdrowie zwierząt), Melville, NY, USA</td><td>033198</td><td>~3mg/szczur*</td></tr><tr><td colspan="4">*Zakłada, że wiek szczura jest opisany w protokole, szczury podają się samodzielnie przez 14 dni, a uderzenia gorąca występują przez 21 dni.</td></tr></tbody></table>

protokół pomiaru reaktywności sygnałów w szczurzym modelu zaburzeń związanych z używaniem kokainy

A Protocol for Measuring Cue Reactivity in a Rat Model of Cocaine Use Disorder

Zaburzenie związane z używaniem kokainy (CUD) podąża trajektorią powtarzającego się samodzielnego administrowania, podczas którego wcześniej neutralne bodźce zyskują wartość motywacyjną. Reaktywność sygnałów, wrażliwość na sygnały wcześniej związane z doświadczeniem zażywania narkotyków, odgrywa znaczącą rolę w ludzkim głodzie podczas abstynencji. Reaktywność sygnału może być oceniana jako orientacja uwagi na sygnały związane z lekiem, która jest mierzalna jako zachowanie podejścia apetytywnego zarówno w badaniach przedklinicznych, jak i na ludziach. W niniejszym artykule opisano ocenę reaktywności sygnału u szczurów wyszkolonych do samodzielnego podawania kokainy. Samodzielne podawanie kokainy jest połączone z prezentacją dyskretnych sygnałów, które działają jak warunkowe wzmacniacze (np. światło w domu, światło bodźca, dźwięki pompy infuzyjnej). Po okresie abstynencji, naciśnięcia dźwigni w kontekście samodzielnego podawania kokainy, którym towarzyszą dyskretne sygnały wcześniej sparowane z wlewem kokainy, są mierzone jako reaktywność sygnału. Model ten jest przydatny do badania mechanizmów neurobiologicznych leżących u podstaw procesów reaktywności sygnału, a także do oceny farmakoterapii w celu tłumienia reaktywności sygnału, a tym samym modyfikowania podatności na nawroty. Zaletami modelu są jego znaczenie translacyjne oraz trafność twarzowa i predykcyjna. Podstawowym ograniczeniem modelu jest to, że zadanie reaktywności sygnału może być wykonywane rzadko i musi być używane tylko w krótkim czasie (np. 1 godzina), w przeciwnym razie szczury zaczną wygaszać parowanie dyskretnych wskazówek z bodźcem kokainowym. Model można rozszerzyć na dowolny pozytywnie wzmacniający bodziec w połączeniu z dyskretnymi wskazówkami; Chociaż model ten ma szczególne zastosowanie w przypadku nadużywanych narkotyków, może mieć w przyszłości zastosowanie w dziedzinach takich jak otyłość, gdzie smaczne nagrody żywieniowe mogą działać jako pozytywnie wzmacniające bodźce.

Wyniki eksperymentu dotyczącego samopodawania kokainy i abstynencji, po którym przeprowadzono test reaktywności na wskazówki, pochodzące z wcześniej opublikowanego badania57, przedstawiono na Rysunku 1. Harmonogram badania przedstawiono na Rysunku 1A.
Szczury przechodzą indywidualnie z poziomu FR1 na FR5 po spełnieniu określonych kryteriów. W mia...

Reaktywność wskazówek jest rozumiana jako wrażliwość na sygnały związane z doświadczeniami związanymi z zażywaniem narkotyków, które przyczyniają się do głodu i nawrotów u abstynentów. Reaktywność sygnału jest modelowana u szczurów poprzez pomiar orientacji uwagi na sygnały związane z narkotykami, co skutkuje zachowaniem podejścia apetytywnego w teście reaktywności sygnału po samodzielnym podaniu i wymuszonej abstynencji.

Protokół pomiaru reaktywności sygnałów w szczurzym modelu zaburzeń związanych z używaniem kokainy

Cocaine use disorder (CUD) follows a trajectory of repetitive self-administration during which previously neutral stimuli gain incentive value. Cue ...

W niniejszym protokole reaktywność na bodziec mierzy motywację zwierzęcia do poszukiwania kokainy po okresie przerwy w samopodawaniu kokainy. Reaktywność na bodziec występuje, gdy szczur zostaje ponownie wystawiony na kontekst i bodźce wcześniej powiązane z dożylnym podawaniem kokainy. Reaktywność na bodziec jest wskaźnikiem ryzyka nawrotu.Opisany tutaj protokół reaktywności na sygnały jest przedkliniczną metodą testowania farmakoterapii modyfikujących nawroty, a także badania czynników genetycznych i środowiskowych, które przyczyniają się do ryzyka nawrotu. Jest to zadanie operacyjne dla zachowań poszukiwania narkotyku, które odpowiada wielu właściwościom zażywania narkotyków i nawrotów u ludzi. Zoptymalizowano kluczowe parametry, takie jak dawka kokainy, objętość podania i czas infuzji, aby ustanowić trafność fazową oraz translacyjną moc badawczą.Do niniejszego protokołu należy użyć samców szczurów Sprague Dawley w wieku około ośmiu do dziewięciu tygodni, które były aklimatyzowane w pomieszczeniu hodowlanym przez co najmniej siedem dni. W okresie aklimatyzacji szczury należy utrzymywać w parach i codziennie z nimi pracować przez cały czas trwania badania. Przez wszystkie fazy badania należy zapewnić zwierzętom nieograniczony dostęp do pokarmu w klatkach domowych.Zaimplantuj cewniki do żyły szyjnej zgodnie z metodą opisaną przez Kmiotka i współpracowników w ich filmie JoVE, a następnie losowo przydziel szczury do grup traktowanych solą fizjologiczną lub kokainą. W celu treningu zaprogramuj harmonogramy samopodawania kokainy zgodnie z opisem w protokole tekstowym. Wyposaż komory treningowe w dwie chowane dźwignie reakcyjne, lampkę sygnałową nad każdą dźwignią oraz lampkę pokojową naprzeciwko dźwigni.Podawaj kokainę lub sól fizjologiczną za pomocą pomp infuzyjnych znajdujących się poza boksem. Do strzykawek należy użyć igieł o rozmiarze 23 G oraz rurek polietylenowych osłoniętych metalową sprężyną, przymocowanych do cewników szczura. Kokaina lub sól fizjologiczna są podawane po naciśnięciu dźwigni aktywnej, ale nie po naciśnięciu dźwigni nieaktywnej.Wymieniaj roztwory codziennie. Używaj świeżo przygotowanych rozcieńczeń kokainy w sterylnym 0,9% NaCl dopasowanych do masy ciała każdej szczura. Do strzykawki każdego szczura wprowadź co najmniej osiem mililitrów roztworu.Rozpocznij od trenowania szczurów w schemacie wzmacniania FR1, a następnie przejdź do schematu FR5 po trzech kolejnych dniach uzyskania siedmiu infuzji na godzinę, przy zmienności całkowitej liczby infuzji na sesję poniżej 10%. Niezbędna jest codzienna analiza danych dotyczących zachowania podczas samopodawania, aby określić moment przejścia zwierzęcia na schemat FR5 oraz sprawdzić, czy cewnik pozostaje drożny. Jednym z krytycznych etapów protokołu jest monitorowanie samopodawania podczas pierwszych 14 dni treningu, aby upewnić się, że zwierzę prawidłowo samopodaje substancję.Jeśli samopodawanie gwałtownie spada, prawdopodobnie doszło do utraty drożności cewnika szczura. Na początku sesji należy sprawdzić, czy w strzykawce nie ma pęcherzyków powietrza. Podłączyć strzykawkę do rurki polietylenowej i włożyć ją do pompy infuzyjnej.Uważnie wyreguluj strzykawkę tak, aby roztwór został równomiernie i całkowicie rozprowadzony w rurkach polietylenowych. Następnie podłącz szczury do systemu podawania i umieść je w odpowiednich standardowych komorach warunkowania instrumentalnego, znajdujących się w wentylowanych kabinach dźwiękochłonnych z wentylatorami. Zachowanie spójności w trakcie całego eksperymentu jest kluczowe.Zawsze umieszczaj szczura w tej samej komorze i utrzymuj aktywną dźwignię po tej samej stronie wewnątrz tej komory. W ciągu 14 codziennych, 180-minutowych sesji szczury mają swobodny dostęp do dźwigni i szybko nauczą się, która z nich zapewnia stymulację, pod warunkiem że system działa poprawnie. Każde uruchomienie aktywnej dźwigni według schematu stałego stosunku jednego uwalnia 0,1 milliliters roztworu w ciągu sześciu sekund i jednocześnie zapala światło w klatce oraz światło bodźca nad aktywną dźwignią.Przed uwolnieniem roztworu występuje jednosekundowe opóźnienie. Po każdym podaniu kokainy lub soli fizjologicznej światło bodźca oraz pompa infuzyjna są dezaktywowane przez 20 sekund, podczas których światło w pomieszczeniu pozostaje włączone, a naciskanie dźwigni nie wywołuje żadnej reakcji, lecz jest rejestrowane. Po zgaszeniu światła dźwignia zostaje ponownie aktywowana.Wszelkie uruchomienia nieaktywnej dźwigni nie wywołują zaplanowanych konsekwencji. Po zakończeniu tej 180-minutowej sesji, powolnymi i ostrożnymi ruchami należy usunąć potencjalnie agresywnego szczura z komory. Następnie należy przepłukać jego cewnik.Pomiędzy sesjami należy starannie oczyścić komory. Przetrzeć każdą powierzchnię 70% roztworem etanolu. Po zakończeniu sesji treningowych szczury poddać wymuszonej abstynencji przez 30 dni bez dostępu do komory operantowej.Kontynuuj codzienną obsługę szczurów i monitoruj ich ogólny stan zdrowia. Po długim okresie abstynencji pozostaw szczury na 60 minut w komorze operantowej, po czym niezwłocznie przystąp do pobrania mózgów. Podczas tej sesji uruchom zaprogramowaną procedurę reaktywności na sygnał.Zróżnicuj godziny rozpoczynania sesji, aby zapewnić czas na pobranie mózgów pomiędzy nimi. Co istotne, uruchamiaj pompę bez podłączonej strzykawki, tak aby sygnał dźwiękowy pompy nadal stanowił część bodźca, lecz bez podawania substancji. Rozpocznij tę sesję w zwykły sposób, umieszczając szczura w komorze samopodawania, w której był on trenowany.W tym teście, po naciśnięciu dźwigni aktywnej, która wcześniej dostarczała kokainę lub sól fizjologiczną, podawane są jedynie sygnały w schemacie FR1. Dźwignia nieaktywna nadal nie wywołuje żadnej reakcji. Należy zarejestrować wszystkie prezentacje sygnałów, naciśnięcia dźwigni wcześniej aktywnej oraz naciśnięcia dźwigni nieaktywnej, a także latencję do pierwszego naciśnięcia dźwigni.Z zastosowaniem opisanego protokołu przeprowadzono badanie, w którym szczury były indywidualnie przenoszone z FR1 na FR5 po spełnieniu określonych kryteriów. W grupie otrzymującej kokainę szczury stopniowo zwiększały liczbę infuzji, aż do osiągnięcia kryterium, po czym przeniesiono je z FR1 na FR5. W teście reaktywności na bodziec kokainowy zebrano wiele miar wynikowych.Na przykład szczury, które wcześniej przyjmowały kokainę metodą samopodawania, naciskały wcześniej aktywną dźwignię znacznie częściej niż szczury, które przyjmowały sól fizjologiczną. Innym ważnym miernikiem wynikowym jest czas do pierwszego naciśnięcia dźwigni. Gdy zaobserwowane zostanie zdarzenie wpływające na ten parametr, zwierzę może być pod wpływem stresu fizycznego lub wykazywać obniżoną motywację do samopodawania kokainy.Zadania oceniające zachowanie lokomotoryczne mogą być wykorzystywane do analizy zmian w zdrowiu fizycznym oraz do odróżnienia zaburzeń motorycznych od zmian motywacyjnych. Po obejrzeniu tego filmu powinni Państwo posiadać wiedzę na temat tego, jak trenować szczury do samopodawania leku, jak utrzymywać drożność cewnika podczas samopodawania oraz jak oceniać reaktywność na bodźce związane z lekiem po okresie abstynencji jako miarę ryzyka nawrotu. Podczas wykonywania tej procedury ważne jest, aby pamiętać o dokładnym zaprogramowaniu oprogramowania, prawidłowej obsłudze zwierząt oraz regularnym przemywaniu cewników dożylnych.Po zastosowaniu tej procedury można ocenić mechanizmy komórkowe i molekularne napędzające reaktywność na sygnały związane z kokainą, a także przetestować potencjalne środki farmakologiczne modyfikujące tę reaktywność.

a-protocol-for-measuring-cue-reactivity-rat-model-cocaine-use

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neuronauka

Procedury operacyjnego samopodawania leków oraz uwarunkowanej preferencji miejsca (CPP) są szeroko stosowane w badaniach do modelowania różnych komponentów wzmocnienia narkotykowego, konsumpcji i uzależnienia u ludzi. W niniejszym raporcie połączyliśmy tradycyjne metody CPP i samopodawania jako nowatorskie podejście do badania wzmocnienia i uzależnienia od leków u szczurów.

Nowoczesne urządzenie i metoda wzmacniania działania leku

Modele zwierzęce nawrotów, znane jako procedury reinstalacji, są szeroko wykorzystywane do badania roli stresu w nawrotach poszukiwania narkotyków. W niniejszym opracowaniu przedstawiamy metodę indukowania reinstalacji poszukiwania kokainy u szczurów laboratoryjnych poprzez krótkotrwałą ekspozycję na łagodne, przerywane wstrząsy elektryczne stóp.

Procedura badania reinstatmentu poszukiwania kokainy indukowanego wstrząsem stopy u szczurów laboratoryjnych

Reagowanie na sygnały powiązane z pokarmem lub lekiem nasila się w czasie okresu abstynencji, co może wiązać się ze zwiększoną podatnością na zachowania nawrotowe. W niniejszym materiale szczegółowo opisujemy procedurę oceny tej „inkubacji głodu” (ang. incubation of craving) u szczurów, które podawały sobie samodzielnie sacharozę.

Ogólna metoda oceny inkubacji głodu sacharozy u szczurów

Ten artykuł opisuje, jak mikrowstrzykiwać wektory wirusowe do mózgu myszy, a następnie testować w warunkowym paradygmacie preferencji miejsca, który obejmuje fazę przejęcia, wyginięcia i przywrócenia.

Stereotaktyczne mikroiniekcja wektorów wirusowych eksprymujących rekombinazę Cre w celu zbadania roli genów docelowych w preferencjach miejsca uwarunkowanego kokainą

Ten protokół ma na celu umożliwienie badaczom przeprowadzania eksperymentów mających na celu przetestowanie tych aspektów uzależnienia za pomocą testów warunkowej preferencji miejsca i uwrażliwienia lokomotorycznego.

Ocena uczulenia behawioralnego wywołanego kokainą i uwarunkowanej preferencji miejsca u myszy

Ten protokół opisuje Preferencję Miejsca Warunkowego (CPP) jako model nawrotu. Procedura ta pozwala na pomiar nawrotu u zwierząt laboratoryjnych, biorąc pod uwagę wpływ sygnałów środowiskowych związanych z narkotykami, takich jak głód i nawrót u osób uzależnionych od abstynencji, jest obecnie przedmiotem programów leczenia uzależnień.

Przywrócenie poszukiwania narkotyków u myszy przy użyciu paradygmatu warunkowej preferencji miejsca

Tutaj opisany jest protokół preferencji miejsca uwarunkowanego morfiną (CPP) do pomiaru inkubacji głodu u szczurów.

Protokół warunkowej preferencji miejsca do pomiaru inkubacji łaknienia u szczurów

Przedstawiamy trzy protokoły, które oceniają różne formy impulsywności u szczurów i innych małych ssaków. Procedury wyboru międzyokresowego oceniają tendencję do dyskontowania wartości opóźnionych wyników. Zróżnicowane wzmocnienie niskich wskaźników i dyskryminacja cechowo-negatywna oceniają zdolność hamowania reakcji odpowiednio z karą i bez kary za niewłaściwe reakcje.

Trzy procedury laboratoryjne do oceny różnych objawów impulsywności u szczurów

Ten model konfliktu jest używany do pomiaru upośledzenia kontroli hamującej po ekspozycji na uzależniające narkotyki, lub inne czynniki, które mogą wpływać na kontrolę hamowania. Bodźce seksualne i przeszkoda awersyjna są prezentowane jednocześnie, dlatego samce szczurów muszą pokonać przeszkodę, aby zbliżyć się do nagrody seksualnej.

Konfliktowy model zachowań związanych z poszukiwaniem nagrody u samców szczurów

Opisane tutaj metody opisują procedurę używaną do optogenetycznie odwracającej plastyczności wywołanej przez kokainę w behawioralnie istotnym obwodzie u szczurów. Utrzymująca się stymulacja optyczna synaps wzgórzowo-migdałowatych o niskiej częstotliwości wywołuje długotrwałą depresję (LTD). Indukowane optogenetycznie LTD in vivo u szczurów doświadczonych z kokainą skutkowało późniejszym osłabieniem poszukiwania narkotyków motywowanego sygnałem.

Wykorzystanie optogenetyki do odwrócenia neuroplastyczności i zahamowania poszukiwania kokainy u szczurów

Poznaj metodę pomiaru reaktywności sygnałów w szczurzym modelu uzależnienia od kokainy. Protokół ten pozwala oceniać ryzyko nawrotu i testować farmakoterapie modyfikujące nawrót.

Protokół pomiaru reaktywności sygnałów w szczurzym modelu zaburzeń związanych z używaniem kokainy

Przeglądaj więcej filmów