Name: Brak weryfikacji czyszczenia w przemyśle farmaceutycznym z powodu nieczystości powierzchni ze stali nierdzewnej (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-08-11T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min
Description: Poznaj protokół czyszczenia powierzchni ze stali nierdzewnej w przemyśle farmaceutycznym. Metoda zapewnia wysokie i powtarzalne odzyskiwanie pozostałości leków, eliminując błędy weryfikacji czyszczenia sprzętu produkcyjnego.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Żadna agencja finansująca nie wspierała tej pracy.

1. Przykładowe rozwiązanie
<ol>
	<li>Obliczyć granicę czyszczenia (CL) dla leku w oparciu o maksymalne dopuszczalne przeniesienie (MACO) zgodnie z kryteriami dawki terapeutycznej. 
	UWAGA: W tym przypadku granica czyszczenia (CL) dla leku A została obliczona na 2,4 μg na 50cm2 w oparciu o maksymalne dopuszczalne przeniesienie (MACO) zgodnie z kryteriami dawki terapeutycznej. Weryfikacja czyszczenia jest wykonywana przy limicie czystości 50%, 100% i 150%. Weryfikacja czyszczenia została oceniona dla dwóch formulacji (2,5% i 60% w/w obciążenia leku).</li>
</ol>
2. Procedura czyszczenia kuponów
<ol>
	<li>Podejście wstępne
	<ol>
		<li>Wyczyść kupony, spłukując i wycierając powierzchnię przez 10 - 15 sekund dwukrotnie wodą i dwukrotnie metanolem, aby usunąć wszelkie pozostałości osadu. Wykonaj ten proces w okapie, ponieważ metanol jest toksyczny i bardzo lotny.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Zaawansowane podejście
	<ol>
		<li>Korzystanie z rozwiązań do czyszczenia na miejscu
		<ol>
			<li>Ustaw sonikator na temperaturę pokojową. Sonikator nie posiada regulacji ustawień mocy, dlatego czas jest ustawiony tak, aby dać odpowiednie wyniki czyszczenia.</li>
			<li>Zanurz próbki w wodzie klasy wysokiej jakości do chromatografii cieczowej (HPLC) i poddaj sonikacji przez 2 minuty.</li>
			<li>Zanurz kupony w 0,1% alkalicznym roztworze detergentu w wodzie klasy HPLC i poddaj sonikacji przez 2 minuty.</li>
			<li>Zanurz kupony w wodzie HPLC i sonikuj przez 2 minuty.</li>
			<li>Zanurz kupony w 0,1% kwaśnym roztworze detergentu w wodzie HPLC i poddaj sonikacji przez 2 minuty.</li>
			<li>Zanurz kupony w wodzie HPLC i sonikuj przez 2 minuty.</li>
		</ol>
		</li>
		<li>Za pomocą nadtlenku kwasowo-zasadowego 
		UWAGA: Jest to alternatywna metoda polegająca na użyciu kwasów, zasad i nadtlenków, a nie detergentów alkalicznych i kwaśnych.
		<ol>
			<li>Ustaw sonikator na temperaturę pokojową. Sonikator nie posiada regulacji ustawień mocy, dlatego czas jest ustawiony tak, aby dać odpowiednie wyniki czyszczenia.</li>
			<li>Zanurz kupony w wodzie i poddaj sonikacji na 2 minuty.</li>
			<li>Zanurz kupony w 0,1 M wodorotlenku sodu i poddaj sonikacji na 2 minuty.</li>
			<li>Zanurz kupony w wodzie i poddaj sonikacji na 2 minuty.</li>
			<li>Zanurz kupony w 0,1 M kwasie solnym i poddaj sonikacji przez 2 minuty.</li>
			<li>Zanurz kupony w wodzie i poddaj sonikacji na 2 minuty.</li>
			<li>Zanurz kupony w 0,1 mg/ml NaNo2 i poddaj sonikacji przez 2 minuty.</li>
			<li>Zanurz kupony w wodzie i poddaj sonikacji na 2 minuty.</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. Procedura pobierania wymazów
<ol>
	<li>Zamontuj kupony ze stali nierdzewnej na dnie plastikowej zlewki o pojemności 250 ml (lub 500 ml) za pomocą taśmy dwustronnej.</li>
	<li>Przytrzymaj zlewkę, aby ułatwić procesy nakłuwania i pobierania wymazów. Minimalizuje to również niektóre niepożądane wypadki, takie jak przestrzelenie zakrętu podczas wymazywania.</li>
	<li>Nanieść określoną objętość o określonym stężeniu i postaci użytkowej (np. 200 μl z 12 μg/ml przy 2,5 % w/w obciążenia lekiem A) w wirowy wzór na powierzchni próbki za pomocą pipety wyporowej.</li>
	<li>Poczekaj, aż powierzchnia kuponu wyschnie (~ 3 - 10 minut w zależności od lotności próbki).</li>
	<li>Zanurz suchy wacik w fiolce z 2 ml rozcieńczalnika (metanol: kwas mrówkowy 100:0,2 objętości/objętość).</li>
	<li>Usunąć nadmiar rozpuszczalnika, dociskając wacik do wnętrza fiolki.</li>
	<li>Mocno przetrzyj powierzchnię kuponu równymi, nakładającymi się na siebie ruchami z boku na bok, aż całkowita powierzchnia testowa 50 cm2 zostanie przetarta jedną stroną mokrego wacika.</li>
	<li>Powtórz proces wycierania (krok 3.7) po tej samej stronie wacika.</li>
	<li>Przetrzyj dwukrotnie cztery krawędzie kuponu.</li>
	<li>Odwróć wacik na drugą stronę i obróć kupon o 90°, zgodnie z ruchem wskazówek zegara lub przeciwnie do ruchu wskazówek zegara, obracając w ten sposób kierunek pobierania wymazówki o 90°.</li>
	<li>Powtórz ruch wymazywania zgodnie z opisem w krokach 3.7 - 3.9. Po pobraniu próbek z powierzchni przeciąć główkę wacika za pomocą nożyczek do fiolki z rozpuszczalnikiem.</li>
	<li>Powtórz proces pobierania wymazu za pomocą drugiego wacika, obracając kupon o 90° w tym samym kierunku, który został wcześniej wybrany.</li>
	<li>Sondować sonikowanie fiolki zawierającej dwie główki wacika przez 5 minut, a następnie wirować przez 10 sekund.</li>
	<li>Przenieść roztwór do fiolki HPLC i oznaczyć go jako roztwór roboczy.</li>
</ol>
4. Obliczanie odzysku
<ol>
	<li>Odzyskiwanie próbek
	<ol>
		<li>Przygotować roztwory kontrolne, mieszając po 200 μl każdego z roztworów do uzupełniania kuponów z 1 800 μl rozcieńczalnika.</li>
		<li>Uruchomić system chromatograficzny zgodnie z warunkami wymienionymi w tabeli 1.</li>
		<li>Obliczyć odzysk roztworu roboczego wacika na podstawie względnej powierzchni pod pikiem roztworów roboczych (A, W) i roztworu kontrolnego (AC).</li>
		<li>Powtórz proces na trzech kuponach i oblicz średni odzysk wraz ze względnym odchyleniem standardowym (Srel). 
		UWAGA: Wszystkie zastosowane tutaj metody analityczne zostały zwalidowane zgodnie z wytycznymi ICH Q2(R1). Warunki chromatografii są wymienione w rozdziale dotyczącym materiałów.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Validation of cleaning processes (7/93). Guide to inspections validation of cleaning processes. , United States Food and Drug Administration. (2004).</li>
<li>Warning Letter: 320-12-08, Gulf Pharmaceuticals. , U.S. Department of Health and Human Services. (2012).</li>
<li>Warning Letter: 320-12-058, Novartis Internationsl AG. , U.S. Department of Health and Human Services. (2012).</li>
<li>Warning Letter: 05-10, Teva Parenterals Medicines, Inc. , U.S. Department of Health and Human Services. (2009).</li>
<li>Warning Letter: 320-14-09, Tianjin Zhongan Pharmaceutical Co., Ltd. , U.S. Department of Health and Human Services. (2014).</li>
<li>Mantel, M., Wightman, J. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/sia.740210902/abstract">Influence of the surface chemistry on the wettability of stainless steel.</a> Surf Interface Anal. 21, 595-605 (1994).</li>
<li>Odaka, K., Ueda, S. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/0042207X96000486">Dependence of outgassing rate on surface oxide layer thickness in type 304 stainless steel before and after surface oxidation in air.</a> Vacuum. 47, 689-692 (1996).</li>
<li>Kerber, S. J., Tverberg, J. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/298883005_Stainless_steel_surface_analysis">Stainless Steel Surface Analysis.</a> Adv. Mater. Processes. , 33-36 (2000).</li>
<li>Kusumaningrum, H. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival+of+foodborne+pathogens+on+stainless+steel+surfaces+and+cross-contamination+to+foods%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Food+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Survival of foodborne pathogens on stainless steel surfaces and cross-contamination to foods.</a> Int J Food Microbiol. 85, 227-236 (2003).</li>
<li>Liu, L., Pack, B. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cleaning+verification+assays+for+highly+potent+compounds+by+high+performance+liquid+chromatography+mass+spectrometry%3A+Strategy%2C+validation%2C+and+long-term+performance%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmaceut.+Biomed%22%5BJournal%5D)">Cleaning verification assays for highly potent compounds by high performance liquid chromatography mass spectrometry: Strategy, validation, and long-term performance.</a> J Pharmaceut. Biomed. 43, 1206-1212 (2007).</li>
<li>Lambropoulos, J., Spanos, G. A., Lazaridis, N. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+validation+of+an+HPLC+assay+for+fentanyl%2C+alfentanil%2C+and+sufentanil+in+swab+samples%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmaceut.+Biomed%22%5BJournal%5D)">Development and validation of an HPLC assay for fentanyl, alfentanil, and sufentanil in swab samples.</a> J Pharmaceut. Biomed. 23, 421-428 (2000).</li>
<li>Chisti, Y., Moo-Young, M. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/BF01569748">Clean-in-place systems for industrial bioreactors: Design, validation and operation.</a> J. Ind. Microbiol. 13, 201-207 (1994).</li>
<li>Haidar Ahmad, I. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cleaning+verification%3A+Exploring+the+effect+of+the+cleanliness+of+stainless+steel+surface+on+sample+recovery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmaceut.+Biomed%22%5BJournal%5D)">Cleaning verification: Exploring the effect of the cleanliness of stainless steel surface on sample recovery.</a> J Pharmaceut. Biomed. 134, 108-115 (2017).</li>
</ol>

Nie istnieje żaden konflikt interesów finansowych ani konflikt interesów.

Głównym czynnikiem przyczyniającym się do niskiego i zmiennego odzysku pozostałości substancji czynnych z próbek ze stali nierdzewnej był brak dobrze zdefiniowanej procedury czyszczenia powierzchni odroczków. Czyszczenie powierzchni kuponów skutkowało stałym, dokładnym odzyskiem kolców i powtarzalnymi wynikami. Wykazując wysoki poziom odzysku z próbek ze stali nierdzewnej, rzeczywiste wyniki weryfikacji czyszczenia uzyskane z urządzeń produkcyjnych przy użyciu zwalidowanych metod powinny być dokładne i precyzyjne, odzwie...

Czystość sprzętu niededykowanego powinna być sprawdzona przed jego późniejszym dopuszczeniem do użytku w produkcji półproduktów i aktywnych składników farmaceutycznych (API), przy zmianie produktu, aby zapobiec zanieczyszczeniu krzyżowemu. Procedury czyszczenia powinny zawierać wystarczające szczegóły, aby umożliwić operatorom czyszczenie każdego rodzaju sprzętu w powtarzalny i skuteczny sposób, a procedury te powinny być zatwierdzone zgodnie z wymaganiami amerykańskiej Agencji ds. Żywności i Leków (FDA)1. FDA wydała liczne listy ostrzegawcze z powodu nieodpowiedniego czyszczenia2,3,4, braku walidacji metody czyszczenia i nieprzestrzegania procedur czyszczenia5. 21 CFR §211.67 określa wymagania niezbędne do pomyślnej weryfikacji czyszczenia.
Jest standardem w przemyśle, że walidacja metod analitycznych do weryfikacji czyszczenia jest przeprowadzana na próbkach ze stali nierdzewnej o tej samej powierzchni/wykończeniu co sprzęt produkcyjny. Kupony ze stali nierdzewnej (np. 50 cm2) służą do przedstawiania powierzchni sprzętu do eksperymentów weryfikacyjnych w laboratorium. Podczas opracowywania i walidacji tych metod analitycznych próbka będąca przedmiotem zainteresowania (tj. pozostałości, które powinny zostać odzyskane z powierzchni urządzenia) jest dopytywana w docelowej pozostałości na kuponie ze stali nierdzewnej wyznaczonym przez maksymalny dopuszczalny limit przeniesienia (MACO). Poziom ten określa się na podstawie dopuszczalnego limitu narażenia, który jest zdefiniowany jako limit, przy którym pacjent może być narażony bez negatywnych skutków dla zdrowia (poziom bez obserwowanych szkodliwych skutków, NOAEL).
Analityk lub operator produkcyjny przeprowadzający pobieranie wymazów musi postępować zgodnie z ustrukturyzowaną procedurą, aby zapewnić, że odzysk jest powtarzalny, niezależnie od tego, kto wykonuje wymaz. Procedura powinna wyraźnie wyszczególniać rodzaj wymazówki, liczbę użytych wymazów, rozcieńczalnik, ilość użytego rozpuszczalnika, dokładny wzór zamiatania, liczbę pociągnięć nałożonych na powierzchnię próbki, ilość czasu poświęconego na pobieranie wymazów/ekstrakcję próbek, metodę wykrywania (ultrafiolet, fluorescencja, spektrometria mas, całkowity węgiel organiczny itp.), technikę ekstrakcji materiału z główki wacika, itd.
Oprócz wszystkich wyżej wymienionych czynników, które wpływają na odzysk próbki, powierzchnia kuponu, a co za tym idzie, powierzchnia sprzętu również odgrywają rolę. Powierzchnia kuponu może być modyfikowana w wyniku osadzania się cienkiej warstwy materiału na powierzchni lub w wyniku zmiany stopnia utlenienia jednego lub więcej pierwiastków w stali nierdzewnej (np. Fe, Cr i Ni)6,7,8. Regeneracja powierzchni kuponów ze stali nierdzewnej z powrotem do jej pierwotnego stanu ma kluczowe znaczenie dla powodzenia procesu wymiany ilościowej. Badania, w których kupony ze stali nierdzewnej nie zostały odpowiednio oczyszczone, wykazały zmienność w odzyskiwaniu, w tym analityka do innego, różnych leków lub różnych poziomów skoków9,10,11. Odchylenie standardowe w odzyskiwaniu dziesięciu powtórzeń na jednym kuponie może wynosić do 14% i 26% na pięciu kuponach9. Ważne jest, aby zauważyć, że wartości względnego odchylenia standardowego (Srel) rosły wraz ze wzrostem liczby powtórzeń lub wraz ze wzrostem liczby użytych kuponów (tj. pięć kuponów zamiast pięciokrotnego wzrostu na tym samym kuponie)11. W takich przypadkach zmienność nie może być interpretowana jako fluktuacja losowa. Niemniej jednak ich wyniki można wytłumaczyć naszym odkryciem, że czystość powierzchni kuponu wpłynie na regenerację. Wyniki opisane w tym artykule ilustrują znaczny wzrost wyników odzysku i zmniejszenie zmienności po prawidłowym oczyszczeniu powierzchni próbek ze stali nierdzewnej.
Clean-in-place () to zautomatyzowany sposób czyszczenia powierzchni sprzętu, który polega na minimalnym lub żadnym demontażu sprzętu. Podczas procesu czyszczenia wykonywana jest zdefiniowana procedura kolejnego mycia zasadą, a następnie kwasem w celu usunięcia pozostałości organicznych i nieorganicznych. Środki powierzchniowo czynne, związki chelatujące lub czynniki kompleksujące są zwykle dodawane do roztworów w celu zwiększenia skuteczności czyszczenia dowolnego produktu z powierzchni urządzenia. Skuteczność czyszczenia zależy od kilku parametrów, w tym wyboru i stężenia roztworów (tj. rodzaju i składu zasady, kwasu i środka powierzchniowo czynnego), czasu czyszczenia, temperatury (zwykle 60 - 80 °C), rodzaju zanieczyszczenia oraz obecności trudnych do czyszczenia części12. W zależności od rodzaju produktu leczniczego, roztwory 100 i 200 zostały wybrane do użycia do czyszczenia kuponów ze stali nierdzewnej używanych do weryfikacji czyszczenia, ponieważ symulują one proces stosowany do czyszczenia urządzeń produkcyjnych.
To badanie informuje o wpływie różnych czynników wpływających na odzysk pozostałości farmaceutycznych z powierzchni próbek ze stali nierdzewnej i zaleca najlepsze praktyki dla rozwoju analitycznych metod czyszczenia małych cząsteczek, białek terapeutycznych i przeciwciał. Brak dobrze zdefiniowanej procedury, która konsekwentnie czyściłaby powierzchnię kuponu, został zidentyfikowany jako główny czynnik przyczyniający się do niskich i zmiennych odzysków. Wysoki i powtarzalny odzysk uzyskano, gdy powierzchnia kuponu została odpowiednio oczyszczona13.

<table><tbody><tr><td>Kupony ze stali nierdzewnej</td><td>&nbsp; GlobePharma (Nowy Brunszwik, NJ ).&nbsp; </td><td>SS316-20RA-50cm2</td><td></td></tr><tr><td>Roztwory do czyszczenia na miejscu (CIP100 i CIP200)&nbsp;</td><td>zostały uzyskane od Steris Corporation (Mentor, OH)</td><td>1D10BG</td><td>Detergent alkaliczny i detergent kwasowy, odpowiednio</td></tr><tr><td>Pipety wyporowe</td><td>Gilson (Middleton, WI).&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr>System oczyszczania wody <td>klasy HPLC</td><td>Millipore Milli-Q Advantage (Darmstadt, Niemcy)&nbsp; lub od Honeywell Burdick & Jackson (Muskegon, Michigan)</td><td>7732-18-5</td><td></td></tr><tr><td>Metanol klasy HPLC</td><td>EMD</td><td>MX0475-1</td><td></td></tr><tr><td>lodowaty kwas octowy&nbsp;</td><td>EMD</td><td>MAX0073P5</td><td></td></tr><tr><td>klasy HPLC Acetonitryl&nbsp;</td><td>J.T. Baker (Avantor Performance Materials, Center Valley, PA)</td><td>75-05-8</td><td></td></tr><tr><td>Kwas trifluorooctowy</td><td>J.T. Baker (Avantor Performance Materials, Center Valley, PA)</td><td>75-05-8</td><td></td></tr><tr><td>Kolumna chromatograficzna Zorbax Eclipse</td><td>&nbsp; XDB-C18, 4,6 x 100 mm, 3,5 cala i mikro; m Kolumna HPLC</td><td>UNSPSC &ndash; 41115709</td><td></td></tr><tr><td>System UHPLC Vanquish&nbsp;</td><td>Thermo Fisher Scientific, Germering, Niemcy</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Myjka ultradźwiękowa Branson B8510&nbsp;</td><td>Branson Ultrasonics (Danbury, CT, Stany Zjednoczone)</td><td>model (8510-D7H)</td><td></td></tr></tbody></table>

brak weryfikacji czyszczenia w przemyśle farmaceutycznym z powodu nieczystości powierzchni ze stali nierdzewnej

Failure of Cleaning Verification in Pharmaceutical Industry Due to Uncleanliness of Stainless Steel Surface

Celem tej pracy jest zidentyfikowanie parametrów, które wpływają na odzysk pozostałości farmaceutycznych z powierzchni odcinków stali nierdzewnej. Oceniono szereg czynników, w tym poziomy skoków produktów leczniczych, procedurę dozowania, proporcje substancji pomocniczych leku, zmienność między analitykami, zmienność śróddzienną i procedurę czyszczenia kuponów. Brak dobrze zdefiniowanej procedury, która konsekwentnie oczyszczałaby powierzchnię kuponu, został zidentyfikowany jako główny czynnik przyczyniający się do niskich i zmiennych odzysków. Ocena czyszczenia powierzchni kuponów roztworami do czyszczenia na miejscu () dała wysoki odzysk (>90%) i powtarzalne wyniki (Srel≤4%) niezależnie od warunków, które były oceniane wcześniej. Podejście to zostało z powodzeniem zastosowane do walidacji czyszczenia małych cząsteczek (MW <1 000 Da), a także dużych biomolekuł (MW do 50 000 Da).

Reprezentatywne wyniki z wstępnych prób weryfikacji czyszczenia dla leku A zostały podsumowane w Tabeli 2. Przed oczyszczeniem kuponów zgodnie ze szczegółową procedurą opisaną w sekcji eksperymentalnej, uzyskano niespójne wyniki dla różnych poziomów wzbogacenia, różnych stosunków API/substancji pomocniczych, różnych analityków, a nawet dla tego samego analityka w różne dni. Obserwowalna zmienność odzysku wymagała wyjaśnienia, ponieważ niektóre wyniki nie spełniły wymogów ...

Brak dobrze zdefiniowanej procedury, która konsekwentnie czyściłaby powierzchnie kuponów, został zidentyfikowany jako główny czynnik przyczyniający się do niskich i zmiennych poziomów odzysku w weryfikacji czyszczenia. Niniejszy manuskrypt opisuje prawidłowy protokół czyszczenia kuponów ze stali nierdzewnej.

Brak weryfikacji czyszczenia w przemyśle farmaceutycznym z powodu nieczystości powierzchni ze stali nierdzewnej

The aim of this work is to identify the parameters that affect the recovery of pharmaceutical residues from the surface of stainless steel coupons. A ...

Ogólnym celem niniejszej pracy jest uzyskanie wysokiego i powtarzalnego odzysku pozostałości farmaceutyków z powierzchni kuponów ze stali nierdzewnej poprzez zastosowanie najlepszych praktyk opracowywania metod czyszczenia analitycznego dla małych cząsteczek, białek terapeutycznych i przeciwciał. Metoda ta może pomóc w udzieleniu odpowiedzi na kluczowe pytania w dziedzinie weryfikacji czyszczenia w przemyśle farmaceutycznym, takie jak przyczyny niepowodzeń w procesie weryfikacji czyszczenia urządzeń produkcyjnych. Główną zaletą niniejszego badania jest przedstawienie procedury właściwego czyszczenia powierzchni kuponów ze stali nierdzewnej wykorzystywanych do walidacji metod analitycznych.Aby rozpocząć ten eksperyment, należy przygotować roztwory wzorcowe leku rozpuszczonego w wybranym rozcieńczalniku po obliczeniu limitu czystości dla danego leku. Kupony ze stali nierdzewnej należy oczyścić, płucząc je wodą i przecierając powierzchnię dwukrotnie przez 10 do 15 sekund. Następnie należy powtórzyć ten etap płukania i przecierania z użyciem metanolu, aby usunąć wszelkie pozostałe osady.Aby przeprowadzić zaawansowaną procedurę czyszczenia z wykorzystaniem roztworów do czyszczenia w miejscu (CIP), zanurz próbki w wodzie o stopniu czystości do wysokosprawnej chromatografii cieczowej (HPLC) i poddaj sonikacji przez dwie minuty. Zanurz próbki w 0,1% roztworze detergentu alkalicznego w wodzie klasy HPLC i poddaj sonikacji przez dwie minuty. Ponownie zanurz próbki w wodzie klasy HPLC i powtórz dwuminutową sonikację.Następnie zanurz je w 0,1% roztworze detergentu kwasowego w wodzie HPLC i poddaj sonikacji przez dwie minuty. Zakończ proces dwuminutową sonikacją w wodzie HPLC. Następnie, używając dwustronnej taśmy, przymocuj stalowe kupony do dna plastikowego zlewki o pojemności 250 ml.Podczas procedury przytrzymaj zlewkę, aby ułatwić nanoszenie próbki i wymaz oraz uniknąć wypadków. Użyj pipety wyporowej, aby nanieść określoną objętość leku o żądanym stężeniu i formulacji, rozprowadzając go okrężnymi ruchami na powierzchni kuponu. Gdy powierzchnia kuponu wyschnie, zanurz suchy wymaz w fiolce zawierającej 2 mL rozcieńczalnika.Przyłóż wymaz do wewnętrznej ścianki probówki, aby usunąć nadmiar rozpuszczalnika. Wykonuj równomierne, nakładające się ruchy poziome, aby mocno przetrzeć powierzchnię kuponu jedną stroną wilgotnego wymazu, aż do oczyszczenia całego obszaru testowego o powierzchni 50 cm². Użyj tej samej strony wymazu, aby powtórzyć proces wycierania.Przetrzyj każdą z czterech krawędzi kuponu dwukrotnie za pomocą wymazka. Obróć kupon o 90 stopni i użyj drugiej strony wymazka, zmieniając tym razem kierunek przecierania o 90 stopni. Powtórz czyszczenie tą stroną wymazka w ten sam sposób, upewniając się, że wszystkie cztery krawędzie kuponu zostały przetarte dwukrotnie.Po przetarciu powierzchni użyj nożyczek, aby odciąć głowicę wymazu do fiolki z rozpuszczalnikiem. Następnie powtórz całą procedurę pobierania wymazu, używając drugiej wymazówki, obracając kupon o 90 stopni w tym samym kierunku, który wybrano wcześniej. Następnie poddaj fiolkę zawierającą dwie głowice wymazów sonikacji przez pięć minut.Następnie wytrząśnij fiolkę w wortexie przez 10 s. Na koniec przelej roztwór do fiolki do HPLC i oznacz go jako roztwór roboczy. Aby odzyskać próbkę, przygotuj roztwory kontrolne, mieszając 200 µL każdego roztworu wzbogaconego kuponu lub roztworu próbki z 1 800 µL rozcieńczalnika.Użyj tych roztworów do przeprowadzenia chromatografii zgodnie z protokołem tekstowym. Oblicz odzysk roztworu roboczego z wymazu na podstawie względnej powierzchni pod pikami roztworów roboczego i kontrolnego. Powtórz ten proces dla trzech próbek, aby obliczyć średni odzysk oraz względne odchylenie standardowe.Przed oczyszczeniem kuponów wyniki odzysku dla różnych poziomów wzbogacenia były niespójne, niezależnie od zastosowanego aktywnego składnika farmaceutycznego lub stosunku API do substancji pomocniczych, różnych analityków, a nawet różnych dni pracy tego samego analityka. Większość wyników odzysku charakteryzowała się wysokim względnym odchyleniem standardowym. Zaobserwowana zmienność odzysku nie została wyeliminowana mimo dostosowania kilku różnych parametrów, w tym techniki wymazu, rozcieńczalnika, rozpuszczalnika do wzbogacania, pH próbki wzbogaconej i rozcieńczalnika, techniki wzbogacania oraz techniki ekstrakcji.Różnica między odzyskiem indywidualnym na każdej powierzchni kuponu a odzyskiem średnim wskazuje, że średni odysk różni się w zależności od powierzchni kuponu, w związku z czym jest bardzo prawdopodobne, że obserwowana zmienność wynika z różnic między powierzchniami kuponów. Po zastosowaniu procedury czyszczenia kuponów opisanej w niniejszym protokole, wyniki odzysku były powtarzalne między kolejnymi próbami, przy minimalnych różnicach w odzysku między kuponami. Zastosowane tutaj czyszczenie kuponów doprowadziło do uzyskania wartości odzysku przekraczających 90%. Ponadto wartości względnego odchylenia standardowego dla każdego poziomu wzbogacenia były akceptowalne i niższe niż wyniki otrzymane przed czyszczeniem.Po opanowaniu techniki, czyszczenie kuponów można przeprowadzić w mniej niż 30 minut, pod warunkiem prawidłowego wykonania procesu. Podczas próby realizacji tej procedury ważne jest pamiętanie o tym, jak prawidłowo przeprowadzić wzbogacenie i odzysk, aby nie utracić analizowanego związku. Po obejrzeniu tego filmu powinieneś mieć dobrą wiedzę na temat właściwego czyszczenia powierzchni stali nierdzewnej w celu uzyskania wysokiego i powtarzalnego odzysku pozostałości.Po opracowaniu technika ta utorowała drogę badaczom z przemysłu farmaceutycznego do dostarczania wiarygodnych danych dotyczących czyszczenia w procesach produkcyjnych.

failure-cleaning-verification-pharmaceutical-industry-due-to

Research

JoVE Journal

Chemistry

Chemia

Przenośny Sterylizator Chemiczny (Portable Chemical Sterilizer, PCS) to przełomowa, niezależna od źródeł energii, niemal bezwodna technologia sterylizacji przeznaczona dla jednostek medycznych armii. PCS wytwarza dwutlenek chloru z suchych odczynników mieszanych z wodą na miejscu, na żądanie i w punkcie użycia (PoU) w plastikowej walizce. Rozpylacz do środków dezynfekujących dla żywności i ekologicznej sanitacji (Disinfectant-sprayer for Foods and ENvironmentally-friendly Sanitation, D-FENS)...

Przenośny Sterylizator Chemiczny (PCS), D-FENS oraz D-FEND ALL: Nowoczesne technologie dekontaminacji chlorkiem dwutlenka dla wojska

Ogólnym celem tego badania było pokazanie potencjalnego mechanizmu zanieczyszczenia krzyżowego patogenu Listeria monocytogenes przenoszonego przez żywność w sklepie delikatesowym. Metodologia ta może być stosowana w wielu różnych środowiskach do śledzenia zanieczyszczenia patogenami.

Śledzenie skażenia mikrobiologicznego w środowiskach handlu detalicznego za pomocą proszku fluorescencyjnego - przykład środowiska delikatesowego w handlu detalicznym

Opisano technikę pasywacji powierzchni cieczy RT do badania aktywności rekombinacyjnej masowych defektów krzemu. Aby technika była skuteczna, wymagane są trzy kluczowe etapy: (i) chemiczne czyszczenie i wytrawianie krzemu, (ii) zanurzenie krzemu w 15% kwasie fluorowodorowym oraz (iii) oświetlenie przez 1 minutę.

Pasywacja kwasem fluorowodorowym wzmocniona światłem: czuła technika wykrywania dużych defektów krzemu

Biofilmy na powierzchniach mogą być skutecznie i szybko usuwane za pomocą okresowego strumienia aerozoli dwutlenku węgla bez przedmuchiwania azotem.

Usuwanie biofilmu za pomocą aerozoli dwutlenku węgla bez przedmuchiwania azotem

Śliskie powierzchnie to nowy sposób na rozwiązanie problemu z przyczepnością. Protokół ten opisuje, jak wytwarzać śliskie powierzchnie w wysokich temperaturach. Wyniki pokazują, że śliskie powierzchnie wykazywały ochronę przed zamoczeniem cieczy i niezwykłe działanie przeciwadhezyjne na tkanki miękkie w wysokich temperaturach.

Przygotowanie i antyadhezja w wysokiej temperaturze śliskiej powierzchni na stali nierdzewnej

Przedstawiona tutaj jest procedura pomiaru podstawowych właściwości materiału za pomocą mikromechanicznego testu rozciągania. Opisano metody wytwarzania próbek mikrorozciągających (umożliwiające szybkie wytwarzanie mikropróbek z objętości materiałów sypkich poprzez połączenie fotolitografii, trawienia chemicznego i mielenia wiązką jonów skupionych), modyfikacji końcówki wgłębnika oraz mikromechanicznych prób rozciągania (w tym przykład).

Mikromechaniczne próby rozciągania próbek ze stali nierdzewnej 17-4 PH wytwarzanych addytywnie

Protokół podsumowuje najlepsze praktyki mające na celu zminimalizowanie obciążenia biologicznego mikroorganizmów w środowisku pomieszczeń czystych i zawiera strategie, takie jak monitorowanie środowiska, monitorowanie procesów i testowanie sterylności produktu. Jest to istotne dla zakładów produkcyjnych i badawczych, które są zobowiązane do spełniania aktualnych standardów dobrej praktyki tkankowej i aktualnych standardów dobrej praktyki wytwarzania.

Strategie kontroli i monitorowania mikrobiologicznego w pomieszczeniach czystych i terapiach komórkowych

Tutaj prezentujemy protokół oceny charakterystyki powierzchni plików do ponownego leczenia endodontycznego po wielokrotnym użyciu w procedurach ponownego leczenia, wykorzystując skaningową mikroskopię elektronową do identyfikacji i analizy potencjalnych wad powierzchni.

Skaningowa ocena mikroskopowa wad powierzchniowych pliku do ponownego traktowania usuwacza po jednym i wielokrotnym użyciu

Niniejsze pilotażowe badanie in vitro miało na celu ocenę skuteczności czyszczenia trzech różnych narzędzi dekontaminacyjnych oraz możliwych zmian powierzchni po zabiegu, przy użyciu permanentnego czerwonego tuszu do naśladowania obecności biofilmu doustnego.

Pilotażowe badanie in vitro mające na celu ocenę zdolności czyszczenia oraz wpływu różnych metod dekontaminacji na powierzchnie implantów

Protokół ten opisuje metody wykorzystania nowatorskiej technologii dezynfekcji mgiełowej z suchym aerozolowym nadtlenkiem wodoru (aHP), która zapewnia inteligentną łączność szpitala, umożliwiając integrację z platformami danych w celu dostarczania historycznych danych o użytkowaniu sprzętu, weryfikację dawek aHP, zasięgu pomieszczenia, czasów dezynfekcji oraz lokalizacji w celu zmniejszenia zakażeń związanych z opieką zdrowotną (HAI).

Zautomatyzowana dezynfekcja pokoi szpitalnych z wykorzystaniem nowatorskiej technologii mikrokropel z mikrokroplami z aerozolem nadtlenku wodoru

Poznaj protokół czyszczenia powierzchni ze stali nierdzewnej w przemyśle farmaceutycznym. Metoda zapewnia wysokie i powtarzalne odzyskiwanie pozostałości leków, eliminując błędy weryfikacji czyszczenia sprzętu produkcyjnego.

Brak weryfikacji czyszczenia w przemyśle farmaceutycznym z powodu nieczystości powierzchni ze stali nierdzewnej

Przeglądaj więcej filmów