Brak weryfikacji czyszczenia w przemyśle farmaceutycznym z powodu nieczystości powierzchni ze stali nierdzewnej

Ogólnym celem tych prac jest uzyskanie wysokich i powtarzalnych odzysków pozostałości farmaceutycznych z powierzchni odcinków ze stali nierdzewnej poprzez zastosowanie najlepszych praktyk w zakresie opracowywania analitycznych metod czyszczenia małych cząsteczek, białek terapeutycznych i przeciwciał. Metoda ta może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania z zakresu weryfikacji mycia w przemyśle farmaceutycznym, np. dlaczego weryfikacja mycia urządzeń produkcyjnych kończy się niepowodzeniem. Główną zaletą tego badania jest to, że pokazuje ono procedurę prawidłowego czyszczenia powierzchni próbek ze stali nierdzewnej stosowanych do walidacji metod analitycznych.

Aby rozpocząć ten eksperyment, należy przygotować próbki roztworów leku rozpuszczonego w wybranym rozcieńczalniku po obliczeniu limitu czyszczenia leku. Wyczyść kupony ze stali nierdzewnej, spłukując je wodą i dwukrotnie wycierając powierzchnię przez 10 do 15 sekund. Następnie powtórz ten etap płukania i wycierania metanolem, aby usunąć wszelkie pozostałości osadu.

Aby przeprowadzić zaawansowane metody czyszczenia przy użyciu roztworów clean in place, zanurz próbki w wysokowydajnej chromatografii cieczowej lub wodzie klasy HPLC i poddaj sonikację na dwie minuty. Zanurz kupony w 0,1% alkalicznym roztworze detergentu w wodzie klasy HPLC i poddaj sonikacji przez dwie minuty. Ponownie zanurz kupony w wodzie HPLC i powtórz dwuminutową sonikację.

Następnie zanurz je w 0,1% roztworze detergentu o kwasie w wodzie HPLC i poddaj sonikacji przez dwie minuty. Zakończ dwuminutową sonikacją w wodzie HPLC. Następnie za pomocą taśmy dwustronnej zamontuj kupony ze stali nierdzewnej na dnie plastikowej zlewki o pojemności 250 mililitrów.

Podczas zabiegu należy trzymać zlewkę, aby ułatwić nakłuwanie i pobieranie wymazu oraz uniknąć wypadków. Za pomocą pipety wyporowej wprowadzić określoną objętość leku o pożądanym stężeniu i postaci w postaci wirowej na powierzchni kuponu. Gdy powierzchnia kuponu wyschnie, zanurz suchy wacik w fiolce z dwoma mililitrami rozcieńczalnika.

Przycisnąć wacik do wnętrza fiolki, aby usunąć nadmiar rozpuszczalnika. Użyj równych, nakładających się na siebie pociągnięć z boku na bok, aby mocno wytrzeć powierzchnię kuponu jedną stroną mokrego wacika, aż całkowity obszar testowy o powierzchni 50 centymetrów kwadratowych zostanie wytarty. Użyj tej samej strony wacika, aby powtórzyć proces wycierania.

Przetrzyj dwukrotnie każdą z czterech krawędzi kuponu. Obróć kupon o 90 stopni i użyj drugiej strony wacika, obracając teraz kierunek wycierania o 90 stopni. Powtórz czyszczenie po tej stronie wacika w ten sam sposób, upewniając się, że dwukrotnie wytarłeś wszystkie cztery krawędzie kuponu.

Po wytarciu powierzchni użyj nożyczek, aby przeciąć główkę wacika w fiolce z rozpuszczalnikiem. Następnie powtórz całą procedurę pobierania wymazu za pomocą drugiego wacika, obracając kupon o 90 stopni w tym samym kierunku, który został wcześniej wybrany. Następnie należy poddać sonikacji fiolki zawierającej dwie główki wacika przez pięć minut.

Następnie wirować fiolkę przez 10 sekund. Na koniec przenieś roztwór do fiolki HPLC i oznacz go jako roztwór roboczy. Aby odzyskać próbkę, należy przygotować roztwory kontrolne, mieszając 200 mikrolitrów każdego roztworu odciekowego lub próbki z 1 800 mikrolitrami rozcieńczalnika.

Użyj tych roztworów, aby uruchomić chromatografię zgodnie z protokołem tekstowym. Obliczyć odzysk roztworu roboczego wacika na podstawie względnej powierzchni pod pikami roztworów roboczych i kontrolnych. Powtórz ten proces dla trzech kuponów, aby obliczyć średni odzysk i względne odchylenie standardowe.

Zanim kupony zostały wyczyszczone, wyniki odzyskiwania dla różnych poziomów skoków były niespójne, niezależnie od aktywnego składnika farmaceutycznego lub współczynnika substancji pomocniczej API, różnych analityków, a nawet innego dnia dla tego samego analityka. Większość wyników odzysku charakteryzowała się wysokim względnym odchyleniem standardowym. Zaobserwowana zmienność odzysku nie została wyeliminowana po dostosowaniu kilku różnych parametrów, w tym techniki pobierania wymazówki, rozcieńczalnika, rozpuszczalnika do wzbogacania, pH kolca i rozcieńczalnika, techniki nakłuwania i techniki ekstrakcji.

Różnica między indywidualnym odzyskiem na każdej powierzchni kuponu a średnim odzyskiem pokazuje, że średni odzysk różni się w zależności od powierzchni kuponu, dlatego jest bardzo prawdopodobne, że obserwowana zmienność wynika z różnic między powierzchniami kuponów. Po wykonaniu czyszczenia kuponów opisanych w tym protokole, wyniki odzyskiwania były powtarzalne z jednej próby na drugą, z minimalną różnicą w odzyskiwaniu między kuponami. Przeprowadzone tutaj czyszczenie kuponowe spowodowało, że odzysk był wyższy niż 90%Ponadto względne wartości odchylenia standardowego dla każdego poziomu skoku były dopuszczalne i mniejsze niż wyniki uzyskane przed czyszczeniem.

Po opanowaniu czyszczenie kuponów można wykonać w mniej niż 30 minut, jeśli zostanie wykonane prawidłowo. Próbując wykonać tę procedurę, ważne jest, aby pamiętać, jak prawidłowo skakać i odzyskiwać bez utraty interesującej analizy. Po obejrzeniu tego filmu powinieneś dobrze zrozumieć, jak prawidłowo czyścić powierzchnie ze stali nierdzewnej, aby uzyskać wysoki i powtarzalny odzysk pozostałości.

Po jej opracowaniu technika ta utorowała drogę naukowcom z branży farmaceutycznej do dostarczania wiarygodnych danych dotyczących czyszczenia procesów produkcyjnych.