Brak weryfikacji czyszczenia w przemyśle farmaceutycznym z powodu nieczystości powierzchni ze stali nierdzewnej
11 sierpnia 2017
Brak dobrze zdefiniowanej procedury, która konsekwentnie czyściłaby powierzchnie kuponów, został zidentyfikowany jako główny czynnik przyczyniający się do niskich i zmiennych poziomów odzysku w weryfikacji czyszczenia. Niniejszy manuskrypt opisuje prawidłowy protokół czyszczenia kuponów ze stali nierdzewnej.
Ogólnym celem tych prac jest uzyskanie wysokich i powtarzalnych odzysków pozostałości farmaceutycznych z powierzchni odcinków ze stali nierdzewnej poprzez zastosowanie najlepszych praktyk w zakresie opracowywania analitycznych metod czyszczenia małych cząsteczek, białek terapeutycznych i przeciwciał. Metoda ta może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania z zakresu weryfikacji mycia w przemyśle farmaceutycznym, np. dlaczego weryfikacja mycia urządzeń produkcyjnych kończy się niepowodzeniem. Główną zaletą tego badania jest to, że pokazuje ono procedurę prawidłowego czyszczenia powierzchni próbek ze stali nierdzewnej stosowanych do walidacji metod analitycznych.
Aby rozpocząć ten eksperyment, należy przygotować próbki roztworów leku rozpuszczonego w wybranym rozcieńczalniku po obliczeniu limitu czyszczenia leku. Wyczyść kupony ze stali nierdzewnej, spłukując je wodą i dwukrotnie wycierając powierzchnię przez 10 do 15 sekund. Następnie powtórz ten etap płukania i wycierania metanolem, aby usunąć wszelkie pozostałości osadu.
Aby przeprowadzić zaawansowane metody czyszczenia przy użyciu roztworów clean in place, zanurz próbki w wysokowydajnej chromatografii cieczowej lub wodzie klasy HPLC i poddaj sonikację na dwie minuty. Zanurz kupony w 0,1% alkalicznym roztworze detergentu w wodzie klasy HPLC i poddaj sonikacji przez dwie minuty. Ponownie zanurz kupony w wodzie HPLC i powtórz dwuminutową sonikację.
Następnie zanurz je w 0,1% roztworze detergentu o kwasie w wodzie HPLC i poddaj sonikacji przez dwie minuty. Zakończ dwuminutową sonikacją w wodzie HPLC. Następnie za pomocą taśmy dwustronnej zamontuj kupony ze stali nierdzewnej na dnie plastikowej zlewki o pojemności 250 mililitrów.
Podczas zabiegu należy trzymać zlewkę, aby ułatwić nakłuwanie i pobieranie wymazu oraz uniknąć wypadków. Za pomocą pipety wyporowej wprowadzić określoną objętość leku o pożądanym stężeniu i postaci w postaci wirowej na powierzchni kuponu. Gdy powierzchnia kuponu wyschnie, zanurz suchy wacik w fiolce z dwoma mililitrami rozcieńczalnika.
Przycisnąć wacik do wnętrza fiolki, aby usunąć nadmiar rozpuszczalnika. Użyj równych, nakładających się na siebie pociągnięć z boku na bok, aby mocno wytrzeć powierzchnię kuponu jedną stroną mokrego wacika, aż całkowity obszar testowy o powierzchni 50 centymetrów kwadratowych zostanie wytarty. Użyj tej samej strony wacika, aby powtórzyć proces wycierania.
Przetrzyj dwukrotnie każdą z czterech krawędzi kuponu. Obróć kupon o 90 stopni i użyj drugiej strony wacika, obracając teraz kierunek wycierania o 90 stopni. Powtórz czyszczenie po tej stronie wacika w ten sam sposób, upewniając się, że dwukrotnie wytarłeś wszystkie cztery krawędzie kuponu.
Po wytarciu powierzchni użyj nożyczek, aby przeciąć główkę wacika w fiolce z rozpuszczalnikiem. Następnie powtórz całą procedurę pobierania wymazu za pomocą drugiego wacika, obracając kupon o 90 stopni w tym samym kierunku, który został wcześniej wybrany. Następnie należy poddać sonikacji fiolki zawierającej dwie główki wacika przez pięć minut.
Następnie wirować fiolkę przez 10 sekund. Na koniec przenieś roztwór do fiolki HPLC i oznacz go jako roztwór roboczy. Aby odzyskać próbkę, należy przygotować roztwory kontrolne, mieszając 200 mikrolitrów każdego roztworu odciekowego lub próbki z 1 800 mikrolitrami rozcieńczalnika.
Użyj tych roztworów, aby uruchomić chromatografię zgodnie z protokołem tekstowym. Obliczyć odzysk roztworu roboczego wacika na podstawie względnej powierzchni pod pikami roztworów roboczych i kontrolnych. Powtórz ten proces dla trzech kuponów, aby obliczyć średni odzysk i względne odchylenie standardowe.
Zanim kupony zostały wyczyszczone, wyniki odzyskiwania dla różnych poziomów skoków były niespójne, niezależnie od aktywnego składnika farmaceutycznego lub współczynnika substancji pomocniczej API, różnych analityków, a nawet innego dnia dla tego samego analityka. Większość wyników odzysku charakteryzowała się wysokim względnym odchyleniem standardowym. Zaobserwowana zmienność odzysku nie została wyeliminowana po dostosowaniu kilku różnych parametrów, w tym techniki pobierania wymazówki, rozcieńczalnika, rozpuszczalnika do wzbogacania, pH kolca i rozcieńczalnika, techniki nakłuwania i techniki ekstrakcji.
Różnica między indywidualnym odzyskiem na każdej powierzchni kuponu a średnim odzyskiem pokazuje, że średni odzysk różni się w zależności od powierzchni kuponu, dlatego jest bardzo prawdopodobne, że obserwowana zmienność wynika z różnic między powierzchniami kuponów. Po wykonaniu czyszczenia kuponów opisanych w tym protokole, wyniki odzyskiwania były powtarzalne z jednej próby na drugą, z minimalną różnicą w odzyskiwaniu między kuponami. Przeprowadzone tutaj czyszczenie kuponowe spowodowało, że odzysk był wyższy niż 90%Ponadto względne wartości odchylenia standardowego dla każdego poziomu skoku były dopuszczalne i mniejsze niż wyniki uzyskane przed czyszczeniem.
Po opanowaniu czyszczenie kuponów można wykonać w mniej niż 30 minut, jeśli zostanie wykonane prawidłowo. Próbując wykonać tę procedurę, ważne jest, aby pamiętać, jak prawidłowo skakać i odzyskiwać bez utraty interesującej analizy. Po obejrzeniu tego filmu powinieneś dobrze zrozumieć, jak prawidłowo czyścić powierzchnie ze stali nierdzewnej, aby uzyskać wysoki i powtarzalny odzysk pozostałości.
Po jej opracowaniu technika ta utorowała drogę naukowcom z branży farmaceutycznej do dostarczania wiarygodnych danych dotyczących czyszczenia procesów produkcyjnych.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych
Przegląd
Niniejsze badanie podejmuje problematykę weryfikacji czystości z pozostałości farmaceutycznych na kuponach ze stali nierdzewnej. Przedstawiono w nim zwalidowany protokół pozwalający na uzyskanie wysokiego i powtarzalnego odzysku pozostałości.
Kluczowe elementy badania
Dziedzina nauki
- Weryfikacja czyszczenia w przemyśle farmaceutycznym
- Opracowywanie metod analitycznych
- Techniki czyszczenia powierzchni
Wstęp
- Weryfikacja czystości ma kluczowe znaczenie w przemyśle farmaceutycznym.
- Niespójne procedury czyszczenia prowadzą do zmiennych wskaźników odzysku.
- Do walidacji powszechnie stosuje się próbki ze stali nierdzewnej.
- Właściwe metody czyszczenia są niezbędne dla uzyskania dokładnych wyników analitycznych.
Cel badania
- Ustanowienie niezawodnego protokołu czyszczenia kuponów ze stali nierdzewnej.
- Poprawa odzysku pozostałości farmaceutycznych.
- Rozwiązanie problemów związanych z błędami w procesach weryfikacji czyszczenia.
Zastosowane metody
- Przygotowanie roztworów wzorcowych leków w wybranym rozcieńczalniku.
- Obliczenie limitów czystości dla konkretnych leków.
- Płukanie kuponów ze stali nierdzewnej wodą.
- Przecieranie powierzchni ściereczką przez 10 do 15 sekund.
- Powtórne płukanie i przecieranie metanolem w celu usunięcia pozostałości.
Główne wyniki
- Opisana metoda skutecznie oczyszcza powierzchnie ze stali nierdzewnej.
- Osiągnięto wysoką i powtarzalną odzyskowalność pozostałości farmaceutycznych.
- Protokół odnosi się do kluczowych kwestii w weryfikacji czyszczenia.
- Poprawiono zrozumienie procesów czyszczenia w kontekście farmaceutycznym.
Wnioski
- Wdrożenie prawidłowego protokołu czyszczenia zwiększa stopień odzysku.
- Niniejsze badanie stanowi podstawę dla przyszłych badań weryfikacyjnych czyszczenia.
- Właściwe metody czyszczenia są kluczowe dla walidacji metod analitycznych.
Najczęściej zadawane pytania
Znaczenie dla przemysłu
Niespójna weryfikacja czyszczenia wynikająca ze zmiennej odzyskiwalności pozostałości z powierzchni stali nierdzewnej stanowi istotne ryzyko w produkcji farmaceutycznej, co może prowadzić do wyników fałszywie ujemnych w walidacji czyszczenia i naruszenia bezpieczeństwa produktów. Niniejsze badanie wskazuje niewłaściwe czyszczenie powierzchni jako główne źródło zmienności i przedstawia zestandaryzowany protokół czyszczenia w miejscu (CIP), który zapewnia wysoką (>90%) i powtarzalną odzyskiwalność w przypadku małych cząsteczek oraz dużych biomolekuł o masie do 50 000 Da. Dzięki ustanowieniu niezawodnej procedury czyszczenia kuponów analitycznych, metoda ta umożliwia dokładną ocenę procesów czyszczenia, co pozwala na podejmowanie decyzji opartych na danych w zakresie sanacji sprzętu i zmniejsza ryzyko zanieczyszczeń przenoszonych między partiami.
Strategiczne zastosowania w badaniach i rozwoju biofarmaceutycznym
Wczesne etapy odkrywania i walidacja celu
- Wartość naukowa: Zapewnia, że dane dotyczące odzyskiwania pozostałości odzwierciedlają rzeczywistą obecność analitycznego związku, a nie zmienność indukowaną przez powierzchnię, co wspiera dokładną interpretację zachowania związku we wczesnej fazie screeningu.
- Wartość operacyjna: Zapewnia powtarzalny etap przygotowania kupona, który minimalizuje zmienność między analitykami oraz w obrębie jednego dnia w pomiarach odzyskiwania pozostałości.
Przesiewanie i opracowywanie testów
- Wartość naukowa: Umożliwia spójny odzysk zarówno leków małocząsteczkowych (<1,000 Da), jak i dużych biomolekuł (do 50,000 Da), co pozwala na jednolite zastosowanie w różnych kampaniach przesiewowych różnych modalności.
- Wartość operacyjna: Zapewnia niskie względne odchylenie standardowe (Srel ≤4%) po czyszczeniu CIP, gwarantując precyzję i niezawodność analizy pozostałości w badaniach wysokoprzepustowych.
Badania translacyjne i przedkliniczne
- Wartość naukowa: Wspiera translację wyników analitycznych z etapu odkryć do fazy przedklinicznej, dostarczając zestandaryzowaną metodę przygotowania powierzchni, która ogranicza błędne przypisywanie różnic w odzysku czynników sformułowaniom lub czynnikom biologicznym.
- Wartość operacyjna: Ułatwia porównywalność danych z weryfikacji czystości między różnymi badaniami dzięki dobrze zdefiniowanej, powtarzalnej procedurze czyszczenia kuponów.
Integracja potoku i przepływu pracy
Metoda ta integruje się z procesem odkrywania i rozwoju jako kluczowy etap wstępnego przygotowania do analiz weryfikacyjnych czystości, umiejscowiony po etapie nanoszenia związków a przed odzyskiwaniem za pomocą wymazów i analizą chromatograficzną, co zapewnia, że zmierzone poziomy odzysku odzwierciedlają rzeczywiste poziomy pozostałości, a nie artefakty wynikające z niewystarczającego oczyszczenia powierzchni.
- Biologia odkrywcza: Eliminuje szumy związane z powierzchnią w danych o odzyskiwaniu, co pozwala badaczom skupić się na interpretacji rzeczywistej lepkości związków lub efektów formulacji podczas wczesnego etapu rozwoju.
- Screening: Zapewnia gotowość do analizy poprzez dostarczenie spójnych powierzchni o wysokim odzyskiwaniu, co umożliwia niezawodną ocenę związków o różnych właściwościach fizykochemicznych.
- Analityka: Generuje ilościowe pomiary odzyskiwania o niskiej zmienności (Srel ≤4%), co pozwala na dokładne porównanie warunków czyszczenia i wpływu formulacji.
- Badania translacyjne: Utrzymuje ciągłość danych weryfikacji czyszczenia od wczesnego etapu rozwoju po etapy przedkliniczne poprzez standaryzację kluczowej zmiennej – czystości powierzchni – w wielu badaniach.
- Ponowne wykorzystanie w przedsiębiorstwie: Ustanawia powtarzalną, znormalizowaną procedurę przygotowania próbek ze stali nierdzewnej, która może być przyjęta w wielu laboratoriach i projektach, ograniczając rozbieżności metodologiczne i poprawiając integralność danych.
Wpływ operacyjny i organizacyjny
- Wartość naukowa: Zwiększa pewność prognostyczną weryfikacji czystości poprzez odróżnienie rzeczywistych poziomów pozostałości od zmienności indukowanej przez powierzchnię, co redukuje niejednoznaczność mechaniczną w ocenie procesu czyszczenia.
- Wartość operacyjna: Poprawia standaryzację i powtarzalność analiz weryfikacji czystości dzięki ściśle zdefiniowanej procedurze CIP opartej na sonikacji, która minimalizuje zmienność zależną od operatora.
- Wartość strategiczna: Wspiera podejmowanie lepszych decyzji typu go/no-go w opracowywaniu formulacji i procesów poprzez dostarczanie wiarygodnych danych o czystości, redukując tym samym ryzyko biologiczne i ryzyko kontaminacji na późniejszych etapach.
- Wpływ na portfolio: Umożliwia priorytetyzację kandydatów na leki i procesów produkcyjnych z uwzględnieniem ryzyka, w oparciu o uargumentowane wyniki weryfikacji czystości o niskiej zmienności.
Kwestie implementacyjne
- Wymaga przeszkolenia w zakresie prawidłowej techniki wymazu, czasu sonikacji oraz postępowania z roztworami, aby zapewnić spójność etapów czyszczenia i odzyskiwania.
- Zależy od dostępu do wody klasy HPLC, myjek ultradźwiękowych, zasadowych i kwasowych roztworów detergentów oraz pipet wypierających w celu dokładnego nanoszenia próbek.
- Wymaga standaryzacji czasu czyszczenia, stężeń roztworów i wzorów wymazów pomiędzy zespołami, aby zachować powtarzalność w różnych laboratoriach i zmianach.
- Wiąże się z koniecznością dostosowania protokołu przy zastosowaniu go do różnych geometrii lub materiałów próbek, choć metoda została zwalidowana dla powierzchni ze stali nierdzewnej stosowanych w walidacji analitycznej.
- Ograniczenia praktyczne obejmują konieczność ostrożnego obchodzenia się z próbkami, aby uniknąć ponownego zanieczyszczenia po czyszczeniu, oraz znaczenie całkowitego wysuszenia próbek przed nanoszeniem substancji, aby zapobiec efektom rozcieńczenia.
