Name: Egzamin smakowy: krótki i zatwierdzony test (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-08-17T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 10 s
Description: Poznaj krótki test smakowy do badań biomedycznych z oceną jamy ustnej i analizą genotypu receptora TAS2R38. Ta metoda pozwala mierzyć odpowiedzi smakowe u ludzi i ma zastosowanie w diagnostyce przewlekłego zapalenia zatok.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Nagrody od National Institutes of Health wsparły te badania (R01DC013588 do NAC, R21DC013886 do NAC i DRR, oraz NIDCD Administrative Research Supplement to Promote Emergence of Clinician-Scientists in Chemosensory Research do JED). Zebraliśmy dane genotypowe ze sprzętu zakupionego częściowo ze środków PZH od OD018125.

Protokół ten został zatwierdzony przez Komisję Bioetyczną Uniwersytetu Pensylwanijskiego. Z badania wykluczono osoby poniżej 18. roku życia oraz kobiety w ciąży.
1. Ocena jamy ustnej: ocena stanu chorobowego i identyfikacja brodawek
<ol>
	<li>Poproś badanego o otwarcie ust.</li>
	<li>Używając źródła światła, takiego jak latarka penlight lub czołówka, oświetl jamę ustną i zbadaj siedem obszarów tej okolicy (język, dno jamy ustnej, błonę śluzową policzków, błonę śluzową warg, dziąsła, podniebienie twarde i trójkąt zazębowy).
	<ol>
		<li>Obejrzyj powierzchnię grzbietową języka. Poproś badanego o uniesienie języka, a następnie zbadaj powierzchnię brzuszną języka oraz dno jamy ustnej, upewniając się, że badanie obejmuje obszar za zębami trzonowymi.</li>
		<li>Używając szpatułki do języka, odsunie policzek badanego na bok, aby obejrzeć błonę śluzową policzków oraz boczne dziąsła obustronnie wokół górnych i dolnych zębów.</li>
		<li>Rozszerz badanie w kierunku przednim, unosząc górną i dolną warga, aby obejrzeć powierzchnie błony śluzowej warg oraz przednie dziąsła.</li>
		<li>Na koniec obejrzyj podniebienie twarde i trójkąt zazębowy.</li>
		<li>Zanotuj obecność zmian, otarć, mas lub oznak stanu zapalnego.</li>
		<li>Ponownie poproś badanego o otwarcie ust i wysunięcie języka.</li>
		<li>Użyj źródła światła, aby obejrzeć powierzchnię grzbietową języka.</li>
		<li>Określ obecność lub brak FP, np. gładką powierzchnię języka.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Zapisz wyniki badania jamy ustnej przed przystąpieniem do testów smaku. Jeśli badacze przeprowadzają ten test smaku w kontekście medycznym, nieoczekiwane znaleziska powinny stać się podstawą do dalszej diagnostyki.</li>
</ol>
2. Psychofizyczne testy smaku
UWAGA: Zasoby i opisy dotyczące psychofizycznych testów smakowych, które następują poniżej, są również dostępne na następującej stronie internetowej: https://osf.io/hn87s/.
<ol>
	<li>Przygotowanie substancji smakowych
	<ol>
		<li>Przygotować roztwory zgodnie z poniższymi instrukcjami. Każdy roztwór należy przygotować w kolbie miarowej, aby zapewnić precyzję stężeń do ± 0.0002 M. Próbki rozpuszczać w wodzie ultrapure. Dobór związków należy dostosować do celów badawczych. Związki wymienione tutaj stanowią jedynie przykład.
		<ol>
			<li>Benzoesan denatonium (gorzki): przygotować roztwór stokowy benzoesanu denatonium o stężeniu 4.99 x 10-3 M, rozpuszczając 2.228 g benzoesanu denatonium w 1 L wody. Do kolby miarowej o pojemności 500 mL dodać 180 µL tego roztworu stokowego. Dopełnić wodą do objętości 500 mL, otrzymując roztwór o stężeniu końcowym 1.8 µM.</li>
			<li>PTC (gorzki): Odważyć 0.0135 g PTC do kolby miarowej o pojemności 500 mL. Dopełnić wodą do objętości 500 mL. PTC jest trudny do rozpuszczenia, dlatego należy umieścić w kolbie mieszadło magnetyczne i podgrzać roztwór do 70 °C na płycie grzejnej. Mieszać roztwór za pomocą mieszadła do całkowitego rozpuszczenia substancji (~15 min). W ten sposób otrzymuje się roztwór o stężeniu końcowym 180 µM.</li>
			<li>Chinina (gorzka): Odważyć 0.011 g dichlorowodoreczku chininy dwuwodnego do kolby miarowej o pojemności 500 mL. Dopełnić wodą do objętości 500 mL, otrzymując roztwór o stężeniu końcowym 56 µM.</li>
			<li>Chlorek sodu (słony): Odważyć 7.5 g chlorku sodu do kolby miarowej o pojemności 500 mL. Dopełnić wodą do objętości 500 mL, otrzymując roztwór o stężeniu końcowym 0.25 M.</li>
			<li>Sacharoza (słodka): Odważyć 60 g sacharozy do kolby miarowej o pojemności 500 mL. Dopełnić wodą do objętości 500 mL, otrzymując roztwór o stężeniu końcowym 0.35 M.</li>
		</ol>
		</li>
		<li>Roztwory smakowe przechowywać w temperaturze 4 °C. Niektóre powszechnie stosowane związki smakowe są światłoczułe, dlatego badacze powinni owinąć je folią lub innymi materiałami, aby ograniczyć ich ekspozycję na światło.</li>
		<li>Aby zidentyfikować typowe błędy w przygotowaniu roztworów, należy napełnić jeden kubek degustacyjny starym roztworem, a drugi nowym. Spróbować każdego z nich, aby zweryfikować, czy mają taką samą intensywność.</li>
		<li>Jako roztwór kontrolny należy zastosować wodę, prezentowaną w pierwszej kolejności, aby zweryfikować, czy badani rozumieją procedurę testową. Każdemu badanemu należy podać każdy smak oraz smak kontrolny dwukrotnie, dbając o to, aby ten sam smak nie pojawiał się bezpośrednio po sobie. Na przykład, aby przetestować pięć unikalnych substancji smakowych, w kwestionariuszu należy uwzględnić dwanaście próbek (patrz 2.2): pięć substancji smakowych i wodę, każdą z nich dwukrotnie. Odmierzyć 5 mL wody do poszczególnych szklanych fiolek scyntylacyjnych. Nakrętki fiolek oznaczyć ciemnoniebieską naklejką z numerem 1.</li>
		<li>Powtórzyć ten proces dla każdej substancji smakowej. Nakrętki fiolek oznaczyć okrągłą naklejką zgodnie z kolejnością prezentacji i ustalonym kodem kolorystycznym (przykład szczegółowo opisany poniżej); etykiety fiolek muszą odpowiadać etykietom w kwestionariuszu smakowym (patrz 2.2). 
		Woda (ciemnoniebieski) 
		Chinina (jasnoniebieski) 
		NaCl (zielony) 
		PTC (żółty) 
		Sacharoza (pomarańczowy) 
		Benzoesan denatonium (czerwony) 
		NaCl (ciemnoniebieski) 
		Benzoesan denatonium (jasnoniebieski) 
		Woda (zielony) 
		Chinina (żółty) 
		Sacharoza (pomarańczowy) 
		PTC (czerwony)</li>
		<li>Zapakować próbki, umieszczając je w dwóch pudełkach: próbki 1–6 w pudełku oznaczonym jako „pudełko A” i próbki 7–12 w „pudełku B” (Rysunek 1); możliwe są również inne strategie pakowania.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
<img alt="Układ eksperymentu percepcji smaku z butelkami do degustacji, arkuszem instrukcji i tabelą ocen." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56705/56705fig1v2.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Rysunek 1"> 
Rysunek 1: Zestaw do badania smaku. Badani wykorzystują zestaw do oceny intensywności i jakości smaku różnych substancji smakowych oznaczonych kodem kolorystycznym. Pudełko A zawiera próbki 1–6, pudełko B zawiera próbki 7–12. <a href="/files/ftp_upload/56705/56705fig1v2large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>
<ol start="2">
	<li>Kwestionariusz smakowy
	<ol>
		<li>Przygotuj kwestionariusz smakowy, wykorzystując skalę kategoriową do oceny intensywności smaku oraz metodę wymuszonego wyboru w celu zidentyfikowania rodzaju smaku dla każdego substantu smakowego (Rycina 2).</li>
		<li>Umieść okrągłe etykiety o odpowiednim kolorze i numerze obok właściwej próbki w kwestionariuszu smakowym (patrz 2.1.6).</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
<img alt="Wykres intensywności smaku; ocena sensoryczna; słony, kwaśny, gorzki, słodki; schemat skali z etykietami." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56705/56705fig2.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Rysunek 2"> 
Rysunek 2: Wpis w kwestionariuszu smaku, obejmujący skalę kategorii do oceny intensywności oraz wymuszony wybór odpowiedzi w zakresie jakości substancji smakowej. Kwestionariusz smaku będzie zawierał jeden wpis dla każdej z testowanych substancji smakowych oznaczonych kolorami. <a href="/files/ftp_upload/56705/56705fig2large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>
<ol start="3">
	<li>Przeprowadzenie testu smakowego
	<ol>
		<li>Przekazać badanym pudełko A, pudełko B, butelkę wody, pusty kubek, długopis oraz papierowy kwestionariusz smakowy z polami dla 12 próbek. Przez cały czas trwania danego badania należy używać wody butelkowanej tej samej marki. Jako alternatywę dla kwestionariusza papierowego można przenieść materiały do oprogramowania do ankiet internetowych i przeprowadzić badanie za pomocą tabletu lub komputera stacjonarnego/laptopa. Przykładowy szablon jest dostępny pod adresem https://osf.io/hn87s/.</li>
		<li>Poinstruować badanych, że zostaną poproszeni o ocenę zarówno intensywności, jak i jakości (np. słony, kwaśny, gorzki, słodki lub brak smaku) każdego substancji smakowej. Poinformować również badanych, że mogą nie odczuć wszystkich jakości.</li>
		<li>Wyjaśnić procedurę testową w następujący sposób: Proszę dwa razy wypłukać usta wodą i wypluć ją do dostarczonego kubka. Proszę wlać całą próbkę 1 do ust i potrzymać ją przez 5 sekund, a następnie wypluć roztwór do kubka. Proszę nie płukać gardła ani nie połykać roztworu. Proszę zakreślić jedną z 13 pionowych linii odpowiadającą intensywności próbki, w skali od 0 do 12, od „brak intensywności” do „skrajnie intensywne”, i wybrać jedną jakość opisującą smak. Następnie proszę dwa razy wypłukać usta wodą przed przejściem do następnej próbki.</li>
		<li>Obserwować badanego podczas smakowania i oceniania próbki 1 (woda). Jeśli ocena będzie odbiegać od „brak intensywności” i „brak smaku”, należy powtórzyć instrukcje do kwestionariusza przed kontynuowaniem testu.</li>
		<li>Przejrzeć wypełniony kwestionariusz pod kątem kompletności.</li>
		<li>Punktować oceny intensywności w skali od 0 do 12 na podstawie zakreślonych przez badanych pionowych linii. Obliczyć średnią z dwóch ocen intensywności dla każdej substancji smakowej; wartość ta zostanie wykorzystana do analizy.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. Genotypowanie
<ol>
	<li>Pobrać ślinę od każdego badanego przy użyciu zestawu do pobierania DNA ze śliny.</li>
	<li>Oczyścić genomowe DNA z próbki zgodnie z instrukcjami producenta.</li>
	<li>Określić genotyp TAS2R38 przy użyciu testów genotypowania SNP (rs713598,rs1726866, rs10246939)40.</li>
	<li>Określić genotyp TAS2R19 przy użyciu testów genotypowania SNP (rs10772420)36.</li>
</ol>
4. Walidacja genotyp-fenotyp
<ol>
	<li>Przejrzyj dostępne zbiorcze dane kontrolne od ponad 800 osób poddanych genotypowaniu w obrębie genów TAS2R38 (rs713598, rs1726866, rs10246939) oraz TAS2R19 (rs10772420) na następującej stronie internetowej: https://carayata.shinyapps.io/TasteBoxplots/.</li>
	<li>Na podstawie genotypu TAS2R38 badanego osobnika porównaj jego psychofizyczną odpowiedź smakową na gorzki związek PTC z normami dla osób o tym samym genotypie. Odpowiedzi powinny być zgodne; jednak w rzadkich przypadkach genotyp TAS2R38 nie przewiduje w pełni wyników sensorycznych dla PTC35.</li>
	<li>W przypadku wystąpienia znacznych rozbieżności w odpowiedziach, porównaj odpowiedź smakową badanego na chininę z normami dla osób o tym samym genotypie TAS2R19. Intensywność odczuwania chininy i genotyp powinny być zgodne36. Jeżeli wszystkie wyniki smakowe nie będą odpowiadać genotypowi, możliwe jest, że badany (a) nie rozumie zadania, (b) podaje fałszywe oceny lub symuluje, lub (c) wystąpił błąd w gromadzeniu danych po stronie badacza.</li>
	<li>Zidentyfikuj wartości odstające w danych i ewentualnie wyklucz je z analizy (Rysunek 3). Zgodność wyników sensorycznych z obiektywnym genotypowaniem potwierdza wiarygodność procedury testów psychofizycznych.</li>
</ol>

<ol><li>Cowart, B. J., Young, I. M., Feldman, R. S., Lowry, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+disorders+of+smell+and+taste%5BTitle%5D)+AND+%22Occupational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Clinical disorders of smell and taste.</a> Occupational Medicine. 12 (3), 465-483 (1997).</li>
<li>Ackerman, B. H., Kasbekar, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disturbances+of+taste+and+smell+induced+by+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacotherapy%22%5BJournal%5D)">Disturbances of taste and smell induced by drugs.</a> Pharmacotherapy. 17 (3), 482-496 (1997).</li>
<li>Kveton, J. F., Bartoshuk, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+unilateral+chorda+tympani+damage+on+taste%5BTitle%5D)+AND+%22Laryngoscope%22%5BJournal%5D)">The effect of unilateral chorda tympani damage on taste.</a> Laryngoscope. 104, 25-29 (1994).</li>
<li>Fischer, R. A., Griffin, F. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/14249066">Pharmacogenetic aspects of gustation.</a> Drug Research. 14 (14), 673-686 (1964).</li>
<li>Joyce, C. R., Pan, L., Varonos, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Taste+sensitivity+may+be+used+to+predict+pharmacological+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Science%22%5BJournal%5D)">Taste sensitivity may be used to predict pharmacological effects.</a> Life Science. 7 (9), 533-537 (1968).</li>
<li>Adappa, N. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetics+of+the+taste+receptor+T2R38+correlates+with+chronic+rhinosinusitis+necessitating+surgical+intervention%5BTitle%5D)+AND+%22International+Forum+of+Allergy+%26+Rhinology%22%5BJournal%5D)">Genetics of the taste receptor T2R38 correlates with chronic rhinosinusitis necessitating surgical intervention.</a> International Forum of Allergy & Rhinology. , (2013).</li>
<li>Lipchock, S. V., Reed, D. R., Mennella, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relationship+between+bitter-taste+receptor+genotype+and+solid+medication+formulation+usage+among+young+children%3A+a+retrospective+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Relationship between bitter-taste receptor genotype and solid medication formulation usage among young children: a retrospective analysis.</a> Clinical Therapeutics. 34 (3), 728-733 (2012).</li>
<li>Bartoshuk, L. M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBartoshuk%2C+LM+%22Handbook+of+perception%3A+Tasting+and+smelling%22">Handbook of perception: Tasting and smelling</a>. Carterette, E. C., Friedman, M. P. , Academic Press. Vol. VIA 2-18 (1978).</li>
<li>Coldwell, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gustation+assessment+using+the+NIH+Toolbox%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">Gustation assessment using the NIH Toolbox.</a> Neurology. 80 (11 Suppl 3), S20-S24 (2013).</li>
<li>Mueller, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+assessment+of+gustatory+function+in+a+clinical+context+using+impregnated+%26%2334%3Btaste+strips%26%2334%5BTitle%5D)+AND+%22Rhinology%22%5BJournal%5D)">Quantitative assessment of gustatory function in a clinical context using impregnated &#34;taste strips&#34.</a> Rhinology. 41 (1), 2-6 (2003).</li>
<li>Reed, D. R., Tanaka, T., McDaniel, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diverse+tastes%3A+Genetics+of+sweet+and+bitter+perception%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Behavior%22%5BJournal%5D)">Diverse tastes: Genetics of sweet and bitter perception.</a> Physiological Behavior. 88 (3), 215-226 (2006).</li>
<li>Miller, I. J. Jr, Reedy, F. E. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variations+in+human+taste+bud+density+and+taste+intensity+perception%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Behavior%22%5BJournal%5D)">Variations in human taste bud density and taste intensity perception.</a> Physiological Behavior. 47 (6), 1213-1219 (1990).</li>
<li>Shahbake, M., Hutchinson, I., Laing, D. G., Jinks, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+quantitative+assessment+of+fungiform+papillae+density+in+the+human+tongue%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Rapid quantitative assessment of fungiform papillae density in the human tongue.</a> Brain Research. 1052 (2), 196-201 (2005).</li>
<li>Spielman, A. I., Pepino, M. Y., Feldman, R., Brand, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technique+to+collect+fungiform+%28taste%29+papillae+from+human+tongue%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Technique to collect fungiform (taste) papillae from human tongue.</a> Journal of Visualized Experiments. 18 (42), 2201(2010).</li>
<li>Nuessle, T. M., Garneau, N. L., Sloan, M. M., Santorico, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Denver+papillae+protocol+for+objective+analysis+of+fungiform+papillae%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Denver papillae protocol for objective analysis of fungiform papillae.</a> Journal of Visualized Experiments. (100), e52860(2015).</li>
<li>Sanyal, S., O'Brien, S. M., Hayes, J. E., Feeney, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TongueSim%3A+development+of+an+automated+method+for+rapid+assessment+of+fungiform+papillae+density+for+taste+research%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Senses%22%5BJournal%5D)">TongueSim: development of an automated method for rapid assessment of fungiform papillae density for taste research.</a> Chemical Senses. 41 (4), 357-365 (2016).</li>
<li>Spielman, A. I., Brand, J. G., Buischi, Y., Bretz, W. A. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21623658">Resemblance of tongue anatomy in twins.</a> Twin Research and Human Genetics. 14 (3), 277-282 (2011).</li>
<li>Kalmus, H., Smith, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+antimode+and+lines+of+optimal+separation+in+a+genetically+determined+bimodal+distribution%2C+with+particular+reference+to+phenylthiocarbamide+sensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Human+Genetics%22%5BJournal%5D)">The antimode and lines of optimal separation in a genetically determined bimodal distribution, with particular reference to phenylthiocarbamide sensitivity.</a> Annals of Human Genetics. 29 (2), 127-138 (1965).</li>
<li>Pearson, J., Finegold, M. J., Budzilovich, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+tongue+and+taste+in+familial+dysautonomia%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">The tongue and taste in familial dysautonomia.</a> Pediatrics. 45 (5), 739-745 (1970).</li>
<li>Fukutake, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Late-onset+hereditary+ataxia+with+global+thermoanalgesia+and+absence+of+fungiform+papillae+on+the+tongue+in+a+Japanese+family%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">Late-onset hereditary ataxia with global thermoanalgesia and absence of fungiform papillae on the tongue in a Japanese family.</a> Brain. 119 (Pt 3), 1011-1021 (1996).</li>
<li>Kinnamon, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Taste+receptor+signalling+-+from+tongues+to+lungs%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+physiologica%22%5BJournal%5D)">Taste receptor signalling - from tongues to lungs.</a> Acta physiologica. 204 (2), Oxford, England. 158-168 (2012).</li>
<li>Lewandowski, B. C., Sukumaran, S. K., Margolskee, R. F., Bachmanov, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amiloride-insensitive+salt+taste+is+mediated+by+two+populations+of+type+iii+taste+cells+with+distinct+transduction+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Amiloride-insensitive salt taste is mediated by two populations of type iii taste cells with distinct transduction mechanisms.</a> Journal of Neuroscience. 36 (6), 1942-1953 (2016).</li>
<li>Vandenbeuch, A., Clapp, T. R., Kinnamon, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amiloride-sensitive+channels+in+type+I+fungiform+taste+cells+in+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Amiloride-sensitive channels in type I fungiform taste cells in mouse.</a> BMC Neuroscience. 9, 1(2008).</li>
<li>Margolskee, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+biochemistry+and+molecular+biology+of+taste+transduction%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinions+in+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">The biochemistry and molecular biology of taste transduction.</a> Current Opinions in Neurobiology. 3 (4), 526-531 (1993).</li>
<li>Meyerhof, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+receptive+ranges+of+human+TAS2R+bitter+taste+receptors%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Senses%22%5BJournal%5D)">The molecular receptive ranges of human TAS2R bitter taste receptors.</a> Chemical Senses. 35 (2), 157-170 (2010).</li>
<li>Yee, K. K., Sukumaran, S. K., Kotha, R., Gilbertson, T. A., Margolskee, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucose+transporters+and+ATP-gated+K%2B+%28KATP%29+metabolic+sensors+are+present+in+type+1+taste+receptor+3+%28T1r3%29-expressing+taste+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+USA%22%5BJournal%5D)">Glucose transporters and ATP-gated K+ (KATP) metabolic sensors are present in type 1 taste receptor 3 (T1r3)-expressing taste cells.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences USA. , (2011).</li>
<li>Tordoff, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calcium%3A+taste%2C+intake+and+appetite%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Review%22%5BJournal%5D)">Calcium: taste, intake and appetite.</a> Physiological Review. 81, 1567-1597 (2001).</li>
<li>Reed, D. R., Xia, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+fatty+acid+perception+and+genetics%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Nutrition%22%5BJournal%5D)">Recent advances in fatty acid perception and genetics.</a> Advances in Nutrition. 6 (3), 353S-360S (2015).</li>
<li>Blekhman, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Host+genetic+variation+impacts+microbiome+composition+across+human+body+sites%5BTitle%5D)+AND+%22Genome+Biology%22%5BJournal%5D)">Host genetic variation impacts microbiome composition across human body sites.</a> Genome Biology. 16, 191(2015).</li>
<li>Hoon, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Putative+mammalian+taste+receptors%3A+a+class+of+taste-specific+GPCRs+with+distinct+topographic+selectivity%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Putative mammalian taste receptors: a class of taste-specific GPCRs with distinct topographic selectivity.</a> Cell. 96 (4), 541-551 (1999).</li>
<li>Laffitte, A., Neiers, F., Briand, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+roles+of+the+sweet+taste+receptor+in+oral+and+extraoral+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Clinical+Nutrition+and+Metabolic%22%5BJournal%5D)">Functional roles of the sweet taste receptor in oral and extraoral tissues.</a> Current Opinion in Clinical Nutrition and Metabolic. 17 (4), 379-385 (2014).</li>
<li>An, S. S., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3423830/">Tas2r activation promotes airway smooth muscle relaxation despite beta2-adrenergic receptor tachyphylaxis.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular. , (2012).</li>
<li>Fox, A. L. The relationship between chemical composition and taste. Science. 74, 607(1931).</li>
<li>Fox, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relationship+between+chemical+constitution+and+taste%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+USA%22%5BJournal%5D)">The relationship between chemical constitution and taste.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences USA. 18, 115-120 (1932).</li>
<li>Bufe, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+basis+of+individual+differences+in+phenylthiocarbamide+and+propylthiouracil+bitterness+perception%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biol.ogy%22%5BJournal%5D)">The molecular basis of individual differences in phenylthiocarbamide and propylthiouracil bitterness perception.</a> Current Biol.ogy. 15 (4), 322-327 (2005).</li>
<li>Reed, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+perception+of+quinine+taste+intensity+is+associated+with+common+genetic+variants+in+a+bitter+receptor+cluster+on+chromosome+12%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Molecular+Genetics%22%5BJournal%5D)">The perception of quinine taste intensity is associated with common genetic variants in a bitter receptor cluster on chromosome 12.</a> Human Molecular Genetics. 19 (21), 4278-4285 (2010).</li>
<li>Bobowski, N., Reed, D. R., Mennella, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variation+in+the+TAS2R31+bitter+taste+receptor+gene+relates+to+liking+for+the+nonnutritive+sweetener+Acesulfame-K+among+children+and+adults%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Reports%22%5BJournal%5D)">Variation in the TAS2R31 bitter taste receptor gene relates to liking for the nonnutritive sweetener Acesulfame-K among children and adults.</a> Science Reports. 6, 39135(2016).</li>
<li>Allen, A. L., McGeary, J. E., Knopik, V. S., Hayes, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bitterness+of+the+non-nutritive+sweetener+acesulfame+potassium+varies+with+polymorphisms+in+TAS2R9+and+TAS2R31%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Senses%22%5BJournal%5D)">Bitterness of the non-nutritive sweetener acesulfame potassium varies with polymorphisms in TAS2R9 and TAS2R31.</a> Chemical Senses. 38 (5), 379-389 (2013).</li>
<li>Roudnitzky, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genomic%2C+genetic%2C+and+functional+dissection+of+bitter+taste+responses+to+artificial+sweeteners%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Molecular+Genetics%22%5BJournal%5D)">Genomic, genetic, and functional dissection of bitter taste responses to artificial sweeteners.</a> Human Molecular Genetics. 20 (17), 3437-3449 (2011).</li>
<li>Guo, S. W., Reed, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+genetics+of+phenylthiocarbamide+perception%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+in+Human+Biology%22%5BJournal%5D)">The genetics of phenylthiocarbamide perception.</a> Annals in Human Biology. 28 (2), 111-142 (2001).</li>
<li>Bartoshuk, L. M., et al. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0950329302000770">Labeled scales (e.g., category, Likert, VAS) and invalid across-group comparisons: what we have learned from genetic variation in taste.</a> Food Quality Prefererences. 14 (2), 125-138 (2003).</li>
</ol>

NAC i DRR są współtwórcami w ramach recenzowanego patentu (Therapy and Diagnostics for Respiratory Infection 61/697,652, WO2013112865).

Znaczenie tej metody polega na tym, że wykorzystuje ona podejście multidyscyplinarne z cechami medycyny (egzamin ustny), psychologii eksperymentalnej (test smaku) i genetyki (etap walidacji). Informacje o smaku prawdopodobnie rozwiną się jako narzędzie diagnostyczne i prognosttyczne, ponieważ smak zapewnia wgląd w funkcję białek w innych częściach organizmu. Z punktu widzenia psychologii eksperymentalnej, dodanie prostego egzaminu może zidentyfikować osoby, które nie są odpowiednie do badania normatywnych funkcji smaku. ...

Miary percepcji ludzkiego smaku mogą być zarówno częścią opieki medycznej, jak i celem badań biomedycznych, jednak smakowi poświęcono niewiele uwagi w porównaniu ze słuchem i wzrokiem (Tabela 1). Z medycznego punktu widzenia, kiedy klinicyści oceniają pacjentów skarżących się na utratę smaku, w większości przypadków rzeczywista utrata dotyczy węchu1, co doprowadziło do odrzucenia utraty smaku jako rzadkiej i często nieuzasadnionej dolegliwości. Zniekształcenia smaku (zaburzenia smaku) są częstsze i często wynikają z wtórnych skutków leków lub uszkodzenia nerwów obwodowych2,3, ale żadna z form nie ma skutecznego leczenia (innego niż odstawienie leku). Klinicyści ignorują również utratę smaku, ponieważ do tej pory miała ona niewielką wartość diagnostyczną lub prognostyczną. Jednak, mimo że pomiar smaku był zaściankiem, może teraz wejść do głównego nurtu medycyny wraz z odrodzeniem historycznego uznania, że smak może być narzędziem diagnostycznym lub prognostycznym4,5. Na przykład, percepcja goryczy może przewidywać funkcję immunologiczną6 lub gotowość pacjenta do przyjmowania leków7. Niemniej jednak badacze biomedyczni w dużej mierze zaniedbali smak. Ta nieuwaga może częściowo odzwierciedlać fakt, że wczesny postęp w zrozumieniu tego systemu sensorycznego ma swoje korzenie w psychologii eksperymentalnej8, dziedzinie, z którą osoby zajmujące się medycyną mogą być stosunkowo mało zaznajomione. Co więcej, ponowne zainteresowanie smakiem zapoczątkowało ustandaryzowane metody smaku9, które opierają się na wcześniejszych metodach10, które, choć kompleksowe, są długie i nieodpowiednie dla warunków klinicznych. Wreszcie, zaufanie do miar smaku może być słabe, ponieważ badani informują o własnych doświadczeniach i dotychczas brakowało walidacji ich obserwacji. Mamy nadzieję, że prosty środek, który badacze lub klinicyści mogą łatwo zastosować, zyska na popularności wśród obu składników. Tutaj opisujemy prosty protokół badania smaku, który składa się z trzech części: oceny jamy ustnej, testu smaku i etapu walidacji przy użyciu wrodzonego genotypu. Po pierwsze, przedstawiamy biologiczny kontekst dla tych procedur, które łączą proste praktyki w medycynie, pomiary sensoryczne z psychologii eksperymentalnej i walidację odpowiedzi za pomocą genotypu i genetyki.
Percepcja smaku zaczyna się w ustach, więc skuteczne badanie smaku musi zawierać krótką ocenę kliniczną oczywistych chorób jamy ustnej, zaczerwienienia, obrzęku i innych przebarwień. Jama ustna składa się z siedmiu podmiejsc: języka, dziąseł, dna jamy ustnej, błony śluzowej policzków, błony wargowej, podniebienia twardego i trygonu zatrzonowego. Wcześniejsze badania ludzkiego smaku koncentrowały się na zdrowych uczestnikach lub osobach z dobrze zdefiniowanymi chorobami, ale ponieważ testowanie smaku staje się rutyną w badaniach lekarskich, ważne jest, aby rejestrować stan jamy ustnej jako część procedury.
Język sam w sobie jest muskularną strukturą otoczoną błoną śluzową; na jego grzbietowej powierzchni znajdują się brodawki, małe wypukłe struktury, które nadają językowi unikalną teksturę i zawierają komórki receptorów smaku. Klasyfikujemy brodawki według ich kształtu: grzybowate, nitkowate, listowate i obwodowe. Brodawki grzybowate (FP) znajdują się przednio-bocznie na języku i są okrągłe, o kształcie grzyba11. Badacze opublikowali kilka przydatnych metod ilościowego określania FP i kierujemy czytelników do tych źródeł w celu zapoznania się z protokołami pomiarowymi12,13,14,15,16. Brodawki liściaste, w kształcie stron książki (folia), znajdują się wyłącznie na bocznej tylnej powierzchni języka11. Brodawki obwodowe, znajdujące się w bruździe końcowej podstawy języka, to duże struktury w kształcie kopuły otoczone ścianami błony śluzowej (łac. circum, "otaczać", + vallum, "ściana")11. Najliczniejsze brodawki, nitkowate, są długie i cienkie i nie zawierają receptorów smaku.
Ludzie różnią się anatomią języka. Chociaż źródła tej zmienności anatomicznej są nieznane, jest ona częściowo determinowana przez wrodzoną zmienność genetyczną, przy czym badacze zgłaszają 31% zgodności anatomii języka wśród bliźniąt dwujajowych i 60% zgodności wśród bliźniąt jednojajowych17. Gęstość brodawkowatych również różni się u ludzi i chociaż rzadko, co najmniej jedna choroba genetyczna (rodzinna dysautonomia) powoduje wrodzony brak brodawek smakowych18,19,20. Dlatego przed wykonaniem testów psychofizycznych pomocne jest potwierdzenie obecności FP w ramach krótkiej oceny i zwrócenie uwagi na względny rozmiar i kolor języka oraz dowody na chorobę jamy ustnej.
Brodawki smakowe zawierają komórki czuciowe, które po stymulacji inicjują odczuwanie smaku. Ludzie są w stanie wyczuć co najmniej pięć klas smaku: słony, kwaśny, gorzki, słodki i umami. Podczas gdy smaki słony, słodki i umami sygnalizują obecność cennych źródeł żywności zawierających odpowiednio chlorek sodu, glukozę i aminokwasy, gorycz i kwaskowatość sygnalizują obecność potencjalnych toksyn i kwasów pochodzących z bakteryjnego rozkładu żywności i wywołują zachowania awersyjne21. Słony i kwaśny smak jest transdukowany poprzez aktywację kanałów jonowych znajdujących się w niektórych typach komórek smakowych, chociaż zrozumienie transdukcji soli ewoluuje i może wymagać również komórek typu I22,23. Gorzki, słodki i umami powstają w wyniku aktywacji receptorów sprzężonych z białkiem G na komórkach smakowych typu II, z których każdy jest dostrojony do określonego smaku. Heterodimery podjednostek trzech konkretnych receptorów transdukują słodkie i umami, podczas gdy związki gorzkie aktywują grupę 25 różnych receptorów gorzkich24. Te gorzkie receptory mogą reagować na wiele gorzkich związków, a pojedynczy gorzki związek często stymuluje więcej niż jeden receptor25. Pomimo niedawnego poszerzenia wiedzy na temat molekularnych podstaw smaku, przed nami mogą być nowe szlaki26 oraz nowe odkrycia wykraczające poza tradycyjne pięć jakości smakowych (np. calcium27 lub sup acid28 percepcja).
Istnieją co najmniej dwa zaskakujące aspekty rodzin smakowych receptorów: geny kodujące te receptory mogą znacznie różnić się sekwencją DNA, a tym samym funkcjonować wśród ludzi, a wiele tkanek ciała wyraża te geny21,29,30,31. Te miejsca zewnątrzustne obejmują między innymi mózg, tarczycę, górne i dolne drogi oddechowe oraz przewód pokarmowy21,29,30,31. Chociaż receptory smaku w tych miejscach nie uczestniczą w percepcji smaku w tradycyjnym sensie, prawdopodobnie wyczuwają lokalne środowisko chemiczne29,32. Na przykład nabłonek rzęskowy górnych dróg oddechowych wyraża receptor goryczy T2R38 (Receptor Gorzkiego Smaku 38), który reaguje na związki chemiczne wytwarzane przez bakterie i wpływa na wrodzoną odpowiedź immunologiczną32, np. zwiększając klirens śluzowo-rzęskowy oraz poziom peptydów przeciwdrobnoustrojowych i tlenku azotu. Odkrycie to ma implikacje medyczne dla przewlekłego zapalenia zatok przynosowych, choroby przewlekłej infekcji bakteryjnej i zapalenia górnych dróg oddechowych i zatok przynosowych.
Szczególnie istotne dla opisywanego tutaj badania smaku jest to, że receptor gorzkiego smaku T2R38, kodowany przez gen TAS2R38, wykazuje zmienność genetyczną, a zatem zmienną wrażliwość smakową. Różnice percepcyjne dla gorzkiego związku fenylotiokarbamidu (PTC) zostały po raz pierwszy opisane przez chemika Arthura Foxa33; później związek ten został zidentyfikowany jako agonista receptora T2R3834. Różnice indywidualne wynikają z sekwencji DNA genu TAS2R38, który ma trzy polimorfizmy pojedynczego nukleotydu, z których każdy daje podstawienia aminokwasów (A49P, A262V i I296V; A: alanina, P: prolina, V: walina, I: izoleucyna). Powstają dwa powszechne haplotypy, PAV i AVI, przy czym osoby PAV/PAV są bardzo wrażliwe na PTC ("degustatorzy"), osoby AVI/AVI są stosunkowo niewrażliwe ("niedegustatorzy"), a heterozygotyczne osobniki AVI/PAV są bardziej zmienne pod względem wrażliwości35. Przykładów zmienności genetycznej wpływającej na gorzką percepcję jest więcej, np. receptor smaku T2R19, kodowany przez gen TAS2R19, podobnie wykazuje zmienność genetyczną i różną wrażliwość smakową na gorzki związek chininy36. Podobnie, zróżnicowanie TAS2R31 wpływa na postrzeganą goryczkę jednego ze słodzików o dużej mocy37,38,39.
Tutaj opisujemy szybką metodę charakteryzowania zmysłu smaku pacjenta, która opiera się na protokołach wysokiej wydajności w medycynie klinicznej, psychologii eksperymentalnej i genetyce.

<table><tbody><tr><td>Jednorazowa latarka diagnostyczna</td><td>Primacare</td><td>DL-9223</td><td></td></tr><tr><td>UltraLite Pro Latarka czołowa</td><td>Integra LifeSciences</td><td>AX2100BIF</td><td></td></tr><tr><td>System oczyszczania wody Millipore Q-Gard 2 EMB</td><td>Millipore</td><td>QGARD00D2</td><td></td></tr><tr><td>Benzoesan denatonu&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D5765</td><td></td></tr><tr><td>Fenylotiokarbamid</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P7629</td><td></td></tr><tr><td>Chlorowodorek chininy dwuwodny</td><td>Sigma Aldrich</td><td>Q1125</td><td></td></tr><tr><td>Chlorek sodu</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S1679</td><td></td></tr><tr><td>Sacharoza</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S0389</td><td></td></tr><tr><td>Fiolki scyntylacyjne szklane</td><td>Thomas Scientific</td><td>1230L59</td><td>Taki sam jak Wheaton nr katalogowy 986580</td></tr><tr><td>Oragene Odkryj zestaw do pobierania DNA OGR-500</td><td>DNA Genotek</td><td>OGR-500</td><td></td></tr><tr><td>prepIT L2P Protocol odczynniki</td><td>DNA Genotek</td><td>PT-L2P-5</td><td></td></tr><tr><td>rs713598 TaqMan SNP test genotypowania</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>C___8876467_10</td><td></td></tr><tr><td>rs1726866 Test genotypowania SNP /emTaqMan</td><td>ThermoFisher Test</td> genotypowania SNP ><<td>C___9506827_10<</td><td></td></tr><tr><td>/em>emTaqMan /em</td><td></td>>rs10772420 TaqMan SNP C___1317426_10 <td></td> ThermoFisher Scientific C___9506826_10<td></td></tr><tr><td><emrs10772420 /emTaqMan SNP</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

egzamin smakowy: krótki i zatwierdzony test

Taste Exam: A Brief and Validated Test

Rosnące znaczenie smaku w medycynie i badaniach biomedycznych oraz nowa wiedza na temat jego genetycznych podstaw, zmotywowały nas do uzupełnienia klasycznych metod testowania smaku na dwa sposoby. Po pierwsze, wyjaśniamy, jak przeprowadzić krótką ocenę jamy ustnej, w tym języka, aby upewnić się, że brodawki smakowe są obecne i odnotować oznaki odpowiedniej choroby. Po drugie, opieramy się na genetyce, aby zweryfikować dane z testów smaku, porównując doniesienia o odczuwanej intensywności goryczy i wrodzonych genotypach receptorów. Rozbieżność między obiektywnymi pomiarami genotypu a subiektywnymi raportami dotyczącymi doznań smakowych może zidentyfikować błędy w zbieraniu danych, rozproszenie uwagi osób lub osoby, które nie zrozumiały lub nie postępowały zgodnie z instrukcjami. Oczekujemy, że szybkie i wiarygodne testy smaku mogą przekonać badaczy i klinicystów do regularnej oceny smaku, dzięki czemu testowanie smaku będzie tak powszechne, jak badanie słuchu i wzroku. Wreszcie, ponieważ wiele tkanek ciała wyraża receptory smaku, reakcje smakowe mogą stanowić wskaźnik wrażliwości tkanek w innych częściach ciała, a tym samym służyć jako szybki test przyłóżkowy do kierowania diagnozą i narzędzie badawcze do oceny funkcji białka receptora smaku.

Wyniki testu smakowego zostały zgromadzone dla wszystkich ocenianych osób (n = 840) i przedstawiono je po rozdzieleniu według genotypu. Pełny zestaw danych jest dostępny pod adresem https://carayata.shinyapps.io/TasteBoxplots/ i może zostać przeanalizowany dla każdego ocenianego substancji smakowej oraz dla genotypów TAS2R38 i TAS2R19. Wyniki potwierdzają istnienie różnic w percepcji smaku PTC wśród osób pogrupowanych według genotypu receptora TAS2R38 (<strong c...

Ten protokół mierzy ludzkie reakcje smakowe i obejmuje krótką ocenę anatomiczną, krótki test smaku oraz metodę walidacji przy użyciu zgłoszonego przez badanego genotypu odczucia i receptora smaku.

Egzamin smakowy: krótki i zatwierdzony test

The emerging importance of taste in medicine and biomedical research, and new knowledge about its genetic underpinnings, has motivated us to supplement ...

Ta metoda może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania w dziedzinie medycyny i sensoryki dotyczące zmysłu smaku każdej osoby. Główną zaletą tej techniki jest jej zwięzłość i przydatność do badań biomedycznych. Implikacje tej techniki rozciągają się w kierunku diagnozy i leczenia przewlekłego zapalenia zatok nosa, ponieważ receptory smaku są częścią wrodzonego układu odpornościowego.Zademonstruję procedurę na naszym członku laboratorium, David i Lauren będą wytwarzać roztwory smakowe. Zacznij od poinstruowania badanego, aby otworzył usta. Użyj światła, aby oświetlić jamę ustną i zbadaj siedem podmiejsc tego obszaru.Tutaj język grzbietowy jest dobrze widoczny. Za pomocą depresora języka do wciśnięcia języka widoczne staje się tylne gardło. Następnie lateralizacja języka umożliwia odsłonięcie lewego trygonu zatrzonowego i błony śluzowej lewej policzka.Tutaj uwidocznione jest dziąsło przednie i błona śluzowa warg. Gdy język badanego jest unoszony, brzuszna powierzchnia języka staje się widoczna. A to pozwala na badanie dna jamy ustnej badanych.Język jest następnie ponownie lateralizowany w celu zbadania prawego trygonu zatrzonowego i prawej błony śluzowej policzka. I wreszcie uwidocznione jest podniebienie twarde i miękkie. Zwróć uwagę na zmiany chorobowe, otarcia i masy lub oznaki stanu zapalnego.Użyj źródła światła, aby uwidocznić grzbietową powierzchnię języka i zidentyfikować obecność lub brak brodawek grzybiczych lub gładkiej powierzchni języka. Na koniec spisz wyniki badania jamy ustnej przed przystąpieniem do badania smaku. Rozpocząć od przygotowania roztworów smakowych przy użyciu kolby miarowej dla każdego z nich, aby zapewnić precyzję stężeń.Rozpuść próbki za pomocą ultra czystej wody. Owiń wszelkie wrażliwe na światło roztwory folią, aby zmniejszyć ekspozycję na światło. Następnie przechowuj roztwory smakowe w temperaturze czterech stopni Celsjusza.Aby zidentyfikować typowe błędy w przygotowaniu roztworu, napełnij jedną filiżankę degustacyjną starym roztworem, a drugą nowym roztworem. Spróbuj każdego roztworu, aby sprawdzić, czy mają identyczną moc. Następnie oznacz nakrętki fiolek okrągłą naklejką zgodnie z kolejnością prezentacji i kodem koloru.W celu dopasowania etykiet fiolek do etykiet w kwestionariuszu smaku. Zapakuj próbki, umieszczając je w odpowiednich nośnikach. Następnie przygotuj kwestionariusz smaku, korzystając ze skali kategorii do oceny intensywności smaku i wymuszonego wyboru w celu określenia jakości smaku każdego degustatora.Na koniec umieść okrągłe etykiety o odpowiednim kolorze i numerze obok odpowiedniej próbki w kwestionariuszu smaku. Przekaż osobie badanej pudełko z próbkami, butelkę wody, pusty kubek, długopis i kwestionariusz smaku zawierający wpisy dla 12 próbek. Wyjaśnij procedurę testowania i poinformuj osobę, że zostanie poproszona o ocenę zarówno intensywności, jak i jakości każdego degustatora.Niech wiedzą, że mogą nie doświadczać wszystkich cech. Rozpocznij test, prosząc badanego o dwukrotne przepłukanie ust wodą i wyplucie jej do dołączonego kubka. Poproś ich, aby wlali całą próbkę pierwszej do ust i trzymali ją tam przez pięć sekund, zanim wyplują roztwór do kubka.Powiedz im, aby nie płukali gardła ani nie połykali roztworu. Następnie poinstruuj badanego, aby zakreślił jedną z 13 pionowych linii odpowiadających intensywności próbki. W skali od 0 do 12.Od zerowej intensywności do ekstremalnie intensywnej. I wybierz jedną jakość, aby opisać smak. Następnie poproś badanego, aby dwukrotnie przepłukał usta wodą przed przejściem do następnej próbki.Obserwuj temat degustacji i oceń próbkę pierwszej wody. Jeśli ocena nie odbiega od żadnej intensywności i smaku, powtórz instrukcje kwestionariusza przed dopuszczeniem do kontynuowania testu. Po spróbowaniu wszystkich próbek przejrzyj gotowy kwestionariusz pod kątem kompletności.Na koniec oceń oceny intensywności w skali od 0 do 12 od pionowych linii, które zakreślił badany. I uśrednij dwie oceny intensywności dla każdego degustatora do późniejszej analizy. Wyniki testu smaku potwierdzają istnienie różnic w percepcji smaku dla związku gorzkiego, fenylotiokarbamidu lub PTC wśród osób pogrupowanych według genotypu receptora TAS2R38.Oceny intensywności PTC różnią się znacząco w trzech genotypach. Motywacją do tego badania była próba oceny lub opracowania szybkiego badania w punkcie usługowym, które moglibyśmy przeprowadzić w klinice, które oceniłoby funkcję tego receptora, który naszym zdaniem odgrywa rolę w rozwoju przewlekłego zapalenia zatok. Chodzi o to, czy możemy użyć tego testu smaku, aby przewidzieć, którzy z naszych pacjentów są narażeni na wysokie ryzyko rozwoju zapalenia zatok, a co ważniejsze, którzy pacjenci są dobrymi kandydatami do operacji zatok, a którzy źle poradzą sobie z naszą operacją zatok.Staramy się więc wykorzystać ten test smaku do prognozowania choroby zatokowo-nosowej pacjenta. Po przejściu wszystkich testów smakowych potwierdziliśmy to poprzez genotypowanie pacjentów. Jak widać na rycinie trzecim, w większości przypadków genotyp pacjenta jest zgodny ze wzorcem jego fenotypu.Oznacza to, że im bardziej gorzko smakowały, miały tendencję do dominacji dla tego receptora. Istnieją jednak pewne wartości odstające. Pokazując, że istnieją funkcjonalne homozygoty, PAV / PAV, które powiedziały, że nie smakują PTC, a z drugiej strony były pewne niefunkcjonalne osoby AVI / AVI, które smakowały PTC z goryczą.Oznacza to, że niezależnie od tego, jaki test smakowy opracujemy, jeśli są pacjenci, którzy nie spełniają naszych oczekiwań, prawdopodobnie będziemy chcieli potwierdzić test smaku poprzez genotypowanie ich pod kątem T2R38. Po opanowaniu egzaminu i testu smaku można go wykonać w mniej niż 30 minut. Po obejrzeniu tego filmu powinieneś wiedzieć, jak przeprowadzić egzamin ustny, zanotować oznaki choroby i przeprowadzić krótki test smaku.

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Wiedza na temat mechanizmów molekularnych leżących u podstaw transdukcji smaku poczyniła ostatnio znaczne postępy, głównie dzięki wykorzystaniu modeli zwierzęcych. Jednakże szeroka rozpiętość czułości i specyficzności smakowej wśród ssaków uzasadnia prowadzenie badań na tkankach ludzkich. Opisujemy technikę biopsji służącą do pobierania żywych komórek smakowych z brodawek języka człowieka.

Technika pobierania brodawek grzybiastych (smakowych) z ludzkiego języka

Ten film opisuje test preferencji smakowych, metodę behawioralną używaną do pomiaru atrakcyjności lub unikania kolorowych roztworów, które smakują inaczej, poprzez ocenę zabarwienia brzucha muchy po spożyciu preferowanej substancji. Przedstawiony protokół przedstawia procedurę zastosowaną do pomiaru preferencji muszek w stosunku do roztworów o różnych stężeniach sacharozy.

Test preferencji smakowych: metoda pomiaru zachowań żywieniowych u Drosophila

Doustna chemorecepcja kwasów tłuszczowych i związek z dietą i preferencjami dotyczącymi tłustych potraw może umożliwić identyfikację mechanizmów związanych z rozwojem otyłości i dlaczego zmiany w diecie mogą być trudne dla wielu osób.

Pomiar doustnych progów kwasów tłuszczowych, percepcji tłuszczu, upodobania do tłustych potraw i gęstości brodawek u ludzi

Tutaj prezentujemy protokół do pomiaru gęstości brodawek grzybowych na podstawie zdjęć cyfrowych. Metoda ta włącza priorytetyzację i obiektywne wskaźniki charakterystyki do oryginalnej pracy opisowej na temat brodawek grzybowatych autorstwa Millera i Reedy'ego (1990).

Protokół Denver Papillae do obiektywnej analizy brodawek grzybiczych

Słodki smak ma potężny hedonistyczny urok wśród ludzi w każdym wieku, szczególnie dzieci. Opisana w niniejszym dokumencie jest wiarygodną i ważną metodą, którą można wykorzystać do określenia najbardziej preferowanego poziomu słodyczy, co czyni ją cennym narzędziem psychofizycznym dla naukowców.

Psychofizyczna metoda śledzenia do pomiaru preferencji smakowych u dzieci i dorosłych

Smak jest ważnym procesem sensorycznym, który ułatwia przyciąganie do dobroczynnych substancji i unikanie substancji toksycznych.  Protokół ten opisuje prosty test spożycia w celu określenia preferencji smakowej Drosophila dla danego związku chemicznego.

Test preferencji smakowych dla dorosłych Drosophila

Prezentujemy trzy nowe metody do nauki kodowania smakowego. Posługując się prostym zwierzęciem, Manduca sexta (Manduca), opisujemy protokół preparacji, użycie zewnątrzkomórkowych tetrod do rejestrowania aktywności wielu neuronów receptorów smakowych oraz system dostarczania i monitorowania precyzyjnie wymierzonych impulsów degustacji.

Nowe metody badania kodowania smaku

Przedstawiamy protokół dla testu żywieniowego dla much z dwoma opcjami. Ten test żywieniowy jest szybki i łatwy do przeprowadzenia i nadaje się nie tylko do badań laboratoryjnych na małą skalę, ale także do wysokowydajnych badań behawioralnych u much.

Szybki test preferencji żywieniowych u Drosophila

Ten artykuł opisuje metody przygotowania tkanek, barwienia i analizy całych grzybów, obwodowych i podniebiennych kubków smakowych, które konsekwentnie dają całe i nienaruszone kubki smakowe (w tym włókna nerwowe, które je unerwiają) i utrzymują relacje między strukturami wewnątrz kubków smakowych a otaczającą je brodawką.

Barwienie całego wierzchu, wizualizacja i analiza grzybokształtnych, obwodowych i podniebienia kubków smakowych

Narzędzia psychofizyczne mierzą funkcjonalność systemu smaku zarówno do celów badawczych, jak i oceny zdrowia. W artykule opisano metodę pomiaru progów wykrywania smaku, które mogą określić najniższe stężenie sacharozy, chlorku sodu lub glutaminianu sodu, które mogą być degustowane przez osoby w wieku 6 lat.

Psychofizyczna metoda śledzenia do oceny progów wykrywania smaku u dzieci, młodzieży i dorosłych: test progu wykrywania smaku (TDT)

Ta praca ilustruje standardową procedurę i wyznaczanie progu za pomocą wskaźnika R do oceny przestrzennej wrażliwości językowej na dotyk za pomocą testu orientacji siatki.

Ocena przestrzennej wrażliwości dotykowej języka za pomocą testu orientacji siatek

Poznaj krótki test smakowy do badań biomedycznych z oceną jamy ustnej i analizą genotypu receptora TAS2R38. Ta metoda pozwala mierzyć odpowiedzi smakowe u ludzi i ma zastosowanie w diagnostyce przewlekłego zapalenia zatok.

Egzamin smakowy: krótki i zatwierdzony test

Przeglądaj więcej filmów