Przywrócenie poszukiwania narkotyków u myszy przy użyciu paradygmatu warunkowej preferencji miejsca

Ogólnym celem tej procedury jest ocena przywrócenia zachowań związanych z poszukiwaniem narkotyków u zwierząt laboratoryjnych, biorąc pod uwagę wpływ sygnałów środowiskowych i stresu związanych z lekiem. Metoda ta może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania w dziedzinie uzależnienia od narkotyków, takie jak rola różnych manipulacji środowiskowych, które mogą modulować powrót do poszukiwania narkotyków. Główną zaletą tej techniki jest to, że uważa się, że przywrócenie CPP odzwierciedla reaktywację motywacyjnej wartości motywacyjnej bodźców kontekstowych w połączeniu z lekiem, co jest spójne w ponownym pojawieniu się zachowania podejścia w kontekście.

Implikacje tej techniki rozciągają się w kierunku etologii nawrotu narkomanii, ponieważ jest to użyteczny i czuły sposób oceny różnych manipulacji środowiskowych, które są głównymi wyzwalaczami nawrotów u ludzi. Nowość w tej metodzie będzie miała trudności, ponieważ model przywracania jest bardzo wrażliwy na zmiany środowiskowe. Warunki pomieszczenia i otoczenia powinny pozostać stałe podczas zabiegu, zwłaszcza w przypadku partnerów płci przeciwnej, hałasów lub warunków oświetleniowych.

Reakcje na lek i przywrócenie wywołane stresem są wykonywane przez różne procedury, które mogą mieć wpływ na wyniki. Szczególnie z tego powodu ważne jest pokazanie porażki społecznej jako czynnika decydującego o przywróceniu do pracy. Na początek zajmij się myszami przez jedną do dwóch minut co trzy dni przed testem.

Ustaw identyczne pudełka, pomieszczenie testowe i roztwór kokainy, zgodnie z zaleceniami zawartymi w pisemnym protokole. Każdego dnia przynoś myszy do pokoju testowego w ich domowych klatkach. Pozwól myszom siedzieć w spokoju przez 15 minut, jako okres przyzwyczajenia do wszystkich dźwięków i bodźców związanych z testem.

Upewnij się, że drzwiczki gilotyny zostały wyjęte z klatki i rozpocznij konfigurację komputera. Wprowadź identyfikator myszy i naciśnij polecenie próbne i uruchamianie. Następnie umieść mysz w środkowej komorze pudełka i utrzymuj minimalny hałas w pomieszczeniu testowym.

Po zakończeniu próby zbierz myszy z powrotem do ich domowych klatek i zapisz dane na komputerze. Pozwól każdej myszy uzyskać dostęp do obu komór pudełek przez 15 minut dziennie, przez trzy kolejne dni. Trzeciego dnia zapisz ilość czasu, jaką każda mysz spędza w każdej komorze.

Następnie przypisz połowę myszy do otrzymania leku w jednej komorze, a drugą połowę w drugiej komorze. Najpierw zważ myszy, aby określić odpowiednią dawkę kokainy. Następnie należy przygotować strzykawki z odpowiednią dawką kokainy lub soli fizjologicznej.

Wstrzykuj każdą mysz pojedynczo dootrzewnowo i delikatnie umieść ją w przypisanej jej komorze przegródki. Po czterech godzinach wstrzyknij dawkę kokainy i zamknij mysz w komorze sparowanej z narkotykiem na 30 minut. Upewnij się, że drzwiczki gilotyny oddzielające dwie komory są zamknięte.

W dniu testu kondycjonacyjnego przyprowadź zwierzęta do pomieszczenia testowego i pozwól im przyzwyczaić się przez 15 minut. Zdejmij drzwiczki gilotyny, oddzielając dwie komory i zainstaluj program komputerowy. Wprowadź identyfikatory zwierząt i naciśnij polecenie start.

Zapisz ilość czasu spędzonego przez nieleczone myszy w komorze pudełka podczas 15-minutowego okresu obserwacji. Po zakończeniu okresu obserwacji zbierz myszy z powrotem do ich domowych klatek i zapisz dane na komputerze. Każdego tygodnia przeprowadzaj sesję wymierania ze wszystkimi myszami, które wykazały preferencję dla przedziału sparowanego z lekiem.

Najpierw zdejmij drzwiczki gilotyny z pudełka i umieść zwierzę w pudełku na 15 minut. Gdy cała grupa nie wykazuje preferencji dla komory sparowanej z lekiem, powtórz test 24 godziny później, aby potwierdzić wyginięcie. W celu przywrócenia leczenia wywołanego przez lek, należy przenieść zwierzęta do innego pomieszczenia 24 godziny po potwierdzeniu ich wyginięcia.

Następnie wstrzyknij im połowę poprzedniej dawki kokainy i wróć do wiwarium na 15 minut. Następnie zabierz myszy do pokoju testowego i umieść je w pudełku na 15 minut. Zapisz czas, jaki każda mysz spędza w każdej komorze i zapisz dane na komputerze.

Aby ocenić skutki przywrócenia do życia wywołanego stresem, przenieś myszy do innego pomieszczenia 24 godziny po potwierdzeniu wyginięcia. Następnie umieść eksperymentalną mysz w plastikowej klatce z agresywną myszą przeciwnika na 10 minut. Po antagonistycznym spotkaniu usuń myszy eksperymentalne i przynieś je do pokoju testowego.

Na koniec zdejmij drzwiczki gilotyny i trzymaj myszy w pudełku przez 15 minut. Jeśli chodzi o stres społeczny, powinniśmy potwierdzić, że zwierzę zostało faktycznie pokonane. Pozytywne spotkanie społeczne, które nie kończy się porażką, wykazuje działanie ochronne, blokując przywrócenie preferencji miejsca kokainy.

Korzystając z protokołu CPP, samce myszy w tym badaniu zostały poddane różnym manipulacjom środowiskowym w celu zmierzenia nawrotu kokainy. Przywrócenie wywołane przez torowanie poddawano kolejnym zmniejszającym się dawkom pobudzającym, aż do momentu, gdy potwierdzono, że dawka pobudzająca jest nieskuteczna. Jak pokazano na tym wykresie, zasysanie się 12,5, 6,25, 3,125 i 1,56 miligrama kokainy na kilogram miało znaczący wpływ na powrót do kokainy.

Myszy poddano interakcji społecznej, w której zwierzęta doświadczalne zostały pokonane przez agresywnego przeciwnika w celu zmierzenia przywrócenia do zdrowia wywołanego stresem. Bycie wystawionym na działanie agresywnego zwierzęcia i pokonane 15 minut przed testem prowadziło do przywrócenia wcześniej wygaszonych preferencji. Myszy, które doznały powtarzających się porażek społecznych przed zabiegiem CPP, wykazywały zmodyfikowane efekty nagradzania podprogowymi dawkami kokainy.

Po wygaśnięciu preferencji, społecznie pokonane myszy powróciły do swojej preferencji przy dawce wstępnej wynoszącej zaledwie 0,5 miligrama na kilogram kokainy. Ważne jest, aby pamiętać, że kluczowym punktem badań nad uzależnieniem od cracku jest opracowanie metod leczenia, które zmniejszają głód, a w konsekwencji zmniejszają podatność na nawroty. Inne metody, takie jak samodzielne podawanie dożylne, mogą być wykonywane w celu udzielenia odpowiedzi na dodatkowe pytania, takie jak kompulsywność lub motywacja do uzyskania leku.

Po tym rozwoju technika ta utorowała drogę naukowcom zajmującym się uzależnieniem od narkotyków do zbadania możliwości przywrócenia do poszukiwania narkotyków u myszy. Po obejrzeniu tego filmu powinieneś dobrze zrozumieć, jak wywołać nawrót poprzez różne manipulacje środowiskowe, takie jak kontekst lub wskazówki dotyczące narkotyków, które przywracają preferencje dotyczące miejsca.