Proliferacja i różnicowanie mysich komórek prekursorowych mieloidu 32D/G-CSF-R

Ogólnym celem tego eksperymentu jest genetyczna modyfikacja mysich komórek szpikowych 32D-G-CSF-R poprzez nadmierną ekspresję lub wyciszenie genu będącego przedmiotem zainteresowania oraz określenie wpływu tych zmian na proliferację i różnicowanie neutrofilowe linii komórkowej. Metoda ta może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania w dziedzinie hematologii, takie jak to, w jaki sposób białko, które Cię interesuje, może być zaangażowane we wzrost i różnicowanie mieloidalnych komórek prekursorowych. Główną zaletą tej linii komórkowej jest to, że posiada nieograniczoną zdolność proliferacji, jest podatna na manipulacje genetyczne, koszt jest stosunkowo niski i pozwala na pewien stopień biologicznego uproszczenia wymagany w niektórych podejściach eksperymentalnych.

Dzisiejszą procedurę zademonstruje Petr Danek, doktorant w moim laboratorium. Przygotuj 250 mililitrów pożywki RPMI-1640 uzupełnionej inaktywowaną termicznie 10% płodową surowicą bydlęcą i 10 nanogramami na mililitr mysiej interleukiny-3. Następnie przygotuj 50 mililitrów pożywki różnicującej.