Obrazowanie pośrednich włókien i mikrotubul za pomocą 2-wymiarowej bezpośredniej stochastycznej mikroskopii rekonstrukcji optycznej

Ogólnym celem tej metodologii jest stworzenie optymalnych warunków eksperymentalnych od przygotowania próbki po akwizycję i rekonstrukcję obrazu w celu wykonania dwukolorowego obrazowania D-STORM 2D mikrotubul i włókien pośrednich w komórkach stałych. Metoda ta może pomóc w scharakteryzowaniu fizycznych interakcji między gęstymi i złożonymi sieciami cytoszkieletu, takimi jak włókna pośrednie i mikrotubule. Główną zaletą tej techniki jest to, że pozwala na obserwację struktur komórkowych, które nie są rozdzielone za pomocą konwencjonalnej mikroskopii fluorescencyjnej.

Wizualna demonstracja tej metody ma kluczowe znaczenie, ponieważ kontrola przygotowania próbek i pozyskiwania danych łączących szaty ma kluczowe znaczenie w celu ograniczenia generowania artefaktów. Po wyhodowaniu komórek U373 zgodnie z protokołem tekstowym, napraw komórki, najpierw używając PBS, aby je raz umyć. Następnie usuń PBS i dodaj jeden mililitr na studzienkę podgrzanego roztworu do utrwalania ekstrakcyjnego.