Oświetlanie szlaków aktywacji kaspazy za pomocą bimolekularnej komplementacji fluorescencyjnej

Ogólnym celem tej metodologii jest wizualizacja jednego z pierwszych kroków w aktywacji kaspaz inicjatora. Ten etap nazywa się indukowaną bliskością i występuje, gdy cząsteczki kaspazy łączą się, tworząc aktywne dimery podczas apoptotycznej śmierci komórki. Ta metoda może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania w dziedzinie kaspazy, takie jak kiedy, gdzie i jak skutecznie można aktywować określone kaspazy inicjujące.

Główną zaletą tej techniki jest to, że można wizualizować składanie kompleksów aktywacyjnych kaspazy w żywych komórkach w czasie rzeczywistym. Ta metoda biomolekularnej komplementacji fluorescencji wykorzystuje fragmenty białka tyroksyny, Venus, które zostały winstalowane do kaspazy. Fragmenty same w sobie nie są fluorescencyjne, ale kiedy kaspaza ulega indukowanej bliskości, zbliża to dwie połówki Wenus do siebie i zapalają się.