Name: Metoda nanocząstek srebra w łagodzeniu zespołu atrezji dróg żółciowych u myszy (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-10-13T13:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 48 s
Description: Poznaj metodę wykorzystania nanocząstek srebra w łagodzeniu zespołu atrezji dróg żółciowych u myszy. Technika ta umożliwia skuteczne wstrzyknięcie noworodkom i poprawę funkcji wątroby.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Użyte tutaj AgNPs były prezentem od C. M. Che z Wydziału Chemii Uniwersytetu w Hongkongu. Praca ta została sfinansowana przez Narodową Fundację Nauk Przyrodniczych Chin (nr 81600399) oraz Projekt Nauki i Technologii w Kantonie (nr 201707010014).

Wszystkie protokoły eksperymentalne na zwierzętach zostały zatwierdzone przez Instytucjonalny Komitet ds. Opieki i Użytkowania Zwierząt w Centrum Zwierząt Laboratoryjnych Uniwersytetu Sun Yat-Sen (#IACUC-DB-16-0602).
1. Ustalanie modelu myszy z atrezją dróg żółciowych
<ol>
	<li>Utrzymuj ciężarne myszy BALB/c w określonym środowisku wolnym od patogenów w 12-godzinnym cyklu ciemności/światła w temperaturze 25 °C, z dostępem do autoklawowanej karmy ad libitum.</li>
	<li>Aby przygotować szczep RRV MMU 18006, należy amplifikować wirusa w komórkach MA104 i zmierzyć miana wirusa za pomocą testu płytki nazębnej19. 
	UWAGA: Komórki MA104 są hodowane w zmodyfikowanej pożywce Eagle's Medium (DMEM) firmy Dulbecco z 10% płodową surowicą bydlęcą (FBS) w inkubatorze z wilgotną atmosferą zawierającą 5% CO2 . Kroki amplifikacji są pokrótce opisane poniżej.
	<ol>
		<li>Zakażone komórki MA104 (1,5 x 107) w kolbie hodowlanej o średnicy 150 cm2 za pomocą RRV aktywowanego trypsyną [1,5 x 106 jednostek tworzących płytkę (PFU)] w 30 ml pożywki bez surowicy. Inkubować zakażone komórki przez 3 dni w wilgotnym inkubatorze w temperaturze 37 °C z 5% CO2 .</li>
		<li>Poddać lizie zakażone komórki w kolbie hodowlanej w trzech cyklach zamrażania i rozmrażania, po 20 minutach w zamrażarce o temperaturze -80 °C dla każdej fazy zamrażania, a następnie rozmrażaniu komórek z powrotem do temperatury pokojowej; cząsteczka wirusa związana z komórką zostanie uwolniona do supernatantu. Następnie zebrać i przenieść lizat komórkowy i supernatant hodowli do stożkowej probówki o pojemności 15 ml.</li>
		<li>Usunąć duże resztki komórkowe z lizatu przez wirowanie na niskiej prędkości (300 x g w temperaturze 4 °C przez 3 min). Następnie przenieść supernatant zawierający wirusa (około 6 ml) do nowej stożkowej probówki o pojemności 15 ml do eksperymentów na zwierzętach. 
		UWAGA: RRV jest wtedy gotowy do mianowania, porcjowania i przechowywania lub użycia do dodatkowych rund amplifikacji. Długotrwałe narażenie na temperaturę pokojową zmniejszy zdolność infekcji wirusowych; wirus powinien być umieszczony na lodzie i przechowywany w temperaturze -80 °C lub w ciekłym azocie.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Załadować RRV do strzykawki insulinowej o małej objętości (1 ml) z igłą 29 G do wstrzykiwań noworodkom myszy. 
	UWAGA: Grube igły strzykawek miarowych łatwo prowadzą do wycieku leku.</li>
	<li>W ciągu 24 godzin od urodzenia podać każdemu noworodkowi 20 μl 1,2 x 105 PFU/ml RRV drogą dożylną; użyć tej samej objętości soli fizjologicznej co kontrola. 
	UWAGA: Strzykawka użyta w tym eksperymencie to strzykawka insulinowa o pojemności 1 ml. Zakażone myszy, które nie były karmione przez matki, zmarły w ciągu pierwszych 2 dni z innych powodów, nie zostały uwzględnione w analizie.</li>
	<li>Uważnie obserwuj wszystkie nowonarodzone myszy i waż je codziennie. Zazwyczaj szóstego dnia po zaszczepieniu RRV żółtaczka pojawia się na uszach i gołej skórze, stolec staje się gliniasty, a futro staje się tłuste, co sugeruje ustalenie modelu BA; Sprawdź, czy nie występują te objawy. 
	UWAGA: BA można potwierdzić badaniem wycinka tkanki wątroby za pomocą H & E i stwierdzenia immunohistochemicznego. Myszy BA są wtedy gotowe do leczenia AgNP. 
	UWAGA: Przedstawiony protokół jest przeznaczony do stosowania ze współczesnymi zwierzęcymi i ludzkimi szczepami RV, które muszą być traktowane w warunkach poziomu bezpieczeństwa biologicznego 2 (BSL-2).</li>
</ol>
2. Synteza nanocząstek srebra
<ol>
	<li>Przygotuj i scharakteryzuj AgNP zgodnie z wcześniejszym opisem12,20. 
	UWAGA: Szczegóły przygotowania i charakterystyki AgNP zostały opisane w publikacjach zespołu C. M. Che z Wydziału Chemii Uniwersytetu w Hongkongu12,20. Końcowe stężenie roztworu wynosiło 1 mM. Średnia średnica AgNPs wynosiła 10 nm (w zakresie od 5 do 15 nm) i została potwierdzona za pomocą mikroskopii elektronowej.</li>
</ol>
3. Przygotowanie mieszaniny kolagenu z nanocząstkami srebra
UWAGA: Mieszanina kolagenu AgNP jest przygotowywana i charakteryzowana zgodnie z wcześniejszym opisem21 i przechowywana w temperaturze 4 °C. Wszystkie zabiegi muszą być wykonywane na lodzie.
<ol>
	<li>Najpierw, do przygotowania kolagenu, dodaj 490 μl kolagenu typu I (4 mg/ml) do probówki o pojemności 1,5 ml i umieść ją na lodzie.</li>
	<li>Dodać 100 μl soli fizjologicznej buforowanej fosforanami (PBS, 10x) do kolagenu i wymieszać pipetą.
	<ol>
		<li>Aby przygotować 1 l buforu 10x PBS, połącz 80 g NaCl, 2 g KCl i 35,8 g Na2HPO4.12H2O do 2,4 g KH2PO4 i przechowywać bufor w temperaturze pokojowej.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Następnie dodać 10 μl NaOH (0,2 M) do powyższego roztworu.
	<ol>
		<li>Aby przygotować 0,2 M NaOH, dodaj 8 g proszku NaOH do 1 l wody destylowanej.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Na koniec dodaj 400 μl AgNPs (1 mM) do kolagenu i wymieszaj je pipetą. 
	UWAGA: Dodaj AgNP na końcu, aby uzyskać równomierne wymieszanie. Mieszaninę kolagenu AgNP należy przechowywać w temperaturze 4 °C; W przeciwnym razie łatwo krzepnie w temperaturze pokojowej.</li>
</ol>
4. Metoda wstrzykiwania myszy
<ol>
	<li>Zakażonym nowonarodzonym myszom w grupie leczonej RRV należy podać iniekcję dożylną 50 μl mieszaniny kolagenu AgNP po wystąpieniu żółtaczki; wykonać drugie wstrzyknięcie 3 dni później. 
	UWAGA: Myszy w grupie kontrolnej RRV (zakażonej grupie kontrolnej) otrzymują tę samą objętość soli fizjologicznej, a myszy w normalnej grupie kontrolnej nie otrzymują żadnego leczenia.</li>
	<li>Na początku wstrzyknięcia należy przycisnąć nogę myszy palcem serdecznym skośnie do prawego uda i powoli wprowadzić igłę pod kątem 15° (Rysunek 1). Po dotarciu do powierzchni dolnej krawędzi wątroby (<klasa silna = "xfig" >Ryc. 2), około 0,5 cm w, wstrzyknąć mieszaninę kolagenu AgNP; Następnie powoli wyjmij igłę. 
	UWAGA: Należy uważać, aby nie wprowadzać powietrza do strzykawki, ponieważ wtedy może to spowodować śmierć nowonarodzonej myszy. U nowonarodzonych myszy żołądek i śledziona znajdują się w lewej jamie brzusznej, a żołądek jest pełen mleka. Jeśli wstrzyknięcie jest podawane z tej strony, igła może łatwo dostać się do żołądka, powodując przepływ mleka do jamy brzusznej lub śledziony, powodując krwawienie. 
	UWAGA: Zwróć uwagę na igłę, aby zapobiec zranieniom palców i pamiętaj o założeniu nasadki igły, wyjęciu igły i umieszczeniu jej w pojemniku na ostre przedmioty.</li>
	<li>Po wszystkich wstrzyknięciach trzymaj myszy z dala od klatek przez 10 minut, aby mieszanina kolagenu AgNP mogła się zżelować i zapobiec lizaniu miejsca wstrzyknięcia przez matkę. Następnie załóż myszy z powrotem do ich klatek.</li>
	<li>Codziennie obserwuj i rejestruj wygląd fizyczny wszystkich myszy, w tym żółtaczkę i masę ciała, a także wskaźnik przeżycia.</li>
</ol>
5. Pobieranie próbek krwi
UWAGA: Próbki krwi o objętości około 120 μL są pobierane poprzez włożenie igły do serca. Po odwirowaniu pobiera się surowicę (około 70 μl) do badania czynności wątroby. Metoda pobierania krwi jest następująca.
<ol>
	<li>Znieczulenie myszy należy przeprowadzić w dziewiątym i dwunastym dniu po inokulacji RRV (czyli 3 dni po leczeniu AgNP) za pomocą 0,5-2,5% sewofluranu.</li>
	<li>Unieruchomić kończyny myszy i wysterylizować górną i dolną część brzucha 75% alkoholem.</li>
	<li>Odsłoń przeponę, przecinając nożyczkami skórę myszy, mięśnie i otrzewną wzdłuż linii środkowej do mieczykowatości; użyj sterylnego bawełnianego wacika, aby usunąć przewód pokarmowy, aby całkowicie odsłonić mięsień przepony.</li>
	<li>Wprowadzić igłę (z niezaładowaną strzykawką insulinową o pojemności 1 ml) do lewej komory serca i powoli odciągnąć tłok strzykawki, aby uzyskać maksymalną objętość krwi. Następnie przenieś krew do probówki o pojemności 1,5 ml.</li>
	<li>Odstawić probówkę na 30 minut w temperaturze pokojowej i odwirować ją przez 5 minut przy 400 x g. Następnie, za pomocą pipety transferowej, zbierz i zachowaj surowicę do dalszego wykorzystania. 
	UWAGA: Unikaj uszkodzenia membrany, ponieważ wady membrany łatwo prowadzą do odmy opłucnowej, śmierci i krzepnięcia krwi, uniemożliwiając w ten sposób pobranie próbki krwi.</li>
</ol>
6. Wykrywanie parametrów biochemicznych
<ol>
	<li>Użyj surowicy zebranej w kroku 5.5 do wykrycia parametrów biochemicznych.</li>
	<li>Użyj automatycznego analizatora biochemicznego, aby wykryć następujące parametry biochemiczne: aminotransferaza alaninowa (ALT), aminotransferaza asparaginianowa (AST), fosfataza alkaliczna (ALP), białko całkowite (TP), albumina (ALB), globulina (GLO), bilirubina całkowita (TBIL), bilirubina bezpośrednia (DBIL), bilirubina pośrednia (IBIL) i całkowite kwasy żółciowe (TBA).</li>
</ol>
7. Cholangiografia pozawątrobowa w celu obserwacji drożności pozawątrobowego przewodu żółciowego
UWAGA: Wykonaj cały proces pod mikroskopem preparacyjnym.
<ol>
	<li>Całkowicie odsłoń wątrobę, woreczek żółciowy i pozawątrobowe drogi żółciowe za pomocą bawełnianego wacika.</li>
	<li>Obserwuj i fotografuj wygląd wątroby i dróg żółciowych pod mikroskopem preparacyjnym</li>.
	<li>Użyj kleszczyków okulistycznych, aby delikatnie przytrzymać dno pęcherzyka żółciowego.</li>
	<li>Załadować strzykawkę o pojemności 1 ml roztworem błękitu metylenowego (0,05% wag. wH2O). Powoli wprowadzić igłę strzykawki do jamy pęcherzyka żółciowego; następnie chwyć igłę kleszczykami okulicznymi i powoli wlej 10–20 μl błękitu metylenowego.</li>
	<li>Obserwuj pod mikroskopem, czy niebieski kolor przechodzi przez pozawątrobowe drogi żółciowe do jelita czczego i zrób zdjęcie.</li>
</ol>
8. Pobieranie świeżych próbek wątroby do barwienia hematoksyliną i eozyną
<ol>
	<li>Napraw świeże tkanki wątroby myszy na noc w 10% formalinie.</li>
	<li>Następnie zanurz utrwalone tkanki wątroby w parafinie i pokrój je.</li>
	<li>Odparafinować skrawki, ponownie je uwodnić serią etanolu (np. 100%, 95%, 80% i 70% etanolu w wodzie destylowanej, każdy przez 5 minut), wybarwić skrawki tkanki hematoksyliną, poddać je 1% różnicowaniu alkoholu kwasu solnego, a na koniec zabarwić skrawki eozyną.</li>
	<li>Na koniec obserwuj histopatologię wątroby pod mikroskopem 40X.</li>
</ol>
9. Barwienie immunohistochemiczne skrawków tkanek barwionych hematoksyliną i eozyną
<ol>
	<li>Po odparafinowaniu i ponownym nawodnieniu skrawków należy przeprowadzić pobranie antygenu, zanurzając skrawki w buforze Tris-EDTA (10 mM zasada Tris, 1 mM roztwór EDTA; pH 9,0) i podgrzewając je w kuchence mikrofalowej przez 10 minut w temperaturze 95 °C.</li>
	<li>Usuń endogenną peroksydazę, wystawiając skrawki tkanki na 10 minut na działanie 3% roztworu nadtlenku wodoru.</li>
	<li>Potraktuj skrawki 5% kozim surowicą, aby zablokować niespecyficzne wiązanie.</li>
	<li>Dodać do skrawków przeciwciała pierwszorzędowe NKG2D królika-myszy (1:100) i inkubować je przez noc w temperaturze 4 °C.</li>
	<li>Inkubować skrawki z odpowiednimi przeciwciałami drugorzędowymi (polimerowy system antykrólików znakowany HRP) przez 30 minut w temperaturze pokojowej.</li>
	<li>Wizualizacja barwienia immunohistochemicznego przy użyciu 3,3'-diaminobenzydyny (DAB) jako chromogenu.</li>
	<li>Obserwuj skrawki pod mikroskopem 40X, uzyskaj obrazy i przystąp do ich analizy zgodnie z potrzebami.</li>
</ol>
10. Analiza cytometryczna przepływowa
<ol>
	<li>Delikatnie zmielić tkankę wątroby, przepuścić ją przez sitko do komórek 70 μm i odwirować 2x w temperaturze 270 x g w temperaturze 4 °C przez 4 minuty.</li>
	<li>Zawiesić osad komórkowy w pożywce RPMI 1640 i przeanalizować go za pomocą dwukolorowej immunofluorescencji przy użyciu przeciwciał monoklonalnych.</li>
	<li>Wykonaj fenotypowanie komórkowe przy użyciu specyficznych markerów powierzchniowych komórek, w tym anty-NKp46 sprzężonych z izotiocyjanianem fluoresceiny i fikoerytryną (limfocyty NK; 1:1,000) i anty-CD4 (podtyp komórek T; 1:1,000), za pomocą cytometru przepływowego i przeanalizuj dane za pomocą oprogramowania do analizy danych cytometrii przepływowej.</li>
	<li>Wybierz populacje komórek zgodnie z rozproszeniem do przodu/boku, bramkują zgodnie z kontrolami izotypu, aby uwzględnić wszelką fluorescencję tła, i poddaj dane analizie wtórnej w oparciu o sygnały fluorescencji z poszczególnych przeciwciał.</li>
</ol>

<ol><li>Szavay, P. O., Leonhardt, J., Czechschmidt, G., Petersen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+reovirus+type+3+infection+in+an+established+murine+model+for+biliary+atresia%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pediatric+Surgery%22%5BJournal%5D)">The role of reovirus type 3 infection in an established murine model for biliary atresia.</a> European Journal of Pediatric Surgery. 12 (04), 248-250 (2002).</li>
<li>Coots, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rotavirus+infection+of+human+cholangiocytes+parallels+the+murine+model+of+biliary+atresia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Rotavirus infection of human cholangiocytes parallels the murine model of biliary atresia.</a> Journal of Surgical Research. 177 (2), 275-281 (2012).</li>
<li>Shanmugam, N. P., Jayanthi, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biliary+atresia+with+cytomegalovirus%5BTitle%5D)+AND+%22Indian+Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Biliary atresia with cytomegalovirus.</a> Indian Pediatrics. 49 (2), 157(2012).</li>
<li>Mack, C. L., Feldman, A. G., Sokol, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clues+to+the+Etiology+of+Bile+Duct+Injuryin+Biliary+Atresia%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Liver+Disease%22%5BJournal%5D)">Clues to the Etiology of Bile Duct Injuryin Biliary Atresia.</a> Seminars in Liver Disease. 32, 307-316 (2012).</li>
<li>Muraji, T., Suskind, D. L., Irie, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biliary+atresia%3A+a+new+immunological+insight+into+etiopathogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Review+of+Gastroenterology+%26+Hepatology%22%5BJournal%5D)">Biliary atresia: a new immunological insight into etiopathogenesis.</a> Expert Review of Gastroenterology & Hepatology. 3 (6), 599-606 (2009).</li>
<li>Sokol, R. J., Mack, C. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/11745039">Etiopathogenesis of Biliary Artesia.</a> Seminars in Liver Disease. 21, 517-524 (2001).</li>
<li>Shivakumar, P., Sabla, G. E., Whitington, P., Chougnet, C. A., Bezerra, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neonatal+NK+cells+target+the+mouse+duct+epithelium+via+Nkg2d+and+drive+tissue-specific+injury+in+experimental+biliary+atresia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Neonatal NK cells target the mouse duct epithelium via Nkg2d and drive tissue-specific injury in experimental biliary atresia.</a> Journal of Clinical Investigation. 119 (8), 2281-2290 (2009).</li>
<li>Mack, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oligoclonal+expansions+of+CD4%2B+and+CD8%2B+T-cells+in+the+target+organ+of+patients+with+biliary+atresia%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Oligoclonal expansions of CD4+ and CD8+ T-cells in the target organ of patients with biliary atresia.</a> Gastroenterology. 133 (1), 278-287 (2007).</li>
<li>Shivakumar, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effector+Role+of+Neonatal+Hepatic+CD8+%2B+Lymphocytes+in+Epithelial+Injury+and+Autoimmunity+in+Experimental+Biliary+Atresia%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Effector Role of Neonatal Hepatic CD8 + Lymphocytes in Epithelial Injury and Autoimmunity in Experimental Biliary Atresia.</a> Gastroenterology. 133 (1), 268-277 (2007).</li>
<li>Saxena, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dendritic+Cells+Regulate+Natural+Killer+Cell+Activation+and+Epithelial+Injury+in+Experimental+Biliary+Atresia%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Dendritic Cells Regulate Natural Killer Cell Activation and Epithelial Injury in Experimental Biliary Atresia.</a> Science Translational Medicine. 3 (102), 102ra194 (2011).</li>
<li>Miethke, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Post-natal+paucity+of+regulatory+T+cells+and+control+of+NK+cell+activation+in+experimental+biliary+atresia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Hepatology%22%5BJournal%5D)">Post-natal paucity of regulatory T cells and control of NK cell activation in experimental biliary atresia.</a> Journal of Hepatology. 52 (5), 718-726 (2010).</li>
<li>Tian, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topical+delivery+of+silver+nanoparticles+promotes+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22ChemMedChem%22%5BJournal%5D)">Topical delivery of silver nanoparticles promotes wound healing.</a> ChemMedChem. 2 (1), 129-136 (2010).</li>
<li>Lu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silver+nanoparticles+inhibit+hepatitis+B+virus+replication%5BTitle%5D)+AND+%22Antiviral+Therapy%22%5BJournal%5D)">Silver nanoparticles inhibit hepatitis B virus replication.</a> Antiviral Therapy. 13 (2), 253-262 (2008).</li>
<li>Xiang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+A%2FHuman%2FHubei%2F3%2F2005+%28H3N2%29+influenza+virus+infection+by+silver+nanoparticles+in+vitro+and+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Nanomedicine%22%5BJournal%5D)">Inhibition of A/Human/Hubei/3/2005 (H3N2) influenza virus infection by silver nanoparticles in vitro and in vivo.</a> International Journal of Nanomedicine. 8 (Issue 1), 4103-4114 (2013).</li>
<li>Elechiguerra, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interaction+of+silver+nanoparticles+with+HIV-1%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Nanobiotechnology%22%5BJournal%5D)">Interaction of silver nanoparticles with HIV-1.</a> Journal of Nanobiotechnology. 3 (1), 1-10 (2005).</li>
<li>Nallanthighal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+effects+of+silver+nanoparticles+on+DNA+damage+and+DNA+repair+gene+expression+in+Ogg1-deficient+and+wild+type+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nanotoxicology%22%5BJournal%5D)">Differential effects of silver nanoparticles on DNA damage and DNA repair gene expression in Ogg1-deficient and wild type mice.</a> Nanotoxicology. 11 (8), 1-16 (2017).</li>
<li>Wen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+toxicity+and+genotoxicity+of+silver+nanoparticle+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Acute toxicity and genotoxicity of silver nanoparticle in rats.</a> PLoS One. 12 (9), e0185554(2017).</li>
<li>Zhang, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silver+nanoparticle+treatment+ameliorates+biliary+atresia+syndrome+in+rhesus+rotavirus+inoculated+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nanomedicine%22%5BJournal%5D)">Silver nanoparticle treatment ameliorates biliary atresia syndrome in rhesus rotavirus inoculated mice.</a> Nanomedicine. 13 (3), 1041-1050 (2017).</li>
<li>Arnold, M., Patton, J. T., McDonald, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Culturing%2C+Storage%2C+and+Quantification+of+Rotaviruses%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Protocols+in+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Culturing, Storage, and Quantification of Rotaviruses.</a> Current Protocols in Microbiology. , Chapter 15 Unit 15C.13 (2009).</li>
<li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silver+nanoparticles+mediate+differential+responses+in+keratinocytes+and+fibroblasts+during+skin+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22ChemMedChem%22%5BJournal%5D)">Silver nanoparticles mediate differential responses in keratinocytes and fibroblasts during skin wound healing.</a> ChemMedChem. 5 (3), 468-475 (2010).</li>
<li>Zhang, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silver+nanoparticles+promote+osteogenesis+of+mesenchymal+stem+cells+and+improve+bone+fracture+healing+in+osteogenesis+mechanism+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Nanomedicine%22%5BJournal%5D)">Silver nanoparticles promote osteogenesis of mesenchymal stem cells and improve bone fracture healing in osteogenesis mechanism mouse model.</a> Nanomedicine. 11 (8), 1949-1959 (2015).</li>
<li>Wu, J., Hou, S., Ren, D., Mather, P. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antimicrobial+properties+of+nanostructured+hydrogel+webs+containing+silver%5BTitle%5D)+AND+%22Biomacromolecules%22%5BJournal%5D)">Antimicrobial properties of nanostructured hydrogel webs containing silver.</a> Biomacromolecules. 10 (9), 2686-2693 (2009).</li>
<li>Xu, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genotoxicity+and+molecular+response+of+silver+nanoparticle+%28NP%29-based+hydrogel%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Nanobiotechnology%22%5BJournal%5D)">Genotoxicity and molecular response of silver nanoparticle (NP)-based hydrogel.</a> Journal of Nanobiotechnology. 10 (1), 16(2012).</li>
<li>Dobrzyńska, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genotoxicity+of+silver+and+titanium+dioxide+nanoparticles+in+bone+marrow+cells+of+rats+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology%22%5BJournal%5D)">Genotoxicity of silver and titanium dioxide nanoparticles in bone marrow cells of rats in vivo.</a> Toxicology. 315 (1), 86-91 (2014).</li>
<li>Mohamed, H. R. H. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26072100">Estimation of TiO 2 nanoparticle-induced genotoxicity persistence and possible chronic gastritis-induction in mice.</a> Food & Chemical Toxicology. 83 (9), 76-83 (2015).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

AgNP wykazują silne właściwości przeciwbakteryjne o szerokim spektrum działania i silną przepuszczalność22; Ponadto są one wykorzystywane do produkcji szeregu przeciwbakteryjnych produktów medycznych23. Jednak usunięcie AgNP może zająć dużo czasu, gdy nagromadzą się w narządach, a to utrzymywanie się może prowadzić do skutków toksycznych 24,25. W poprzednim badaniu zbadano ostrą toksyczność i genotoksyczność AgNPs p...

BA jest formą cholestazy charakteryzującą się uporczywą żółtaczką i wysoką śmiertelnością przy braku przeszczepu wątroby. Infekcje wirusowe są ściśle związane z patogenezą BA. Wirus cytomegalii, reowirus i rotawirus zostały zasugerowane jako patogeny w BA1,2,3. W okresie noworodkowym odpowiedź niedojrzałego układu odpornościowego na infekcję wirusową powoduje rozregulowanie immunologiczne przeciwko poza- i wewnątrzwątrobowym drogom żółciowym, co prowadzi do apoptozy komórek nabłonka dróg żółciowych, nacieku komórek zapalnych w okolicy wrotnej, niedrożności wewnątrzwątrobowych i zewnątrzwątrobowych dróg żółciowych, a wreszcie zwłóknienia wątroby4,5,6.
Powszechnie używany model zwierzęcy do badań BA polega na zaszczepieniu noworodka myszy rotawirusem rezusa (RRV). Żółtaczka zwykle rozwija się u myszy po 5-6 dniach, wykazując niską masę ciała i acholowe stolce. Rola odpowiedzi immunologicznej w procesie chorobowym jest krytyczna, zwłaszcza w przypadku komórek NK (natural killer); zubożenie tych komórek przeciwciałem anty-NKG2D znacznie zmniejsza uszkodzenia wywołane przez BA7. Ponadto wykazano, że inne komórki, w tym limfocyty T CD4 +, limfocyty T CD8 +, komórki dendrytyczne i limfocyty T regulatorowe, odgrywają rolę w chorobie8,9,10,11. Wszystkie dane wskazują na nieodzowny charakter układu odpornościowego w przebiegu BA.
Wykazano, że nanocząsteczki srebra (AgNPs) mają korzystny wpływ na niektóre choroby zakaźne, w tym infekcje bakteryjne12 i infekcje wirusowe13,14,15. Jednak poza zastosowaniem dermatologicznym, w niewielu badaniach stosowano AgNPs w leczeniu klinicznym, głównie ze względu na ich potencjalną toksyczność. W eksperymentach na zwierzętach naukowcy na ogół badali skuteczność AgNP podawanych doustnie16 lub dożylnie17. Jednak żaden inny badacz nie badał skuteczności AgNPs podawanych w zastrzyku dootrzewnowym (i.p.) w eksperymentach na noworodkach na myszach, co jest prostą i szybką metodą prowadzącą do bardziej bezpośredniego wpływu na wątrobę i drogi żółciowe przy jednoczesnym zmniejszeniu toksyczności dla innych układów, takich jak układ odpornościowy. Wykazano, że AgNP wpływają na aktywność komórek NK18; w związku z tym przetestowaliśmy efekty terapeutyczne AgNP podawanych przez wstrzyknięcie i.p. w modelu mysim BA.

<table><tbody><tr><td>Mysz BALB/c</td><td>Guangdong Medyczne Centrum Zwierząt Doświadczalnych</td><td>SYXK2017-0174</td><td>Eksperyment na zwierzętach</td></tr><tr><td>Rotawirus rezusa (RRV)</td><td>ATCC</td><td>ATCC&nbsp; VR-1739</td><td>Ustal model myszy atrezji dróg żółciowych</td></tr><tr><td>MA104 komórki</td><td>ATCC</td><td>ATCC&nbsp; CRL-2378.1</td><td>Tylko do użytku laboratoryjnego</td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Thermo Fisher</td><td>10569010</td><td>Hodowla komórek ssaków</td></tr><tr><td>Surowica bydlęca</td><td>Thermo Fisher</td><td>10099141</td><td>Hodowla komórek ssaków</td></tr><tr><td>kolagen typu I</td><td>CORNING</td><td>354236</td><td>Tylko do użytku badawczego</td></tr><tr><td>Bufor</td><td>PBS OXOID</td><td>BR0014G</td><td>Do mycia</td></tr><tr><td>NaOH</td><td>Sigma</td><td>1310-73-2</td><td>Dostosuj wartość pH</td></tr><tr><td>AgNP</td><td></td><td></td><td>Antibacterial Uwaga: AgNps był prezentem od prof. CM Che. z Wydziału Chemii Uniwersytetu w Hongkongu.</td></tr><tr><td>Strzykawka insulinowa ze zintegrowaną igłą</td><td>BD</td><td>9161635S</td><td>Do użytku medycznego</td></tr><tr><td>15 ml Probówka wirówkowa</td><td>Corning</td><td>430791</td><td>Tylko do użytku laboratoryjnego</td></tr><tr><td>1,5 ml Probówka do mikrowirówki</td><td>GEB</td><td>CT0200-B-N Tylko</td><td>do użytku laboratoryjnego</td></tr><tr><td></td><td>Mikroskop Nikon</td><td>ECLIPSE-Ci</td><td>Do użytku laboratoryjnego</td></tr> Mikroskop <tr><td>preparacyjny/przyżyciowy</td><td>Nikon</td><td>SMZ 1000</td><td>Do użytku laboratoryjnego</td></tr><tr><td>anty-mysz NKp46 FITC</td><td>eBioscience</td><td>11-3351</td><td>Do celów badawczych tylko</td></tr><tr><td>anty-mysie CD4 PE-cyjaninina5</td><td>eBioscience</td><td>15-0041</td><td>Do użytku badawczego Tylko do użytku</td></tr><tr><td>monoklonalnego Mysz anty-ludzka CD4</td><td>DAKO</td><td>20001673</td><td>Do celów badawczych tylko</td></tr><tr><td>anty-NKG2D</td><td>RD</td><td>MAB1547</td><td>Do celów badawczych</td></tr><tr><td>tylko BD Cytometr przepływowy FACSCanto</td><td>BD Biosciences</td><td>FACS Canto Plus</td><td>Wyłącznie do użytku laboratoryjnego</td></tr></tbody></table>

metoda nanocząstek srebra w łagodzeniu zespołu atrezji dróg żółciowych u myszy

A Silver Nanoparticle Method for Ameliorating Biliary Atresia Syndrome in Mice

Atrezja dróg żółciowych (BA) jest ciężkim typem zapalenia dróg żółciowych o wysokiej śmiertelności u dzieci, którego etiologia nie jest jeszcze w pełni poznana. Jedną z możliwych przyczyn mogą być infekcje wirusowe. Typowy model zwierzęcy używany do badania BA jest ustalany przez zaszczepienie nowonarodzonej myszy rotawirusem rezus. Wykazano, że nanocząstki srebra wywierają działanie przeciwbakteryjne i przeciwwirusowe; w tym badaniu oceniano ich funkcję w modelu myszy BA. Obecnie w doświadczeniach na zwierzętach BA metodami stosowanymi w celu poprawy objawów myszy BA są na ogół leczenie objawowe podawane za pośrednictwem żywności lub innych leków. Celem pracy jest zademonstrowanie nowej metody łagodzenia zespołu BA u myszy poprzez dootrzewnowe wstrzyknięcie nanocząstek srebra oraz przedstawienie szczegółowych metod przygotowania preparatu żelu z nanocząstkami srebra. Metoda ta jest prosta i ma szerokie zastosowanie i może być stosowana do badania mechanizmu BA, a także w leczeniu klinicznym. W oparciu o mysi model BA, gdy myszy wykazują żółtaczkę, przygotowany żel z nanocząstek srebra jest wstrzykiwany dootrzewnowo na powierzchnię dolnej wątroby. Obserwuje się stan przeżycia, bada wskaźniki biochemiczne i histopatologię wątroby. Metoda ta pozwala na bardziej intuicyjne zrozumienie zarówno tworzenia modelu BA, jak i nowatorskich metod leczenia BA.

W oparciu o ustalony model mysi BA, zakażonym myszom noworodkowym podano dwiema dawkami preparat mieszaniny AgNP i kolagenu w formie wstrzyknięcia i.p. po wystąpieniu żółtaczki. Przeżywalność myszy sprawdzano codziennie, a następnie przeprowadzono testy funkcji wątroby, badanie histopatologiczne wątroby oraz cytometrię przepływową. W porównaniu z nieleczoną grupą kontrolną myszy z BA, myszy leczone AgNP wykazały zmniejszenie objawów żółtaczki i zachowały prawidłową masę ciała (<strong cla...

Ten artykuł szczegółowo opisuje metodę opartą na nanocząstkach srebra do łagodzenia zespołu atrezji dróg żółciowych w eksperymentalnym modelu myszy z atrezją dróg żółciowych. Solidne zrozumienie procesu przygotowania odczynnika i techniki wstrzykiwania noworodków na myszach pomoże zapoznać badaczy z metodą stosowaną w badaniach na modelu noworodkowym myszy.

Metoda nanocząstek srebra w łagodzeniu zespołu atrezji dróg żółciowych u myszy

Biliary atresia (BA) is a severe type of cholangitis with high mortality in children of which the etiology is still not fully understood. Viral infections ...

Metody te mogą pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania dotyczące atrezji dróg żółciowych. Z poglądów BA na temat choroby, patogenezy i leczenia. Główną zaletą tej techniki jest to, że technika wstrzykiwania noworodków na myszach pomoże naukowcom zapoznać się z tą metodą w innych badaniach na modelach noworodków na myszach.Implikacje tej techniki rozciągają się w kierunku terapii BA jako kilku nanocząstek o znaczeniu Chociaż ta metoda może zapewnić wgląd w leczenie BA, może być również stosowana do innych systemów, takich jak modele noworodków myszy patogenezy tego Ogólnie rzecz biorąc, w taki sposób, w jaki to zrobi ta metoda, ponieważ mały rozmiar nowonarodzonych myszy może powodować budowanie procesu wstrzykiwania. Aby ustalić atrezję dróg żółciowych w modelu mysim, załaduj rototowirusa rezusa do jednomililitrowej strzykawki insulinowej wyposażonej w igłę o rozmiarze 29 i dootrzewnowo podaj 1,2 razy 10 do 5. jednostki tworzącej płytkę żółciową wirusa w 20 mikrolitrach zmodyfikowanej pożywki Dulbecco Eagle Medium każdemu noworodkowi w ciągu 24 godzin od urodzenia. Następnie zwróć noworodki do matki w celu codziennego monitorowania i ważenia.Kiedy nowonarodzone zwierzęta zaczną wykazywać oznaki żółtaczki, załaduj jednomililitrową strzykawkę wyposażoną w igłę o rozmiarze 29 z 50 mikrolitrami świeżo przygotowanego roztworu kolagenu z nanocząsteczkami srebra na zwierzę i użyj palca serdecznego, aby przycisnąć nogę jednego zwierzęcia z żółtaczką ukośnie do prawego uda. Powoli wprowadź igłę pod kątem 15 stopni do otrzewnej, a po dotarciu do powierzchni dolnej krawędzi wątroby wstrzyknij mieszaninę kolagenu z nanocząstkami srebra. Po wstrzyknięciu całej mieszaniny należy powoli wyjąć igłę i pozwolić zwierzęciu odpocząć przez dziesięć minut, aby kolagen zastygł i zapobiec lizaniu miejsca wstrzyknięcia przez matkę.Następnie wróć myszy do ich klatek w celu codziennego monitorowania. Dziewiątego lub dwunastego dnia po inokulacji wysterylizuj górną i dolną część brzucha 75% etanolem i unieruchomij kończyny zakażonej myszy. Otwórz skórę, mięśnie i otrzewną wzdłuż linii środkowej do ksylufidu i użyj sterylnego bawełnianego wacika, aby usunąć przewód pokarmowy, aby całkowicie odsłonić przeponę.Włożyć igłę rozładowanej strzykawki insulinowej o pojemności jednego mililitra do lewej komory serca i powoli cofnąć tłok strzykawki, aby uzyskać maksymalną objętość krwi. Przenieś krew do 1,5 mililitrowej probówki na 30-minutową inkubację w temperaturze pokojowej i osadzaj czerwone krwinki przez odwirowanie. Następnie zbierz surowicę do późniejszej analizy.W przypadku cholangiografii pozawątrobowej użyj bawełnianego wacika, aby całkowicie odsłonić wątrobę, woreczek żółciowy i pozawątrobowe drogi żółciowe. Po sfotografowaniu wyglądu wątroby i dróg żółciowych pod mikroskopem preparacyjnym, użyj kleszczyków okulistycznych, aby delikatnie chwycić dno pęcherzyka żółciowego i powoli włóż igłę jednomililitrowej strzykawki wypełnionej roztworem błękitu metylenowego do jamy pęcherzyka żółciowego. Chwytając igłę kleszczami, powoli wlej 10-20 mikrolitrów błękitu metylenowego.Kiedy barwnik przechodzi przez pozawątrobowe drogi żółciowe do jelita czczego, uzyskaj kolejne zdjęcie tkanki. Następnie, w celu barwienia hematoksyliną i eozyną, zbierz wątrobę od każdego zwierzęcia w celu utrwalenia przez noc w 10% formalinie. Następnego ranka zanurz próbki w parafinie w celu podziału, a następnie ponownie nawodnij odwoskowywanie za pomocą serii etanolowej i barwienie hematoksyliną i eozyną zgodnie ze standardowymi protokołami analizy histopatologicznej.W porównaniu z nieleczonymi myszami z zarośnięciem dróg żółciowych, zwierzęta leczone nanocząstkami srebra wykazują zmniejszoną żółtaczkę i utrzymują normalną masę ciała. Poziomy metabolizmu bilirubiny i aminotransferazy wątrobowej spadają do normalnych wartości kontrolnych, co sugeruje, że nanocząsteczki srebra znacznie poprawiają czynność wątroby. Cholangiografia pozawątrobowa z barwieniem błękitem metylenowym potwierdza drożność dróg żółciowych po leczeniu nanocząstkami srebra, a barwienie H&E ujawnia znaczny spadek nacieku komórek zapalnych w obszarze wrotnym wątroby myszy leczonych nanocząstkami srebra w porównaniu z kontrolą.Analiza miejsca przepływu i wskaźników wskazuje na obecność znacznie mniejszej liczby komórek NK w wątrobach zwierząt leczonych nanocząstkami srebra w porównaniu z nieleczonymi myszami zakażonymi rotawirusem rezus. Dalsze barwienie immunohistochemiczne ujawnia znacznie zmniejszoną ekspresję barwienia markerów komórek NK w triadzie wrotnej myszy traktowanych nanocząstkami srebra w porównaniu ze zwierzętami zakażonymi rotawirusem rezus. Próbując tej procedury, należy pamiętać, że praktyka da najlepsze rezultaty.Podążanie za tą procedurą, ponieważ metody takie jak koniugacja nanocząstek srebra z innymi rzeczami mogą być wykonane, aby odpowiedzieć na dodatkowe pytania dotyczące aktywności zmian w leczeniu BA w modelach mysich. jest rozwój. Technika ta umożliwiła naukowcom zajmującym się gastroenterologią uzyskanie BA lub innych chorób, takich jak cholestaza wątroby.Nie zapominaj, że praca z rotawirusem badawczym może być niezwykle niebezpieczna, dlatego podczas wykonywania tej procedury należy zawsze podejmować środki ostrożności, takie jak noszenie odpowiedniego sprzętu ochrony osobistej.

a-silver-nanoparticle-method-for-ameliorating-biliary-atresia

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologia i infekcje

Insonacja mikropęcherzyków jest obiecującą strategią ablacji guzów przy zredukowanej średniej mocy akustycznej, a także ukierunkowanego dostarczania leków. Celem niniejszego badania jest opracowanie strategii impulsowania ultradźwiękami o niskim cyklu pracy oraz nanonośników w celu maksymalizacji nietermicznej ablacji mikro naczyniowej i dostarczania ładunku do podskórnych glejaków C6.

Porównanie ukierunkowanego leczenia glejaków u myszy z wykorzystaniem ultradźwięków poprzez dostarczanie nanocząsteczek z lekiem oraz ablację mikro naczyniową

Źródło: Kim, B. D., et al. Dostarczanie nanocząstek ładunku oligonukleotydowego w modelu zwierzęcym glejaka wielopostaciowego. J. Vis. Exp. (2024)Ten film pokazuje dożylne wstrzyknięcie terapeutycznych nanocząstek myszy z glejakiem. Metoda umożliwia celowane dostarczanie przez barierę krew-mózg i wspiera nieinwazyjne obrazowanie w celu oceny biodystrybucji nanocząstek i skuteczności terapeutycznej w guzach mózgu.

Dożylne podawanie terapeutycznych nanocząstek w modelu glejaka mysiego

Zakłócenie przepływu żółci powoduje ciężkie zapalne cholestatyczne uszkodzenie wątroby z charakterystyczną, zależną od czasu sekwencją zmian morfologicznych. W tym miejscu przedstawiamy protokół chirurgicznego podwiązania przewodu żółciowego wspólnego u myszy, który pozwala na wywołanie silnej odpowiedzi zwłóknieniowej po 21 do 28 dniach.

Podwiązanie dróg żółciowych u myszy: indukcja zapalnego uszkodzenia wątroby i zwłóknienia przez chalestazę obturacyjną

Tutaj prezentujemy częściowe podwiązanie dróg żółciowych jako chirurgiczny model uszkodzenia i regeneracji wątroby u gryzoni.

Częściowe podwiązanie dróg żółciowych u myszy: kontrolowany model zlokalizowanej cholestazy obturacyjnej

W warunkach klinicznych, biopsja wątroby jest używana do oceny etapów niealkoholowego stłuszczeniowego zapalenia wątroby (stłuszczenie, stan zapalny, balonowanie hepatocytów i zwłóknienie). W tym miejscu ilustrujemy biopsję wątroby u myszy, która może być wykorzystana do analiz histologicznych, aby umożliwić ocenę środków terapeutycznych w sposób bardziej zgodny z badaniami klinicznymi.

Włączenie procedury biopsji wątroby, która daje się przeżyć, u myszy w celu oceny ustąpienia niealkoholowego stłuszczeniowego zapalenia wątroby (NASH)

Stworzyliśmy mysi model przewlekłego zwłóknienia wątroby, który dostarcza odpowiedniego modelu zwierzęcego do mechanistycznego badania atrezji dróg żółciowych (BA) wywołanego przez wirusa i platformy dla przyszłych terapii BA.

Mysi model przewlekłego zwłóknienia wątroby do badania atrezji dróg żółciowych

Prezentowany tutaj jest protokół użycia nanocząsteczek srebra do skutecznego łagodzenia ostrych objawów u myszy z chorobą zwyrodnieniową stawów wywołaną kolagenazą typu II, w tym zapalenie błony maziowej, przerost błony maziowej, przerost naczyń krwionośnych, itp.

Łagodzenie choroby zwyrodnieniowej stawów u myszy za pomocą nanocząstek srebra

W tym protokole omawiamy implementację modelu udanego ortotopowego przeszczepu wątroby (OLT) u myszy. Dodatkowo omówiono adiuwanty do dalszej analizy drożności przeszczepu allogenicznego po udanym OLT u myszy, w szczególności z wykorzystaniem skanów tomografii mikrokomputerowej (microCT).

Udany ortotopowy przeszczep wątroby u myszy z wykorzystaniem angiografii tomografii mikrokomputerowej

Mysi model częściowej 2/3 (66%) hepatektomii jest dobrze opisany w literaturze, ale rzadko stosowano bardziej rozbudowane hepatektomie naśladujące zespół małego dla rozmiaru po przeszczepie wątroby. Opisujemy rozszerzoną 78% procedurę hepatektomii w modelu mysim, która powoduje około 50% śmiertelności pooperacyjnej u zdrowych myszy.

Rozszerzona 78% hepatektomia w mysim modelu chirurgicznym

Ten artykuł zawiera protokół i towarzyszący mu film dotyczący iniekcji do zatoki zagałkowej o całkowitej objętości 150 μL dla dorosłych myszy po porodzie, młodych osobnikach i biegach. Procedura ta szczególnie dobrze nadaje się do wstrzykiwania małych myszy (15 g), gdy wstrzyknięcie do żyły ogonowej nie jest możliwe.

Leczenie ogólnoustrojowe dorosłych myszy po porodzie, młodych i biegowych przez wstrzyknięcie do zatoki zagałkowej

Bariera krew-mózg jest znaczącą przeszkodą w dostarczaniu terapii glejaka, choroby, na którą nie ma lekarstwa. W tym miejscu przedstawiamy sterowaną obrazem in vivo terapeutyczną platformę nano tlenku żelaza, która może ominąć tę fizjologiczną barierę ze względu na rozmiar i gromadzić się w guzie.

Dostarczanie nanocząstek ładunku oligonukleotydowego w modelu zwierzęcym glejaka wielopostaciowego

Poznaj metodę wykorzystania nanocząstek srebra w łagodzeniu zespołu atrezji dróg żółciowych u myszy. Technika ta umożliwia skuteczne wstrzyknięcie noworodkom i poprawę funkcji wątroby.

Metoda nanocząstek srebra w łagodzeniu zespołu atrezji dróg żółciowych u myszy

Przeglądaj więcej filmów