Saccharomyces cerevisiae (Saccharomyces cerevisiae) Kinetyka wzrostu wykładniczego w hodowli wsadowej w celu analizy metabolizmu oddechowego i fermentacyjnego

Metoda ta może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania w dziedzinie biotechnologii i biomedycyny, takie jak to, jakie są molekularne podstawy efektów Warburga i Crabtree. Główną zaletą tej techniki jest to, że pozwala ona na wysokoprzepustowe badanie wpływu niektórych substancji na metabolizm oddechowy i fermentacyjny. Zacznij od zaszczepienia 15-mililitrowej stożkowej probówki zawierającej trzy mililitry chłodnej, sterylnej 2% dekstrozy peptonowej z ekstraktem drożdżowym lub bulionu YPD, z 250 mikrolitrami komórek drożdży S.cerevisiae zakonserwowanych w glicerolu w temperaturze ujemnej 20 stopni Celsjusza.

Inkubuj drożdże przez noc w wytrząsarce orbitalnej w temperaturze 30 stopni Celsjusza i 200 obr./min, aby następnego ranka rozpylić je na 60-mililitrowej, wypełnionej agarem 2% YPD. Hoduj naczynie w temperaturze 30 stopni Celsjusza, aż zaobserwuje się izolowane kolonie.