Zakażenia arbowirusem jako narzędzia przesiewowe do identyfikacji immunomodulatorów wirusa i czynników przeciwwirusowych gospodarza

Metoda ta może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania w dziedzinie immunologii wirusów, takie jak, które czynniki gospodarza ograniczają replikację arbowirusa, a co za tym idzie, które białka unikające odporności kodowane przez wirusa przezwyciężają te mechanizmy ograniczania gospodarza. Główną zaletą tej techniki jest to, że pozwala ona na wykorzystanie uproszczonych testów luminescencyjnych i fluorescencyjnych do określenia warunków komórkowych, które pozwalają arbowirusom na replikację w nieudanej infekcji w komórkach owadów z rzędu Lepidoptera. Ponieważ replikacja arbowirusów w tle w komórkach łuskoskrzydłych jest minimalna, wykrycie warunków, które pozwalają na replikację arbowirusa, staje się stosunkowo proste.

Na początek utrzymuj komórki LD652 w 10-centymetrowych naczyniach poddanych kulturze tkankowej i przechodź komórki, gdy osiągną 80% konfluencji. Kilkakrotnie pipetować pożywkę na monowarstwę komórki, aby usunąć komórki, a następnie rozcieńczyć próbkę w pożywce wzrostowej do przybliżonej gęstości 100 tysięcy komórek na mililitr. Następnie przenieś jeden mililitr rozcieńczonej kultury do każdego dołka 24-dołkowej płytki.