Oparta na formie metoda trójwymiarowego tworzenia tkanki serca bez rusztowań

Protokół ten opisuje nowatorską i łatwą metodę tworzenia trójwymiarowej tkanki serca opartą na formie, która wykorzystuje sferoidy jako narzędzie do tworzenia tkanki serca bez rusztowania. W naszych eksperymentach wyizolowano trzy typy komórek, ludzkie indukowane pluripotencjalne kardiomiocyty pochodzące z komórek macierzystych, ludzkie fibroblasty serca i ludzkie komórki śródbłonka żyły pępowinowej i wykorzystano je do wytworzenia zawiesiny komórkowej. Z 70% kardiomiocytami, 15% fibroblastami i 15% komórkami śródbłonka w stożkowej tubie o pojemności 50 ml.

Następnie dozujemy zawiesinę komórek do każdej studzienki systemu wiszących kropli o bardzo niskim nasadce, co spowoduje spontaniczne uformowanie się setek bijących sferoid po trzech dniach. Sferoidy są następnie zbierane i umieszczane w nowej jamie pleśni. Tkanka jest następnie przechowywana w sterylnym pojemniku z pożywką, na wytrząsarce w inkubatorze przez kilka dni.