Test koimmunoprecypitacji do badania funkcjonalnych interakcji między receptorami i enzymami

Metoda ta może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania w dziedzinie sygnalizacji komórkowej, takie jak znaczenie różnych domen białkowych w interakcji enzymów receptorowych i aktywacji enzymatycznej. Główną zaletą tej techniki jest to, że umożliwia ona jednoczesne badanie interakcji enzymów receptorowych i funkcjonalnych konsekwencji tych interakcji dla aktywności enzymu. Na każdą płytkę użyj 10 mililitrów DMEM uzupełnionego o 10% FBS i 1% penicylinę oraz streptomycynę.

Dzień przed transfekcją wysiewaj ludzkie embrionalne komórki T nerki 293-T na 12 10-centymetrowych płytek za pomocą hemocytometru do policzenia komórek. Inkubować w temperaturze 37 stopni Celsjusza w 5% C02. Gdy komórki zlewają się w 80 do 90%, użyj środka do transfekcji na bazie lipidów, aby transfekować pięć płytek.