9 października 2018
Oferujemy nowatorską metodę poprawy kontrastu absorpcji promieniowania rentgenowskiego tkanki kukurydzy, odpowiednią do zwykłego skanowania metodą tomografii mikrokomputerowej. Na podstawie obrazów CT wprowadzamy zestaw procesów przetwarzania obrazów dla różnych materiałów kukurydzianych, aby skutecznie wyodrębnić mikroskopijne fenotypy wiązek naczyniowych kukurydzy.
Metoda ta może przynieść szybkie odpowiedzi na pytania w planowanej budowie technik fenotypowania w skali mikronowej. Takich jak cząstki skanujące mikro-CT i metoda analizy fenotypowej dla wiązek naczyniowych kukurydzy. Główną zaletą tej techniki jest zapewnienie nowych i skutecznych sposobów badania fenotypowych cech wiązki naczyniowej kukurydzy poprzez przygotowanie próbki, tomografię komputerową i analizę protokołów.
Implikacje tej techniki poszerzają zastosowania zwykłego skanowania mikro-tomografią komputerową i innych nauk o roślinach. Protokół ten można łatwo zmodyfikować, aby uwzględnić inne materiały roślinne, takie jak procedura suszenia odwadniania. Na początek zbierz łodygę, liść i korzeń ze świeżych roślin kukurydzy.
I podziel je na trzy grupy próbek. Następnie za pomocą ostrza chirurgicznego wyciąć od jednego do 1,5 centymetra segmentu środkowego międzywęźla łodygi. Za pomocą tego samego ostrza chirurgicznego wytnij segment o długości od 1/2 do dwóch centymetrów od maksymalnej szerokości liścia w kierunku pionowym z główną żyłą.
Użyj ostrza chirurgicznego, aby wyciąć 1/2 centymetra segment ze zmielonego korzenia. Następnie zanurz segmenty próbki w roztworze FAA przez co najmniej trzy dni. Odwadniać segmenty próbki przez 30 minut w sześciu sekwencyjnych gradientach etanolu.
Następnie umieść materiały roślinne w odpowiednich koszach na próbki. Szybko przenieś kosze do celi na próbki w systemie suszenia punktu krytycznego dwutlenku węgla. Umieść wysuszone materiały roślinne w 50-mililitrowej probówce wirówkowej z dwoma gramami stałego jodu.
Następnie umieść probówki w pomieszczeniu odpornym na światło na cztery do pięciu godzin. Najpierw ustaw parametry skanowania CT zgodnie z protokołem tekstowym. Następnie ustaw zakresy skanowania zgodnie z różnymi rozmiarami i objętościami użytych materiałów roślinnych.
Następnie dostosuj rozmiary pikseli obrazowania w następujący sposób:Dwa mikrometry dla korzenia. 6,77 mikrometra dla łodygi. I 10 mikrometrów na liść.
Aby zrekonstruować obrazy przekrojów, użyj oprogramowania do tworzenia obrazów, aby przekonwertować surowe dane CT na obrazy plasterków CT o rozdzielczości 2K. Najpierw określ typ narządu, aby zainicjować różne potoki algorytmów w oprogramowaniu do automatycznego obrazowania. Następnie kliknij przycisk parametrów metody i wybierz łodygę kukurydzy lub liść kukurydzy w pierwszym polu rozwijanym.
Kliknij przycisk zarządzania danymi, ustaw katalog roboczy i zaimportuj wszystkie obrazy plasterków w katalogu. Następnie wybierz obrazy jedno- lub wieloplasterkowe do potoków obrazów. Następnie określ rozmiar obrazu w pikselach.
Wybierz parametry metody i wprowadź rozmiar obrazu w pikselach w odpowiednim elemencie edycji. Następnie kliknij przycisk obliczeń fenotypowania, aby automatycznie wyodrębnić cechy fenotypowe wiązek naczyniowych dla wszystkich wybranych obrazów plasterków. Kliknij przycisk analizy statystycznej, aby wydrukować wyniki tych analiz w postaci pliku tekstowego lub CSV.
Zaimportuj zrekonstruowane obrazy korzeni kukurydzy i określ dokładne parametry przestrzeni. Następnie użyj rekurencyjnego narzędzia Gaussa, aby wygładzić obrazy i poprawić jakość obrazu. Dostosuj parametry progowe, aby przeprowadzić segmentację 3D naczyń metaksylemowych.
Spowoduje to utworzenie jednolitej kolorowej etykiety dla każdego podłączonego naczynia metaksylemu. Następnie udoskonal i zidentyfikuj naczynia metaksylemu interaktywnie, wykorzystując morfologię bitową i operacje wypełniania powodziowego. Następnie należy przeprowadzić wizualizację objętości i rekonstrukcję powierzchni naczyń.
Na koniec użyj narzędzia do statystyk maski, aby policzyć i zmierzyć cechy fenotypowe naczynia na poziomie 2D i 3D. Korzystając z analizy opisanej w protokole, obliczono cechy fenotypowe wiązek naczyniowych w łodygach, liściach i korzeniach kukurydzy. Stworzono wygenerowaną wizualizację 3D naczyń korzeniowych i metaksylemowych, wykorzystując wyniki segmentacji, rekonstrukcji i wizualizacji objętości.
Prawidłowy protokół przygotowania próbki znacznie poprawia jakość emitowania skaningu mikro-CT dla łodygi, liścia i korzenia kukurydzy. Z automatycznym rurociągiem emitującym do szybkiej ekstrakcji cech fenotypowych wiązek naczyniowych dla łodygi i liści kukurydzy. A konfiguracja i przetwarzanie emisji skanują w celu analizy cech fenotypowych 3D wiązek naczyniowych dla korzenia kukurydzy.
Technika ta zapewnia praktyczny sposób dokładnej i szybkiej kwalifikacji fenotypowej oraz identyfikacji wiązek naczyniowych kukurydzy.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych
Niniejsze badanie przedstawia nową metodę zwiększania kontrastu absorpcji promieni rentgenowskich w tkankach kukurydzy, mającą na celu usprawnienie procesów mikrotomografii komputerowej (micro-CT). Technika ta skutecznie wspomaga analizę wiązek przewodzących w kukurydzy, umożliwiając szczegółową ocenę fenotypową dzięki ustrukturyzowanemu procesowi przetwarzania obrazów.
Dokładna kwantyfikacja struktur anatomicznych roślin wspiera walidację celów w biotechnologii rolniczej, umożliwiając przesiew fenotypowy cech naczyniowych powiązanych z tolerancją na stres i plonowaniem. Metoda ta zwiększa pewność prognostyczną w fazie wczesnego odkrywania dzięki wysokoprzepustowemu fenotypowaniu wiązek przewodzących kukurydzy w skali mikronowej. Pozycjonuje ona analizę cech opartą na obrazowaniu jako skalowalne narzędzie służące do minimalizacji ryzyka w procesie identyfikacji wiodących kandydatów w potokach ulepszania upraw.
Metoda ta wpisuje się w kontinuum od etapu odkrywania do badań przedklinicznych, umożliwiając analizę cech naczyniowych, która dostarcza informacji niezbędnych do wyboru celu i optymalizacji wiodących związków w programach biotechnologii roślin uprawnych.