Oznaczanie na obecność nieorganicznego polifosforanu w bakteriach

Nieorganiczny polifosforan jest kluczowym elementem w odpowiedzi bakterii na stres. Jednak starsze metody ekstrakcji i pomiaru poliP w bakteriach są złożone i pracochłonne. Główną zaletą tej techniki jest to, że umożliwia szybką, czułą i niedrogą ocenę ilościową poziomów poliP w wielu różnych gatunkach bakterii.

Procedura zostanie zademonstrowana przez Aryę Pokhrel, studentkę studiów licencjackich z mojego laboratorium. Na początek hoduj bakterie Lactobacillus reuteri w pożywce do indukcji enzymów jabłkowych bez cystyny w temperaturze 37 stopni Celsjusza przez noc bez wstrząsania. Odwiruj jeden mililitr tej nocnej kultury w 1,5-mililitrowej probówce mikrowirówkowej, aby zebrać wystarczającą liczbę komórek, aby uzyskać łącznie od 50 do 100 mikrogramów białka komórkowego.