Name: Ocena odpowiedzi gospodarz-patogen i skuteczności szczepionki u myszy (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-02-22T13:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 52 s
Description: Poznaj metodę oceny odpowiedzi immunologicznych i skuteczności szczepionek u myszy w modelu in vivo. Protokół umożliwia pomiar obciążenia bakteryjnego oraz analizę reakcji gospodarza na różne patogeny.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ta praca była wspierana przez 1R01AI125560-01 oraz fundusze start-up z Uniwersytetu Stanowego Ohio.

<ol><li>Tacken, P. J., Figdor, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+antigen+delivery+and+activation+of+dendritic+cells+in+vivo%3A+steps+towards+cost+effective+vaccines%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">Targeted antigen delivery and activation of dendritic cells in vivo: steps towards cost effective vaccines.</a> Seminars in Immunology. 23 (1), 12-20 (2011).</li>
<li>Kilgore, P. E., Salim, A. M., Zervos, M. J., Schmitt, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pertussis%3A+Microbiology%2C+Disease%2C+Treatment%2C+and+Prevention%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Microbiology+Reviews%22%5BJournal%5D)">Pertussis: Microbiology, Disease, Treatment, and Prevention.</a> Clinical Microbiology Reviews. 29 (3), 449-486 (2016).</li>
<li>Dorji, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bordetella+Pertussis+virulence+factors+in+the+continuing+evolution+of+whooping+cough+vaccines+for+improved+performance%5BTitle%5D)+AND+%22Medical+Microbiology+and+Immunology%22%5BJournal%5D)">Bordetella Pertussis virulence factors in the continuing evolution of whooping cough vaccines for improved performance.</a> Medical Microbiology and Immunology. 207 (1), 3-26 (2018).</li>
<li>Feldstein, L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+Routine+Vaccination+Coverage%2C+2016%5BTitle%5D)+AND+%22Morbidity+and+Mortality+Weekly+Report%22%5BJournal%5D)">Global Routine Vaccination Coverage, 2016.</a> Morbidity and Mortality Weekly Report. 66 (45), 1252-1255 (2017).</li>
<li>Cherry, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemic+pertussis+in+2012--the+resurgence+of+a+vaccine-preventable+disease%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Epidemic pertussis in 2012--the resurgence of a vaccine-preventable disease.</a> New England Journal of Medicine. 367 (9), 785-787 (2012).</li>
<li>Celentano, L. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resurgence+of+pertussis+in+Europe%5BTitle%5D)+AND+%22The+Pediatric+Infectious+Disease+Journal%22%5BJournal%5D)">Resurgence of pertussis in Europe.</a> The Pediatric Infectious Disease Journal. 24 (9), 761-765 (2005).</li>
<li>McNabb, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Summary+of+notifiable+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Morbidity+and+Mortality+Weekly+Report+p%22%5BJournal%5D)">Summary of notifiable diseases.</a> Morbidity and Mortality Weekly Report p. 54 (53), 1-92 (2007).</li>
<li>Sealey, K. L., Belcher, T., Preston, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bordetella+pertussis+epidemiology+and+evolution+in+the+light+of+pertussis+resurgence%5BTitle%5D)+AND+%22Infection%2C+Genetics%2C+and+Evolution%22%5BJournal%5D)">Bordetella pertussis epidemiology and evolution in the light of pertussis resurgence.</a> Infection, Genetics, and Evolution. 40, 136-143 (2016).</li>
<li>Warfel, J. M., Merkel, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+baboon+model+of+pertussis%3A+effective+use+and+lessons+for+pertussis+vaccines%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Reviews+of+Vaccines%22%5BJournal%5D)">The baboon model of pertussis: effective use and lessons for pertussis vaccines.</a> Expert Reviews of Vaccines. 13 (10), 1241-1252 (2014).</li>
<li>Jennings-Gee, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+adjuvant+Bordetella+Colonization+Factor+A+attenuates+alum-induced+Th2+responses+and+enhances+Bordetella+pertussis+clearance+from+mouse+lungs%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">The adjuvant Bordetella Colonization Factor A attenuates alum-induced Th2 responses and enhances Bordetella pertussis clearance from mouse lungs.</a> Infection and Immunity. , (2018).</li>
<li>Sukumar, N., Mishra, M., Sloan, G. P., Ogi, T., Deora, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+Bvg+phase-dependent+regulation+and+combinatorial+role+in+pathogenesis+of+two+Bordetella+paralogs%2C+BipA+and+BcfA%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bacteriology%22%5BJournal%5D)">Differential Bvg phase-dependent regulation and combinatorial role in pathogenesis of two Bordetella paralogs, BipA and BcfA.</a> Journal of Bacteriology. 189 (10), 3695-3704 (2007).</li>
<li>Stainer, D. W., Scholte, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+chemically+defined+medium+for+the+production+of+phase+I+Bordetella+pertussis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+General+Microbiology%22%5BJournal%5D)">A simple chemically defined medium for the production of phase I Bordetella pertussis.</a> Journal of General Microbiology. 63 (2), 211-220 (1970).</li>
<li>Bordet, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Le+microbe+de+le+coqueluche%5BTitle%5D)+AND+%22Annales+de+l%27Institut+Pasteur%22%5BJournal%5D)">Le microbe de le coqueluche.</a> Annales de l'Institut Pasteur. 20, 731-741 (1906).</li>
<li>Cook, M. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCook%2C+MJ+%22The+Anatomy+of+the+Laboratory+Mouse%22">The Anatomy of the Laboratory Mouse</a>. , Academic Press. (1965).</li>
<li>Sutton, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accuracy+of+Plate+Counts%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Validation+Techniques%22%5BJournal%5D)">Accuracy of Plate Counts.</a> Journal of Validation Techniques. 17 (3), 42-46 (2011).</li>
<li>Conover, M. S., Sloan, G. P., Love, C. F., Sukumar, N., Deora, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Bps+polysaccharide+of+Bordetella+pertussis+promotes+colonization+and+biofilm+formation+in+the+nose+by+functioning+as+an+adhesin%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Microbiology%22%5BJournal%5D)">The Bps polysaccharide of Bordetella pertussis promotes colonization and biofilm formation in the nose by functioning as an adhesin.</a> Molecular Microbiology. 77 (6), 1439-1455 (2010).</li>
<li>Cattelan, N., Jennings-Gee, J., Dubey, P., Yantorno, O. M., Deora, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperbiofilm+Formation+by+Bordetella+pertussis+Strains+Correlates+with+Enhanced+Virulence+Traits%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Hyperbiofilm Formation by Bordetella pertussis Strains Correlates with Enhanced Virulence Traits.</a> Infection and Immunity. 85 (12), (2017).</li>
<li>Andreasen, C., Carbonetti, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pertussis+toxin+inhibits+early+chemokine+production+to+delay+neutrophil+recruitment+in+response+to+Bordetella+pertussis+respiratory+tract+infection+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Pertussis toxin inhibits early chemokine production to delay neutrophil recruitment in response to Bordetella pertussis respiratory tract infection in mice.</a> Infection and Immunity. 76 (11), 5139-5148 (2008).</li>
<li>Mills, K. H., Gerdts, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+and+pig+models+for+studies+of+natural+and+vaccine-induced+immunity+to+Bordetella+pertussis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Mouse and pig models for studies of natural and vaccine-induced immunity to Bordetella pertussis.</a> Journal of Infectious Diseases. 209, Suppl 1 16-19 (2014).</li>
<li>Dunne, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+TLR2+agonist+from+Bordetella+pertussis+is+a+potent+adjuvant+that+promotes+protective+immunity+with+an+acellular+pertussis+vaccine%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunology%22%5BJournal%5D)">A novel TLR2 agonist from Bordetella pertussis is a potent adjuvant that promotes protective immunity with an acellular pertussis vaccine.</a> Mucosal Immunology. 8 (3), 607-617 (2015).</li>
<li>Denoel, P., Godfroid, F., Guiso, N., Hallander, H., Poolman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+acellular+pertussis+vaccines-induced+immunity+against+infection+due+to+Bordetella+pertussis+variant+isolates+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">Comparison of acellular pertussis vaccines-induced immunity against infection due to Bordetella pertussis variant isolates in a mouse model.</a> Vaccine. 23 (46-47), 5333-5341 (2005).</li>
<li>Marr, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+activity+of+the+Bordetella+pertussis+BrkA+autotransporter+in+the+murine+lung+colonization+model%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">Protective activity of the Bordetella pertussis BrkA autotransporter in the murine lung colonization model.</a> Vaccine. 26 (34), 4306-4311 (2008).</li>
<li>Feunou, P. F., Bertout, J., Locht, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((T-+and+B-cell-mediated+protection+induced+by+novel%2C+live+attenuated+pertussis+vaccine+in+mice.+Cross+protection+against+parapertussis%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">T- and B-cell-mediated protection induced by novel, live attenuated pertussis vaccine in mice. Cross protection against parapertussis.</a> PLoS One. 5 (4), 10178(2010).</li>
<li>Mills, K. H., Ryan, M., Ryan, E., Mahon, B. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+murine+model+in+which+protection+correlates+with+pertussis+vaccine+efficacy+in+children+reveals+complementary+roles+for+humoral+and+cell-mediated+immunity+in+protection+against+Bordetella+pertussis%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">A murine model in which protection correlates with pertussis vaccine efficacy in children reveals complementary roles for humoral and cell-mediated immunity in protection against Bordetella pertussis.</a> Infection and Immunity. 66 (2), 594-602 (1998).</li>
<li>Higgs, R., Higgins, S. C., Ross, P. J., Mills, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunity+to+the+respiratory+pathogen+Bordetella+pertussis%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunology%22%5BJournal%5D)">Immunity to the respiratory pathogen Bordetella pertussis.</a> Mucosal Immunology. 5 (5), 485-500 (2012).</li>
<li>Alving, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Design+and+selection+of+vaccine+adjuvants%3A+animal+models+and+human+trials%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">Design and selection of vaccine adjuvants: animal models and human trials.</a> Vaccine. 20, Suppl 3 56-64 (2002).</li>
<li>Ipp, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adverse+reactions+to+diphtheria%2C+tetanus%2C+pertussis-polio+vaccination+at+18+months+of+age%3A+effect+of+injection+site+and+needle+length%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Adverse reactions to diphtheria, tetanus, pertussis-polio vaccination at 18 months of age: effect of injection site and needle length.</a> Pediatrics. 83 (5), 679-682 (1989).</li>
<li>Fessard, C., Riche, O., Cohen, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intramuscular+versus+subcutaneous+injection+for+hepatitis+B+vaccine%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">Intramuscular versus subcutaneous injection for hepatitis B vaccine.</a> Vaccine. 6 (6), 469(1988).</li>
<li>Bergeson, P. S., Singer, S. A., Kaplan, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intramuscular+injections+in+children%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Intramuscular injections in children.</a> Pediatrics. 70 (6), 944-948 (1982).</li>
<li>Zhang, L., Wang, W., Wang, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+vaccine+administration+modality+on+immunogenicity+and+efficacy%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Review+of+Vaccines%22%5BJournal%5D)">Effect of vaccine administration modality on immunogenicity and efficacy.</a> Expert Review of Vaccines. 14 (11), 1509-1523 (2015).</li>
<li>Ross, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relative+Contribution+of+Th1+and+Th17+Cells+in+Adaptive+Immunity+to+Bordetella+pertussis%3A+Towards+the+Rational+Design+of+an+Improved+Acellular+Pertussis+Vaccine%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathogens%22%5BJournal%5D)">Relative Contribution of Th1 and Th17 Cells in Adaptive Immunity to Bordetella pertussis: Towards the Rational Design of an Improved Acellular Pertussis Vaccine.</a> PLoS Pathogens. 9 (4), 1003264(2013).</li>
<li>Warfel, J. M., Zimmerman, L. I., Merkel, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acellular+pertussis+vaccines+protect+against+disease+but+fail+to+prevent+infection+and+transmission+in+a+nonhuman+primate+model%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+USA%22%5BJournal%5D)">Acellular pertussis vaccines protect against disease but fail to prevent infection and transmission in a nonhuman primate model.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences USA. 111 (2), 787-792 (2014).</li>
<li>Allen, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sustained+protective+immunity+against+Bordetella+pertussis+nasal+colonization+by+intranasal+immunization+with+a+vaccine-adjuvant+combination+that+induces+IL-17-secreting+TRM+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunology%22%5BJournal%5D)">Sustained protective immunity against Bordetella pertussis nasal colonization by intranasal immunization with a vaccine-adjuvant combination that induces IL-17-secreting TRM cells.</a> Mucosal Immunology. , (2018).</li>
<li>Solans, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-17-dependent+SIgA-mediated+protection+against+nasal+Bordetella+pertussis+infection+by+live+attenuated+BPZE1+vaccine%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunology%22%5BJournal%5D)">IL-17-dependent SIgA-mediated protection against nasal Bordetella pertussis infection by live attenuated BPZE1 vaccine.</a> Mucosal Immunology. , (2018).</li>
<li>Miller, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualization+of+murine+intranasal+dosing+efficiency+using+luminescent+Francisella+tularensis%3A+effect+of+instillation+volume+and+form+of+anesthesia%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Visualization of murine intranasal dosing efficiency using luminescent Francisella tularensis: effect of instillation volume and form of anesthesia.</a> PLoS One. 7 (2), 31359(2012).</li>
<li>Sato, Y., Izumiya, K., Sato, H., Cowell, J. L., Manclark, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aerosol+infection+of+mice+with+Bordetella+pertussis%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Aerosol infection of mice with Bordetella pertussis.</a> Infection and Immunity. 29 (1), 261-266 (1980).</li>
<li>Warfel, J. M., Beren, J., Merkel, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Airborne+transmission+of+Bordetella+pertussis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Airborne transmission of Bordetella pertussis.</a> Journal of Infectious Diseases. 206 (6), 902-906 (2012).</li>
<li>Scanlon, K. M., Snyder, Y. G., Skerry, C., Carbonetti, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fatal+Pertussis+in+the+Neonatal+Mouse+Model+Is+Associated+with+Pertussis+Toxin-Mediated+Pathology+beyond+the+Airways%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Fatal Pertussis in the Neonatal Mouse Model Is Associated with Pertussis Toxin-Mediated Pathology beyond the Airways.</a> Infection and Immunity. 85 (11), (2017).</li>
<li>Martinez de Tejada, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neither+the+Bvg-+phase+nor+the+vrg6+locus+of+Bordetella+pertussis+is+required+for+respiratory+infection+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Neither the Bvg- phase nor the vrg6 locus of Bordetella pertussis is required for respiratory infection in mice.</a> Infection and Immunity. 66 (6), 2762-2768 (1998).</li>
<li>Higgins, S. C., Jarnicki, A. G., Lavelle, E. C., Mills, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TLR4+mediates+vaccine-induced+protective+cellular+immunity+to+Bordetella+pertussis%3A+role+of+IL-17-producing+T-cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">TLR4 mediates vaccine-induced protective cellular immunity to Bordetella pertussis: role of IL-17-producing T-cells.</a> Journal of Immunology. 177 (11), 7980-7989 (2006).</li>
<li>Mahon, B. P., Brady, M. T., Mills, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protection+against+Bordetella+pertussis+in+mice+in+the+absence+of+detectable+circulating+antibody%3A+implications+for+long-term+immunity+in+children%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Protection against Bordetella pertussis in mice in the absence of detectable circulating antibody: implications for long-term immunity in children.</a> Journal of Infectious Diseases. 181 (6), 2087-2091 (2000).</li>
<li>Karlsson, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+ELISPOT+and+cytokine+flow+cytometry+assays+for+the+enumeration+of+antigen-specific+T-cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunological+Methods%22%5BJournal%5D)">Comparison of the ELISPOT and cytokine flow cytometry assays for the enumeration of antigen-specific T-cells.</a> Journal of Immunological Methods. 283 (1-2), 141-153 (2003).</li>
<li>Hagen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+Multi-Donor+Study+of+IFNgamma+Secretion+and+Expression+by+Human+PBMCs+Using+ELISPOT+Side-by-Side+with+ELISA+and+Flow+Cytometry+Assays%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Comparative Multi-Donor Study of IFNgamma Secretion and Expression by Human PBMCs Using ELISPOT Side-by-Side with ELISA and Flow Cytometry Assays.</a> Cells. 4 (1), 84-95 (2015).</li>
<li>Raeven, R. H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+and+cellular+signatures+underlying+superior+immunity+against+Bordetella+pertussis+upon+pulmonary+vaccination%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunology%22%5BJournal%5D)">Molecular and cellular signatures underlying superior immunity against Bordetella pertussis upon pulmonary vaccination.</a> Mucosal Immunology. 11 (3), 1009(2018).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Opisany tutaj kompleksowy protokół badania odporności wywołanej szczepionką na zakażenie B. pertussis pozwoli również na ocenę odpowiedzi gospodarza na wiele innych patogenów. W protokole omówiono metody dostarczania szczepień, określania skuteczności szczepionki po prowokacji patogenem i równoległej sekcji funkcji immunologicznej. Dostosowując protokół w celu zbadania innych patogenów, konieczne byłoby zmodyfikowanie kilku parametrów. Należą do nich między innymi sposób znieczulenia zwierząt, skład szczepionki,...

Szczepionki stanowią jedno z największych osiągnięć zdrowia publicznego XX wieku, jednak nadal nie rozumiemy w pełni mechanizmów, za pomocą których skuteczne szczepionki stymulują odporność ochronną. Identyfikacja sygnatur molekularnych (np. markerów aktywacji komórek, ekspansji podtypów komórkowych i wzorców ekspresji genów) indukowanych po szczepieniu dostarcza mnóstwa informacji do przewidywania i generowania skutecznej odpowiedzi immunologicznej. Złożoność odpowiedzi gospodarz-patogen nie może być odpowiednio odtworzona przy użyciu systemów hodowli komórkowych in vitro1. Modele szczepionek in vivo są przeznaczone do jednoczesnej oceny wielu typów komórek odpornościowych w organizmie gospodarza. Daje to przewagę przy charakteryzowaniu przetwarzania i prezentacji antygenu szczepionkowego, różnicowego wydzielania cytokin i ekspansji komórek odpornościowych. Opisany tutaj protokół zawiera szczegółową metodę określania skuteczności szczepionki poprzez ocenę ogólnoustrojowej i miejscowej odpowiedzi immunologicznej oraz ilościowe określenie obciążenia patogenami w tkankach będących przedmiotem zainteresowania. Podany tutaj przykład testuje skuteczność eksperymentalnej szczepionki przeciwko patogenowi Bordetella pertussis (B. pertussis).
B. krztusiec to bakteria Gram-ujemna, która jest czynnikiem etiologicznym choroby układu oddechowego krztuśca (krztuśca)2,3. Bliski kontakt z osobami zakażonymi (objawowymi lub bezobjawowymi) prowadzi do przenoszenia, kolonizacji i choroby. Pomimo znacznego globalnego zasięgu szczepień4, krztusiec jest uważany za chorobę odradzającą się w wielu krajach na całym świecie i jest główną przyczyną możliwych do uniknięcia zgonów w dzieciństwie5,6,7,8. W 2015 r. B. pertussis i krztusiec zostały wpisane na listę pojawiających się zakaźnych patogenów/chorób Narodowego Instytutu Alergii i Chorób Zakaźnych (NIAID), podkreślając potrzebę opracowania lepszej szczepionki, która zapewni długotrwałą odporność ochronną.
Obecnie, aktywnym obszarem badań mających na celu kontrolowanie nawrotu krztuśca jest opracowanie nowej generacji bezkomórkowej szczepionki przeciw krztuścowi (aPV) z optymalną kombinacją nowych adiuwantów i antygenów, aby naśladować odpowiedź immunologiczną wywołaną przez całokomórkową szczepionkę przeciw krztuścowi (wPV)9. Korzystając z opisanego protokołu, niedawno informowaliśmy, że modyfikacja obecnie zatwierdzonego przez FDA aPV poprzez dodanie nowego adiuwantu, czynnika kolonizacji Bordetella A (BcfA), spowodowała bardziej efektywną redukcję obciążenia bakteryjnego B. pertussis z płuc myszy10,11. Tej zwiększonej ochronie towarzyszyło wypaczenie indukowanej przez ałun odpowiedzi immunologicznej Th1/Th2 na bardziej ochronny profil immunologiczny Th1/Th1710. Protokół ten jest szczegółowy i kompleksowy, umożliwiając badaczowi uzyskanie maksymalnych informacji poprzez jednoczesną ocenę odpowiedzi gospodarza i układu odpornościowego na różne patogeny.
Opisany tutaj protokół jest zgodny z reprezentatywnym schematem szczepień, pokazanym w Rysunek 1, aby zapewnić optymalną odpowiedź immunologiczną gospodarza.

<table><tbody><tr><td>Komora indukcyjna 2L</td><td>Vet Equip</td><td>941444</td><td></td></tr><tr><td>Fluriso</td><td>Vet One</td><td>V1 501017</td><td>dowolnej marki jest odpowiednia</td></tr><tr><td>Bordet Gengou Agar Base</td><td>BD bioscience</td><td>248200</td><td></td></tr><tr><td>Kazeina</td><td>Sigma</td><td>C-7078</td><td></td></tr><tr><td>Casaminokwasy</td><td>VWR</td><td>J851-500G</td><td>Filtr siatkowy Scholte (SS) składniki podłoża</td></tr><tr><td>Kwas L-glutaminowy</td><td>Produkty Badawcze Int</td><td>G36020-500</td><td></td></tr><tr><td>L-Prolina</td> Produkty <td>Badawcze Int</td><td>P50200-500</td><td></td></tr><tr><td>Chlorek sodu</td><td>Fisher</td><td>BP358-10</td><td></td></tr><tr><td>Fosforan potasu jednozasadowy</td><td>Fisher</td><td>BP362-1</td><td></td></tr><tr><td>Chlorek potasu</td><td>Fisher</td><td>P217-500</td><td></td></tr><tr><td>Chlorek magnezu sześciowodny</td><td>Fisher</td><td>M2670-500G</td><td></td></tr><tr><td>Chlorek wapnia</td><td>Fisher</td><td>C75-500</td><td></td></tr><tr><td>Tris base</td><td>Fisher</td><td>BP153-1</td><td></td></tr><tr><td>L-cysteina HCl</td><td>Fisher</td><td>BP376-100</td><td>SS suplementy mediów</td></tr><tr><td>Siarczan żelazawy siedmiowodny</td><td>Sigma</td><td>F-7002</td><td></td></tr><tr><td>Produkty Badawcze Niacyny</td><td>Int</td><td>N20080-100</td><td></td></tr><tr><td>Glutation</td><td>Produkty Badawcze Int</td><td>G22010-25</td><td></td></tr><tr><td>Kwas askorbinowy</td><td>Produkty Badawcze Int</td><td>A50040-500</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>11875093</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>Sigma</td><td>F2442-500mL</td><td>&nbsp; dowolne źródło amerykańskie, nieinaktywowana termicznie</td></tr><tr><td>gentamycyna</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>15710064</td><td></td></tr><tr><td>B-merkaptoetanol</td><td>Fisher&nbsp;</td><td>BP176-100</td><td></td></tr><tr><td>15mL młynek do tkanek</td><td>Wheaton</td><td>357544</td><td>każda podobna marka jest odpowiednia</td></tr><tr><td>Bezprzewodowy homogenizator ręczny</td><td>Kontes/Sigma&nbsp;</td><td>Z359971-1EA</td><td>każda podobna marka jest odpowiednia</td></tr><tr><td>Instrumenty - nożyczki, nożyczki krzywe, kleszcze, kleszcze drobnoziarniste, rozpieracze</td><td></td><td></td> trójkątów <td>każda marka jest odpowiednia</td></tr><tr><td>Strzykawki 3 ml</td><td>BD bioscience</td><td>309657</td><td></td></tr><tr><td>Probówki stożkowe 15 ml</td><td>Fisher&nbsp;</td><td></td><td></td>339651</tr><tr><td>1,5 ml probówki do mikrofuge</td><td>Denville</td><td>C2170</td><td></td></tr><tr><td>70um sitka komórkowe</td><td>Fisher&nbsp;</td><td></td><td></td>22363548</tr><tr><td>Płytki 60 mm</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>130181</td><td></td></tr><tr><td>48-dołkowe płytki do hodowli tkankowych</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>08-772-1C</td><td></td></tr><tr><td>1mL strzykawka insulinowa 28G1/2</td><td>Fisher Scientific/Excel Int.</td><td>14-841-31</td><td></td></tr><tr><td>Mysz IFN-gamma ELISA Ready-SET-Go! Zestaw</td><td>Invitrogen / eBioscience</td><td>50-173-21</td><td></td></tr><tr><td>Mysz IL-17 ELISA Ready-SET-Go! Zestaw</td><td>Invitrogen / eBioscience</td><td>50-173-77</td><td></td></tr><tr><td>Mysz IL-5 ELISA Ready-SET-Go! Zestaw</td><td>Invitrogen / eBioscience</td><td>50-172-09</td><td></td></tr></tbody></table>

ocena odpowiedzi gospodarz-patogen i skuteczności szczepionki u myszy

Evaluation of Host-Pathogen Responses and Vaccine Efficacy in Mice

Szczepionki to medyczny cudXX wieku. Radykalnie zmniejszyły one zachorowalność i śmiertelność spowodowaną chorobami zakaźnymi i przyczyniły się do uderzającego wzrostu średniej długości życia na całym świecie. Niemniej jednak określenie skuteczności szczepionki pozostaje wyzwaniem. Pojawiające się dowody sugerują, że obecna szczepionka bezkomórkowa (aPV) przeciwko Bordetella pertussis (B. pertussis) indukuje nieoptymalną odporność. Dlatego głównym wyzwaniem jest zaprojektowanie szczepionki nowej generacji, która indukuje odporność ochronną bez niepożądanych skutków ubocznych szczepionki pełnokomórkowej (wPV). Tutaj opisujemy protokół, który zastosowaliśmy do przetestowania skuteczności obiecującego, nowatorskiego adiuwantu, który wypacza odpowiedzi immunologiczne na ochronny fenotyp Th1 / Th17 i sprzyja lepszemu usuwaniu prowokacji B. pertussis z mysich dróg oddechowych. W tym artykule opisano protokół immunizacji myszy, inokulacji bakteryjnej, pobierania tkanek i analizy odpowiedzi immunologicznej. Korzystając z tej metody, w ramach naszego modelu, udało nam się wyjaśnić kluczowe mechanizmy wywoływane przez obiecującą bezkomórkową szczepionkę przeciw krztuścowi nowej generacji. Metodę tę można zastosować do dowolnego modelu choroby zakaźnej w celu określenia skuteczności szczepionki.

Opisany model przedstawia metodę oceny skuteczności szczepionki oraz odpowiedzi immunologicznych podczas oddziaływań między gospodarzem a patogenem. Rysunek 1 przedstawia reprezentatywny harmonogram szczepień stosowany do immunizacji i zakażania myszy oraz pobierania tkanek do analizy. Rysunek 2 prezentuje konfigurację systemu znieczulenia wykorzystywanego do indukcji u myszy, co umożliwia badaczom podanie szczepionek oraz inokul...

Tutaj prezentujemy elegancki protokół do oceny in vivo skuteczności szczepionki i odpowiedzi immunologicznej gospodarza. Protokół ten można dostosować do modeli szczepionek, które badają patogeny wirusowe, bakteryjne lub pasożytnicze.

Ocena odpowiedzi gospodarz-patogen i skuteczności szczepionki u myszy

Vaccines are a 20th century medical marvel. They have dramatically reduced the morbidity and mortality caused by infectious diseases and contributed to a ...

Protokół umożliwia ocenę odpowiedzi gospodarza na różne patogeny i preparaty szczepionek. Główną zaletą tej techniki jest to, że umożliwia ona ocenę obciążenia bakteryjnego i odpowiedzi immunologicznych in vivo, przy użyciu wykonalnego modelu zwierzęcego. Demonstruje tę procedurę Kacy Yount, doktorantka z mojego laboratorium.W celu uodpornienia należy potwierdzić brak reakcji na uszczypnięcie palca u znieczulonej myszy w wieku od sześciu do dwunastu tygodni i załadować strzykawkę insulinową o pojemności jednego mililitra, wyposażoną w igłę o rozmiarze 28,5 z 0,1 mililitra interesującej nas szczepionki. Trzymając strzykawkę pod kątem 45 stopni, ze skosem skierowanym do góry, wprowadzić igłę na około pięć milimetrów w naramiennik myszy i wstrzyknąć szczepionkę. Przytrzymaj igłę wbitą w mięsień przez pięć do dziesięciu sekund, a następnie obróć strzykawkę o 180 stopni, tak aby skos był skierowany w dół, aby utworzyć uszczelnienie i zapobiec wyciekowi szczepionki, zanim powoli wycofasz igłę z miejsca wstrzyknięcia.Następnie umieść mysz z powrotem w klatce, z monitorowaniem, aż do pełnego wyzdrowienia. Około dwa tygodnie po wzmocnieniu zainfekuj uodpornione myszy. Chwyć znieczuloną mysz za kark grzbietowej klatki piersiowej, za łopatkami i szyją, a następnie ustaw mysz pionowo, aby uzyskać dostęp do nosa.Używając końcówki pipety o pojemności 200 mikrolitrów, powoli nałóż od 20 do 25 mikrolitrów interesującego nas inokulum bakteryjnego na każdy nos zwierzęcia, trzymając mysz aż do wdychania całego inokulum. Następnie dostarczyć równą objętość sterylnego PBS jednej grupie myszy jako kontrolę negatywną. W odpowiednim eksperymentalnym punkcie końcowym umieść zakażoną mysz brzuszną stroną do góry na desce sekcyjnej i zabezpiecz kończyny.Zwilż ciało 70% etanolem i użyj kleszczy, aby chwycić skórę poniżej brzucha na środku miednicy. Za pomocą ostrych nożyczek wykonaj pionowe cięcie aż do żuchwy i wypreparuj skórę ze ściany otrzewnej. Przesuń skórę na boki tuszy, aby stworzyć niezakłócone pole do sterylnego pobierania narządów, i chwyć nienaruszoną otrzewną poniżej klatki piersiowej, na lub w pobliżu wątroby.Przetnij otrzewną w kierunku klatki piersiowej, aby odsłonić dolny odcinek przewodu pokarmowego, i przesuń okrężnicę w lewo, aby odsłonić śledzionę. Za pomocą zakrzywionych kleszczy chwyć śledzionę i wypreparuj tkankę łączną nożyczkami. Następnie umieść śledzionę w 15-mililitrowej stożkowej probówce zawierającej 3 mililitry RPMI i 5% płodowej surowicy bydlęcej na lodzie.Użyj kleszczy, aby ustabilizować klatkę piersiową w wyrostku ksylufoidalnym i rozciąć przeponę. Płuca powinny opróżnić się i opaść w kierunku kręgosłupa. Rozetnij klatkę piersiową po bokach, aby usunąć napierśnik, a następnie przetnij tętnice płucne i żyły, aby wyizolować i usunąć górny płat prawego płuca.Umieść płat w 15-mililitrowej stożkowej probówce z 10% neutralną buforowaną formaliną w temperaturze pokojowej przez co najmniej 24 godziny i odizoluj pozostałe płaty prawego i lewego płuca. Następnie umieść płatki w stożkowej probówce o pojemności 15 mililitrów, zawierającej dwa mililitry 1% kazeiny w PBS na lodzie. Użyj pipetownika o pojemności jednego mililitra z końcówką, aby zebrać krew wypełniającą jamę klatki piersiowej i przenieś krew do wstępnie oznakowanej 1,5-mililitrowej probówki mikrowirówkowej na lodzie.Usuń ślinianki przyuszne, podjęzykowe i podszczękowe oraz węzły chłonne pokrywające tchawicę, a następnie otwórz i usuń błony ochronne otaczające tchawicę. Za pomocą cienkich kleszczy i nożyczek ostrożnie oddziel tchawicę od przełyku, a wszelką inną tkankę łączną od górnej części obojczyków do dolnej części żuchwy. Użyj kleszczy, aby przytrzymać tchawicę i przeciąć tchawicę w górnej części obojczyka.Pociągnij tchawicę w dół, aby zmaksymalizować elastyczność, i przetnij tchawicę na dole żuchwy, tuż nad krtanią, izolując około jednego centymetra tkanki. Następnie umieść narząd w wstępnie oznakowanej 1,5 mililitrowej probówce mikrowirówkowej, zawierającej 0,3 mililitra 1% kazeiny w PBS na lodzie. Teraz obróć mysz, aby uzyskać wyraźny dostęp do nosa, i spryskaj głowę 70% etanolem.Ręcznie chwyć zwierzę bezpośrednio za czaszką i nożyczkami odetnij miękkie mięso pyska, zaczynając od dołu nosa i przesuwając się w górę. Usuń futro, skórę i wąsy z okolic nosa i włóż końcówki zakrzywionych nożyczek do nozdrza z krzywiznami skierowanymi w dół. Rozetnij przewód nosowy w kierunku oczu, tworząc formację przypominającą literę V.Następnie użyj cienkich kleszczy, aby zebrać przegrodę nosową i tkankę miękką w formacji, a następnie umieść tkankę we wstępnie oznakowanej 1,5-mililitrowej probówce mikrowirówkowej zawierającej 0,3 mililitra 1% kazeiny w PBS na lodzie. Aby przetworzyć tkankę płucną, przenieś całą zawartość probówki z próbką płuc do sterylnego 15-mililitrowego homogenizatora Dounce i użyj tłuczka do homogenizacji tkanki. Oddzielić próbkę do momentu, aż nie pozostaną żadne duże cząstki tkanki, a następnie zwróć homogenizowaną zawiesinę do oryginalnej 15-mililitrowej probówki.Usunąć podwielokrotność 0,3 mililitra do posiewu jednostek tworzących kolonie i zebrać resztę homogenatu przez odwirowanie. Podwielokrotność 0,5 mililitra supernatantu do wstępnie znakowanych probówek do mikrowirówek w celu przechowywania w temperaturze 20 stopni Celsjusza do czasu analizy ekspresji cytokin przez Elizę. Następnie seryjnie rozcieńczyć 0,1 mililitra podwielokrotności odłożonej homogenizowanej zawiesiny płuc w 0,9 mililitra sterylnego PBS na rozcieńczenie i użyć sterylnego trójkątnego rozsiewacza do naniesienia 0,1 mililitra każdego empirycznie wybranego rozcieńczenia na wstępnie oznakowanych płytkach 10% Bordet-Gengou plus streptomycyna.Tutaj pokazano reprezentatywne pomiary i obliczenia gęstości optycznej 600 w celu uzyskania zawiesiny bakteryjnej o jednej gęstości optycznej, w celu przygotowania stukrotnie rozcieńczonego inokulum bakteryjnego, które ma być dostarczone myszom. Po siedmiu dniach stymulacji antygenem szczepionkowym, uodpornione komórki śledziony z grupy szczepionki skojarzonej wytwarzają interferon gamma i IL17, jednocześnie znacznie obniżając regulację IL5, promując polaryzację odpowiedzi immunologicznej jako pomocnika T, jednego pomocnika T 17 podczas zakażenia krztuścem typu B. Liczenie bakterii tworzących kolonie odzyskanych z problemów z drogami oddechowymi myszy zakażonej krztuścem typu B może być wykorzystane do oceny ochronnego działania szczepionki będącej przedmiotem zainteresowania.Pracuj tak szybko i wydajnie, jak to możliwe, aby uniknąć martwicy tkanek, i przechowuj izolowaną tkankę na lodzie, aby zachować żywotność odzyskanych bakterii. Cytometria przepływowa ELISpot oraz izolacja DNA i RNA mogą być wykonywane w celu oceny komórek odpornościowych, produkcji analitu oraz umożliwienia analiz epigenetycznych i transkryptomicznych. Podczas pracy z czynnikami zakaźnymi, takimi jak Bordetella pertussis, należy pamiętać o noszeniu odpowiednich środków ochrony osobistej i pracy w certyfikowanej komorze bezpieczeństwa biologicznego, aby zapobiec przenoszeniu patogenów.Protokół ten szczegółowo opisuje liczenie CFU z dróg oddechowych, w szczególności z gardła nosowego. Odpowiedzieć na pytania w dziedzinie szczepionek i chorób zakaźnych dotyczące celowania w kolonizację bakteryjną w nosie.

evaluation-of-host-pathogen-responses-and-vaccine-efficacy-in-mice

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologia i infekcje

W tym filmie opisujemy protokół testowania skuteczności bezkomórkowej szczepionki przeciw krztuścowi przeciwko zakażeniu Bordetella pertussis u myszy. Po szczepieniu myszy poddano infekcji, a ich homogenat tkankowy poddano hodowli w celu analizy kolonii bakteryjnych jako odczytu odporności ochronnej wywołanej szczepionką.

Ocena odporności indukowanej szczepionką przeciwko infekcji bakteryjnej w modelu mysim

Odpowiedź immunologiczna gospodarza na infekcję patogenem jest ściśle regulowanym procesem. Wykorzystując model ekspozycji płuc na lipopolisacharydy u myszy, możliwe jest przeprowadzenie oceny w wysokiej rozdzielczości złożonych mechanizmów związanych z patogenezą choroby.

Wykorzystanie dotchawczego podawania PAMP w jamie ustnej i gardłowej oraz płukania oskrzeli i pęcherzyków płucnych w celu oceny odpowiedzi immunologicznej gospodarza u myszy

Modele zwierzęce okazały się nieocenionymi narzędziami w definiowaniu mechanizmów specyficznych dla gospodarza i patogenu, które przyczyniają się do rozwoju przewlekłego stanu zapalnego. W tym miejscu opisujemy mysi model zakażenia jamy ustnej ludzkim patogenem Porphyromonas gingivalis i szczegółowo opisujemy metodologie oceny postępu stanu zapalnego w miejscach miejscowych i ogólnoustrojowych.

Mysi model przewlekłego stanu zapalnego wywołanego przez patogeny w miejscach lokalnych i ogólnoustrojowych

Szczegółowo opisujemy metodologię stosowaną do porównania skuteczności ochronnej i odpowiedzi immunologicznej płuc indukowanej przez donosowe i podskórne szczepienie z BCG w modelu mysim. Nasze wyniki pokazują korzyści płynące ze szczepienia płuc i sugerują rolę odpowiedzi za pośrednictwem IL17 w ochronie indukowanej szczepionką.

Skuteczność ochronna i odpowiedź immunologiczna płuc po podaniu podskórnym i donosowym BCG myszom

Ten protokół opisuje, jak zaszczepić myszy C57BL/6J szczepem EGD Listeria monocytogenes (L. monocytogenes) i zmierzyć odpowiedzi interferonu γ (IFN-γ) przez komórki NK (natural killer), limfocyty T (NKT) i adaptacyjne limfocyty T po zakażeniu. Protokół ten opisuje również, w jaki sposób przeprowadzać badania przeżycia u myszy po zakażeniu zmodyfikowaną dawką LD50 patogenu.

Eksperymentalne zakażenie Listeria monocytogenes jako model do badania odpowiedzi na interferon-γ gospodarza

Wirusy grypy typu A (IAV) są ważnymi ludzkimi patogenami układu oddechowego. Aby zrozumieć patogenność wirusów IAV i przeprowadzić badania przedkliniczne nowych metod szczepień, potrzebne są modele zwierzęce naśladujące ludzką fizjologię. W tym miejscu opisujemy techniki oceny patogenezy IAV, odpowiedzi humoralnych i skuteczności szczepionki przy użyciu mysiego modelu infekcji.

Badania wirusa grypy A w mysim modelu infekcji

Prezentujemy tutaj aplikację do standardowej techniki immunologicznej (proliferacja OT-I barwiona CFSE) przeznaczonej do szybkiego monitorowania wytwarzania cytotoksycznych limfocytów T (CTL) za pośrednictwem adiuwantów in vivo. To szybkie oszacowanie zdolności CTL jest przydatne do opracowywania szczepionek profilaktycznych przeciwko patogenom wewnątrzkomórkowym, a także terapeutycznych szczepionek przeciwnowotworowych.

Szybka ocena in vivo zdolności wytwarzania cytotoksycznych limfocytów T adiuwantu w celu opracowania szczepionki

Opisano podejście do wykrywania w czasie rzeczywistym wrodzonej odpowiedzi immunologicznej na zranienia skórne i zakażenie Staphylococcus aureus u myszy. Porównując myszy LysM-EGFP (które posiadają fluorescencyjne neutrofile) z krzyżówką LysM-EGFP szczepu myszy z niedoborem odporności, pogłębiamy naszą wiedzę na temat infekcji i rozwijamy podejścia do zwalczania infekcji.

Mysi model do oceny wrodzonej odpowiedzi immunologicznej na zakażenie Staphylococcus aureus

Ten artykuł opisuje protokoły oceny odpowiedzi Tfh i GC B w mysim modelu infekcji wirusem grypy.

Ocena komórek pomocniczych pęcherzyków T i odpowiedzi centrum rozrodczego podczas infekcji wirusem grypy A u myszy

Tutaj prezentujemy skuteczną i efektywną metodę wstrzykiwania żył ogonowych gryzoni za pomocą unikalnie zaprojektowanego urządzenia rozgrzewającego/krępującego. Usprawniając inicjację procesów rozszerzania naczyń krwionośnych i ograniczania, protokół ten umożliwia dokładne i terminowe wstrzyknięcia dożylne dużym grupom zwierząt przy minimalnym stresie.

Nowoczesne urządzenie rozgrzewające/ograniczające do skutecznych iniekcji żył ogonowych w mysim modelu sepsy grzybiczej

Obecny protokół przygotowuje i ocenia właściwości fizyczne, odpowiedź immunologiczną i efekt ochronny in vivo nowej szczepionki z adiuwantem nanoemulsyjnym.

Ocena odpowiedzi immunologicznej szczepionki z adiuwantem nanoemulsyjnym przeciwko zakażeniu gronkowcem złocistym opornym na metycylinę (MRSA)

Poznaj metodę oceny odpowiedzi immunologicznych i skuteczności szczepionek u myszy w modelu in vivo. Protokół umożliwia pomiar obciążenia bakteryjnego oraz analizę reakcji gospodarza na różne patogeny.

Ocena odpowiedzi gospodarz-patogen i skuteczności szczepionki u myszy

Przeglądaj więcej filmów