Name: Hodowla zielonych mikroalg w fotobioreaktorach z kolumnami bąbelkowymi i test na obecność obojętnych lipidów (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 8 s
Description: Poznaj metodę hodowli zielonych mikroalg w fotobioreaktorach z kolumnami bąbelkowymi oraz test na obecność obojętnych lipidów. To ekonomiczne rozwiązanie pozwala badać biopaliwa algalne i oczyszczanie ścieków.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Wsparcie dla tych badań zostało zapewnione przez USDA National Institute of Food and Agriculture Hatch Project ALA0HIGGINS oraz Auburn University Offices of the Rektor, Vice President for Research oraz Samuel Ginn College of Engineering. Wsparcia udzielił również grant NSF CBET-1438211.

<ol><li>Prandini, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancement+of+nutrient+removal+from+swine+wastewater+digestate+coupled+to+biogas+purification+by+microalgae+Scenedesmus+spp%5BTitle%5D)+AND+%22Bioresource+Technology%22%5BJournal%5D)">Enhancement of nutrient removal from swine wastewater digestate coupled to biogas purification by microalgae Scenedesmus spp.</a> Bioresource Technology. , 67-75 (2016).</li>
<li>Liu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phycoremediation+of+dairy+and+winery+wastewater+using+Diplosphaera+sp.+MM1%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Phycology%22%5BJournal%5D)">Phycoremediation of dairy and winery wastewater using Diplosphaera sp. MM1.</a> Journal of Applied Phycology. 28 (6), 3331-3341 (2016).</li>
<li>Passero, M., Cragin, B., Coats, E. R., McDonald, A. G., Feris, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dairy+Wastewaters+for+Algae+Cultivation%2C+Polyhydroxyalkanote+Reactor+Effluent+Versus+Anaerobic+Digester+Effluent%5BTitle%5D)+AND+%22BioEnergy+Research%22%5BJournal%5D)">Dairy Wastewaters for Algae Cultivation, Polyhydroxyalkanote Reactor Effluent Versus Anaerobic Digester Effluent.</a> BioEnergy Research. 8 (4), 1647-1660 (2015).</li>
<li>Hodgskiss, L. H., Nagy, J., Barnhart, E. P., Cunningham, A. B., Fields, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cultivation+of+a+native+alga+for+biomass+and+biofuel+accumulation+in+coal+bed+methane+production+water%5BTitle%5D)+AND+%22Algal+Research%22%5BJournal%5D)">Cultivation of a native alga for biomass and biofuel accumulation in coal bed methane production water.</a> Algal Research. 19, 63-68 (2016).</li>
<li>Gao, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oil+accumulation+mechanisms+of+the+oleaginous+microalga+Chlorella+protothecoides+revealed+through+its+genome%2C+transcriptomes%2C+and+proteomes%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Genomics%22%5BJournal%5D)">Oil accumulation mechanisms of the oleaginous microalga Chlorella protothecoides revealed through its genome, transcriptomes, and proteomes.</a> BMC Genomics. 15, (2014).</li>
<li>Burch, A. R., Franz, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combined+nitrogen+limitation+and+hydrogen+peroxide+treatment+enhances+neutral+lipid+accumulation+in+the+marine+diatom+Phaeodactylum+tricornutum%5BTitle%5D)+AND+%22Bioresource+Technology%22%5BJournal%5D)">Combined nitrogen limitation and hydrogen peroxide treatment enhances neutral lipid accumulation in the marine diatom Phaeodactylum tricornutum.</a> Bioresource Technology. 219, 559-565 (2016).</li>
<li>Brennan, L., Owende, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biofuels+from+microalgae--A+review+of+technologies+for+production%2C+processing%2C+and+extractions+of+biofuels+and+co-products%5BTitle%5D)+AND+%22Renewable+Sustainable+Energy+Reviews%22%5BJournal%5D)">Biofuels from microalgae--A review of technologies for production, processing, and extractions of biofuels and co-products.</a> Renewable Sustainable Energy Reviews. 14 (2), 557-577 (2009).</li>
<li>Branyikova, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microalgae+-+Novel+highly+efficient+starch+producers%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+and+Bioengineering%22%5BJournal%5D)">Microalgae - Novel highly efficient starch producers.</a> Biotechnology and Bioengineering. 108 (4), 766-776 (2010).</li>
<li>Chalima, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Utilization+of+Volatile+Fatty+Acids+from+Microalgae+for+the+Production+of+High+Added+Value+Compounds%5BTitle%5D)+AND+%22Fermentation%22%5BJournal%5D)">Utilization of Volatile Fatty Acids from Microalgae for the Production of High Added Value Compounds.</a> Fermentation. 3 (4), (2017).</li>
<li>Harun, R., Singh, M., Forde, G. M., Danquah, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioprocess+engineering+of+microalgae+to+produce+a+variety+of+consumer+products%5BTitle%5D)+AND+%22Renewable+and+Sustainable+Energy+Reviews%22%5BJournal%5D)">Bioprocess engineering of microalgae to produce a variety of consumer products.</a> Renewable and Sustainable Energy Reviews. 14 (3), 1037-1047 (2010).</li>
<li>Liu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+new+method+for+genetic+transformation+of+the+green+alga+Chlorella+ellipsoidea%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+biotechnology%22%5BJournal%5D)">Development of a new method for genetic transformation of the green alga Chlorella ellipsoidea.</a> Molecular biotechnology. 54 (2), 211-219 (2013).</li>
<li>Cheng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mutate+Chlorella+sp.+by+nuclear+irradiation+to+fix+high+concentrations+of+CO2%5BTitle%5D)+AND+%22Bioresource+Technology%22%5BJournal%5D)">Mutate Chlorella sp. by nuclear irradiation to fix high concentrations of CO2.</a> Bioresource Technology. 136, 496-501 (2013).</li>
<li>Davis, R., Aden, A., Pienkos, P. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Techno-economic+analysis+of+autotrophic+microalgae+for+fuel+production%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Energy%22%5BJournal%5D)">Techno-economic analysis of autotrophic microalgae for fuel production.</a> Applied Energy. 88 (10), 3524-3531 (2011).</li>
<li>Sales, C. M., Au, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+Scale+in+a+Photosynthetic+Reactor+System+for+Algal+Remediation+of+Wastewater%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Comparison of Scale in a Photosynthetic Reactor System for Algal Remediation of Wastewater.</a> Journal of Visualized Experiments. (121), e55256(2017).</li>
<li>Higgins, B. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cofactor+symbiosis+for+enhanced+algal+growth%2C+biofuel+production%2C+and+wastewater+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Algal+Research%22%5BJournal%5D)">Cofactor symbiosis for enhanced algal growth, biofuel production, and wastewater treatment.</a> Algal Research. 17, 308-315 (2016).</li>
<li>Higgins, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Algal-bacterial+synergy+in+treatment+of+winery+wastewater%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Clean+Water%22%5BJournal%5D)">Algal-bacterial synergy in treatment of winery wastewater.</a> Nature Clean Water. 1 (6), (2017).</li>
<li>Higgins, B. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+thiamine+metabolites+and+spent+medium+from+Chlorella+sorokiniana+on+metabolism+in+the+green+algae+Auxenochlorella+prototheciodes%5BTitle%5D)+AND+%22Algal+Research%22%5BJournal%5D)">Impact of thiamine metabolites and spent medium from Chlorella sorokiniana on metabolism in the green algae Auxenochlorella prototheciodes.</a> Algal Research. 33, 197-208 (2018).</li>
<li>Lépinay, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First+insight+on+interactions+between+bacteria+and+the+marine+diatom+Haslea+ostrearia%3A+Algal+growth+and+metabolomic+fingerprinting%5BTitle%5D)+AND+%22Algal+Research%22%5BJournal%5D)">First insight on interactions between bacteria and the marine diatom Haslea ostrearia: Algal growth and metabolomic fingerprinting.</a> Algal Research. 31, 395-405 (2018).</li>
<li>Franchino, M., Comino, E., Bona, F., Riggio, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+of+three+microalgae+strains+and+nutrient+removal+from+an+agro-zootechnical+digestate%5BTitle%5D)+AND+%22Chemosphere%22%5BJournal%5D)">Growth of three microalgae strains and nutrient removal from an agro-zootechnical digestate.</a> Chemosphere. 92 (6), 738-744 (2013).</li>
<li>Choix, F. J., Lopez-Cisneros, C. G., Mendez-Acosta, H. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Azospirillum+brasilense+Increases+CO2+Fixation+on+Microalgae+Scenedesmus+obliquus%2C+Chlorella+vulgaris%2C+and+Chlamydomonas+reinhardtii+Cultured+on+High+CO2+Concentrations%5BTitle%5D)+AND+%22Microbial+Ecology%22%5BJournal%5D)">Azospirillum brasilense Increases CO2 Fixation on Microalgae Scenedesmus obliquus, Chlorella vulgaris, and Chlamydomonas reinhardtii Cultured on High CO2 Concentrations.</a> Microbial Ecology. 76 (2), 430-442 (2018).</li>
<li>Higgins, B., VanderGheynst, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+Escherichia+coli+on+mixotrophic+growth+of+Chlorella+minutissima+and+production+of+biofuel+precursors%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Effects of Escherichia coli on mixotrophic growth of Chlorella minutissima and production of biofuel precursors.</a> PLoS One. 9 (5), e96807(2014).</li>
<li>Higgins, B., Thornton-Dunwoody, A., Labavitch, J. M., VanderGheynst, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microplate+assay+for+quantitation+of+neutral+lipids+in+extracts+from+microalgae%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Microplate assay for quantitation of neutral lipids in extracts from microalgae.</a> Analytical Biochemistry. 465, 81-89 (2014).</li>
<li>Tanadul, O. U., Vandergheynst, J. S., Beckles, D. M., Powell, A. L., Labavitch, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+elevated+CO2+concentration+on+the+quality+of+algal+starch+as+a+potential+biofuel+feedstock%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+and+Bioengineering%22%5BJournal%5D)">The impact of elevated CO2 concentration on the quality of algal starch as a potential biofuel feedstock.</a> Biotechnology and Bioengineering. 111 (7), 1323-1331 (2014).</li>
<li>Folch, J., Lees, M., Sloane Stanley, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+method+for+the+isolation+and+purification+of+total+lipides+from+animal+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biological+Chemistry%22%5BJournal%5D)">A simple method for the isolation and purification of total lipides from animal tissues.</a> Journal of Biological Chemistry. 226 (1), 497-509 (1957).</li>
<li>Higgins, B. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Informatics+for+improved+algal+taxonomic+classification+and+research%3A+A+case+study+of+UTEX+2341%5BTitle%5D)+AND+%22Algal+Research%22%5BJournal%5D)">Informatics for improved algal taxonomic classification and research: A case study of UTEX 2341.</a> Algal Research. 12, 545-549 (2015).</li>
<li>Garrett, R. H., Grisham, C. M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGarrett%2C+RH+%22Biochemistry%22">Biochemistry</a>. , 5th Edition, Cengage Learning. 578-730 (2012).</li>
<li>de-Bashan, L. E., Trejo, A., Huss, V. A. R., Hernandez, J. -P., Bashan, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chlorella+sorokiniana+UTEX+2805%2C+a+heat+and+intense%2C+sunlight-tolerant+microalga+with+potential+for+removing+ammonium+from+wastewater%5BTitle%5D)+AND+%22Bioresource+Technology%22%5BJournal%5D)">Chlorella sorokiniana UTEX 2805, a heat and intense, sunlight-tolerant microalga with potential for removing ammonium from wastewater.</a> Bioresource Technology. 99 (11), 4980-4989 (2008).</li>
<li>Wang, Q., Higgins, B., Ji, H., Zhao, D. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWang%2C+Q+%22Annual+International+Meeting+of+the+ASABE%22">Annual International Meeting of the ASABE</a>. , American Society of Agricultural and Biological Engineers. Detroit, MI. (2018).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Najważniejszą kwestią przy hodowli glonów jest zrozumienie specyficznych potrzeb organizmu lub grupy organizmów. Opisany tutaj system uprawy glonów może być wykorzystywany do hodowli szerokiej gamy glonów, ale konkretne czynniki abiotyczne (temperatura, pożywka, pH, natężenie światła, poziomCO2 , szybkość napowietrzania) muszą być dostosowane do potrzeb organizmu. Należy zauważyć, że opisane tutaj parametry zostały wykorzystane do uprawy Chlorelli i Auxenochlorella. Organizmy te mają znaczeni...

Zastosowanie mikroalg w inżynierii i biotechnologii wzbudziło duże zainteresowanie w ostatnich latach. Mikroalgi są badane pod kątem zastosowania w oczyszczaniu ścieków1,2,3,4, produkcja biopaliw5,6,7,8, oraz produkcja nutraceutyków i innych produktów o wysokiej wartości9,10. Glony są również modyfikowane genetycznie w coraz szybszym tempie w celu poprawy ich przydatności do określonych zastosowań inżynieryjnych11,12. W związku z tym istnieje duże zainteresowanie eksperymentami z organizmami istotnymi dla przemysłu w kontrolowanych warunkach. Celem tej metody jest przedstawienie skutecznego podejścia do hodowli mikroalg w kontrolowanym środowisku laboratoryjnym oraz pomiar wzrostu i neutralnej zawartości lipidów w tych algach. Poprawa tempa wzrostu i neutralna zawartość lipidów w mikroalgach zostały zidentyfikowane jako dwa kluczowe wąskie gardła na drodze do komercjalizacji biopaliw z alg13.
Do hodowli glonów do celów eksperymentalnych stosowano szeroki zakres podejść. Ogólnie rzecz biorąc, podejścia te można podzielić na uprawę na dużą skalę na zewnątrz i uprawę na małą skalę w pomieszczeniach. Uprawa na wolnym powietrzu w fotobioreaktorach i otwartych stawach jest odpowiednia do eksperymentów mających na celu zwiększenie skali procesów, które zostały już udowodnione w skali laboratoryjnej (np. w celu przetestowania skali nowego szczepu glonów o wysokiej zawartości lipidów)14. Jednak uprawa na małą skalę w pomieszczeniach jest odpowiednia przy opracowywaniu nowych lub ulepszonych szczepów glonów lub przeprowadzaniu eksperymentów mających na celu zrozumienie mechanizmów biologicznych. W tych ostatnich przypadkach wymagany jest wysoki stopień kontroli eksperymentalnej, aby wydobyć subtelne zmiany w zachowaniu biologicznym. W tym celu często wymagane są kultury akseniczne, aby zminimalizować złożone czynniki biotyczne związane z innymi organizmami (np. bakteriami, innymi glonami), które nieuchronnie rosną w dużych systemach zewnętrznych. Nawet podczas badania interakcji między glonami a innymi organizmami odkryliśmy, że wykorzystanie ściśle kontrolowanych warunków eksperymentalnych jest pomocne podczas badania wymiany molekularnej między organizmami15,16,17.
W kategorii uprawy glonów na małą skalę, zastosowano szereg podejść. Być może najczęstszym podejściem jest hodowla glonów w kolbach Erlenmeyera na stole do wytrząsania pod lekkim bankiem18,19. Wymiana tlenu i CO2 odbywa się poprzez dyfuzję bierną przez korek piankowy w górnej części kolby. Niektórzy badacze udoskonalili tę konfigurację poprzez aktywne napowietrzanie kolb20. Innym podejściem jest uprawa glonów w butelkach, zmieszanych z mieszadłem i aktywnym napowietrzaniem. Pomimo ich prostoty stwierdziliśmy, że stosowanie kolb i butelek często prowadzi do niespójnych wyników wśród kontrprób biologicznych. Przypuszczalnie jest to spowodowane efektami położenia - różne pozycje otrzymują różne ilości światła, które również wpływają na temperaturę wewnętrznego reaktora. Codzienna rotacja reaktorów do nowych pozycji może pomóc, ale nie łagodzi problemu, ponieważ niektóre etapy wzrostu glonów (np. wczesny wykładniczy) są bardziej wrażliwe na efekty pozycyjne niż inne (np. faza logarytmiczna).
Na przeciwległym biegunie technologicznego zaawansowania znajdują się w pełni kontrolowane komercyjne fotobioreaktory. Systemy te stale monitorują i dostosowują warunki w reaktorze, aby zoptymalizować wzrost glonów. Posiadają programowalne oświetlenie, kontrolę temperatury w czasie rzeczywistym i kontrolę pH. Niestety, są one drogie i zazwyczaj kosztują kilka tysięcy dolarów za reaktor. Większość czasopism naukowych i inżynieryjnych wymaga biologicznej replikacji wyników, co wymaga zakupu wielu bioreaktorów. Przedstawiamy tutaj system reaktora z kolumną bąbelkową, który wypełnia granicę między prostym (kolba) a wyrafinowanym (w pełni kontrolowany bioreaktor) podejściem do hodowli glonów na skalę laboratoryjną. Kolumny pęcherzykowe wykorzystują unoszące się pęcherzyki gazu, aby ułatwić wymianę gazową i mieszanie reaktora. Takie podejście zapewnia pewien stopień kontroli nad oświetleniem i temperaturą, ale robi to w sposób opłacalny. Co więcej, stwierdziliśmy, że system ten daje bardzo spójne wyniki wśród kontrprób biologicznych, zmniejszając wymaganą liczbę powtórzeń biologicznych potrzebnych do uzyskania statystycznie istotnych wyników w porównaniu z podejściem kolbowym lub butelkowym. Użyliśmy również tego systemu do udanej hodowli mieszanin glonów i bakterii21. Oprócz uprawy glonów przedstawiamy procedurę pomiaru neutralnej zawartości lipidów w hodowanych algach. Ta ostatnia metoda została opublikowana w innym miejscu22, ale tutaj zamieszczamy procedurę, aby dostarczyć instrukcje krok po kroku, jak skutecznie ją zastosować.

<table><tbody><tr><td>Materiały eksploatacyjne do konfiguracji fotobioreaktora transportu powietrznego</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>1 L Butelki z tworzywa sztucznego</td><td>Corning</td><td>16157-191</td><td>Do reaktorów butelkowych, nawilżaczy</td></tr><tr><td>Zacisk węża 1/2"</td><td>Home Depot</td><td>UC953A</td><td>lub odpowiednik</td></tr><tr><td>1/4" żeński luer do zadzioru</td><td>Nordson biomedyczny Nordson</td><td>FTLL360-6005</td><td>1/4" ID, PP</td></tr><tr><td>Rurki PVC do autoklawy 1/4" ID, 3/8" OD</td><td>Thermo-Nalgene</td><td>63013-244</td><td>50'1</td></tr><tr><td>/4" in O-ringi</td><td>Grainger</td><td>1REC5</td><td>#010 Średnio twardy silikonowy O-ring, 0,239" ID, 0,379"OD.</td></tr><tr><td>1/8 "żeński luer do zadzioru</td><td>Nordson biomedical</td><td>FTLL230-6005</td><td></td></tr><tr><td>1/8 "ID, 1/4" OD autoklawowalne rurki PVC</td><td>Thermo-Nalgene</td><td>63013-608</td><td>250'1</td></tr><tr><td>/8" męski przędzenie luer do zadzioru</td><td>Nordson biomedical</td><td>MLRL013-6005</td><td></td></tr><tr><td>1/8" wieloportowy zadzior</td><td>Nordson</td><td>biomedical 4PLL230-6005</td><td>1/8" wieloportowy zadzior</td></tr><tr><td>1/8 "NPT do zadzioru</td><td>Nordson biomedical</td><td>18230-6005</td><td>1/8" 200 series Barb</td></tr><tr><td>1/8" do montażu panelowego Luer</td><td>Nordson biomedical Nordson</td><td>MLRLB230-6005</td><td>1/8", PP</td></tr><tr><td>10 galonów</td> akwarium <td>Walmart</td><td>802262</td><td>Może pomieścić do 8 bioreaktorów w zależności od układu</td></tr><tr><td>Przepływomierz 100-1000 ccm</td><td>Dwyer</td><td>RMA-13-SSV</td><td>Do reaktorów butelkowych</td></tr><tr><td>2 stopy fluorescencyjny bank światła</td><td>Agrobrite</td><td>FLT24 T5</td><td></td></tr><tr><td>Przepływomierz 200-2500 ccm</td><td>Dwyer</td><td>RMA-14-SSV</td><td>Do regulacji powietrza przed nawilżaczem</td></tr><tr><td>Butelki Pyrex 250 ml</td><td>Corning</td><td>16157-136</td><td>Do mieszania gazów po nawilżaczu</td></tr><tr><td>Przepływomierz 50-500 ccm</td><td>Dwyer</td><td>RMA-12-SSV</td><td>Do reaktorów rurowych hybrydyzacyjnych</td></tr><tr><td>Przepływomierz 5-50 ccm</td><td>Dwyer</td><td>RMA-151-SSV</td><td>Do kontroli natężenia przepływu CO2</td></tr><tr><td>Filtry powietrza 0,2 i mikro; m</td><td>Whatman/ Fisher</td><td>09-745-1A</td><td>Polyvent, 28 mm, 0,2 i mikro; m, PTFE, 50 sztuk</td></tr><tr><td>Zawory zwrotne</td><td>VWR</td><td>89094-714</td><td></td></tr><tr><td>Pokrywki Corning do butelek z pyreksu</td><td>VWR</td><td>89000-233</td><td>10 pokrywek GL45</td></tr><tr><td>Żeńska nasadka końcowa luer</td><td>Nordson biomedical</td><td>Nordson FTLLP-6005</td><td>Żeńska stabilna</td></tr><tr><td>PP Rurki hybrydyzacyjne</td><td>Corning</td><td>32645-030</td><td>35x300 mm, opakowanie 2 sztuk</td></tr><tr><td>Zegar świetlny</td><td>Walmart</td><td>556393626</td><td></td></tr><tr><td>Nakrętki zabezpieczające</td><td>Nordson biomedical</td><td>Nordson LNS-3</td><td>1/4", czerwony nylon</td></tr><tr><td>Niskoprofilowe mieszadło magnetyczne</td><td>VWR</td><td>10153-690</td><td>Mieszadło magnetyczne niskoprofilowe</td></tr><tr><td>Męska nasadka końcowa typu luer</td><td>Nordson biomedyczna</td><td>Nordson LP4-6005</td><td>Wtyczka męska PP</td></tr><tr><td>Wirujący pierścień blokujący typu luer</td><td>Nordson biomedyczny Nordson</td><td>FSLLR-6005</td><td></td></tr><tr><td>Mieszadła - długie</td><td>VWR</td><td>58949-040</td><td>38,1 mm, do reaktorów butelkowych</td></tr><tr><td>Mieszadła - średnie</td><td>VWR</td><td>58949-034</td><td>25 mm, do probówek do hyridyzacji</td></tr><tr><td>Materiały eksploatacyjne i odczynniki do hodowli glonów</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>0,2 i mikro; m Filtry</td><td>VWR</td><td>28145-491</td><td>13 mm, PTFE, do filtrowania zużytych pożywek z pobierania próbek z codziennej</td></tr><tr><td>hodowli Strzykawki 1 ml</td><td>Air-tite</td><td>89215-216</td><td>Do filtrowania zużytych pożywek z dziennego pobierania próbek posiewu</td></tr><tr><td>Probówki 1,5 ml</td><td>VWR</td><td>87003-294</td><td>Sterylne (lub równoważne)</td></tr><tr><td>10 ml Pipety serologiczne</td><td>Greiner Bio-One</td><td>82050-482</td><td>Sterylne (lub równoważne)</td></tr><tr><td>100 mm </td><td>talerze VWR</td><td>25384-342</td><td>Szalki Petriego 100x15 mm do układania w stosy, sterylne</td></tr><tr><td>probówki 15 ml</td><td>Greiner Bio-One</td><td>82050-276</td><td>Sterylne (lub równoważne), polipropylenowe</td></tr><tr><td>2 ml Serologiczne końcówki do pipet</td><td>Greiner Bio-One</td><td>82051-584</td><td>Sterylne (lub równoważne)</td></tr><tr><td>Probówki 2 ml</td><td>VWR</td><td>87003-298</td><td>Sterylne (lub równoważne)</td></tr> <tr><td>probówki 50 ml</td><td>Greiner Bio-One</td><td>82050-348</td><td>Sterylna (lub równoważna), polipropylenowa</td></tr><tr><td>96-dołkowa mikropłytka</td><td>Greiner Bio-One</td><td>89089-578</td><td>Polistyren z pokrywką, płaskie dno</td></tr><tr><td>Pętle do zakładania VWR</td><td></td><td>80094-478</td><td>Sterylny (lub równoważny)</td></tr> <tr><td>zbiornik ciekłego dwutlenku węgla i regulator</td><td>Airgas</td><td>CD-50</td><td></td></tr><tr><td>Materiały eksploatacyjne i odczynniki do ekstrakcji lipidów i oznaczania lipidów obojętnych</ mocne></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>2 ml probówki z kulkami</td><td>VWR</td><td>10158-556</td><td>Rurka polipropylenowa z pokrywką</td></tr><tr><td>96-dołkowe mikropłytki</td><td>Greiner Bio-One</td><td>82050-774</td><td>Polipropylen, płaskie dno</td></tr><tr><td>Wybielacz</td><td>Walmart</td><td>550646751</td><td>Używaj tylko zwykłego wybielacza, nie czyszcząc wybielacza</td></tr><tr><td>Chloroform</td><td>BDH</td><td>BDH1109-4LG</td><td></td></tr><tr><td>Dimetylosulfotlenek</td><td>BDH</td><td>BDH1115-1LP</td><td></td></tr><tr><td>Alkohol izopropylowy</td><td>BDH</td><td>BDH1133-1LP</td><td></td></tr><tr><td>Metanol</td><td>BDH</td><td>BDH20864.400</td><td></td></tr><tr><td>Czerwień nilowa</td><td>VWR</td><td>TCN0659-5G</td><td></td></tr><tr><td>Końcówki do pipet Pasteura</td><td>VWR</td><td>14673-010</td><td></td></tr><tr><td>Chlorek sodu</td><td>BDH</td><td>BDH9286-500G</td><td></td></tr><tr><td>Olej roślinny</td><td>Walmart</td><td>9276383</td><td>Każdy olej roślinny powinien działać, o ile jest świeży</td></tr><tr><td>Kulki cyrkonowe/krzemionkowe (średnica 0,5 mm)</td><td>Produkty biospec</td><td>11079105z</td><td></td></tr><tr><td>Equipment</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Analytical balance</td><td>Mettler-Toledo</td><td>XS205DU</td><td>Z dokładnością co najmniej 4 miejsc po przecinku</td></tr><tr><td>Homogenizator kulek</td><td>Omni</td><td>19-040E</td><td></td></tr><tr><td>Mikrowirówka stołowa</td><td>Thermo</td><td>Heraeus Fresco 21 z 24x2</td><td>W tym wirnik zdolny do obsługi probówek 1,5 i 2 ml</td></tr><tr><td>Suchy grzejnik blokowy</td><td>VWR</td><td>75838-282</td><td>W zestawie suchy blok do mikropłytki</td></tr><tr><td>Liofilizator</td><td>Labconco</td><td>7670520</td><td>System liofilizacji 2,5L</td></tr><tr><td>Duża wirówka stołowa</td><td>Thermo</td><td>Heraeus Megafuge 16R Tissue</td><td>W zestawie wirniki zdolne do obsługi butelek o pojemności 400 ml, probówek 50 ml i probówek 15 ml</td></tr><tr><td>Czytnik mikropłytek</td><td>Urządzenia molekularne</td><td>SpectraMax M2</td><td>Możliwość odczytu absorbancji i fluorescencji</td></tr><tr><td>Mieszalnik wirowy</td><td>VWR</td><td>10153-838</td><td></td></tr></tbody></table>

hodowla zielonych mikroalg w fotobioreaktorach z kolumnami bąbelkowymi i test na obecność obojętnych lipidów

Cultivation of Green Microalgae in Bubble Column Photobioreactors and an Assay for Neutral Lipids

Istnieje duże zainteresowanie badaniem mikroalg do zastosowań inżynieryjnych, takich jak produkcja biopaliw, produktów o wysokiej wartości oraz do przetwarzania odpadów. Ponieważ większość nowych badań rozpoczyna się na skalę laboratoryjną, istnieje zapotrzebowanie na opłacalne metody hodowli mikroalg w powtarzalny sposób. W tym miejscu komunikujemy skuteczne podejście do hodowli mikroalg w fotobioreaktorach na skalę laboratoryjną oraz do pomiaru wzrostu i neutralnej zawartości lipidów w tych algach. Dołączona jest również instrukcja, jak skonfigurować system fotobioreaktora. Chociaż przykładowe organizmy to gatunki Chlorella i Auxenochlorella, system ten można przystosować do uprawy szerokiej gamy mikroalg, w tym kokultur glonów z gatunkami innymi niż glony. Kultury podstawowe są najpierw hodowane w butelkach w celu wytworzenia inokulum dla systemu fotobioreaktora. Inokulum glonów jest zagęszczane i przenoszone do fotobioreaktorów w celu uprawy w trybie wsadowym. Próbki są pobierane codziennie w celu odczytu gęstości optycznej. Pod koniec hodowli wsadowej komórki są zbierane za pomocą wirówki, myte i liofilizowane w celu uzyskania końcowego stężenia suchej masy. Końcowe stężenie suchej masy służy do stworzenia korelacji między gęstością optyczną a stężeniem suchej masy. Zmodyfikowana metoda Folcha jest następnie stosowana do ekstrakcji całkowitych lipidów z liofilizowanej biomasy, a ekstrakt jest oznaczany pod kątem neutralnej zawartości lipidów za pomocą testu mikropłytki. Test ten został opublikowany wcześniej, ale uwzględniono tutaj kroki protokołu, aby podkreślić krytyczne etapy procedury, w których często występują błędy. Opisany tutaj system bioreaktorów wypełnia niszę między prostą hodowlą w kolbach a w pełni kontrolowanymi bioreaktorami komercyjnymi. Nawet przy zaledwie 3-4 powtórzeniach biologicznych na zabieg, nasze podejście do hodowli glonów prowadzi do ścisłych odchyleń standardowych w testach wzrostu i lipidów.

Niniejsza procedura pozwala na uzyskanie danych z przebiegu czasowego gęstości optycznej alg przy OD 550 nm (Rycina 4A). Dane dotyczące gęstości optycznej i stężenia suchej masy mogą zostać skorelowane (Rycina 4B). Osiąga się to najpierw poprzez obliczenie końcowego stężenia suchej masy alg po etapie liofilizacji. Następnie można skorelować gęstość optyczną rozcieńczeń seryjnych kultury (wykonanych w ostatnim dniu pobierania prób...

Tutaj prezentujemy protokół budowy fotobioreaktorów z bąbelkowymi kolumnami na skalę laboratoryjną i wykorzystania ich do hodowli mikroalg. Dostarcza również metody określania tempa wzrostu kultury i neutralnej zawartości lipidów.

Hodowla zielonych mikroalg w fotobioreaktorach z kolumnami bąbelkowymi i test na obecność obojętnych lipidów

There is significant interest in the study of microalgae for engineering applications such as the production of biofuels, high value products, and for the ...

Protokół ten zawiera instrukcje dotyczące budowy i użytkowania systemu fotobioreaktora z kolumną bąbelkową do hodowli mikroalg i powinien być interesujący dla każdego, kto studiuje biopaliwa algelowe, oczyszczanie ścieków lub biologię algel. Odkryliśmy, że system reaktora iglicowego daje bardzo renomowane wyniki. System reaktora można również dostosować do szerokiej gamy glonów i kosztuje znacznie mniej niż wiele ofert komercyjnych.Procedurę zademonstruje Qichen Wang, doktorant z mojego laboratorium. Aby rozpocząć konfigurację fotobioreaktorów z kolumną bąbelkową, skonstruuj zestaw wentylowanych pokrywek z plastikowych pokrywek litrowych szklanych butelek i probówek hybrydyzacyjnych, jak opisano w protokole tekstowym. Wsuń O-ring 1/4 cala na bieżniki złączki przynęty do montażu panelowego 1/8 cala i wsuń go do otworu 1/4 cala wywierconego w pokrywie.Wsuń drugie 1/4 cala na gwinty, tak aby pokrywka była umieszczona między dwoma O-ringami. Następnie wsuń nakrętkę zabezpieczającą na gwinty i dokręć ją, aby zamocować przynętę do montażu panelowego na miejscu. Teraz zatrzaśnij, aby zablokować pierścienie na odsłoniętej męskiej przynęcie, wystającej z pokrywy.Powtórz tę procedurę dla każdego otworu w pokrywie. W przypadku pokrywek, które będą używane w kolumnie bąbelkowej i reaktorach butelkowych, przymocuj żeńską przynętę 1/8 cala do złączek kolczastych do 1 1/2 cala kawałków rurki PVC o średnicy wewnętrznej 1/8 cala. Przymocuj je do każdego z odsłoniętych elementów przynęty męskiej na pokrywie.Podłącz zawór zwrotny do wolnego końca jednego z elementów 1/8 cala. Następnie podłącz męską przynętę do zadzioru do drugiego elementu rurki 1/8 cala wystającej z pokrywy. Zatrzaśnij obrotowy pierścień blokujący na miejscu i przymocuj do niego filtr powietrza o średnicy 0.2 mikrona.Kompletny montaż systemu dostarczania powietrza, zbiorników na ryby, płyt mieszających i świateł zgodnie z opisem w protokole tekstowym. Zagęścić osiadły wywar z mikroalg, usuwając supernatent za pomocą pompy próżniowej. Pozostaw mniej niż 100 mililitrów podłoża w każdej butelce, ale unikaj usuwania osiadłych glonów.Zawieś i przenieś gnojowicę glonów do sterylnych 50-mililitrowych probówek wirówkowych. Odwirować 1 000 razy G przez pięć minut, aby jeszcze bardziej zagęścić glony. W komorze bezpieczeństwa biologicznego usuń wystarczającą ilość supernatentu, aby uzyskać całkowitą objętość około 80 mililitrów koncentratów glonów dla 12 fotobioreaktorów.Unikaj odkurzania granulek. Przenieś koncentrat z alg do sterylnego pojemnika. Teraz dodaj sześć mililitrów zawiesiny glonów do każdego fotobioreaktora za pomocą sterylnej 10-mililitrowej pipety serologicznej.Zakręć bioreaktorami, aby wymieszać glony z podłożem. Pobrać dwumililitrową próbkę z każdego bioreaktora za pomocą pipety serologicznej i przenieść do dwumililitrowej probówki. Pobieraj próbkę o wielkości dwóch mililitrów co 24 godziny, aby monitorować postęp hodowli.Sprawdź próbkę pod kątem ph za pomocą pasków testowych i dostosuj reaktor w razie potrzeby. Dokręć pokrywy bioreaktora i umieść wszystkie bioreaktory w kąpieli wodnej w akwarium. Dostosuj napowietrzanie, dwutlenek węgla i oświetlenie do poziomów odpowiednich dla gatunku.Obracaj pozycję bioreaktora każdego dnia po pobraniu próbki. Nałożyć 200 mikrolitrów każdej próbki kultury w trzech powtórzeniach do studzienek 96-dołkowej mikropłytki. Następnie zmierz gęstość optyczną przy 550 nanometrach i 680 nanometrach.Zmierzyć ustaloną objętość hodowli glonów z każdego bioreaktora za pomocą cylindra z podziałką i przenieść do butelek wirówkowych. Odwirować kulturę 4 696 razy G przez pięć minut. Wyrzuć supernatent, ostrożnie go odkurzając.Przenieś granulki do oznaczonych 50-mililitrowych probówek. Wypłucz butelki wirówkowe wodą destylowaną i przenieś zawartość do 50-mililitrowych probówek. Upewnij się, że całkowita objętość nie przekracza 45 mililitrów.Po umyciu granulek glonów zgodnie z opisem w protokole tekstowym, wyrzuć supernatent. Następnie dodaj 7,5 mililitra wody destylowanej do każdej 50-mililitrowej probówki. Teraz wywiruj 50-mililitrowe rurki i przenieś zawiesiny glonów do wstępnie zważonych 15-mililitrowych probówek.Przepłucz 50-mililitrowe probówki dodatkową wodą destylowaną i przenieś płyn do 15-mililitrowych probówek, utrzymując całkowitą objętość w tych probówkach na mniej niż 12 mililitrów. Po odwirowaniu 15-mililitrowych probówek i odrzuceniu supernatentu jak poprzednio, zamrozić probówki z granulkami w temperaturze minus 80 stopni Celsjusza przez co najmniej 30 minut w ramach przygotowań do liofilizacji. Dodaj 1,5 mililitra rozpuszczalnika folch do każdej dwumililitrowej probówki zawierającej 20 miligramów liofilizowanych alg.Wlej około 0,5 mililitra kulek krzemionki cyrkonu do każdej probówki, aż poziom cieczy osiągnie dwa mililitry. Homogenizuj próbki glonów w młynie perełkowym przez 20 sekund z prędkością 6,5 metra na sekundę. Przenieść probówki do lodu na 30 sekund w celu schłodzenia próbek.Następnie powtórz jeszcze pięć razy, aby w pełni wyekstrahować lipidy. Przefiltrować homogenat przez pięciomililitrową strzykawkę zawierającą krążek z siatki drucianej ze stali nierdzewnej, aby odcedzić kulki, zbierając filtrat w 15-mililitrowej probówce. Umyj kulki 1,5 mililitra rozpuszczalnika folch, przepychając płyn strzykawką, jeśli to konieczne.Powtórz to płukanie jeszcze 2 razy i zbierz cały filtrat w 15-mililitrowej probówce, uzyskując końcową objętość około sześciu mililitrów. Dodaj 1,2 mililitra 0,9% roztworu chlorku sodu do ekstraktu folch w 15-mililitrowej probówce i wiruj, aby dobrze wymieszać. Odwirować 15-mililitrowe probówki o temperaturze 6 000 razy G przez pięć minut.Zapisz objętość dolnej fazy chloroformu z dokładnością do 0,1 mililitra za pomocą linii z boku 15-mililitrowej probówki. Następnie przenieś dolną fazę do szklanego naczynia za pomocą szklanej pipety pastwiskowej. Aby wykonać test neutralnych lipidów, należy trzykrotnie rozcieńczyć ekstrakty lipidowe i wzorzec oleju roślinnego metanolem.Do każdej rozcieńczonej próbki dodać 80 mikrolitrów do 96-dołkowej mikropłytki polipropylenowej w czworworze. W przypadku ślepej próby rozpuszczalnika nałóż 80 mikrolitrów rozpuszczalnika folch w czterokrotnym powiększeniu. W przypadku wzorców dodaj 10, 30, 60, 90 i 120 mikrolitrów rozcieńczonego wzorca oleju roślinnego również w poczwórnym powiększeniu.Umieścić mikropłytkę w dygestorium na nagrzanym suchym bloku grzewczym o temperaturze 55 stopni Celsjusza na 20 do 30 minut, aż cały rozpuszczalnik wyparuje. Wyjmij mikropłytkę z bloku grzewczego i pozwól jej ostygnąć do temperatury pokojowej. Następnie dodaj 30 mikrolitrów alkoholu izopropylowego do każdej studzienki i mieszaj, pipetując w górę iw dół.Upewnij się, że wszystkie kanały pipet mieszają roztwór i ponownie zawieszają lipidy, uzyskując jednorodną zieloną ciecz. Teraz dodaj 200 mikrolitrów jednego mikrograma na mililitr roztworu czerwieni nilowej do każdej studzienki i przetrzyj go 10 razy w górę iw dół, aby wymieszać. Po pięciominutowej inkubacji w temperaturze pokojowej dodaj 20 mikrolitrów 50% roztworu wybielacza do każdej studzienki i pięć razy w górę iw dół, aby dobrze wymieszać.Pozostaw płytkę do inkubacji przez 30 minut w temperaturze pokojowej. Po 30 minutach odczytuj kwiatostan w próbkach co pięć do 10 minut przy wzbudzeniu 530 nanometrów, emisji 575 nanometrów, z automatycznymi odcięciami ustawionymi na 570 nanometrów, aż sygnał z próbek glonów ustabilizuje się. Ta procedura daje przebieg czasowy danych o gęstości optycznej algelu przy OD 550 nanometrach.Kultury kontrolne hodowano na świeżym pożywce NH4 anate. Pierwszym zabiegiem są kokultury auxenochlorella protothecoides i azospirillum brasiliense uprawiane na świeżym wrodzonym pożywce NH4. Zabieg drugi, to azynowy A.Protothecoides wyhodowany na wrodzonym pożywce NH4 uzupełnionej 50 miligramami na mililitr IAA, który całkowicie zahamował wzrost glonów.Zabieg trzeci, to azynowy A.Protothecoides, wyhodowany na zużytym podłożu z A.Brasilienes. Krzywe wzrostu pokazują, że kultury auksenochlorelli protothecoides wchodzą w późny wzrost logarytmiczny po 120 godzinach. Przedstawiono tutaj krzywe korelacji między gęstością optyczną przy 550 nanometrach a końcowym stężeniem suchej masy, przy użyciu dopasowania wielomianowego drugiego rzędu.Na koniec zabarwienie można zastosować do danych o gęstości optycznej przebiegu czasu, aby uzyskać krzywą wzrostu suchej masy. Stosuje się tutaj te same zabiegi, z wyjątkiem tego, że chlorella sorokiniana jest hodowana zamiast protothecoides auksenochlorelli. Procent obojętnego lipidu w suchej masie uzyskany w obojętnym teście lipidowym dobrze koreluje z zawartością triozy glicerolu na odpowiedniej płytce do chromatografii cienkowarstwowej.W przeciwieństwie do A.Protothecoides, leczenie IAA nie hamowało wzrostu C.Sorkinana. Po ekstrakcji lipidów z alg, pozostała paleta komórkowa może być analizowana pod kątem zawartości skrobi i ściany komórkowej, zapewniając bardziej szczegółowy obraz produktów magazynowania energii w komórce. Opisane tu metody umożliwiły nowe odkrycia w dziedzinie biopaliw algowych i oczyszczania ścieków.W szczególności system ten został wykorzystany do lepszego zrozumienia, w jaki sposób bakterie wpływają na wzrost glu.

cultivation-green-microalgae-bubble-column-photobioreactors-an-assay

Research

JoVE Journal

Environment

Środowisko

Opisano metodę oznaczania zawartości i składu kwasów tłuszczowych w mikroalgach na podstawie mechanicznego rozbijania komórek, ekstrakcji lipidów na bazie rozpuszczalnika, transestryfikacji oraz kwantyfikacji i identyfikacji kwasów tłuszczowych za pomocą chromatografii gazowej. Wewnętrzny wzorzec tripentadekaniny służy do kompensacji ewentualnych strat podczas ekstrakcji i niepełnej transestryfikacji.

Analiza zawartości i składu kwasów tłuszczowych w mikroalgach

Opisany jest prosty protokół do określania neutralnej zawartości lipidów w komórkach glonów za pomocą procedury barwienia czerwienią Nilu. Ta oszczędzająca czas technika stanowi alternatywę dla tradycyjnych protokołów kwantyfikacji lipidów opartych na grawimetrii. Został zaprojektowany z myślą o konkretnym zastosowaniu monitorowania wydajności bioprocesów.

Prosty i szybki protokół pomiaru neutralnych lipidów w komórkach glonów za pomocą fluorescencji

Integracja hodowli mikroalg z przemysłowymi gazami spalinowymi ostatecznie wprowadzi metale ciężkie i inne związki nieorganiczne do podłoża wzrostowego. W pracy przedstawiono procedurę zastosowaną do określenia końcowego losu i wpływu metali ciężkich i zanieczyszczeń nieorganicznych na wzrost Nannochloropsis salina hodowanych w fotobioreaktorach.

Kwantyfikacja metali ciężkich i innych zanieczyszczeń nieorganicznych na produktywność mikroglonów

Ten artykuł opisuje proces montażu i działania laboratoryjnego bioreaktora fotosyntetycznego, który może być użyty, w połączeniu z innymi metodami, do oszacowania odpowiednich parametrów wzrostu kinetycznego. System ten stale monitoruje pH, światło i temperaturę za pomocą czujników, jednostki akwizycji i sterowania danymi oraz oprogramowania do akwizycji danych typu open source.

Budowa i konfiguracja laboratoryjnego bioreaktora fotosyntetycznego glonów z monitorowaniem temperatury, światła i pH do testów wzrostu kinetycznego

Uprawa akseniczna na skalę laboratoryjną ułatwia charakterystykę mikroglonów i optymalizację produktywności przed kolejnym zwiększeniem skali procesu. Fotobioreaktory zapewniają niezbędną kontrolę dla wiarygodnych i powtarzalnych eksperymentów z mikroalgami i mogą być przystosowane do bezpiecznej hodowli mikroalg z gazami korozyjnymi (CO2, SO2, NO2) z emisji ze spalania komunalnego lub przemysłowego.

Uprawa mikroalg i kwantyfikacja biomasy w fotobioreaktorze laboratoryjnym z korozyjnymi gazami spalinowymi

Opisano protokół wykorzystania dwutlenku węgla z gazów spalinowych elektrowni na gaz ziemny do hodowli mikroalg w otwartych stawach torowych. Wtryskiwanie spalin jest kontrolowane za pomocą czujnika pH, a wzrost mikroalg jest monitorowany za pomocą pomiarów gęstości optycznej w czasie rzeczywistym.

Sprzężenie wychwytywania dwutlenku węgla z elektrowni z półautomatycznymi otwartymi stawami torowymi do uprawy mikroalg

Ten protokół demonstruje użycie platformy technologicznej mikromacierzy fenotypowej (PM) do zdefiniowania wymagań metabolicznych Chlamydomonas reinhardtii, zielonej mikroalgi, i udoskonalenia istniejącego modelu sieci metabolicznej.

Wysokoprzepustowe profilowanie metaboliczne w celu udoskonalenia modelu mikroalg

Ta publikacja opisuje projekt laboratoryjnych fotobioreaktorów (PBR) z konfigurowalnymi reżimami oświetlenia. Wzrost sinic lub mikroalg, wykorzystujących wodorowęglan jako źródło węgla, jest stale monitorowany poprzez pomiar objętościowej produkcji tlenu. Te PBR ułatwiają szybkie, powtarzalne porównania wzrostu laboratoryjnego przy niewielkiej interwencji użytkownika podczas eksperymentów.

Obsługa fotobioreaktorów laboratoryjnych z pomiarami wzrostu online i konfigurowalnymi reżimami oświetlenia

Zanieczyszczenie powietrza wpływa na jakość życia wszystkich organizmów. W tym miejscu opisujemy zastosowanie biotechnologii mikroalg do oczyszczania biogazu (jednoczesne usuwanie dwutlenku węgla i siarkowodoru) oraz produkcji biometanu poprzez półprzemysłowe otwarte stawy glonów o wysokiej szybkości, a następnie analizę skuteczności oczyszczania, pH, rozpuszczonego tlenu i wzrostu mikroalg.

Oczyszczanie biogazu poprzez zastosowanie systemu mikroalgo-bakteryjnego w półprzemysłowych stawach z glonami o wysokiej zawartości

Niniejsze badanie podkreśla zalety stosowania metody opracowanej przez Jeffreya i Humphreya do ekstrakcji i ilościowego oznaczania rozpuszczalnych w tłuszczach pigmentów z mikroalg. Metoda ta służy jako cenne narzędzie do oceny wpływu czynników wzrostu na produkcję chlorofilu i zawartość komórkową w tych organizmach.

Ocena wpływu czynników wzrostu na produkcję chlorofilów a i b z mikroalg

Poznaj metodę hodowli zielonych mikroalg w fotobioreaktorach z kolumnami bąbelkowymi oraz test na obecność obojętnych lipidów. To ekonomiczne rozwiązanie pozwala badać biopaliwa algalne i oczyszczanie ścieków.

Hodowla zielonych mikroalg w fotobioreaktorach z kolumnami bąbelkowymi i test na obecność obojętnych lipidów

Przeglądaj więcej filmów