Name: Pomiar poziomu stresu biofizycznego i psychicznego po wizycie w trzech miejscach o różnym poziomie natury (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-06-19T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 33 s
Description: Poznaj metodę pomiaru stresu biologicznego i psychicznego po wizycie w trzech lokalizacjach o różnym stopniu naturalności. Analiza poziomu kortyzolu i alfa-amylazy w ślinie pozwala obiektywnie ocenić reakcję organizmu na środowisko naturalne.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

To badanie zostało częściowo sfinansowane przez Wydziałowy Program Grantów Badawczych (FRGP) sponsorowany przez Szkołę Zdrowia Publicznego na Uniwersytecie Indiana, Bloomington, IN. Autorzy pragną podziękować dr Alison Voight i Melissie Page za ich pomoc redakcyjną i konstruktywne komentarze.

Badanie to zostało przeprowadzone zgodnie z zasadami i wytycznymi Programu Ochrony Badań z Udziałem Ludzi (Human Research Protection Program) Komisji Bioetycznej (Institutional Review Board) Uniwersytetu w Indianie.
1. Wybór lokalizacji
<ol>
	<li>Wybierz liczbę obszarów (n) w oparciu o różne poziomy kontaktu z naturą. 
	UWAGA: W naszej pracy wybraliśmy trzy obszary. Stosując kontinuum oparte na poziomach „naturalności”, obszar A uznano za najbardziej naturalny; obejmuje on około 1 200 akrów zalesionych grzbietów graniczących z jeziorem, położonych wewnątrz lasu liściastego. Najczęstsze aktywności to spacery i obserwacja dzikiej przyrody. Obszar B stanowił miejski park o powierzchni 33 akrów, wyposażony w ścieżki spacerowe, miejsca spotkań, place zabaw oraz otwarte przestrzenie polne do swobodnych działań rekreacyjnych. Obszar C był miejskim, krytym obiektem do ćwiczeń, charakteryzującym się najniższym poziomem naturalności. Wszystkie trzy obszary znajdują się w stosunkowo bliskiej odległości od średniej wielkości miasta (szacowana liczba mieszkańców: 46 000 osób) w środkowo-zachodniej części Stanów Zjednoczonych.</li>
</ol>
2. Przesiew i przygotowanie uczestników
<ol>
	<li>Zakończ rekrutację uczestników przed rozpoczęciem przez badanych doświadczeń rekreacyjnych. 
	UWAGA: W przypadku lokalizacji A i B badani zostali zaproszeni do udziału przez badacza na parkingu przy wejściu do parku. W lokalizacji C badani zostali zaproszeni przy recepcji krytej hali sportowej. Aby kontrolować różnice w rodzaju aktywności, osoby zrekrutowane w lokalizacjach A i B zajmowały się głównie wędrówkami pieszymi, natomiast w lokalizacji C główną aktywnością był bieg lub marsz po krytej bieżni.</li>
	<li>Podczas rekrutacji przypomnij badanym o przestrzeganiu wytycznych dotyczących pobierania próbek kortyzolu z śliny. Nie mogą oni jeść ani pić na 10 min przed pobraniem próbki śliny. 
	UWAGA: Należy zauważyć, że w tym przypadku próbki śliny nie były normalizowane pod kątem objętości ani rozcieńczenia (stężenia) – tzn. czy uczestnicy byli odpowiednio nawodnieni i/lub czy stopień nawodnienia zmienił się między pobraniami próbek.</li>
	<li>Wręcz każdemu uczestnikowi czerwoną opaskę na ramię (lub równoważny, rzucający się w oczy element ubioru), aby umożliwić łatwą identyfikację po zakończeniu aktywności.</li>
	<li>Wyznacz przedział czasowy od 30-40 min, tak aby wszyscy badani we wszystkich trzech lokalizacjach spędzili podobną ilość czasu w każdej z nich. Wyklucz badanych, którzy spędzili znacznie więcej lub mniej czasu niż reszta grupy.</li>
	<li>Zachowaj spójność rodzaju podejmowanej aktywności. 
	UWAGA: W tym przypadku aktywnością o „umiarkowanej” intensywności był marsz lub wędrówka piesza. Z próby wykluczono osoby, których aktywność znacząco odbiegała od marszu lub wędrówki. Na przykład osoby łowiące ryby, piknikujące lub ćwiczące z ciężarami nie zostały włączone do odpowiednich grup.</li>
</ol>
3. Warunki i projekt eksperymentalny
<ol>
	<li>Zastosuj quasi-eksperymentalny schemat badania z pomiarem przed i po interwencji.</li>
	<li>Po zidentyfikowaniu uczestników i uzyskaniu ich zgody na udział, poproś każdą osobę o przeczytanie i podpisanie formularza IRB wyjaśniającego dobrowolność, cel oraz procedury badania.</li>
	<li>Po zakończeniu tego procesu przydziel uczestnikom element garderoby (np. czerwoną opaskę na ramię) w celu przyszłej identyfikacji i wykonaj pomiary fizjologiczne oraz psychologiczne poziomu stresu (tj. PSQ, 1-2 mL śliny wyplutej lub wypływającej do probówki). Próbki należy pobierać od późnego popołudnia do wczesnego wieczoru. 
	UWAGA: Dane te były zbierane przez badaczy zarówno 1) tuż przed wejściem uczestników na obszar badania, jak i 2) niezwłocznie po zakończeniu wizyty na tym obszarze.</li>
</ol>
4. Próbki śliny
<ol>
	<li>Aby uniknąć rozcieńczenia próbek, poproś badanych, aby nie jedli, nie pili i nie płukali ust na 10 min przed pobraniem próbek śliny.</li>
	<li>Poproś badanych o przekazanie próbek śliny o objętości 1-2 mL (z wyłączeniem piany) tuż przed doświadczeniem rekreacyjnym oraz niezwłocznie po jego zakończeniu.</li>
	<li>Pobierz próbki śliny metodą pasywnego ślinienia:
	<ol>
		<li>Przekaż badanym 2-calową plastikową słomkę do picia, aby mogli nalać ślinę do 2 mL krioprobówki (patrz Tabela materiałów).</li>
		<li>Poleć badanym, aby pozwolili ślinie zebrać się w ustach, a następnie spłynęła ona przez słomkę do krioprobówki. Zgodnie z Saliva Collection and Handling Advice (2011), 1 mL (z wyłączeniem piany) jest wystarczające dla większości testów.</li>
		<li>Oznacz próbki przypisanym 3-cyfrowym numerem ID (np. 001) oraz literą wskazującą czas pobrania danych (np. A oznacza przed testem, B oznacza po teście; gdzie 001A reprezentuje próbkę śliny przekazaną przez uczestnika 001 przed przeprowadzeniem doświadczenia rekreacyjnego).</li>
		<li>Po pobraniu i oznaczeniu próbki należy ją tymczasowo przechowywać w zamrożeniu w pudełku ze styropianu wypełnionym suchym lodem przez nie więcej niż 2 h.</li>
		<li>Przetransportuj oznaczone próbki do laboratorium i przechowuj w temperaturze -80 °C do momentu analizy.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
5. Oznaczanie ilościowe α-amylazy
UWAGA: W tym teście α-amylaza hydrolizuje 2-chloro-p-nitrofenylo-α-D-maltotriozyd do 2-chloronitrofenolu i tworzy glukozę, 2-chloro-p-nitrofenylo-α-D-maltozyd, maltotriozę oraz glukozę. Reakcję monitoruje się przy absorbancji 405 nm, co odpowiada aktywności α-amylazy w próbce. Test ten wykazuje liniowość w zakresie od 0 do 2000 U/L.
<ol>
	<li>Materiały
	<ol>
		<li>Do ilościowego oznaczenia α-amylazy w próbkach śliny użyto zestawu odczynników do płynnego oznaczenia amylazy (patrz Tabela materiałów). Wszystkie odczynniki są dostarczane w formie gotowych do użycia roztworów i przechowywane w temperaturze 0-4 °C.</li>
		<li>Należy użyć czytnika wielofunkcyjnego (patrz Tabela materiałów) zdolnego do pomiaru gęstości optycznej przy 405 nm z kontrolą temperatury na poziomie 37 °C podczas analizy.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Analiza
	<ol>
		<li>Próbki należy rozmrozić na lodzie przed analizą.</li>
		<li>Próbki należy rozcieńczyć w stosunku 1:10 w 1x PBS (10 µL śliny + 90 µL PBS).</li>
		<li>Każdą próbkę należy analizować w dubletach.</li>
		<li>Odczynnik amylazy należy doprowadzić do temperatury 20-25 °C przez co najmniej 30 min.</li>
		<li>Do mikropłytki 96-dołkowej należy dodać 0,1 mL odczynnika amylazy dla każdej próbki.</li>
		<li>Mikropłytkę należy wstępnie inkubować w temperaturze 37 °C przez minimum 5 min.</li>
		<li>Do odczynnika amylazy należy dodać 2,5 µL próbki.</li>
		<li>Pierwszy pomiar należy wykonać po 60 s.</li>
		<li>Kolejne pomiary należy wykonywać co 60 s przez dodatkowe 2 min.</li>
		<li>Należy obliczyć średnią różnicę absorbancji na minutę (ΔAbs/min).</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Obliczenia
	<ol>
		<li>Aby obliczyć aktywność amylazy, należy zastosować następujący wzór: 
		<img alt="Równanie równowagi statycznej, wzór ΔAbs/min dla aktywności alfa-amylazy w analizie śliny." src="/files/ftp_upload/59272/59272eq1.jpg" data-altupdatedat="1788282455000" data-alt="Równanie 1"> 
		Gdzie ΔAbs/min = zmiana różnicy absorbancji na minutę; TV = całkowita objętość analizy (0,1025 mL); *1000 = przeliczenie U/mL na U/L; MMA = absorpcja molowa 2-chloro-p-nitrofenolu = 12,9; SV = objętość próbki (0,0025 mL); oraz LP = droga optyczna (1 cm). Po podstawieniu otrzymujemy: 
		<img alt="Schemat wzoru równowagi statycznej, obliczenia ΔAbs/min, analiza aktywności enzymatycznej α-amylazy w U/L." src="/files/ftp_upload/59272/59272eq2.jpg" data-altupdatedat="1788282455000" data-alt="Równanie 2"> 
		W związku z tym, należy pomnożyć wartość ΔAbs/min przez 3178 oraz przez czynnik rozcieńczenia (10), aby otrzymać stężenie amylazy w U/L.</li>
		<li>W przypadku próbek przekraczających 2000 U/L (liniowość analizy) należy je dodatkowo rozcieńczyć (co najmniej 2x w PBS) i ponownie zbadać, a następnie pomnożyć wynik dla α-amylazy przez dodatkowy czynnik rozcieńczenia.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
6. Oznaczanie ilościowe kortyzolu
UWAGA: W tym teście wolny kortyzol w ślinie jest ilościowo określany przy użyciu krzywej wzorcowej kortyzolu. Standardy oraz rozcieńczone próbki nanosi się na płytkę mikrotitracyjną pokrytą uprzednio przeciwciałem. Do dołków dodaje się koniugat kortyzol-peroksydaza, a następnie przeciwciało monoklonalne przeciwko kortyzolowi. Ilość związanego koniugatu kortyzol/peroksydaza zmniejsza się wraz ze wzrostem stężenia kortyzolu w próbce.
<ol>
	<li>Materiały
	<ol>
		<li>Do oznaczenia ilości kortyzolu w próbkach śliny należy użyć zestawu do enzymatycznego immunoanalizy kortyzolu (patrz Tabela materiałów). Wszystkie odczynniki niezbędne do wykonania tego testu znajdują się w zestawie. Wszystkie komponenty zestawu przechowuje się w temperaturze 0-4 °C do dnia upływu terminu ważności.</li>
		<li>Należy użyć spektrofotometru zdolnego do pomiaru gęstości optycznej (OD) przy 450 nm (patrz Tabela materiałów), a także oprogramowania umożliwiającego wykorzystanie zapisów OD z czytnika płytek do dopasowania krzywej logistycznej czteroparametrowej (4 PLC).</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Przygotowanie odczynników
	<ol>
		<li>Należy pozwolić wszystkim odczynnikom osiągnąć temperaturę 20-25 °C przez minimum 30 min.</li>
		<li>Bufor do analizy kortyzolu należy rozcieńczyć 1:5 wodą dejonizowaną.</li>
		<li>Bufor płuczący należy rozcieńczyć 1:20 wodą dejonizowaną. 
		UWAGA: Bufory do analizy i płukania są stabilne przez 3 miesiące przy przechowywaniu w temperaturze 0-4 °C.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Przygotowanie próbek
	<ol>
		<li>Próbki należy rozmrozić na lodzie przed analizą.</li>
		<li>Próbki należy rozcieńczyć 1:10 buforem do analizy kortyzolu (20 µL śliny + 180 µL buforu) i wykorzystać w ciągu 2 h od przygotowania.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Przygotowanie standardów
	<ol>
		<li>Szklane probówki należy opisać od #1 do #7.</li>
		<li>Do probówki #1 należy pipetować 225 μL buforu do analizy, a do probówek #2-#7 po 125 μL buforu.</li>
		<li>Do probówki #1 należy dodać 25 μL roztworu zapasowego kortyzolu, a następnie wymieszać w wiertaku (vortex).</li>
		<li>Z probówki #1 należy pobrać 125 μL buforu i dodać go do probówki #2, a następnie wymieszać w wiertaku.</li>
		<li>Rozcieńczenia seryjne należy powtórzyć dla probówek #3-#7. 
		UWAGA: Końcowe stężenia kortyzolu dla każdego standardu przedstawiono w Tabeli 1.</li>
		<li>Standardy muszą zostać zużyte w ciągu 2 h od przygotowania.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
<table fo:keep-together.within-page="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Standard</td>
			<td>#1</td>
			<td>#2</td>
			<td>#3</td>
			<td>#4</td>
			<td>#5</td>
			<td>#6</td>
			<td>#7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Objętość buforu do testu (μL)</td>
			<td>225</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dodawanie</td>
			<td>Roztwór wzorcowy (Stock Std)</td>
			<td>#1</td>
			<td>#2</td>
			<td>#3</td>
			<td>#4</td>
			<td>#5</td>
			<td>#6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Objętość dodawanej ilości (µL)</td>
			<td>25</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stężenie końcowe (pg/ml)</td>
			<td>3200</td>
			<td>1600</td>
			<td>800</td>
			<td>400</td>
			<td>200</td>
			<td>100</td>
			<td>50</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 1: Tabela przygotowania krzywej standardowej.
<ol start="5">
	<li>Analiza
	<ol>
		<li>Należy posłużyć się schematem płyty przedstawionym poniżej na Ryc. 1 w celu przygotowania mikropłytki.</li>
		<li>Zaleca się użycie pipety wielokanałowej do dodawania reagentów.</li>
		<li>Do odpowiedniej liczby studzienek na płytce należy dodać po 50 μL próbek lub standardów. Próbki i standardy powinny być analizowane w duplikatach.</li>
		<li>Do studzienek wiązania nieswoistego (NSB) należy dodać bufor do analizy (75 μL).</li>
		<li>Do studzienek wiązania maksymalnego (B0) oraz studzienek standardu zero (blank) należy dodać bufor do analizy (50 μL).</li>
		<li>Do każdej studzienki należy dodać 25 μL koniugatu kortyzolu.</li>
		<li>Do każdej studzienki, z wyjątkiem studzienek NSB, należy dodać 25 μL przeciwciała przeciwko kortyzolowi.</li>
		<li>Należy delikatnie ostukać bok płytki, aby wymieszać reagenty.</li>
		<li>Płytkę należy przykryć uszczelniaczem i inkubować w temperaturze pokojowej (RT) 20-25 °C przez 1 h przy potrząsaniu.</li>
		<li>Należy usunąć zawartość studzienek i przemyć każdą z nich 4x buforem do mycia (300 Μl). Między myciami płytkę należy ostukać o ręczniki chłonne w celu osuszenia.</li>
		<li>Do każdej studzienki należy dodać substrat TMB (100 μL).</li>
		<li>Płytkę należy inkubować w temperaturze 20-25 °C przez 30 min bez potrząsania.</li>
		<li>Do każdej studzienki należy dodać roztwór stopujący (50 μL).</li>
		<li>Należy odczytać gęstość optyczną w każdej studzience mikropłytki przy 450 nm.</li>
		<li>Należy obliczyć średnią gęstość optyczną dla każdego standardu, a następnie próbki, i odjąć średnią gęstość optyczną dla studzienek NSB.</li>
		<li>Należy obliczyć % wiązania (B/B0) dla wszystkich próbek, korzystając z kontroli wiązania maksymalnego (B0).</li>
		<li>Należy sporządzić krzywą wzorcową przy użyciu oprogramowania umożliwiającego dopasowanie krzywej regresji logistycznej czteroparametrowej, obliczone na podstawie krzywej %B/B0.</li>
		<li>Wynik należy pomnożyć przez czynnik rozcieńczenia (10), aby otrzymać wartości kortyzolu w pg/mL.</li>
		<li>Próbki, których gęstość optyczna przekracza wartość najwyższego standardu, powinny zostać dodatkowo rozcieńczone buforem do analizy i poddane ponownemu badaniu, a następnie wynik należy pomnożyć przez dodatkowy czynnik rozcieńczenia.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
<img alt="Schemat mapy płytki mikrotitracyjnej dla konfiguracji testu z dołkami na standardy, próbki nieznane, kontrolami ujemnymi, NSB i B0." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59272/59272fig1.jpg" data-altupdatedat="1788282455000" data-alt="Rysunek 1"> 
Rysunek 1: Przykładowy układ płytki. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59272/59272fig1large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>
7. Pomiar psychologiczny (Kwestionariusz Odczuwanego Stresu)
<ol>
	<li>Zmierz poziom psychologiczny badanych za pomocą kwestionariusza PSQ opublikowanego przez Fliege i współpracowników13, który obejmuje cztery czynniki (martwienie się, napięcie, niepokój, radość) i składa się z 20 punktów.</li>
	<li>Poproś badanego o wypełnienie kwestionariusza PSQ bezpośrednio przed rozpoczęciem doświadczenia rekreacyjnego oraz niezwłocznie po jego zakończeniu.</li>
	<li>Oznacz kwestionariusze 3-cyfrowym numerem identyfikacyjnym, zgodnym z numerem przypisanym do biofizjologicznego poziomu stresu każdego badanego.</li>
</ol>

<ol><li>Hansmann, R., Hug, S., Seeland, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restoration+and+stress+relief+through+physical+activities+in+forests+and+parks%5BTitle%5D)+AND+%22Urban+Forestry+and+Urban+Greening%22%5BJournal%5D)">Restoration and stress relief through physical activities in forests and parks.</a> Urban Forestry and Urban Greening. 6, 213-225 (2007).</li>
<li>Krantz, D. S., McCeney, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+psychological+and+social+factors+on+organic+disease%3A+A+critical+assessment+of+research+on+coronary+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Psychology%22%5BJournal%5D)">Effects of psychological and social factors on organic disease: A critical assessment of research on coronary heart disease.</a> Annual Review of Psychology. 53, 341-369 (2002).</li>
<li>Ward Thompson, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((More+green+space+is+linked+to+less+stress+in+deprived+communities%3A+Evidence+from+salivary+cortisol+patterns%5BTitle%5D)+AND+%22Landscape+and+Urban+Planning%22%5BJournal%5D)">More green space is linked to less stress in deprived communities: Evidence from salivary cortisol patterns.</a> Landscape and Urban Planning. 105, 221-229 (2012).</li>
<li>Haluza, D., Schonbauer, R., Cervinka, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Green+perspectives+for+public+health%3A+A+narrative+on+the+physiological+effects+of+experiencing+outdoor+nature%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Environmental+Research+and+Public+Health%22%5BJournal%5D)">Green perspectives for public health: A narrative on the physiological effects of experiencing outdoor nature.</a> International Journal of Environmental Research and Public Health. 11, 5445-5461 (2014).</li>
<li>Korpela, K. M., Ylen, M., Tyrväinen, L., Silvennomen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determinants+of+restorative+experiences+in+everyday+favorite+places%5BTitle%5D)+AND+%22Health+and+Place%22%5BJournal%5D)">Determinants of restorative experiences in everyday favorite places.</a> Health and Place. 14, 636-652 (2008).</li>
<li>Mantler, A., Logan, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natural+environments+and+mental+health%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Integrative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Natural environments and mental health.</a> Advances in Integrative Medicine. 2, 5-12 (2015).</li>
<li>Mayer, F. S., McPherson-Frantz, C., Bruehlman-Senecal, E., Dolliver, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Why+is+nature+beneficial%3F+the+role+of+connectedness+to+nature%5BTitle%5D)+AND+%22Environment+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Why is nature beneficial? the role of connectedness to nature.</a> Environment and Behavior. 41, 307-643 (2009).</li>
<li>Pretty, J., Peacock, J., Sellens, M., Griffin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mental+and+physical+health+outcomes+of+green+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Environal+Health+Research%22%5BJournal%5D)">The mental and physical health outcomes of green exercise.</a> International Journal of Environal Health Research. 15, 319-337 (2005).</li>
<li>Ulrich, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress+recovery+during+exposure+to+natural+and+urban+environments%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Environmental+Psychology%22%5BJournal%5D)">Stress recovery during exposure to natural and urban environments.</a> Journal of Environmental Psychology. 11, 201-230 (1991).</li>
<li>Kaplan, S., Talbot, J. F. Psychological Benefits of a Wilderness Experience. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKaplan%2C+S+%22Behavior+and+the+Natural+Environment%22">Behavior and the Natural Environment</a>. Altman, I., Wohlwill, J. F. , Springer. Boston, MA. 163-203 (1983).</li>
<li>Salmon, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+physical+exercise+on+anxiety%2C+depression%2C+and+sensitivity+to+stress%3A+A+unifying+theory%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Psychology+Review%22%5BJournal%5D)">Effects of physical exercise on anxiety, depression, and sensitivity to stress: A unifying theory.</a> Clinical Psychology Review. 21, 33-61 (2001).</li>
<li>Focht, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brief+walks+in+outdoor+and+laboratory+environments%3A+Effects+on+affective+responses%2C+enjoyment%2C+and+intentions+to+walk+for+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22Research+Quarterly+for+Exercise+and+Sport%22%5BJournal%5D)">Brief walks in outdoor and laboratory environments: Effects on affective responses, enjoyment, and intentions to walk for exercise.</a> Research Quarterly for Exercise and Sport. 80, 611-620 (2009).</li>
<li>Fliege, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Perceived+Stress+Questionnaire+%28PSQ%29+reconsidered%3A+Validation+and+reference+values+from+different+clinical+and+healthy+adult+samples%5BTitle%5D)+AND+%22Psychosomatic+Medicine%22%5BJournal%5D)">The Perceived Stress Questionnaire (PSQ) reconsidered: Validation and reference values from different clinical and healthy adult samples.</a> Psychosomatic Medicine. 67, 78-88 (2005).</li>
<li>Kirschbaum, C., Hellhammer, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salivary+cortisol+in+psychoneuronendocrine+research%3A+Recent+developments+and+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Psychoneuroendocrinology%22%5BJournal%5D)">Salivary cortisol in psychoneuronendocrine research: Recent developments and applications.</a> Psychoneuroendocrinology. 19, 313-333 (1994).</li>
<li>Gallacher, D. V., Petersen, O. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stimulus-secretion+coupling+in+mammalian+salivary+glands%5BTitle%5D)+AND+%22International+Reviews+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">Stimulus-secretion coupling in mammalian salivary glands.</a> International Reviews in Physiology. 28, 1-52 (1983).</li>
<li>Slosnik, R. T., Chatterton, R. T., Swisher, T., Par, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+attentional+inhibition+by+norepinephrine+and+cortisol+after+psychological+stress%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Psychophysiology%22%5BJournal%5D)">Modulation of attentional inhibition by norepinephrine and cortisol after psychological stress.</a> International Journal of Psychophysiology. 36, 59-68 (2000).</li>
<li>Nater, U. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress-induced+changes+in+human+salivary+alpha-amylase+activity-associations+with+adrenergic+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Psychoneuroendocrinology%22%5BJournal%5D)">Stress-induced changes in human salivary alpha-amylase activity-associations with adrenergic activity.</a> Psychoneuroendocrinology. 31 (1), 49-58 (2006).</li>
<li>Takai, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+psychological+stress+on+the+salivary+cortisol+and+amylase+levels+in+healthy+young+adults%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Oral+Biology%22%5BJournal%5D)">Effect of psychological stress on the salivary cortisol and amylase levels in healthy young adults.</a> Archives of Oral Biology. 49 (12), 963-968 (2004).</li>
<li>Shirtcliff, E. A., Granger, D. A., Schwatz, E., Curran, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+salivary+biomarkers+in+biobehavioral+research%3A+Cotton+based+sample+collection+methods+can+interfere+with+salivary+immunoassay+results%5BTitle%5D)+AND+%22Psychoneuroendocrinology%22%5BJournal%5D)">Use of salivary biomarkers in biobehavioral research: Cotton based sample collection methods can interfere with salivary immunoassay results.</a> Psychoneuroendocrinology. 26, 165-173 (2001).</li>
<li>Nater, U. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+salivary+alpha-amylase+reactivity+in+a+psychosocial+stress+paradigm%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Psychophysiology%22%5BJournal%5D)">Human salivary alpha-amylase reactivity in a psychosocial stress paradigm.</a> Journal of Psychophysiology. 55 (3), 333-342 (2005).</li>
<li>Granger, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integration+of+salivary+biomarkers+into+developmental+and+behaviorally-oriented+research%3A+Problems+and+solutions+for+collecting+specimens%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Integration of salivary biomarkers into developmental and behaviorally-oriented research: Problems and solutions for collecting specimens.</a> Physiology and Behavior. 92, 583-590 (2007).</li>
<li>Frumkin, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beyond+toxicity%3A+Human+health+and+the+natural+environment%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Preventive+Medicine%22%5BJournal%5D)">Beyond toxicity: Human health and the natural environment.</a> American Journal of Preventive Medicine. 20, 234-240 (2001).</li>
<li>Hartig, T., Mitchell, R., de Vries, S., Frumkin, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nature+and+health%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Public+Health%22%5BJournal%5D)">Nature and health.</a> Annual Review of Public Health. 35, 207-228 (2014).</li>
<li>Gidlow, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Where+to+put+your+best+foot+forward%3A+Psycho-physiological+responses+to+walking+in+natural+and+urban+environments%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Environmental+Psychology%22%5BJournal%5D)">Where to put your best foot forward: Psycho-physiological responses to walking in natural and urban environments.</a> Journal of Environmental Psychology. 45, 22-29 (2016).</li>
<li>Ewert, A., Chang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Levels+of+nature+and+stress+response%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+Sciences%22%5BJournal%5D)">Levels of nature and stress response.</a> Behavioral Sciences. 8 (5), 49(2018).</li>
<li>Wyles, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Are+some+natural+environments+more+psychologically+beneficial+than+others%3F+The+importance+of+type+and+quality+on+connectedness+to+nature+and+psychological+restoration%5BTitle%5D)+AND+%22Environment+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Are some natural environments more psychologically beneficial than others? The importance of type and quality on connectedness to nature and psychological restoration.</a> Environment and Behavior. 51 (2), 111-143 (2019).</li>
</ol>

Autorzy deklarują brak konfliktu interesów.

Celem tego badania jest zidentyfikowanie potencjalnych zmian w stresie za pomocą narzędzi biofizycznych i psychologicznych po rekreacyjnych wizytach w trzech różnych miejscach o różnych poziomach natury. Wykazano, że zarówno kortyzol, jak i α-amylaza są wiarygodnymi wskaźnikami poziomu stresu psychologicznego. Procedura oznaczania amylazy opisana w tym badaniu została dostosowana do formatu 96 dołków. Gdy poziom amylazy w ślinie jest wysoki, zmiany absorbancji zachodzą szybko. Dlatego bardzo ważne jest ograniczenie liczb...

Podwyższony poziom stresu od dawna wiąże się z wieloma poważnymi schorzeniami, takimi jak choroby serca, otyłość i zaburzenia psychiczne1,2,3. Coraz więcej badań sugeruje, że bliskie sąsiedztwo lub odwiedziny w naturalnym otoczeniu, takim jak park i niezagospodarowane krajobrazy, może mieć niezwykły wpływ na samopoczucie psychiczne i zmniejszenie poziomu stresu1,4,5,6,7,8,9,10. Wyjaśnienia dotyczące wpływu naturalnych ustawień i poziomów stresu są następujące: (1) naturalne warunki zapewniają miejsca do aktywności fizycznej8,11 i (2) odwiedzający naturalne środowisko mają zdolność do skupienia się na bardziej niezwiązanych z zadaniami procesach myślowych, co prowadzi do zmniejszenia zmęczenia uwagi12. Aby określić wpływ natury na redukcję stresu, w badaniu wykorzystano samoopis stresu psychologicznego (PSQ) i dwa biomarkery oparte na ślinie, kortyzol i α-amylazę, po wizycie w trzech różnych miejscach rekreacyjnych. Lokalizacje te różnią się między sobą poziomem "naturalności" i obejmują otoczenie typu dzikiej przyrody, park miejski oraz lokalny obiekt fitness i rekreacyjny.
To badanie ma na celu odpowiedź na następujące pytania badawcze: (RQ1) Czy istnieją różnice w poziomach stresu biofizycznego mierzonego za pomocą kortyzolu w ślinie i α-amylazy w porównaniu we wszystkich trzech miejscach (tj. naturalny, półnaturalny, zbudowany)? (RQ2) Czy istnieją różnice w poziomach stresu psychicznego mierzonego przez PSQ (przejawiającego się w czterech konstruktach: wymaganiach, zmartwieniach, napięciu i radości) w porównaniu we wszystkich trzech miejscach (tj. naturalny, półnaturalny, zbudowany)?

<table><tbody><tr><td>Zestaw do oznaczania enzymów kortyzolu</td><td>DetectX</td><td>K003-H1</td><td>Zestaw do oznaczania enzymów kortyzolu jest przeznaczony do ilościowego pomiaru kortyzolu obecnego w suszonych ekstraktach kałowych, ślinie, moczu, surowicy, osoczu i próbkach pożywek hodowlanych.</td></tr><tr><td>Etykiety kriogeniczne do przechowywania kriogenicznego</td><td>Fisherbrand</td><td>5-910-A</td><td>Unikalny klej wytrzymuje ekstremalne temperatury</td></tr><tr><td>Odczynnik w płynie Amylaza (CNPG3) Set</td><td>Pointe Scientific</td><td>A7564</td><td>Do ilościowego oznaczania kinetycznego aktywności &alfa-amylazy w surowicy ludzkiej.</td></tr><tr><td>Probówki polipropylenowe o okrągłym dnie 2 ml z nasadką z gwintem zewnętrznym</td><td>Greiner Bio-One</td><td>07-000-257</td><td>2,0 ml U-BTM Cryo.s wolnostojący sterylizowany polipropylenem</td></tr><tr><td>wielomodowy czytnik mikropłytek Synergy</td><td></td><td></td> Jest <td>to jednokanałowy czytnik mikropłytek absorbancji, fluorescencji i luminescencji, który wykorzystuje konstrukcję z podwójną optyką do wykonywania pomiarów próbek w formacie mikropłytki.</td></tr></tbody></table>

pomiar poziomu stresu biofizycznego i psychicznego po wizycie w trzech miejscach o różnym poziomie natury

Measuring Biophysical and Psychological Stress Levels Following Visitation to Three Locations with Differing Levels of Nature

Wizyta w naturalnym środowisku wiąże się z redukcją stresu psychicznego. Chociaż większość badań związanych ze stresem opiera się na formatach samoopisowych, coraz więcej badań obejmuje obecnie biologiczne hormony i katalizatory związane ze stresem, takie jak kortyzol i α-amylaza, do pomiaru poziomu stresu. Przedstawiono tutaj protokół mający na celu zbadanie wpływu na poziom stresu biofizycznego i psychicznego po wizycie w trzech różnych miejscach o różnym poziomie natury. Poziomy stresu biofizycznego i psychicznego są mierzone natychmiast po wejściu do wybranych lokalizacji i tuż przed opuszczeniem terenu przez odwiedzających. Stosując metodę "śliny", miara biofizyczna składa się z 1-2 ml próbek śliny dostarczonych przez uczestników badania po wejściu do jednego z trzech miejsc badania. Zgodnie z zaleceniami istniejącej literatury, ślina jest pobierana w ciągu 45 minut od zakończenia zaangażowania odwiedzającego w dane miejsce. Po pobraniu śliny próbki są znakowane i transportowane do laboratorium biologicznego. Kortyzol jest zmienną biofizyczną będącą przedmiotem zainteresowania w tym badaniu i mierzoną za pomocą procesu ELISA z czytnikiem płytek TECAN. Aby zmierzyć stres zgłaszany przez samych siebie, stosuje się Kwestionariusz Postrzeganego Stresu (PSQ), który informuje o poziomie zmartwień, napięcia, radości i postrzeganych wymagań. Dane są zbierane we wszystkich trzech lokalizacjach od późnego popołudnia do wczesnego wieczora. W porównaniu we wszystkich trzech ustawieniach, poziom stresu, mierzony zarówno za pomocą markerów biologicznych, jak i raportów własnych, jest znacznie niższy po wizycie w najbardziej naturalnym otoczeniu.

Opis próby 
Z wykorzystaniem techniki doboru kwotowego w badaniu zrekrutowano po 35 odwiedzających z każdego z trzech miejsc. Łącznie do badania włączono 105 osób, w tym 63 mężczyzn i 42 kobiety. Średni wiek osób zrekrutowanych z trzech różnych miejsc wynosił odpowiednio 25,9 roku (Miejsce A), 37,2 roku (Miejsce B) oraz 28,8 roku (Miejsce C). Odnotowano również częstotliwość odwiedzin badanych osób w wybranych trzech miejscach. W przypadku Miejsca A i Miejsca C większość osób odwiedzała dany obiekt od...

Celem tego artykułu jest zidentyfikowanie zmian w poziomie stresu po wizycie w trzech różnych miejscach i opisanie metod stosowanych do identyfikacji poziomów stresu na podstawie pomiarów kortyzolu w ślinie, α-amylazy i psychologicznego narzędzia do samoopisu.

Pomiar poziomu stresu biofizycznego i psychicznego po wizycie w trzech miejscach o różnym poziomie natury

Visitation to natural environments has been linked to psychological stress reduction. Although most stress-related research has relied on self-report ...

Poniżej przedstawiamy protokół, który służy do zbadania wpływu na poziom stresu biofizycznego i psychicznego po wizycie w trzech miejscach o różnym poziomie natury. Jesteśmy ciekawi, czy strona o wyższym poziomie naturalności będzie bardziej skuteczna w pomaganiu uczestnikom w zmniejszaniu poziomu stresu. Oprócz korzystania z kwestionariusza samoopisowego, główną zaletą stosowania tej techniki jest to, że analiza poziomów kortyzolu i amylazy pobranych z próbek śliny uczestników może dać nam dokładniejszy odczyt i lepsze zrozumienie, jak nasz organizm faktycznie reaguje po wizycie w miejscach rekreacyjnych.Procedurę zademonstruje dr Hocevar, profesor z Indiana University. Zacznij od zapoznania się z tematem. Przekaż im formularz zgody do podpisania, w którym wyjaśnisz dobrowolny charakter, cel i procedury badania.Daj osobie badanej czerwoną opaskę na rękę do przyszłej identyfikacji. Uzyskaj fizjologiczne i psychologiczne pomiary poziomu stresu za pomocą próbek śliny, tuż przed doświadczeniem rekreacyjnym i bezpośrednio po jego zakończeniu. Zbierz od jednego do dwóch mililitrów próbki śliny metodą biernego ślinoty.Poinstruuj badanych, aby pozwolili, aby ślina gromadziła się w ustach,

measuring-biophysical-psychological-stress-levels-following

Research

JoVE Journal

Behavior

Zachowanie

W tym filmie opiszemy jedną z metod oceny psychofizjologicznej reakcji człowieka na stres z wykorzystaniem biofeedbacku. Przedstawimy również ogólne wytyczne dotyczące planowania leczenia.

Psychofizjologiczna ocena stresu z wykorzystaniem biofeedbacku

W niniejszym artykule opisano protokół indukowania stresu psychologicznego u uczestników, który umożliwia badaczom pomiar odpowiedzi psychologicznych, fizjologicznych i neuroendokrynnych na stres w ramach jednego uczestnika lub pomiędzy grupami.

Protokół Trierowskiego Testu Stresu Społecznego w celu wywoływania stresu psychologicznego

Przedstawiono protokół badania, w którym można ocenić związki między słuchaniem muzyki a stresem psychobiologicznym (mierzonym przez subiektywny poziom stresu, kortyzol w ślinie i alfa-amylazę w ślinie) w codziennym życiu. Udzielane są porady dotyczące projektu badania, materiałów, metod, doboru uczestników i obsługi statystycznej. Przedstawiono i omówiono reprezentatywne wyniki.

Ocena wpływu słuchania muzyki na stres psychobiologiczny w życiu codziennym

Tutaj prezentujemy protokół, który sprowokował reaktywność kortyzolu u wrażliwej próbki meksykańskiego Amerykanina, wykorzystując zmodyfikowaną wersję Trier Social Stress Test (TSST). Próbki śliny pobrano na początku badania, 15, 30 i 45 minut po wystąpieniu TSST. Przyszłe badania mogą wykorzystać ten zmodyfikowany TSST w przypadku wrażliwej młodzieży.

Zmodyfikowany test stresu społecznego w Trewirze dla wrażliwych nastolatków meksykańsko-amerykańskich

Stres jest nieuniknionym i trwałym elementem życia, a holistyczne podejście do jego zarządzania jest rozważane. Stworzono ustandaryzowaną metodologię, aby zademonstrować wykonalność protokołu radzenia sobie ze stresem opartego na oddechu, który może być stosowany z dostępną na rynku technologią przenośną.

Społecznościowy program radzenia sobie ze stresem: wykorzystanie urządzeń ubieralnych do oceny reakcji fizjologicznych całego ciała w warunkach nielaboratoryjnych

Zaproponowano protokół oceny rozwiązań opartych na komercyjnych urządzeniach do noszenia na nadgarstku (COTS) w celu oszacowania stresu u uczniów. Protokół jest przeprowadzany w dwóch fazach: wstępny laboratoryjny test indukcyjny stresu oraz etap monitorowania odbywający się w klasie, podczas gdy uczeń wykonuje zajęcia akademickie.

Ocena komercyjnych urządzeń noszonych na nadgarstku w celu oszacowania stresu u uczniów

Eksperymenty wirtualnej rzeczywistości (VR) mogą być trudne do przeprowadzenia i wymagają skrupulatnego planowania. Protokół ten opisuje metodę projektowania i realizacji eksperymentów VR, które zbierają dane fizjologiczne od uczestników. Framework EVE (Experiments in Virtual Environments) jest wykorzystywany do przyspieszenia tego procesu.

Eksperymenty w wirtualnej rzeczywistości ze środkami fizjologicznymi

Tutaj prezentujemy oryginalną metodę mieszaną, łączącą podejście ilościowe i jakościowe, aby dokładnie zbadać doświadczenia uczestników podczas Testu Stresu Społecznego w Trewirze i Testu Stresu Społecznego w Trewirze dla grup.

Enaktywne fenomenologiczne podejście do testu stresu społecznego w Trewirze: mieszany punkt widzenia

Obecny protokół wprowadza niekomercyjną, samodzielnie opracowaną aplikację do zbierania danych w czasie rzeczywistym na miejscu, w tym skal psychologicznych, lokalizacji GPS, tętna i poziomu nasycenia krwi tlenem, a także procedur operacyjnych aplikacji. Jako przykład zastosowania posłużyło badanie empiryczne przeprowadzone na Tajwanie w 2020 roku.

Aplikacja do parowania z urządzeniami ubieralnymi w celu monitorowania stanu zdrowia

Przedstawiamy protokół badający wpływ immersyjnych, 360-stopniowych ekspozycji na naturę w wirtualnej rzeczywistości na nastrój i ucieleśnienie. Uczestnicy doświadczają środowisk leśnych i morskich w pozycji siedzącej i stojącej, a oceny przeprowadzane są na standaryzowanych skalach do oceny efektów terapeutycznych dla interwencji zdrowia psychicznego.

Terapia przyrody VR: Ucieleśnienie i regulacja emocji poprzez immersyjne środowiska wirtualne

Poznaj metodę pomiaru stresu biologicznego i psychicznego po wizycie w trzech lokalizacjach o różnym stopniu naturalności. Analiza poziomu kortyzolu i alfa-amylazy w ślinie pozwala obiektywnie ocenić reakcję organizmu na środowisko naturalne.

Pomiar poziomu stresu biofizycznego i psychicznego po wizycie w trzech miejscach o różnym poziomie natury

Przeglądaj więcej filmów