Name: Indukcja niewydolności prawej komory przez zwężenie tętnicy płucnej i ocena funkcji prawej komory u myszy (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-05-13T13:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 40 s
Description: Poznaj technikę zwężenia tętnicy płucnej u myszy do badania niewydolności prawej komory. Metoda obejmuje ewentualnie echokardiografię i cewnikowanie w celu oceny przeciążenia ciśnieniowego.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ta praca była wspierana przez granty z Narodowej Fundacji Nauk Przyrodniczych Chin (81570464, 81770271; dla Dr. Liao) oraz Miejskich Projektów Planowania Technologii Naukowych w Kantonie (201804020083) (dla Dr. Liao).

Wszystkie procedury zostały przeprowadzone zgodnie z wytycznymi instytucjonalnymi dotyczącymi badań na zwierzętach, które są zgodne z Przewodnikiem Opieki i Użytkowania Zwierząt Laboratoryjnych opublikowanym przez amerykańskie Narodowe Instytuty Zdrowia (Publikacja NIH nr 85-23, poprawiona w 1996 roku). Samce myszy C57BL/6 (8-10 tygodni, o wadze 20-25 g) zostały dostarczone przez Animal Center Południowego Uniwersytetu Medycznego. Po przybyciu na miejsce, myszy były trzymane w 12/12-godzinnym cyklu ciemności/światła, z wystarczającą ilością pożywienia i wody.
1. Przygotowanie narzędzi chirurgicznych i produkcja igieł
<ol>
	<li>Przygotuj sterylne narzędzia chirurgiczne (<silna klasa="xfig">Rycina 1A), pleciony jedwabny szew 6-0 (<silna klasa="xfig">Rysunek 1B[a]) do podwiązania oraz nylonowy szew 5-0 do zamknięcia nacięcia (<silna klasa="xfig">Rysunek 1B[b]).</li>
	<li>Przełóż pleciony jedwabny szew 6-0 (<klasa silna = "xfig">Rysunek 1B [a]) przez igłę 25 G zdemontowaną ze strzykawki iniekcyjnej o pojemności 1 ml. Następnie wyginaj igłę pod kątem 90° za pomocą kleszczyków hemostatycznych, aby uzyskać igłę zatrzaskową (<silna klasa="xfig">Rysunek 1C[a]). Zegnij igłę 22 G o 120° (<silna klasa="xfig">Rysunek 1C (b)), aby wykonać igłę wyściełającą.</li>
</ol>
2. Przygotowanie do operacji
<ol>
	<li>Autoklawuj wszystkie narzędzia chirurgiczne przed zabiegiem. Ustaw poduszkę grzewczą na 37 °C. Znieczulij myszy przez wstrzyknięcie dootrzewnowe mieszaniną ksylazyny (5 mg/kg) i ketaminy (100 mg/kg) w celu złagodzenia bólu. Umieść myszy w osobnych pudełkach, aby poczekały na pojawienie się narkotyku. 
	UWAGA: Zaleca się również stosowanie 1,5% izofluranu do znieczulenia wziewnego.</li>
	<li>Monitoruj adekwatność znieczulenia poprzez zanik odruchu wycofania pedału. Trzymaj myszy w pozycji leżącej na poduszce grzewczej, mocując siekacze za pomocą szwu i mocując nogi taśmą klejącą. Sprawdź ponownie odruch, aby upewnić się, że znieczulenie jest głębokie.</li>
	<li>Nałóż pastę do depilacji na skórę od szyi do wyrostka mieczykowatego. Zdezynfekuj obszar jodem, a następnie 75% alkoholem.</li>
	<li>Wykonaj intubację dotchawiczą.
	<ol>
		<li>Dostosuj parametry miniwentylatora dla zwierząt (<klasa silna="xfig">Rysunek 1D) i ustaw częstość oddechów na 150/min, a objętość oddechową na 300 μl.</li>
		<li>Wyciągnij lekko język za pomocą spiczastych szczypiec, podnieś żuchwę szpatułką wykonaną w laboratorium <silna klasa = "xfig" > Rysunek 1C [c]), aby odsłonić głośnię, i delikatnie włóż laboratoryjną kaniulę tchawicy (<silna klasa = "xfig">Rysunek 1C [d]) przez głośnię, podczas gdy źródło zimnego światła jest skierowane na krtań.</li>
		<li>Podłącz rurkę i respirator, aby sprawdzić, czy kaniula została wprowadzona do tchawicy. Przymocuj tchawicę za pomocą taśmy klejącej, jeśli kaniula została prawidłowo włożona.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. Chirurgia
<ol>
	<li>Otwórz skrzynię.
	<ol>
		<li>Wykonaj nacięcie w skórze równolegle do drugiego żebra o długości około 10 mm za pomocą nożyczek okulistycznych. Upewnij się, że nacięcie zaczyna się od kąta mostka i kończy na lewej przedniej linii pachowej. Zidentyfikuj drugą przestrzeń międzyżebrową, licząc żebra od kąta mostka.</li>
		<li>Oddziel i przetnij mięśnie piersiowe większe i piersiowe mniejsze nożyczkami i pęsetą łokciową powyżej drugiej przestrzeni międzyżebrowej, aby odsłonić tę przestrzeń. 
		UWAGA: Zaleca się również oddzielenie, mobilizację i przesunięcie mięśni piersiowych w prawo i czaszkę.</li>
		<li>Tępo przeniknij drugą przestrzeń międzyżebrową pęsetą łokciową i otwórz tę przestrzeń. Następnie tępo oddziel miąższ i grasicę, aż będzie widoczny pień płucny.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Zwęź tętnicę płucną.
	<ol>
		<li>Dosadnie oddziel pień płucny i aortę wstępującą za pomocą pęsety łokciowej. Przełóż szew przez tkankę łączną między pniem płucnym a aortą wstępującą za pomocą igły zatrzaskowej.</li>
		<li>Umieścić igłę wyściełającą (patrz krok 1.2) na pniu płucnym, a następnie podwiązać pień płucny razem z igłą wyściełającą, używając plecionego jedwabnego szwu 6-0. Natychmiast po zaobserwowaniu wypełnienia stożka płucnego należy usunąć igłę wyściełającą i odciąć końce szwu.</li>
		<li>Obserwuj wypełnienie stożka płucnego, aby ocenić, czy występuje zwężenie. Ponownie oceń odruch zwierzęcia, aby upewnić się, że podwiązanie zakończy się sukcesem. 
		UWAGA: Wykonaj pozorowaną operację, wykonując wszystkie powyższe kroki z wyjątkiem zwężenia.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Zamknij klatkę piersiową i skórę nylonowym szwem 5-0. Ponownie zdezynfekuj skórę 75% alkoholem.</li>
	<li>Wstrzyknij podskórnie 0,5 ml soli fizjologicznej, aby uzupełnić płyn utracony podczas operacji. Umieść mysz w klatce osobno z poduszką grzewczą, aby ułatwić regenerację. Wróć myszy do ich klatek w pomieszczeniu z 12/12 godzinnym cyklem światła/ciemności, gdy powróci świadomość. Myszy należy podawać buprenorfinę w wodzie pitnej przez następne 3 dni.</li>
	<li>Zwróć szczególną uwagę na gojenie się rany po torakotomii, monitorując myszy 2 razy dziennie w ciągu pierwszego tygodnia, aby wykryć wszelkie oznaki niewystarczającego gojenia, upośledzenia ruchomości lub utraty wagi.</li>
</ol>
4. Echokardiograficzna ocena funkcji RV po operacji
UWAGA: Zmiany echokardiograficzne można wykryć 3 dni po zabiegu.
<ol>
	<li>Znieczulić myszy 3% izofluranem poprzez inhalację i utrzymać głębokość znieczulenia 1,5% izofluranem. Zamocuj mysz na platformie, przyklej jej pazury do elektrody i utrzymuj zwierzę w pozycji leżącej. Utrzymuj tętno myszy w zakresie 450-550 uderzeń/min, dostosowując stężenie izofluranu w zakresie od 1,5% do 2,5%.</li>
	<li>Usuń włosy z klatki piersiowej myszy za pomocą kremu do depilacji i nałóż żel ultradźwiękowy na skórę klatki piersiowej.</li>
	<li>Oceń zwężenie pnia płucnego za pomocą sondy 30 MHz.
	<ol>
		<li>Trzymaj sondę pod kątem 30° w kierunku przeciwnym do ruchu wskazówek zegara w stosunku do lewej linii przymostkowej, jednocześnie ustawiając wycięcie w kierunku ogonowym. Reguluj oś y i oś x w trybie B, aż zastawka mitralna, aorta i komora LV będą wyraźnie widoczne.</li>
		<li>Obróć sondę o 30°-40° wokół jej osi y w kierunku klatki piersiowej. Reguluj oś y i oś x, aż stożek płucny będzie wyraźnie widoczny.</li>
		<li>Umieść kursor na końcówce płatka zastawki płucnej, aby zmierzyć szczytową prędkość przepływu. Użyj trybu Color Doppler, naciskając Kolor, a następnie PW, a następnie przesuwając kursor, aby umieścić linię przerywaną PW równolegle do kierunku przepływu krwi.</li>
		<li>Zmierz szczytową prędkość tętnicy płucnej. Zapisz dane i obraz za pomocą Cine Store i Frame Store.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Oceń parametry RV za pomocą sondy 30 MHz.
	<ol>
		<li>Wyreguluj lewą stronę podkładki tak, aby znajdowała się niżej niż prawa strona. Trzymaj sondę zorientowaną pod kątem 30° do horyzontu wzdłuż prawej przedniej linii pachowej z wcięciem skierowanym w kierunku ogonowym. Reguluj oś y i oś x, aż RV będzie wyraźnie pokazany.</li>
		<li>Naciśnij M-Mode 2x, aby wyświetlić linię wskaźnika. Zmierz wymiar komory RV, skrócenie ułamkowe i grubość ścianki RV. Zapisz dane i obraz za pomocą Cine Store i Frame Store.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Należy przerwać inhalację izofluranu, aby umożliwić myszom odzyskanie przytomności, a następnie przywrócić zwierzęta do ich klatek w pomieszczeniu z 12-godzinnym cyklem światła/ciemności.</li>
</ol>
5. Cewnikowanie prawego serca do oceny funkcji RV
UWAGA: Cewnikowanie prawego serca zostało wykonane 8 tygodni po operacji w celu oceny funkcji RV, przy użyciu cewnika 1,0 F i systemu monitorowania.
<ol>
	<li>Autoklaw wszystkich narzędzi chirurgicznych. Znieczulić zwierzę poprzez wstrzyknięcie dootrzewnowe mieszaniną ksylazyny (5 mg/kg) i ketaminy (100 mg/kg).</li>
	<li>Po ustąpieniu odruchu wycofania pedału przymocuj mysz do platformy, przyklej jej pazury do elektrody i utrzymuj mysz w pozycji leżącej. Usuń włosy w obszarze operacyjnym za pomocą kremu do depilacji.</li>
	<li>Zdezynfekuj skórę pola operacyjnego 75% alkoholem. Za pomocą spiczastych szczypiec lekko wyciągnij język, podnieś żuchwę za pomocą szpatułki wykonanej we własnym zakresie, aby odsłonić głośnię, i delikatnie włóż kaniulę tchawicy wykonaną we własnym zakresie przez głośnię, podczas gdy źródło zimnego światła jest skierowane na krtań. Użyj respiratora (<silna klasa="xfig">Rysunek 1E), aby wspomóc wentylację.</li>
	<li>Otwórz jamę klatki piersiowej za pomocą 1,5 cm obustronnego nacięcia poniżej wyrostka mieczykowatego przez przeponę za pomocą nożyczek okulistycznych i kleszczy. Przetnij przeponę i żebra nożyczkami okulistycznymi, aby odsłonić serce. Przebić ścianę wolną od RV za pomocą igły 23 G i usunąć igłę; Delikatnie dociśnij punkt nakłucia bawełnianym wacikiem, aby zatrzymać krwawienie. Nakłuć komorę końcówką cewnika przez ranę. 
	UWAGA: Zaleca się również cewnikowanie prawego serca przez prawą żyłę szyjną6. Gdy końcówka cewnika znajdzie się w komorze, monitor wyświetli krzywą ciśnienia RV.</li>
	<li>Zapisz skurczowe ciśnienie krwi RV, ciśnienie końcoworozkurczowe RV, RV dP/dt, tętno myszy i wykładniczą stałą czasową relaksacji RV (Tau) przez 10 minut, gdy krzywa jest stabilna. Korzystając z oprogramowania, kliknij przycisk Wybierz, a następnie kliknij przycisk Analizuj.</li>
	<li>Wyreguluj końcówkę cewnika w kierunku drogi odpływowej RV. Wyciągnij cewnik po zakończeniu nagrywania. Po zakończeniu pomiarów umieść cewnik w soli fizjologicznej.</li>
	<li>Poddaj myszy eutanazji przez dootrzewnowe wstrzyknięcia pentobarbitalu sodu 150 mg / kg, a następnie zwichnięcie szyjki macicy. Następnie zbierz serce, płuca i piszczel do analiz histomorfologicznych i biologii molekularnej.</li>
</ol>

<ol><li>Mehra, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+heart+failure%3A+toward+a+common+language%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Heart+and+Lung+Transplantation%3A+The+Official+Publication+of+the+International+Society+for+Heart+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Right heart failure: toward a common language.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation: The Official Publication of the International Society for Heart Transplantation. 33, 123-126 (2014).</li>
<li>Sun, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stagedependent+changes+of+beta2adrenergic+receptor+signaling+in+right+ventricular+remodeling+in+monocrotalineinduced+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">Stagedependent changes of beta2adrenergic receptor signaling in right ventricular remodeling in monocrotalineinduced pulmonary arterial hypertension.</a> International Journal of Molecular Medicine. 41, 2493-2504 (2018).</li>
<li>Sun, X. Q., Abbate, A., Bogaard, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+cardiac+inflammation+in+right+ventricular+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Research%22%5BJournal%5D)">Role of cardiac inflammation in right ventricular failure.</a> Cardiovascular Research. 113, 1441-1452 (2017).</li>
<li>Xie, Y. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sildenafil+prevents+and+reverses+transverse-tubule+remodeling+and+Ca%282%2B%29+handling+dysfunction+in+right+ventricle+failure+induced+by+pulmonary+artery+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Sildenafil prevents and reverses transverse-tubule remodeling and Ca(2+) handling dysfunction in right ventricle failure induced by pulmonary artery hypertension.</a> Hypertension. 59, 355-362 (2012).</li>
<li>de Raaf, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SuHx+rat+model%3A+partly+reversible+pulmonary+hypertension+and+progressive+intima+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22European+Respiratory+Journal%22%5BJournal%5D)">SuHx rat model: partly reversible pulmonary hypertension and progressive intima obstruction.</a> European Respiratory Journal. 44, 160-168 (2014).</li>
<li>Abe, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Haemodynamic+unloading+reverses+occlusive+vascular+lesions+in+severe+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Research%22%5BJournal%5D)">Haemodynamic unloading reverses occlusive vascular lesions in severe pulmonary hypertension.</a> Cardiovascular Research. 111, 16-25 (2016).</li>
<li>Gomez-Arroyo, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+monocrotaline+model+of+pulmonary+hypertension+in+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Lung+Cellular+and+Molecular+Physiology%22%5BJournal%5D)">The monocrotaline model of pulmonary hypertension in perspective.</a> American Journal of Physiology. Lung Cellular and Molecular Physiology. 302, L363-L369 (2012).</li>
<li>van der Feen, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shunt+Surgery%2C+Right+Heart+Catheterization%2C+and+Vascular+Morphometry+in+a+Rat+Model+for+Flow-induced+Pulmonary+Arterial+Hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension.</a> Journal of Visualized Experiments. (120), e55065(2017).</li>
<li>Andersen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Pulmonary+Trunk+Banding+Model+of+Pressure+Overload+Induced+Right+Ventricular+Hypertrophy+and+Failure%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A Pulmonary Trunk Banding Model of Pressure Overload Induced Right Ventricular Hypertrophy and Failure.</a> Journal of Visualized Experiments. (141), e58050(2018).</li>
<li>Hirata, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+Model+of+Pulmonary+Artery+Banding+Leading+to+Right+Heart+Failure+in+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22BioMed+Research+International%22%5BJournal%5D)">Novel Model of Pulmonary Artery Banding Leading to Right Heart Failure in Rats.</a> BioMed Research International. 2015, 753210(2015).</li>
<li>Zaw, A. M., Williams, C. M., Law, H. K., Chow, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimally+Invasive+Transverse+Aortic+Constriction+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (121), e55293(2017).</li>
<li>Rockman, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+and+physiological+alterations+in+murine+ventricular+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Molecular and physiological alterations in murine ventricular dysfunction.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 91, 2694-2698 (1994).</li>
<li>Reddy, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((miR-21+is+associated+with+fibrosis+and+right+ventricular+failure%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">miR-21 is associated with fibrosis and right ventricular failure.</a> JCI Insight. 2, (2017).</li>
<li>Kusakari, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impairment+of+Excitation-Contraction+Coupling+in+Right+Ventricular+Hypertrophied+Muscle+with+Fibrosis+Induced+by+Pulmonary+Artery+Banding%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Impairment of Excitation-Contraction Coupling in Right Ventricular Hypertrophied Muscle with Fibrosis Induced by Pulmonary Artery Banding.</a> PLoS ONE. 12, e0169564(2017).</li>
<li>Hu, J., Sharifi-Sanjani, M., Tofovic, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nitrite+Prevents+Right+Ventricular+Failure+and+Remodeling+Induced+by+Pulmonary+Artery+Banding%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiovascular+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Nitrite Prevents Right Ventricular Failure and Remodeling Induced by Pulmonary Artery Banding.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology. 69, 93-100 (2017).</li>
<li>Hemnes, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Testosterone+negatively+regulates+right+ventricular+load+stress+responses+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Pulmonary+Circulation%22%5BJournal%5D)">Testosterone negatively regulates right ventricular load stress responses in mice.</a> Pulmonary Circulation. 2, 352-358 (2012).</li>
<li>Mendes-Ferreira, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+right+ventricle+remodeling+in+response+to+pressure+overload+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Distinct right ventricle remodeling in response to pressure overload in the rat.</a> American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. 311, H85-H95 (2016).</li>
<li>Razavi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+effects+of+pulmonary+artery+stenosis+on+hemodynamic+and+structural+development+of+the+lungs%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Lung+Cellular+and+Molecular+Physiology%22%5BJournal%5D)">Chronic effects of pulmonary artery stenosis on hemodynamic and structural development of the lungs.</a> American Journal of Physiology. Lung Cellular and Molecular Physiology. 304, L17-L28 (2013).</li>
<li>Tarnavski, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+cardiac+surgery%3A+comprehensive+techniques+for+the+generation+of+mouse+models+of+human+diseases+and+their+application+for+genomic+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Genomics%22%5BJournal%5D)">Mouse cardiac surgery: comprehensive techniques for the generation of mouse models of human diseases and their application for genomic studies.</a> Physiological Genomics. 16, 349-360 (2004).</li>
<li>Jessen, L., Christensen, S., Bjerrum, O. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+antinociceptive+efficacy+of+buprenorphine+administered+through+the+drinking+water+of+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">The antinociceptive efficacy of buprenorphine administered through the drinking water of rats.</a> Laboratory Animals. 41, 185-196 (2007).</li>
<li>Haddad, F., Doyle, R., Murphy, D. J., Hunt, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+ventricular+function+in+cardiovascular+disease%2C+part+II%3A+pathophysiology%2C+clinical+importance%2C+and+management+of+right+ventricular+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Right ventricular function in cardiovascular disease, part II: pathophysiology, clinical importance, and management of right ventricular failure.</a> Circulation. 117, 1717-1731 (2008).</li>
<li>Bosch, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+ventricular+dysfunction+in+left-sided+heart+failure+with+preserved+versus+reduced+ejection+fraction%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Heart+Failure%22%5BJournal%5D)">Right ventricular dysfunction in left-sided heart failure with preserved versus reduced ejection fraction.</a> European Journal of Heart Failure. 19, 1664-1671 (2017).</li>
<li>Sianos, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recanalisation+of+chronic+total+coronary+occlusions%3A+2012+consensus+document+from+the+EuroCTO+club%5BTitle%5D)+AND+%22EuroIntervention%3A+Journal+of+EuroPCR+in+Collaboration+with+the+Working+Group+on+Interventional+Cardiology+of+the+European+Society+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Recanalisation of chronic total coronary occlusions: 2012 consensus document from the EuroCTO club.</a> EuroIntervention: Journal of EuroPCR in Collaboration with the Working Group on Interventional Cardiology of the European Society of Cardiology. 8, 139-145 (2012).</li>
<li>Bardaji, A., Rodriguez-Lopez, J., Torres-Sanchez, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+total+occlusion%3A+To+treat+or+not+to+treat%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Chronic total occlusion: To treat or not to treat.</a> World Journal of Cardiology. 6, 621-629 (2014).</li>
<li>Choi, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+Discrimination+of+Coronary+Chronic+Total+Occlusion+and+Subtotal+Occlusion+by+Coronary+Computed+Tomography+Angiography%5BTitle%5D)+AND+%22JACC.+Cardiovascular+Interventions%22%5BJournal%5D)">Noninvasive Discrimination of Coronary Chronic Total Occlusion and Subtotal Occlusion by Coronary Computed Tomography Angiography.</a> JACC. Cardiovascular Interventions. 8, 1143-1153 (2015).</li>
<li>Danek, B. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+Lesion+Age+on+Outcomes+of+Chronic+Total+Occlusion+Percutaneous+Coronary+Intervention%3A+Insights+From+a+Contemporary+US+Multicenter+Registry%5BTitle%5D)+AND+%22The+Canadian+Journal+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Effect of Lesion Age on Outcomes of Chronic Total Occlusion Percutaneous Coronary Intervention: Insights From a Contemporary US Multicenter Registry.</a> The Canadian Journal of Cardiology. 32, 1433-1439 (2016).</li>
<li>Savai, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pro-proliferative+and+inflammatory+signaling+converge+on+FoxO1+transcription+factor+in+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">Pro-proliferative and inflammatory signaling converge on FoxO1 transcription factor in pulmonary hypertension.</a> Nature Medicine. 20, 1289-1300 (2014).</li>
<li>Zhiyu Dai, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+and+Smooth+Muscle+Cell+Interaction+via+FoxM1+Signaling+Mediates+Vascular+Remodeling+and+Pulmonary+Hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+and+Critical%22%5BJournal%5D)">Endothelial and Smooth Muscle Cell Interaction via FoxM1 Signaling Mediates Vascular Remodeling and Pulmonary Hypertension.</a> American Journal of Respiratory and Critical. 198, 788-802 (2018).</li>
<li>Hill, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+and+mechanical+adaptations+of+right+ventricle+free+wall+myocardium+to+pressure+overload%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Biomedical+Engineering%22%5BJournal%5D)">Structural and mechanical adaptations of right ventricle free wall myocardium to pressure overload.</a> Annals of Biomedical Engineering. 42, 2451-2465 (2014).</li>
<li>Poirier, N. C., Mee, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Left+ventricular+reconditioning+and+anatomical+correction+for+systemic+right+ventricular+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery.+Pediatric+Cardiac+Surgery+Annual%22%5BJournal%5D)">Left ventricular reconditioning and anatomical correction for systemic right ventricular dysfunction.</a> Seminars in Thoracic and Cardiovascular Surgery. Pediatric Cardiac Surgery Annual. 3, 198-215 (2000).</li>
<li>Wei, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+Hypertrophic+Preconditioning+Attenuates+Cardiomyocyte+Hypertrophy+and+Slows+Progression+to+Heart+Failure+Through+Upregulation+of+S100A8%2FA9%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Myocardial Hypertrophic Preconditioning Attenuates Cardiomyocyte Hypertrophy and Slows Progression to Heart Failure Through Upregulation of S100A8/A9.</a> Circulation. 131, 1506-1517 (2015).</li>
<li>Zakliczynski, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+circulatory+support+is+effective+to+treat+pulmonary+hypertension+in+heart+transplant+candidates+disqualified+due+to+unacceptable+pulmonary+vascular+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22+Kardiochirurgia+i+Torakochirurgia+Polska+%28Polish+Journal+of+Cardio-Thoracic+Surgery%29%22%5BJournal%5D)">Mechanical circulatory support is effective to treat pulmonary hypertension in heart transplant candidates disqualified due to unacceptable pulmonary vascular resistance.</a> Kardiochirurgia i Torakochirurgia Polska (Polish Journal of Cardio-Thoracic Surgery). 15, 23-26 (2018).</li>
<li>De Santo, L. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+artery+hypertension+in+heart+transplant+recipients%3A+how+much+is+too+much%3F%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Cardio-Thoracic+Surgery%3A+Official+Journal+of+the+European+Association+for+Cardio-Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pulmonary artery hypertension in heart transplant recipients: how much is too much?</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery: Official Journal of the European Association for Cardio-Thoracic Surgery. 42, 864-870 (2012).</li>
<li>Cheng, X. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prognostic+Value+of+Pulmonary+Artery+Compliance+in+Patients+with+Pulmonary+Arterial+Hypertension+Associated+with+Adult+Congenital+Heart+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22International+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Prognostic Value of Pulmonary Artery Compliance in Patients with Pulmonary Arterial Hypertension Associated with Adult Congenital Heart Disease.</a> International Heart Journal. 58, 731-738 (2017).</li>
<li>Egemnazarov, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pressure+Overload+Creates+Right+Ventricular+Diastolic+Dysfunction+in+a+Mouse+Model%3A+Assessment+by+Echocardiography%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Society+of+Echocardiography%22%5BJournal%5D)">Pressure Overload Creates Right Ventricular Diastolic Dysfunction in a Mouse Model: Assessment by Echocardiography.</a> Journal of the American Society of Echocardiography. 28, 828-843 (2015).</li>
<li>Jang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomechanical+and+Hemodynamic+Measures+of+Right+Ventricular+Diastolic+Function%3A+Translating+Tissue+Biomechanics+to+Clinical+Relevance%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Heart+Association%22%5BJournal%5D)">Biomechanical and Hemodynamic Measures of Right Ventricular Diastolic Function: Translating Tissue Biomechanics to Clinical Relevance.</a> Journal of the American Heart Association. 6 (9), e006084(2017).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Patologiczny wzrost ciśnienia napełniania RV powoduje przesunięcie przegrody w lewo, co może zmienić geometrię lewej komory21. Zmiany te przyczyniają się do zmniejszenia pojemności minutowej serca i frakcji wyrzutowej lewej komory (LVEF), co może powodować zaburzenia hemodynamiczne układu krążenia22. Dlatego cenny jest wydajny, stabilny i ekonomiczny model do badania mechanizmu RVF.
Opracowaliśmy bardziej skuteczne i wysoce powtarzalne podejście ...

dysfunkcja RV (RVD), zdefiniowana tutaj jako dowód na nieprawidłową strukturę lub funkcję RV, wiąże się ze słabymi wynikami klinicznymi. RVF, jako końcowe stadium funkcji RV, jest zespołem klinicznym z objawami przedmiotowymi i podmiotowymi niewydolności serca, które wynikają z postępującego RVD1. Ze względu na różnice w budowie i funkcji fizjologicznej, niewydolność lewej komory (LV) i RVF mają różne mechanizmy patofizjologiczne. Opisano kilka niezależnych mechanizmów patofizjologicznych w RVF, w tym nadekspresję sygnalizacji receptora β2-adrenergicznego2, zapalenie3, przebudowa kanalików poprzecznych i dysfunkcja obsługi Ca2+4.
RVF może być spowodowany przeciążeniem objętości lub ciśnienia kampera. Poprzednie modele zwierzęce wykorzystywały SU5416 (silny i selektywny inhibitor receptora czynnika wzrostu śródbłonka naczyniowego) w połączeniu z niedotlenieniem (SuHx)5,6 lub monocrotaline7 w celu wywołania nadciśnienia płucnego, które powoduje RVF wtórne do choroby naczyń płucnych2. Naukowcy prowadzący te badania skupili się na unaczynieniu, a nie na patologicznej progresji RVF. Co więcej, monokrotalina ma działanie pozasercowe, które nie może dokładnie reprezentować choroby kardiogennej. Inne modele wykorzystywały zastawki tętniczo-żylne do wywoływania przeciążenia objętościowego i RVF8. Jednak operacja ta jest trudna do wykonania i nieodpowiednia dla myszy, które wymagają długich okresów indukcji do produkcji RVF.
Istnieją również modele PAC dla szczurów korzystające z klipsów do banderolowania9,10. W porównaniu ze szczurami, myszy mają wiele zalet jako zwierzęce modele chorób serca, takich jak łatwiejsza reprodukcja, szersze zastosowanie, zmniejszone koszty i dostęp do modyfikacji genów11. Jednak średnice klipsów do banderolowania zwykle wahają się od 0,5 mm do 1,0 mm, które są zbyt duże dla myszy9. Ponadto klips do banderolowania jest trudny do wyprodukowania, naśladowania i spopularyzowania w innych laboratoriach.
Udostępniamy protokół do opracowania zmodyfikowanego reprodukcyjnego modelu myszy RVF na podstawie zgłoszonych badań, który wykorzystuje PAC do naśladowania tetralogii zespołu Fallota i Noonana lub innych chorób nadciśnienia tętniczego płucnego12,13,14,15,16,17,18,19. To podejście PAC jest tworzone przez podwiązanie pnia płucnego myszy za pomocą igły zatrzaskowej i wyściełającej wykonanej we własnym zakresie w celu kontrolowania stopnia zwężenia. Igła zatrzaskowa wykonana jest z zakrzywionej pod kątem 90° strzykawki iniekcyjnej z plecionym jedwabnym szwem przeprowadzonym przez strzykawkę. Igła jest wykonana z popularnych materiałów w procesie, który jest łatwy do opanowania. Igła wyściełająca jest zakrzywiona o 120° od igły miernika. Stosuje się igły wyściełające o różnych średnicach (0,6-0,8 mm), w zależności od wagi myszy (20-35 g). Dodatkowo ustalamy kryterium oceny w celu określenia stabilności i jakości modelu RVF za pomocą echokardiografii i cewnikowania prawego serca. Używamy myszy jako zwierząt modelowych ze względu na ich powszechne zastosowanie w innych eksperymentach. Igły wykonane w laboratorium są łatwe do odtworzenia i mogą być szeroko stosowane w innych laboratoriach. Badanie to stanowi dobre podejście dla naukowców do zbadania mechanizmu RVF.

<table><tbody><tr><td>Wentylator ALC-V8S</td><td>SHANGHAI&NBSP; ALCOTT&nbsp; BIOTECHNOLOGIA&nbsp; CO</td><td>ALC-V8S</td><td>Wentylacja wspomagająca</td></tr><tr><td>Mini wentylator dla zwierząt</td><td>Haverd</td><td>Typ 845</td><td>Wentylacja wspomagająca System</td></tr><tr><td>ultrasonograficzny dla zwierząt VEVO2100</td><td>Visual Sonic</td><td>&nbsp; VEVO2100</td><td>Echokardiografia</td></tr><tr><td>Oświetlacz zimnego światła</td><td>Olympus</td><td>ILD-2</td><td>Light</td></tr><tr><td>Heat pad - termostatyczny system chirurgiczny (ALC-HTP-S1)</td><td>SZANGHAJ&nbsp; ALCOTT&nbsp; BIOTECHNOLOGIA&nbsp; CO</td><td>ALC-HTP-S1</td><td>Ogrzewanie</td></tr><tr><td>Izofluran</td><td>RWD life science</td><td>R510-22</td><td>Znieczulenie wziewne</td></tr><tr><td>Matrx VIP 3000 Waporyzator izofuranowy</td><td>Midmark Corporation</td><td>VIP 3000</td><td>Znieczulenie</td></tr><tr><td>Medyczny pleciony jedwabny szew (6-0)</td><td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co.</td><td>6-0</td><td>Podwiązanie</td></tr><tr><td>Medyczny nylonowy szew (5-0)</td><td>Ningbo Medical Needle Co.</td><td>5-0</td><td>Szew</td></tr><tr><td>Cewnik Millar (1,0 F)</td><td>Instrumenty AD</td><td>1,0F</td><td>Do cewnikowania prawego serca Sól</td></tr><tr><td>sodowa pentobarbitalu</td><td>Merck</td><td>25MG</td><td>Znieczulenie</td></tr><tr><td>PowerLab wielokierunkowy system zapisu fizjologicznego</td><td>Instrumenty AD</td><td>4/35</td><td>Zapisz wynik cewnikowania prawego serca</td></tr><tr><td>Precyzyjna waga elektroniczna</td><td>Instrument Denver</td><td>TB-114</td><td>Czujnik wagowy</td></tr><tr><td>Samodzielnie wykonana igła</td><td></td><td></td> zatrzaskowa <td>Oddziel aortę i tułów płucny</td></tr><tr><td>Samodzielnie wykonana igła wyściełająca&nbsp;</td><td></td><td></td><td>Zwężenie</td></tr><tr><td>Samodzielna intubacja tchawicy</td><td></td><td></td><td>Intubacja tchawicy&nbsp;</td></tr><tr><td>Sprzęt do mikrochirurgii małych zwierząt</td><td>Napox</td><td>MA-65</td><td>Narzędzia chirurgiczne</td></tr><tr><td>Żel transmisyjny</td><td>Guang Gong pai</td><td>250ML</td><td>Echokardiografia</td></tr><tr><td>Krem do depilacji Veet</td><td>Reckitt Benchiser</td><td>RQ/B 33 Typ 2</td><td>Usuń sierść myszy</td></tr><tr><td>Pionowy automatyczny elektrotermiczny ciśnieniowy sterylizator parowy</td><td>Hefei Huatai Medical Equipment Co.</td><td>LX-B50L</td><td>Automatyczne czyszczenie narzędzi chirurgicznych</td></tr><tr><td>Pionowy mikroskop chirurgiczny dla małych zwierząt</td><td>Instrument optyczny Yihua</td><td>Y-HX-4A</td><td>Do cewnikowania prawego serca</td></tr></tbody></table>

indukcja niewydolności prawej komory przez zwężenie tętnicy płucnej i ocena funkcji prawej komory u myszy

Induction of Right Ventricular Failure by Pulmonary Artery Constriction and Evaluation of Right Ventricular Function in Mice

Mechanizm niewydolności prawej komory (RVF) wymaga wyjaśnienia ze względu na unikalność, wysoką zachorowalność, wysoką śmiertelność i oporny charakter RVF. Opisano wcześniejsze modele szczurów imitujące progresję RVF. W porównaniu ze szczurami myszy są bardziej dostępne, ekonomiczne i szeroko stosowane w eksperymentach na zwierzętach. Opracowaliśmy podejście do zwężenia tętnicy płucnej (PAC), które polega na opasaniu pnia płucnego u myszy w celu wywołania przerostu prawej komory (RV). Zaprojektowano specjalną igłę do zatrzasku chirurgicznego, która pozwala na łatwiejsze oddzielenie aorty od pnia płucnego. W naszych eksperymentach użycie tej sfabrykowanej igły do zatrzaskiwania zmniejszyło ryzyko wystąpienia arterioreksji i poprawiło wskaźnik sukcesu chirurgicznego do 90%. Użyliśmy różnych średnic igieł wyściółki, aby precyzyjnie stworzyć zwężenie ilościowe, które może wywołać różne stopnie przerostu RV. Określiliśmy ilościowo stopień zwężenia, oceniając prędkość przepływu krwi w PA, która została zmierzona za pomocą nieinwazyjnej echokardiografii przezklatkowej. Funkcję RV dokładnie oceniono za pomocą cewnikowania prawego serca po 8 tygodniach od operacji. Narzędzia chirurgiczne wykonane we własnym zakresie zostały wykonane ze zwykłych materiałów przy użyciu prostego procesu, który jest łatwy do opanowania. W związku z tym opisane tutaj podejście PAC jest łatwe do naśladowania przy użyciu przyrządów wykonanych w laboratorium i może być szeroko stosowane w innych laboratoriach. Badanie to przedstawia zmodyfikowane podejście PAC, które ma wyższy wskaźnik sukcesu niż inne modele i 8-tygodniowy wskaźnik przeżycia po operacji wynoszący 97,8%. To podejście PAC zapewnia użyteczną technikę badania mechanizmu RVF i umożliwi lepsze zrozumienie RVF.

W niniejszym badaniu myszy randomly przydzielono do grupy PAC (n = 9) lub grupy operacji pozorowanej (n = 10). Echokardiografię wykonano w 1., 4. i 8. tygodniu po operacji. Osiem tygodni po zabiegu, po ostatniej ocenie echokardiograficznej i cewnikowaniu, myszy uśmiercono, a ich serca pobrano do oceny morfologicznej i histologicznej.
Zwężenie pnia płucnego spowodowało przerost prawej komory (RV) (<strong class=...

Tutaj oferujemy użyteczne podejście do badania mechanizmu niewydolności prawej komory. Wygodniejsze i skuteczniejsze podejście do zwężenia tętnicy płucnej ustala się za pomocą narzędzi chirurgicznych wykonanych we własnym zakresie. Ponadto przedstawiono metody oceny jakości tego podejścia za pomocą echokardiografii i cewnikowania.

Indukcja niewydolności prawej komory przez zwężenie tętnicy płucnej i ocena funkcji prawej komory u myszy

The mechanism of right ventricular failure (RVF) requires clarification due to the uniqueness, high morbidity, high mortality, and refractory nature of ...

Metoda ta stanowi przydatną technikę badania mechanizmów niewydolności prawej komory. Głównymi zaletami tej techniki jest oszczędność czasu i zwiększenie wskaźnika powodzenia operacji. Ta technika może pomóc nam naśladować przerost i niewydolność prawego serca u ludzi poprzez zwężenie tętnicy płucnej w celu wytworzenia przeciążenia ciśnieniem płucnym.Metoda ta może być stosowana do techniki poprzecznego zwężenia aorty i może zapewnić wgląd w powikłania po przeszczepie serca oraz badania nad wrodzonymi wadami serca. Procedura zostanie zademonstrowana przez Xiaoxia Huang, technika z mojego laboratorium. Przed rozpoczęciem zabiegu przełóż kawałek plecionego jedwabnego szwu 6-0 przez igłę o rozmiarze 25 zdemontowaną z jednomililitrowej strzykawki.Użyj kleszczy hemostatycznych, aby zgiąć igłę pod kątem 90 stopni. Następnie zegnij igłę o rozmiarze 22 o 120 stopni. Po potwierdzeniu braku reakcji na szczypanie palców u stóp, umieść znieczuloną mysz w pozycji leżącej na poduszce grzewczej o temperaturze 37 stopni Celsjusza i zabezpiecz siekacze szwem.Przymocuj kończyny taśmą i użyj kremu do depilacji, aby usunąć włosy z szyi do wyrostka mieczykowatego. Zdezynfekuj odsłoniętą skórę sekwencyjnymi chusteczkami z jodem i 75% etanolem i użyj spiczastych szczypiec, aby lekko usunąć język. Podnieś żuchwę za pomocą specjalnie wykonanej szpatułki, aby odsłonić głośnię, i użyj zimnego źródła światła, aby skierować ostrożne wprowadzenie wykonanej na zamówienie kaniuli tchawicy przez głośnię.Dostosuj parametry mini respiratora i ustaw częstość oddechów na 150 oddechów na minutę i objętość oddechową 300 mikrolitrów. Następnie podłącz rurkę i respirator, aby potwierdzić, że kaniula została prawidłowo włożona przed zamocowaniem kaniuli taśmą. Aby otworzyć klatkę piersiową, wykonaj około 10-milimetrowe nacięcie skóry równolegle do drugiego żebra.Użyj nożyczek i pęsety łokciowej, aby oddzielić mięśnie piersiowe większe i mniejsze powyżej drugiej przestrzeni międzyżebrowej. Policz żebra od kąta mostka, aby zidentyfikować drugą przestrzeń międzyżebrową i użyj nożyczek, aby otworzyć tę przestrzeń. Następnie tępo oddziel miąższ i grasicę, aż będzie widoczny pień płucny.Aby zwęzić tętnicę płucną, użyj pęsety łokciowej, aby tępo oddzielić pień płucny i aortę wstępującą. Użyj igły zatrzaskowej 90 stopni, aby przeciągnąć szew przez tkankę łączną między pniem płucnym a aortą wstępującą. Umieść igłę wyściełającą pod kątem 120 stopni na pniu płucnym.Użyj plecionego jedwabnego szwu 6-0, aby podwiązać igłę wyściełającą do pnia płucnego, usuwając igłę wyściełającą natychmiast po zaobserwowaniu wypełnienia stożka płucnego. Przeciąć oba końce szwów i kontynuować obserwację wypełnienia stożka płucnego, aby ocenić, czy występuje zwężenie. Następnie ponownie oceń odruch pedałowania zwierzęcia, aby upewnić się, że podwiązanie zakończyło się sukcesem i zamknij klatkę piersiową i skórę nylonowym szwem 5-0.Co najmniej trzy dni po zabiegu należy nałożyć żel ultradźwiękowy na klatkę piersiową zwierzęcia ze zwężoną tętnicą płucną. Umieść sondę 30 megaherców na klatce piersiowej pod kątem 30 stopni w kierunku przeciwnym do ruchu wskazówek zegara względem lewej linii przymostkowej, jednocześnie ustawiając wcięcie w kierunku ogonowym. Reguluj osie Y i X w trybie B, aż zastawka mitralna, aorta i komora lewej komory będą wyraźnie widoczne.Obróć sondę o 30 do 40 stopni na osi Y w kierunku klatki piersiowej. Wyreguluj osie Y i X, aż stożek płucny będzie wyraźnie widoczny i umieść kursor na końcówce płatków zastawki płucnej, aby zmierzyć szczytową prędkość przepływu. Wybierz kolor i PW i umieść linię przerywaną falą pulsacyjną równolegle do kierunku przepływu krwi.Wyreguluj lewą stronę podkładki tak, aby była wyższa niż prawa strona, utrzymując sondę skierowaną pod kątem 30 stopni do horyzontu wzdłuż prawej wewnętrznej linii pachowej, z wycięciem skierowanym w kierunku ogonowym. Reguluj osie X i Y, aż prawa komora będzie wyraźnie widoczna. Następnie kliknij dwa razy w tryb M, aby wyświetlić linię wskaźnika.Osiem tygodni po operacji zaintubuj mysz, jak pokazano, i wykonaj 1,5-centymetrowe obustronne nacięcie poniżej wyrostka mieczykowatego przez przeponę, aby otworzyć jamę klatki piersiowej. Przeciąć żebra, aby odsłonić serce, i użyj igły o rozmiarze 23, aby przebić prawą ścianę wolną od komory. Delikatnie dociśnij punkt nakłucia bawełnianym wacikiem, aby zatrzymać krwawienie, a następnie użyj końcówki cewnika, aby przebić komorę przez ranę.Gdy krzywa jest stabilna, wyreguluj końcówkę cewnika w kierunku drogi odpływu prawej komory. Kliknij wybierz i przeanalizuj, aby zarejestrować skurczowe i rozkurczowe ciśnienie krwi prawej komory, maksymalne tempo wzrostu, wykładniczą stałą czasową relaksacji i tętno przez 10 minut. Następnie przenieś cewnik z serca do pojemnika z solą fizjologiczną.W porównaniu z grupą Sham, wyższą prędkość szczytową, większy gradient ciśnienia i większą grubość ściany prawej komory uzyskuje się z widoku długiej osi przymostkowej po ośmiu tygodniach od operacji w grupie zwężenia tętnicy płucnej. Dodatkowo funkcja skurczowa prawej komory jest znacznie zmniejszona w grupie zwężenia tętnicy płucnej w porównaniu z grupą Sham, osiem tygodni po operacji. Grupa zwężenia tętnicy płucnej ma wyższe ciśnienie w prawej komorze w skurczu i rozkurczu, a wskaźnik kurczliwości jest zmniejszony w porównaniu z grupą Sham.Tau prawej komory i maksymalne tempo wzrostu są również większe w grupie zwężenia tętnicy płucnej niż w grupie pozorowanej. Wykazanie, że dysfunkcja prawej komory jest indukowana u myszy po ośmiu tygodniach opaski tętnicy płucnej. Inwazyjne badania hemodynamiczne w prawej komorze wykazują, że częstość akcji serca pozostaje stabilna przed i po monitorowaniu cewnika.W porównaniu z grupą Sham wymiary prawej komory są znacznie powiększone, a masa prawej komory jest wyższa. Ponadto badanie histologiczne wykazuje, że zwłóknienie serca w obszarze objętym kardiomiocytami jest większe w grupie zwężenia tętnicy płucnej niż w grupie pozorowanej. Najważniejszą częścią zabiegu jest upewnienie się, że tętnica płucna jest prawidłowo i całkowicie oddzielona.Aby uniknąć nieprawidłowego oddzielenia, punkt separacji powinien znajdować się w pobliżu odgałęzienia tętnicy płucnej, gdzie tkanka łączna między tętnicami będzie luźniejsza. Dzięki tej metodzie zapewniliśmy wygodniejsze i skuteczniejsze podejście do wywoływania przerostu prawej komory. Ogólnie rzecz biorąc, zabieg chirurgiczny i metody oceny są bardzo bezpieczne.

induction-right-ventricular-failure-pulmonary-artery-constriction

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Ten artykuł zawiera protokół do echokardiograficznej oceny wielkości prawej komory i nadciśnienia płucnego u myszy.  Zastosowania obejmują określanie fenotypu i seryjną ocenę w transgenicznych i indukowanych toksynami mysich modelach kardiomiopatii i chorób naczyń płucnych.

Echokardiograficzna ocena prawego serca u myszy

Dysfunkcja prawej komory (RV) jest kluczowa dla patogenezy chorób sercowo-naczyniowych, jednak dostępne są ograniczone metodologie jej oceny. Ostatnie postępy w obrazowaniu ultrasonograficznym zapewniają nieinwazyjną i dokładną opcję podłużnego badania RV. W tym artykule szczegółowo opisujemy krok po kroku metodę echokardiograficzną wykorzystującą mysi model przeciążenia ciśnienia RV.

Ocena struktury i funkcji prawej komory serca w mysim modelu zwężenia tętnicy płucnej za pomocą echokardiografii przezklatkowej

Niewydolność serca jest główną przyczyną hospitalizacji i główną przyczyną śmiertelności. Model trwałego podwiązania lewej przedniej zstępującej tętnicy wieńcowej u myszy stosuje się do badania przebudowy komór i dysfunkcji serca po zawale mięśnia sercowego. Przedstawiono technikę inwazyjnych pomiarów hemodynamicznych u myszy.

Trwałe podwiązanie lewej przedniej zstępującej tętnicy wieńcowej u myszy: model przebudowy po zawale mięśnia sercowego i niewydolności serca

Tutaj opisujemy i porównujemy dwie pozycje do uzyskania wierzchołkowego widoku czterokomorowego u myszy. Pozycje te umożliwiają ilościowe określenie funkcji prawej komory, zapewniają porównywalne wyniki i mogą być stosowane zamiennie.

Echokardiograficzny pomiar parametrów rozkurczowych prawej komory serca u myszy

Tutaj prezentujemy protokół do przeprowadzenia inwazyjnej oceny hemodynamicznej prawej komory i tętnicy płucnej u myszy przy użyciu metody chirurgicznej na otwartej klatce piersiowej.

Inwazyjna ocena hemodynamiczna układu prawej komory i tętniczego nadciśnienia płucnego wywołanego niedotlenieniem u myszy

Prezentowany tutaj jest protokół oceny dwukomorowej funkcji serca u myszy poprzez generowanie pętli ciśnienie-objętość (PV) z prawej i lewej komory u tego samego zwierzęcia za pomocą zamkniętego cewnikowania klatki piersiowej. Nacisk kładziony jest na techniczny aspekt chirurgii i pozyskiwania danych.

Dwukomorowa ocena czynności serca i pętli ciśnienie-objętość za pomocą cewnikowania w zamkniętej klatce piersiowej u myszy

Istnieje kilka różnic między prawą i lewą komorą. Patofizjologia zawału prawej komory (RVI) nie została jednak wyjaśniona. W niniejszym protokole przedstawiono powtarzalną metodę generowania mysiego modelu RVI, która może dostarczyć środków do wyjaśnienia mechanizmu RVI.

Generowanie i charakterystyka zawału mięśnia sercowego prawej komory serca wywołanego trwałym podwiązaniem prawej tętnicy wieńcowej u myszy

Niniejszy protokół opisuje echokardiograficzną charakterystykę morfologii i funkcji prawej komory w szczurzym modelu tętniczego nadciśnienia płucnego.

Kompleksowa echokardiograficzna ocena funkcji prawej komory serca w szczurzym modelu tętniczego nadciśnienia płucnego

Opisujemy mysi model przeciążenia ciśnienia w prawej komorze wywołanego przez opaski na pniu płucnym. Szczegółowe protokoły intubacji, chirurgii i fenotypowania za pomocą echokardiografii znajdują się w artykule. Do intubacji i chirurgii wykorzystywane są instrumenty wykonane na zamówienie, co pozwala na szybkie i niedrogie odtworzenie modelu.

Mysi model przerostu prawej komory serca wywołanego przeciążeniem ciśnieniowym i niewydolności przez opaski pnia płucnego

Prezentacja szczegółowych metod oceny funkcji prawej komory poprawi jakość i wiarygodność badań nad nadciśnieniem płucnym, oferując solidne ramy dla przyszłych badań i zwiększając odtwarzalność w różnych laboratoriach.

Ocena funkcji prawej komory w eksperymentalnych modelach tętniczego nadciśnienia płucnego

Poznaj technikę zwężenia tętnicy płucnej u myszy do badania niewydolności prawej komory. Metoda obejmuje ewentualnie echokardiografię i cewnikowanie w celu oceny przeciążenia ciśnieniowego.

Indukcja niewydolności prawej komory przez zwężenie tętnicy płucnej i ocena funkcji prawej komory u myszy

Przeglądaj więcej filmów