Name: Ocena reakcji na napięcie naczyniowe przy użyciu izolowanych tętnic krezkowych z naciskiem na modulację przez okołonaczyniowe tkanki tłuszczowe (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-06-03T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 41 s
Description: Poznaj technikę wire myography do oceny napięcia naczyniowego tętnic krezkowych myszy z uwzględnieniem roli okołonaczyniowej tkanki tłuszczowej. Metoda pozwala badać wpływ PVAT na reaktywność naczyń.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ta praca była wspierana finansowo przez granty z Research Grant Council of Hong Kong [17124718 i 17121714], Hong Kong Health and Medical Research Fund [13142651 i 13142641], Collaborative Research Fund of Hong Kong [C7055-14G] oraz National Basic Research Program of China [973 Program 2015CB553603].

<ol><li>Furchgott, R. F., Zawadzki, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+obligatory+role+of+endothelial+cells+in+the+relaxation+of+arterial+smooth+muscle+by+acetylcholine%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The obligatory role of endothelial cells in the relaxation of arterial smooth muscle by acetylcholine.</a> Nature. 288 (5789), 373-376 (1980).</li>
<li>Furchgott, R. F., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelium-derived+relaxing+and+contracting+factors%5BTitle%5D)+AND+%22The+FASEB+Journal%22%5BJournal%5D)">Endothelium-derived relaxing and contracting factors.</a> The FASEB Journal. 3 (9), 2007-2018 (1989).</li>
<li>Feletou, M., Kohler, R., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelium-derived+vasoactive+factors+and+hypertension%3A+possible+roles+in+pathogenesis+and+as+treatment+targets%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Hypertension+Reports%22%5BJournal%5D)">Endothelium-derived vasoactive factors and hypertension: possible roles in pathogenesis and as treatment targets.</a> Current Hypertension Reports. 12 (4), 267-275 (2010).</li>
<li>Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+dysfunction%3A+the+first+step+toward+coronary+arteriosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Journal%22%5BJournal%5D)">Endothelial dysfunction: the first step toward coronary arteriosclerosis.</a> Circulation Journal. 73 (4), 595-601 (2009).</li>
<li>Feletou, M., Huang, Y., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelium-mediated+control+of+vascular+tone%3A+COX-1+and+COX-2+products%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Endothelium-mediated control of vascular tone: COX-1 and COX-2 products.</a> British Journal of Pharmacology. 164 (3), 894-912 (2011).</li>
<li>Harrison, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+and+molecular+mechanisms+of+endothelial+cell+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Cellular and molecular mechanisms of endothelial cell dysfunction.</a> Journal of Clinical Investigation. 100 (9), 2153(1997).</li>
<li>Vanhoutte, P. M., Shimokawa, H., Tang, E. H., Feletou, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+dysfunction+and+vascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+physiologica%22%5BJournal%5D)">Endothelial dysfunction and vascular disease.</a> Acta physiologica. 196 (2), 193-222 (2009).</li>
<li>Klöß, S., Bouloumié, A., Mülsch, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aging+and+chronic+hypertension+decrease+expression+of+rat+aortic+soluble+guanylyl+cyclase%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Aging and chronic hypertension decrease expression of rat aortic soluble guanylyl cyclase.</a> Hypertension. 35 (1), 43-47 (2000).</li>
<li>Csiszar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aging-induced+phenotypic+changes+and+oxidative+stress+impair+coronary+arteriolar+function%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Aging-induced phenotypic changes and oxidative stress impair coronary arteriolar function.</a> Circulation Research. 90 (11), 1159-1166 (2002).</li>
<li>Guo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+SIRT1+prevents+age-induced+impairment+of+vasodilator+responses+by+enhancing+the+expression+and+activity+of+soluble+guanylyl+cyclase+in+smooth+muscle+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Research%22%5BJournal%5D)">Endothelial SIRT1 prevents age-induced impairment of vasodilator responses by enhancing the expression and activity of soluble guanylyl cyclase in smooth muscle cells.</a> Cardiovascular Research. , (2018).</li>
<li>Auch-Schwelk, W., Katusic, Z. S., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nitric+oxide+inactivates+endothelium-derived+contracting+factor+in+the+rat+aorta%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Nitric oxide inactivates endothelium-derived contracting factor in the rat aorta.</a> Hypertension. 19 (5), 442-445 (1992).</li>
<li>Tang, E. H., Feletou, M., Huang, Y., Man, R. Y., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acetylcholine+and+sodium+nitroprusside+cause+long-term+inhibition+of+EDCF-mediated+contractions%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Heart+and+Circulation+Physiology%22%5BJournal%5D)">Acetylcholine and sodium nitroprusside cause long-term inhibition of EDCF-mediated contractions.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulation Physiology. 289 (6), H2434-H2440 (2005).</li>
<li>Ghiadoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+function+and+common+carotid+artery+wall+thickening+in+patients+with+essential+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Endothelial function and common carotid artery wall thickening in patients with essential hypertension.</a> Hypertension. 32 (1), 25-32 (1998).</li>
<li>Xu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+Impairment+of+Vascular+Structure+and+Functions%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+and+Disease%22%5BJournal%5D)">Age-related Impairment of Vascular Structure and Functions.</a> Aging and Disease. 8 (5), 590-610 (2017).</li>
<li>Tabit, C. E., Chung, W. B., Hamburg, N. M., Vita, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+dysfunction+in+diabetes+mellitus%3A+Molecular+mechanisms+and+clinical+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Reviews+in+Endocrine+%26+Metabolic+Disorders%22%5BJournal%5D)">Endothelial dysfunction in diabetes mellitus: Molecular mechanisms and clinical implications.</a> Reviews in Endocrine & Metabolic Disorders. 11 (1), 61-74 (2010).</li>
<li>Tanaka, K., Sata, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Roles+of+perivascular+adipose+tissue+in+the+pathogenesis+of+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">Roles of perivascular adipose tissue in the pathogenesis of atherosclerosis.</a> Frontiers in Physiology. 9, 3(2018).</li>
<li>Brown, N. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perivascular+adipose+tissue+in+vascular+function+and+disease%3A+a+review+of+current+research+and+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis+Thrombosis+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">Perivascular adipose tissue in vascular function and disease: a review of current research and animal models.</a> Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology. 34 (8), 1621-1630 (2014).</li>
<li>Lohn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Periadventitial+fat+releases+a+vascular+relaxing+factor%5BTitle%5D)+AND+%22The+FASEB+Journal%22%5BJournal%5D)">Periadventitial fat releases a vascular relaxing factor.</a> The FASEB Journal. 16 (9), 1057-1063 (2002).</li>
<li>Gálvez-Prieto, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+reduction+in+the+amount+and+anti-contractile+effect+of+periadventitial+mesenteric+adipose+tissue+precedes+hypertension+development+in+spontaneously+hypertensive+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension+research%22%5BJournal%5D)">A reduction in the amount and anti-contractile effect of periadventitial mesenteric adipose tissue precedes hypertension development in spontaneously hypertensive rats.</a> Hypertension research. 31 (7), 1415(2008).</li>
<li>Gao, Y. J., Lu, C., Su, L. Y., Sharma, A., Lee, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+vascular+function+by+perivascular+adipose+tissue%3A+the+role+of+endothelium+and+hydrogen+peroxide%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Modulation of vascular function by perivascular adipose tissue: the role of endothelium and hydrogen peroxide.</a> British Journal of Pharmacology. 151 (3), 323-331 (2007).</li>
<li>Gao, Y. -J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perivascular+adipose+tissue+promotes+vasoconstriction%3A+the+role+of+superoxide+anion%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Research%22%5BJournal%5D)">Perivascular adipose tissue promotes vasoconstriction: the role of superoxide anion.</a> Cardiovascular Research. 71 (2), 363-373 (2006).</li>
<li>Szasz, T., Webb, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perivascular+adipose+tissue%3A+more+than+just+structural+support%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Science+%28London%29%22%5BJournal%5D)">Perivascular adipose tissue: more than just structural support.</a> Clinical Science (London). 122 (1), 1-12 (2012).</li>
<li>Ramirez, J. G., O'Malley, E. J., Ho, W. S. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pro-contractile+effects+of+perivascular+fat+in+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Brish+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Pro-contractile effects of perivascular fat in health and disease.</a> Brish Journal of Pharmacology. 174 (20), 3482-3495 (2017).</li>
<li>Hajer, G. R., van Haeften, T. W., Visseren, F. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipose+tissue+dysfunction+in+obesity%2C+diabetes%2C+and+vascular+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Adipose tissue dysfunction in obesity, diabetes, and vascular diseases.</a> European Heart Journal. 29 (24), 2959-2971 (2008).</li>
<li>Mulvany, M. J., Halpern, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contractile+properties+of+small+arterial+resistance+vessels+in+spontaneously+hypertensive+and+normotensive+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Contractile properties of small arterial resistance vessels in spontaneously hypertensive and normotensive rats.</a> Circulation Research. 41 (1), 19-26 (1977).</li>
<li>Mulvany, M. J., Halpern, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+properties+of+vascular+smooth+muscle+cells+in+situ%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Mechanical properties of vascular smooth muscle cells in situ.</a> Nature. 260 (5552), 617-619 (1976).</li>
<li>del Campo, L., Ferrer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wire+myography+to+study+vascular+tone+and+vascular+structure+of+isolated+mouse+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Wire myography to study vascular tone and vascular structure of isolated mouse arteries.</a> Methods in Molecular Biology. 1339, 255-276 (2015).</li>
<li>Dobrin, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+initial+length+on+length-tension+relationship+of+vascular+smooth+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Influence of initial length on length-tension relationship of vascular smooth muscle.</a> American Journal of Physiology. 225 (3), 664-670 (1973).</li>
<li>Xu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calorie+restriction+prevents+metabolic+aging+caused+by+abnormal+SIRT1+function+in+adipose+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Calorie restriction prevents metabolic aging caused by abnormal SIRT1 function in adipose tissues.</a> Diabetes. 64 (5), 1576-1590 (2015).</li>
<li>Sheykhzade, M., Nyborg, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Caliber+dependent+calcitonin+gene-related+peptide-induced+relaxation+in+rat+coronary+arteries%3A+effect+of+K%2B+on+the+tachyphylaxis%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Caliber dependent calcitonin gene-related peptide-induced relaxation in rat coronary arteries: effect of K+ on the tachyphylaxis.</a> European Journal of Pharmacology. 351 (1), 53-59 (1998).</li>
<li>Soltis, E. E., Cassis, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+perivascular+adipose+tissue+on+rat+aortic+smooth+muscle+responsiveness%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+and+Experimental+Hypertension+A%22%5BJournal%5D)">Influence of perivascular adipose tissue on rat aortic smooth muscle responsiveness.</a> Clinical and Experimental Hypertension A. 13 (2), 277-296 (1991).</li>
<li>Lohn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Periadventitial+fat+releases+a+vascular+relaxing+factor%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+Journal%22%5BJournal%5D)">Periadventitial fat releases a vascular relaxing factor.</a> FASEB Journal. 16 (9), 1057-1063 (2002).</li>
<li>Fesus, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adiponectin+is+a+novel+humoral+vasodilator%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Research%22%5BJournal%5D)">Adiponectin is a novel humoral vasodilator.</a> Cardiovascular Research. 75 (4), 719-727 (2007).</li>
<li>Greenstein, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Local+inflammation+and+hypoxia+abolish+the+protective+anticontractile+properties+of+perivascular+fat+in+obese+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Local inflammation and hypoxia abolish the protective anticontractile properties of perivascular fat in obese patients.</a> Circulation. 119 (12), 1661-1670 (2009).</li>
<li>Yudkin, J. S., Eringa, E., Stehouwer, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%22Vasocrine%22+signalling+from+perivascular+fat%3A+a+mechanism+linking+insulin+resistance+to+vascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">"Vasocrine" signalling from perivascular fat: a mechanism linking insulin resistance to vascular disease.</a> Lancet. 365 (9473), 1817-1820 (2005).</li>
<li>Xia, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uncoupling+of+endothelial+nitric+oxide+synthase+in+perivascular+adipose+tissue+of+diet-induced+obese+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis+Thrombosis+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">Uncoupling of endothelial nitric oxide synthase in perivascular adipose tissue of diet-induced obese mice.</a> Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology. 36 (1), 78-85 (2016).</li>
<li>Xia, N., Forstermann, U., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+resveratrol+on+eNOS+in+the+endothelium+and+the+perivascular+adipose+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+the+New+York+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Effects of resveratrol on eNOS in the endothelium and the perivascular adipose tissue.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 1403 (1), 132-141 (2017).</li>
<li>Schinzari, F., Tesauro, M., Cardillo, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+and+perivascular+adipose+tissue+abnormalities+in+obesity-related+vascular+dysfunction%3A+novel+targets+for+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiovascular+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Endothelial and perivascular adipose tissue abnormalities in obesity-related vascular dysfunction: novel targets for treatment.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology. 69 (6), 360-368 (2017).</li>
<li>Liu, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipocalin-2+deficiency+prevents+endothelial+dysfunction+associated+with+dietary+obesity%3A+role+of+cytochrome+P450+2C+inhibition%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Lipocalin-2 deficiency prevents endothelial dysfunction associated with dietary obesity: role of cytochrome P450 2C inhibition.</a> British Journal of Pharmacology. 165 (2), 520-531 (2012).</li>
<li>Martinez-Quinones, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertension+induced+morphological+and+physiological+changes+in+cells+of+the+arterial+wall%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Hypertension%22%5BJournal%5D)">Hypertension induced morphological and physiological changes in cells of the arterial wall.</a> American Journal of Hypertension. 31 (10), 1067-1078 (2018).</li>
<li>Outzen, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Translational+value+of+mechanical+and+vasomotor+properties+of+mouse+isolated+mesenteric+resistance-sized+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology+Research+and+Perspectives%22%5BJournal%5D)">Translational value of mechanical and vasomotor properties of mouse isolated mesenteric resistance-sized arteries.</a> Pharmacology Research and Perspectives. 3 (6), e00200(2015).</li>
<li>Sheykhzade, M., Simonsen, A. H., Boonen, H. C., Outzen, E. M., Nyborg, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+ageing+on+the+passive+and+active+tension+and+pharmacodynamic+characteristics+of+rat+coronary+arteries%3A+age-dependent+increase+in+sensitivity+to+5-HT+and+K%2B%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Effect of ageing on the passive and active tension and pharmacodynamic characteristics of rat coronary arteries: age-dependent increase in sensitivity to 5-HT and K+.</a> Pharmacology. 90 (3-4), 160-168 (2012).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Oprócz komórek śródbłonka, sygnały pochodzące z PVAT odgrywają ważną rolę w regulacji reaktywności napięcia mięśni gładkich30. Zdrowy PVAT uwalnia NO i przeciwzapalną adiponektynę, aby wywierać działanie przeciwskurczowe na tętnice, które jest tracone w stanach patologicznych, takich jak otyłość i zespół metaboliczny31,32. W stanach chorobowych PVAT przyczynia się do rozwoju dysfunkcji śródbłonka i innych nieprawidłowości sercowo-naczyniow...

Rozszerzenia i zwężenia tętnic są osiągane odpowiednio przez rozluźnienia i skurcze komórek mięśni gładkich naczyń krwionośnych. Zmiany w reakcjiach naczyniowych małych tętnic przyczyniają się do homeostatycznej regulacji ciśnienia tętniczego krwi przez autonomiczne nerwy i hormony obecne we krwi (np. Katecholaminy, angiotensyna II, serotonina, wazopresyna). Na poziomie lokalnym reakcje naczyniowe komórek mięśni gładkich są modulowane przez sygnały zarówno z komórek śródbłonka błony wewnętrznej, jak i tkanki tłuszczowej otaczającej tętnice (<silna klasa = "xfig">Ryc. 1).
Śródbłonek jest nie tylko pasywną barierą, ale służy również jako powierzchnia do wymiany sygnałów między krwią a leżącymi poniżej komórkami mięśni gładkich naczyń krwionośnych. Uwalniając różne substancje wazoaktywne, śródbłonek odgrywa kluczową rolę w lokalnej kontroli reakcji tonu naczyniowego1. Na przykład, w odpowiedzi na acetylocholinę, śródbłonkowa syntaza tlenku azotu (eNOS) jest aktywowana w śródbłonku w celu wytworzenia tlenku azotu (NO), który indukuje rozluźnienie leżących poniżej mięśni gładkich naczyń krwionośnych poprzez aktywację rozpuszczalnej cyklazy guanylowej (sGC)2. Inne substancje wazoaktywne obejmują produkty cyklooksygenaz (np. prostacykliny i tromboksanuA2), lipooksygenazy (np. kwasów 12-hydroksyeikozatetraenowych, 12-HETE) i monooksygenaz cytochromu P450 (HETE i kwasy epoksyeikozatrienowe, EET), reaktywnych form tlenu (ROS) i peptydów wazoaktywnych (np. endoteliny-1 i angiotensyny II) oraz czynników hiperpolaryzacyjnych pochodzących ze śródbłonka (EDHF)3. Delikatna równowaga między środkami rozszerzającymi naczynia krwionośne pochodzącymi ze śródbłonka a zwężającymi naczynia krwionośne utrzymuje lokalne napięcie naczynioruchowe4,5.
Dysfunkcja śródbłonka charakteryzuje się upośledzeniem zależnego od śródbłonka rozszerzenia naczyń krwionośnych6, cecha charakterystyczna starzenia się naczyń krwionośnych7. Wraz z wiekiem zdolność śródbłonka do promowania rozszerzenia naczyń krwionośnych jest stopniowo zmniejszana, głównie z powodu zmniejszonej biodostępności NO, a także nieprawidłowej ekspresji i funkcji eNOS w śródbłonku i sGC w komórkach mięśni gładkich naczyń krwionośnych8,9,10. Zmniejszona biodostępność NO nasila produkcję zależnych od śródbłonka czynników zwężających naczynia krwionośne11,12. W starzejących się tętnicach dysfunkcja śródbłonka powoduje przerost w podłożu, co znajduje odzwierciedlenie w wyraźnym wzroście grubości ścian, liczby jąder przyśrodkowych, które przypominają pogrubienie tętnic w nadciśnieniu tętniczym i miażdżycy obserwowane u ludzi13,14. Ponadto stany patofizjologiczne, takie jak otyłość, cukrzyca czy nadciśnienie, przyspieszają rozwój dysfunkcji śródbłonka15,16.
Okołonaczyniowa tkanka tłuszczowa (PVAT) uwalnia liczne adipokiny regulujące strukturę i funkcję naczyń krwionośnych17. W przeciwskurczowym działaniu PVAT pośredniczą czynniki relaksujące, takie jak adiponektyna, NO, nadtlenek wodoru i siarkowodór18,19,20. Jednak w zależności od lokalizacji i stanu patofizjologicznego, PVAT może również wzmacniać reakcje skurczowe w różnych tętnicach21. Substancje prokurczliwe wytwarzane przez PVAT obejmują angiotensynę II, leptynę, rezystynę i ROS22,23. W większości badań nad izolowanymi naczyniami krwionośnymi PVAT był uważany za proste wsparcie strukturalne dla układu krwionośnego, a tym samym usuwany podczas przygotowywania segmentów pierścienia naczyń krwionośnych. Ponieważ dysfunkcja tkanki tłuszczowej stanowi niezależny czynnik ryzyka nadciśnienia tętniczego i związanych z nim powikłań sercowo-naczyniowych24, PVAT otaczający naczynia krwionośne powinien być brany pod uwagę podczas badania reakcji naczyniowej różnych tętnic.
Wieloprzewodowe systemy miograficzne były szeroko stosowane do badania funkcji naczyniomotorycznych różnych naczyń krwionośnych, w tym aorty, tętnic krezkowych, nerkowych, udowych, mózgowych i wieńcowych25,26. Opisane w niniejszym dokumencie protokoły będą wykorzystywać miografię przewodową do oceny reakcji naczyniowej w tętnicach krezkowych wyizolowanych z genetycznie zmodyfikowanych modeli myszy, ze szczególnym naciskiem na modulację przez PVAT.

<table><tbody><tr><td>Acetylocholina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A6625</td><td><silny>Stężenie magazynowe</mocny>: 10-1 M <silny>Stężenie robocze</mocny>: 10-10 do 10-5 M</td></tr><tr><td>L-NAME (ester metylowy N&omega;-nitro-L-argininy)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>N5751</td><td><silny>Stężenie zapasowe</mocny>: 3 x 10-2 M <silny>Stężenie robocze</mocny>: 10-4 M</td></tr><tr><td>Phenylephrine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P6126</td><td><silny>Stężenie zapasowe</silny>: 10-2 M <silny>Stężenie robocze</silny>: 10-10 do 10-5 M</td></tr><tr><td>U46619 (9,11-dideoxy-9&alpha;,11&alpha; prostaglandyna metaanoepoksydowa F2&alfa;)</td><td>Enzo</td><td>BML-PG023-0001</td><td><silny>Stężenie zapasów</silny>: 10-5 M <silny>Stężenie robocze</mocny>: 1-3 x 10-8 M</td></tr><tr><td>Miograf wieloprzewodowy</td><td>Duńska technologia MyoTechnology (DMT)</td><td>620M</td><td></td></tr><tr><td>Instrumenty PowerLab 4/26</td><td>ADInstruments</td><td>ML848</td><td></td></tr><tr><td>Labchart7</td><td>ADInstruments</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Myszy typu dzikiego Adipo-SIRT1</td><td>Jednostka Zwierząt Laboratoryjnych, Uniwersytet w Hongkongu</td><td>NR KATALOGOWY: 4085-16</td><td></td></tr><tr><td>Pokryte silikonem szalki Petriego</td><td>Duńska MyoTechnology (DMT)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Druty wolframowe</td><td>Duńska MyoTechnology (DMT)</td><td>300331</td><td></td></tr><tr><td>Narzędzia</td><td></td><td></td><td></td> chirurgiczne</tr></tbody></table>

ocena reakcji na napięcie naczyniowe przy użyciu izolowanych tętnic krezkowych z naciskiem na modulację przez okołonaczyniowe tkanki tłuszczowe

Assessment of Vascular Tone Responsiveness using Isolated Mesenteric Arteries with a Focus on Modulation by Perivascular Adipose Tissues

Zmieniona reakcja tonu naczyniowego na bodźce patofizjologiczne przyczynia się do rozwoju szerokiego zakresu chorób sercowo-naczyniowych i metabolicznych. Dysfunkcja śródbłonka stanowi głównego winowajcę zmniejszonego rozszerzenia naczyń krwionośnych i zwiększonego zwężenia naczyń krwionośnych tętnic. Tkanki tłuszczowe (tłuszczowe) otaczające tętnice odgrywają ważną rolę w regulacji zależnego od śródbłonka rozluźnienia i/lub skurczu komórek mięśni gładkich naczyń krwionośnych. Wzajemne oddziaływanie między śródbłonkiem a okołonaczyniową tkanką tłuszczową można ocenić ex vivo za pomocą zamontowanych naczyń krwionośnych za pomocą systemu miografii przewodowej. Należy jednak ustalić optymalne ustawienia dla tętnic pochodzących od zwierząt różnych gatunków, w różnym wieku, o różnym pochodzeniu genetycznym i/lub stanach patofizjologicznych.

Badanie zależności długość/napięcie w celu wyznaczenia współczynnika normalizacji k
Wielkość rozciągnięcia zastosowana do segmentu naczynia wpływa na zakres oddziaływania aktyno-miozynowego, a tym samym na rozwiniętą maksymalną siłę aktywną. W związku z tym, w przypadku każdego typu naczynia krwionośnego, w celu prawidłowego przeprowadzenia badań miograficznych konieczne jest określenie stopnia rozciągn...

Protokół opisuje użycie miografii drucianej do oceny przezściennego napięcia izometrycznego tętnic krezkowych wyizolowanych od myszy, ze szczególnym uwzględnieniem modulacji przez czynniki uwalniane z komórek śródbłonka i okołonaczyniowej tkanki tłuszczowej.

Ocena reakcji na napięcie naczyniowe przy użyciu izolowanych tętnic krezkowych z naciskiem na modulację przez okołonaczyniowe tkanki tłuszczowe

Altered vascular tone responsiveness to pathophysiological stimuli contributes to the development of a wide range of cardiovascular and metabolic ...

Wymagany jest bardzo ścisły protokół, abyśmy mogli prawomocnie porównać preparaty od tych samych zwierząt lub od różnych zwierząt lub tętnic w obecności lub braku otaczającego je tłuszczu lub w obecności lub braku śródbłonka. Główną zaletą tej techniki eksperymentalnej jest to, że możemy porównać pierścienie tej samej tętnicy w warunkach izometrycznych, a tym samym miarodajnie wyciągnąć wnioski dotyczące wpływu badanych przez nas czynników eksperymentalnych. Protokół ten zapewnia wgląd w modulację reakcji naczyniowej przez okołonaczyniowe tkanki tłuszczowe różnych genetycznie zmodyfikowanych zwierząt.Dysfunkcje tkanki tłuszczowej stanowią niezależny czynnik ryzyka nadciśnienia tętniczego i związanych z nim powikłań sercowo-naczyniowych. Nasz miograf składa się z wielu skomplikowanych etapów, które wymagają szczególnej ostrożności w każdym punkcie, aby uniknąć uszkodzenia naczynia, zwłaszcza podczas montażu, oraz aby upewnić się, że naczynie odpowiednio reaguje na różne bodźce. Rozpocznij tę procedurę od przygotowania i wypreparowania pierścieni tętniczych krezki zgodnie z opisem w protokole tekstowym.Włącz komputer i otwórz oprogramowanie do nagrywania danych. Zapisz eksperyment jako plik danych wykresu laboratoryjnego pod nową nazwą, aby uniknąć zastąpienia oryginalnego pliku ustawień. Otwórz okno ustawień normalizacji i ustaw współczynnik K na jeden.Zaakceptuj wartości domyślne kalibracji adresów IP, ciśnienia docelowego, czasu uśredniania online i czasu opóźnienia. Kliknij OK, aby zapisać ustawienia. Wybierz interesujące Cię kanały i wprowadź średnicę drutu, punkty końcowe tkanki i początkowy odczyt mikrometru w oknie normalizacji.Aby rozpocząć procedurę normalizacji, zastosuj pierwsze pasywne rozciąganie do naczynia krwionośnego, obracając mikrometryczną w kierunku przeciwnym do ruchu wskazówek zegara. Po odczekaniu trzech minut, aż naczynie się ustabilizuje, wprowadź nowy odczyt mikrometru w oknie normalizacji. Naprężenie ściany jest obliczane automatycznie i wyświetlane jako punkt na wykresie.Po każdym pasywnym rozciąganiu należy zastąpić kontrolny bufor Krebs izoosmotycznym buforem o wysokiej zawartości potasu zawierającym 150 milimolowy chlorek potasu. Gdy skurcz osiągnie plateau po około trzech minutach, zapisz aktywną siłę, odejmując siłę pasywną przy każdym rozciągnięciu od siły aktywowanej potasem. Oblicz naprężenie ściany, a także wartości obwodu wewnętrznego.Usuń stan wysokiego stężenia potasu, zastępując bufor o wysokiej zawartości potasu świeżym buforem Krebs. Powtarzaj mycie trzy razy w ciągu pięciu minut. Powtórz kroki normalizacji, indukując pasywne rozciąganie, a następnie aktywny skurcz w naprzemiennych obrotach, aż aktywne napięcie zacznie się zmniejszać.Dokładnie wypłukać bufor o wysokiej zawartości potasu i zrównoważyć preparaty przez kolejne 30 do 45 minut. Zresetuj podstawowe napięcia do zera, tak aby podczas kolejnego eksperymentu rejestrowane były tylko aktywne reakcje skurczowe. Przygotuj i zamontuj sparowane pierścienie tętnicze zgodnie z opisem w protokole tekstowym z sąsiednich odcinków każdej tętnicy.Przygotuj jeden pierścień tętniczy z nienaruszonym PVAT, a drugi z usuniętym PVAT. Po normalizacji należy wstępnie zkontraktować odcinki tętnic buforem Krebsa o wysokiej zawartości potasu, dodając 115 milimolowy roztwór chlorku potasu do komory zawierającej Krebsa. Po skurczeniu się do okresu plateau wypłukać wysoki poziom potasu i zastąpić bufor świeżo napowietrzonym buforem krebs.Powtórz mycie trzy razy w ciągu pięciu minut. Powtórzyć stymulację chlorkiem potasu i płukanie trzy razy i zapisać maksymalną reakcję skurczową na chlorek potasu, odejmując napięcie podstawowe od napięcia spowodowanego stymulacją chlorkiem potasu. Po ostatnim skurczu i przepłukaniu napełnij komorę ciepłym, napowietrzonym buforem krebs i pozwól tętnicy zregenerować się przez około 30 minut przed wykonaniem kolejnego zadania.Do każdej komory dodać skumulowane ilości fenylefryny w celu wywołania zależnego od stężenia wzrostu i napięcia izometrycznego preparatów w stanie spoczynku. Po dodaniu ostatniej dawki agonisty należy dokładnie wypłukać lek i ponownie napełnić komorę świeżym buforem krebs. Wykreślić reakcje zależne od stężenia, gdy rosnący procent chlorku potasu indukował maksymalne skurcze.Aby ocenić udział tlenku azotu, należy inkubować preparaty z inhibitorem syntazy tlenku azotu L-NAME przez 30 minut przed dodaniem fenylefryny. W celu sekwencyjnego wykonania drugiej krzywej stężenie-odpowiedź, należy całkowicie i wielokrotnie umyć komorę, aby usunąć wszystkie poprzednie agonistów, aż do momentu, gdy nie zaobserwuje się dalszych zmian tonu. Normalizację zależności długość-napięcie przeprowadzono dla tętnic krezkowych wyizolowanych z modeli mysich karmionych standardową karmą lub dietą wysokotłuszczową.Pasywną zależność długość-napięcie ustalono poprzez stopniowe rozciąganie odcinków tętnicy, aż do uzyskania obwodu wewnętrznego odpowiadającego 100 milimetrom ciśnienia transściennego rtęci, czyli IC100. Po każdym rozciąganiu stosowano 115-milimolowy chlorek potasu w celu pobudzenia skurczów. Krzywe rozciągania długości czynnej zostały wykreślone na podstawie danych o sile czynnej na osi Y, a obliczone wartości IC na podstawie danych mikrometrycznych na osi X.Wartość IC leżąca w obrębie plateau piku to IC1. Współczynnik normalizacji K obliczono jako stosunek IC1 i IC100, który można było następnie zastosować do próbek tego samego typu naczynia w kolejnym eksperymencie. Pokazano tutaj zapisy wyjściowe odpowiedzi zwężających naczynia krwionośne na fenylefrynę w tętnicach krezkowych z otaczającym PVAT lub bez niego.Skumulowane stężenia fenylefryny zastosowano w celu stymulacji skurczów tętnic krezkowych pobranych od 16-tygodniowych myszy z zespołem tłuszczu pierwszego. Reakcje skurczowe zarejestrowano i obliczono jako procent maksymalnego skurczu wywołanego 150 milimolowym chlorkiem potasu. Obszar pod krzywymi skurczu wykreślono dla porównania.Należy zauważyć, że PVAT z jednej myszy z tkanki tłuszczowej wywołał efekt przeciwskurczowy w odpowiedzi na fenylefrynę. Podczas uzyskiwania skurczów wywołanych przez KCL odpowiedzi muszą być stabilne i stabilne. Jeśli odpowiedź nadal się nasila po trzech stopniowych podaniu KCL, może być konieczna stymulacja KCL.Aby osiągnąć optymalne warunki napięć, bardzo ważny jest etap normalizacji, ponieważ określa on siłę potrzebną do otwarcia naczyń krwionośnych. Jeśli nie zostanie to zrobione prawidłowo, wpłynie to na cały eksperyment. Protokół ten może być stosowany do innych ustawień oprócz skurczu lub rozluźnienia wywołanego przez fenylefrynę.Na przykład w obecności lub braku okołonaczyniowej tkanki tłuszczowej, nerwów autonomicznych lub śródbłonka. Dzięki temu protokołowi naukowcy mogą badać małe naczynia krwionośne z chorych modeli zwierzęcych w różnych stanach patofizjologicznych, takich jak otyłość, cukrzyca i choroby sercowo-naczyniowe.

assessment-vascular-tone-responsiveness-using-isolated-mesenteric

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Opisano zautomatyzowaną metodę miografii do pomiarów siły w izolowanych tętnicach krezkowych. Wykorzystuje ona urządzenie Mulvany-Halpern Auto Dual Wire Myograph 510A do określania reakcji na fenylefrynę oraz wapń zewnątrzkomórkowy. Metoda ta pozwala na spójne określanie odpowiedzi izometrycznych na agonistów w małych naczyniach o średnicach od 60 do 300 μm, niezależnie od siebie.

Badania skurczu i rozkurczu tętnicy krezkowej z wykorzystaniem zautomatyzowanej miografii drucianej

Miografia ciśnieniowa służy do oceny wazoaktywności małych tętnic, które rozwijają trwałe zwężenie pod wpływem ciśnienia. Manuskrypt ten zawiera szczegółowy protokół oceny w izolowanych odcinkach małych tętnic krezkowych u szczurów, wazoaktywności i wpływu ciśnienia śródświetlnego na średnicę naczyń krwionośnych.

Ocena odpowiedzi miogennej i wazoaktywności w opornych tętnicach krezkowych za pomocą miografii ciśnieniowej

Jelito cienkie jest często narażone na działanie toksyn, które mogą wpływać na przepływ krwi i negatywnie wpływać na wchłanianie składników odżywczych. Za pomocą multimiografu i izolatów tętnic i żył krezkowych można badać pod kątem wazoaktywności związki lub toksyny.

Izolowanie i wykorzystanie odcinków tętnicy i żyły krezkowej bydła jako testu biologicznego do badania wazoaktywności w jelicie cienkim

Niniejszy artykuł opisuje metodologiczne rozważania dotyczące kilku nieinwazyjnych ocen funkcji i morfologii naczyń krwionośnych, które są powszechnie stosowane w badaniach medycznych do oceny różnych etapów miażdżycy.

Metodologiczne podejście do nieinwazyjnej oceny funkcji i morfologii naczyń krwionośnych

Wywołane insuliną rozszerzenie naczyń krwionośnych reguluje perfuzję mięśni i zwiększa powierzchnię mikrokrążenia (rekrutację mikronaczyniową) dostępną do wymiany substancji rozpuszczonej między krwią a śródmiąższem tkankowym. Przedstawiono połączoną mikroskopię przyżyciową i ultrasonografię ze wzmocnieniem kontrastowym w celu jednoczesnej oceny działania insuliny na większe naczynia i mikrokrążenie in vivo.

Połączona mikroskopia przyżyciowa i ultrasonografia tylna myszy ze wzmocnieniem kontrastowym w celu zbadania rozszerzenia naczyń krwionośnych i perfuzji mięśni wywołanego insuliną

Systemy videomikroskopii służą do badania funkcjonalnych właściwości izolowanych tętniczek tkanki tłuszczowej w odpowiedzi na bodźce fizjologiczne i farmakologiczne. Technika ta może być stosowana do badania fenotypów mikronaczyniowych w różnych domenach tkanki tłuszczowej u otyłych ludzi.

Ocena funkcji mikrokrążenia tkanki tłuszczowej człowieka za pomocą wideomikroskopii

Ten manuskrypt opisuje protokoły mikroskopii wideo in vitro do oceny funkcji naczyniowej w tętnicach oporowych mózgu szczurów. W manuskrypcie opisano również techniki oceny gęstości mikronaczyń za pomocą znakowanej fluorescencyjnie lektyny i perfuzji tkanek za pomocą laserowej przepływometrii dopplerowskiej.

Ocena mechanizmów kontroli naczyniowej z wykorzystaniem wideomikroskopii izolowanych tętnic opornych szczurów

Tworzenie nowych naczyń krwionośnych i unerwienie współczulne odgrywają kluczową rolę w przebudowie tkanki tłuszczowej. Pozostają jednak kwestie techniczne związane z wizualizacją i ilościowym pomiarem tkanki tłuszczowej. Poniżej przedstawiamy protokół, który pozwala skutecznie oznaczyć i ilościowo porównać gęstości naczyń krwionośnych i włókien nerwowych w różnych tkankach tłuszczowych.

Współbarwienie naczyń krwionośnych i włókien nerwowych w tkance tłuszczowej

Tutaj opisujemy izolację, hodowlę i indukcję adipogenną preadipocytów pochodzących z frakcji naczyniowej zrębu z mysiej tkanki tłuszczowej okołoaortalnej, co pozwala na badanie funkcji okołonaczyniowej tkanki tłuszczowej i jej związku z komórkami naczyniowymi.

Izolacja, hodowla i indukcja adipogenna preadipocytów pochodzących z frakcji zrębu naczyniowego z mysiej tkanki tłuszczowej okołooortalnej

W artykule przedstawiono krok po kroku protokół izolacji i oceny funkcjonalnej ludzkich gałęzi tętnic nerkowych, ułatwiający badania przedkliniczne w celu opracowania farmaceutycznego.

Wielopoziomowa mikrodysekcja i profilowanie funkcjonalno-strukturalne gałęzi tętniczych ludzkiego nerki

Poznaj technikę wire myography do oceny napięcia naczyniowego tętnic krezkowych myszy z uwzględnieniem roli okołonaczyniowej tkanki tłuszczowej. Metoda pozwala badać wpływ PVAT na reaktywność naczyń.

Ocena reakcji na napięcie naczyniowe przy użyciu izolowanych tętnic krezkowych z naciskiem na modulację przez okołonaczyniowe tkanki tłuszczowe (Wideo) | JoVE Journal

Ocena reakcji na napięcie naczyniowe przy użyciu izolowanych tętnic krezkowych z naciskiem na modulację przez okołonaczyniowe tkanki tłuszczowe

Przeglądaj więcej filmów