October 20th, 2019
Opisujemy, jak określić ilościowo stawonogi żyjące w liściach, zamykając liście i końce gałęzi w torbie, przycinając i zamrażając materiał w worku, a następnie płucząc wcześniej zamrożony materiał w wodzie, aby oddzielić stawonogi od podłoża w celu ilościowego określenia.
Główną zaletą tego protokołu jest to, że pozwala naukowcom uchwycić zarówno latające, jak i pełzające stawonogi z liści. Chociaż stosujemy tę technikę na drzewach, można ją również stosować na krzakach i krzewach. Uważaj, aby ćwiczyć szybkie pakowanie gałęzi bez naruszania liści, aby aktywne stawonogi nie uniknęły schwytania.
Aby rozpocząć tę procedurę, użyj nożyc do, dużych przecinaków do drutu lub elektrycznej tarczy szlifierskiej, aby usunąć dolną trzecią część 30-centymetrowej drucianej klatki na pomidory, tak aby miała około 55 centymetrów długości. Następnie wytnij dwie 50-centymetrowe szelki z aluminiowej rurki lub podobnie sztywnego materiału, aby użyć ich jako prętów mocujących i klamer po każdej stronie największego końca klatki na pomidory. W odległości 38 centymetrów od końca użyj imadła stołowego lub większych narzędzi chwytających, takich jak zamki kanałów, aby zgiąć klamrę pod kątem około 30 stopni.
Przymocuj długi koniec każdego pręta mocującego do przeciwległych końców klatki na pomidory za pomocą opasek zaciskowych. Użyj taśmy klejącej lub taśmy elektrycznej, aby podeprzeć to mocowanie, upewniając się, że taśma jest owinięta wokół co najmniej sześciu centymetrów klatki i pręta. Przymocuj drugi koniec każdego pręta po przeciwnych stronach końca wysuwanego drążka za pomocą opasek zaciskowych.
Użyj taśmy klejącej lub taśmy elektrycznej, aby podeprzeć to mocowanie, upewniając się, że owijasz taśmę wiele razy i że zachodzi ona na słup i pręty na co najmniej sześć centymetrów. Upewnij się, że otwór klatki styka się z końcem drążka teleskopowego, gdy klatka jest zamocowana. Następnie przymocuj klatkę bezpośrednio do końca słupa za pomocą taśmy.
Przymocuj paski mocujące na rzep w dwóch punktach do otworu klatki pod kątem 90 stopni od wcześniej przymocowanego drążka. Najpierw przymocuj dwa kawałki zapięcia na rzep do zewnętrznego otworu torby tak, aby pokrywały się z zapięciem na rzep przymocowanym do otworu klatki. Upewnij się, że zapięcie na rzep jest wyrównane tak, aby po włożeniu i przymocowaniu torby otwór do sznurków ciągnących torby przebiegał równolegle do drążka teleskopowego.
Włóż 49-litrowy kuchenny worek na śmieci do drucianej klatki na pomidory. Umieść trzy zaciski aligatora równomiernie rozproszone po każdej odpowiedniej stronie dna worka i przymocuj klipsy zarówno do torby, jak i drucianej klatki tak, aby worek był przyciśnięty do klatki. Ustaw zacisk aligatora na otworze worka tak, aby był przymocowany do sznurka równolegle do drążka teleskopowego naprzeciwko miejsca mocowania tyczki.
Przymocuj paracord do sznurka ściągającego torby znajdującego się najbliżej słupa. Wytnij cztery kawałki plastikowej lub twardej gumowej rurki na czterocentymetrowe odcinki i przymocuj je w czterech miejscach za pomocą taśmy klejącej lub taśmy elektrycznej. Pierwszy należy umieścić na przedłużającej się części tyczki w odległości około 0,5 metra od końca słupa znajdującego się najbliżej klatki na pomidory.
Pozostałe trzy należy umieścić w równej odległości wzdłuż dolnej części przedłużającej się tyczki, zaczynając około pięciu centymetrów od górnej części dolnej części. Przez plastikową rurkę przewlecz koniec paracordu, który nie jest przymocowany do torby. Następnie przeprowadź oba sznurki paracordu razem przez plastikowe wkładki rurowe, aby utrzymać go na miejscu.
Dla każdego drzewa próbki użyj generatora liczb losowych, aby wybrać wysokość próbki, która mieści się w wysokości przedłużacza, gdy jest wysunięta na maksymalną długość. Użyj generatora liczb losowych, aby wybrać odległość próbki od pnia drzewa i zidentyfikować gałąź, która zmieści się w torbie przy minimalnym zakłóceniu liści. I to właściwa wysokość i odległość od pnia na podstawie wygenerowanych liczb.
Podnieś drążek do pobierania próbek na wysokość równoległą do żądanej gałęzi. Szybko nasunąć torbę na gałąź, a następnie szybko pociągnąć za sznurki paracordu, które są przymocowane do sznurków, aby zaplombować torbę. Poproś drugą osobę, aby użyła sekatora do przedłużacza, aby przyciąć gałąź w miejscu przylegającym do otworu torby.
Następnie ostrożnie przyłóż worek na próbkę do ziemi i szybko zawiąż sznurki ściągające worka. Przechowuj zapakowaną gałąź w zamrażarce, aż będzie gotowa do przeprowadzenia laboratoryjnej analizy stawonogów. Trzymaj zamrożoną torbę i gałąź pionowo i potrząśnij gałązką próbki, gdy znajduje się w torbie, aby usunąć stawonogi do torby.
Ostrożnie wyjmij gałąź z torby i opłucz ją w dużej misce zbiorczej, aby usunąć wszelkie pozostałe stawonogi. Następnie opróżnij materiał pozostały w torbie do miski zbiorczej i usuń resztki niebędące stawonogami. Podziel stawonogi na żądane grupy taksonomiczne.
Zauważając różnice między larwami a osobnikami dorosłymi. Określ ilościowo stawonogi zgodnie z potrzebami. Jeśli biomasa jest przedmiotem zainteresowania, zmierz długość stawonogów i skorzystaj z opublikowanej tabeli długości masy, aby oszacować biomasę.
Wymień stawonogi na małe patelnie do suszenia. Suszyć w suszarce przez 24 godziny w temperaturze 45 stopni Celsjusza i zważyć na wadze elektronicznej. Suszyć liście w suszarce przez 48 godzin w temperaturze 45 stopni Celsjusza i zważyć je na wadze elektronicznej.
Lub zmierz długość wszystkich zdrewniałych gałęzi w próbce. W reprezentatywnym badaniu pobrano 626 próbek z 323 pojedynczych drzew, które składały się z pięciu grup drzew. W przypadku szacunków całkowitej biomasy stawonogów na metr pobranej gałęzi błąd standardowy wynosi od 12% do 18% średniej dla pięciu grup drzew.
Ten poziom precyzji jest wystarczający do wykrycia zmienności między grupami drzew w kwadratowej zmianie biomasy według daty. Technika ta zapewnia większą precyzję przy szacowaniu różnorodności gildii, czego dowodem jest błąd standardowy różnorodności gildii stawonogów wynoszący od 3% do 7% średniej różnorodności w pięciu grupach drzew. Precyzja na tym poziomie jest wystarczająca do wykrycia zmienności między pięcioma grupami drzew.
Precyzja oszacowań bogactwa jest również bardzo precyzyjna, o czym świadczą błędy standardowe, które wahały się od 3% do 7% średniego bogactwa w pięciu grupach drzew. Ten poziom precyzji jest wystarczający do zidentyfikowania różnic między grupami drzew. Kwadratowe powiązanie z datą, spadek bogactwa wraz ze wzrostem na drzewie oraz dodatnia zależność między bogactwem stawonogów a odległością od pnia drzewa.
Upewnij się, że szybko otaczasz gałąź, nie naruszając liści, aby upewnić się, że aktywne stawonogi nie unikną schwytania.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Ten artykuł opisuje protokół ilościowego badania pajęczaków zamieszkujących liście poprzez zamknięcie liści i gałęzi w torebkach, zamrożenie materiału i jego spłukanie w celu oddzielenia pajęczaków od podłoża. Metoda ta skutecznie zbiera zarówno lecące, jak i pełzające pajęczaki z liści.
This method enables precise quantification of foliage-dwelling arthropods, supporting ecological risk assessment and environmental monitoring in biopharma R&D. By providing consistent detection probability and known sampling area, it generates reliable abundance and diversity data for evaluating ecosystem impacts of pharmaceutical compounds or agricultural adjuvants. The protocol’s precision allows detection of treatment-related changes in arthropod communities across spatial and temporal variables, informing non-target organism safety evaluations.
The method fits within environmental safety workflows from early hazard identification through preclinical evaluation, delivering quantitative ecological endpoints for go/no-go decisions.