Name: Fenotypowanie okołodobowe człowieka i dobowe testy wydajności w świecie rzeczywistym (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-04-07T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 16 s
Description: Poznaj metodę fenotypowania okołodobowego człowieka w warunkach domowych przy użyciu kwestionariusza MCTQ, analizy melatoniny i kortyzolu oraz aktygrafii. Protokół umożliwia dokładną ocenę rytmów dobowych i ich wpływu na wydajność.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ta praca była wspierana przez fundusze Rady ds. Badań nad Biotechnologią i Naukami Biologicznymi (BBSRC, BB/J014532/1) oraz Rady ds. Badań Inżynieryjnych i Fizycznych (EPSRC, EP/J002909/1). E.R.F.C otrzymało stypendium akceleracyjne Wellcome Trust Institutional Strategic Support Fund (ISSF) Scheme (Wellcome 204846/Z/16/Z) oraz grant rządu australijskiego, Departament Przemysłu, Innowacji i Nauki (ICG000899/19/0602). Serdecznie dziękujemy wszystkim uczestnikom oraz firmie Stockgrand Ltd za odczynniki do testów.

Wszystkie opisane tutaj metody zostały zatwierdzone przez Komitet Etyki Badań Uniwersytetu w Birmingham.
1. Selekcja uczestników i projekt eksperymentu
<ol>
	<li>Wykonuj wszystkie metody zgodnie z odpowiednimi zezwoleniami etycznymi, zgodnie z Deklaracją Helsińską i uzyskaj pisemną świadomą zgodę od wszystkich uczestników przed jakimkolwiek zaangażowaniem.</li>
	<li>Rekrutuj uczestników, u których nie zdiagnozowano zaburzeń snu, neurologicznych lub psychiatrycznych oraz bez przyjmowania jakichkolwiek leków wpływających na rytm snu, melatoniny lub kortyzolu.</li>
	<li>Upewnij się, że żaden z uczestników nie jest pracownikiem zmianowym, uczestnicy nie podróżowali więcej niż dwie strefy czasowe w ciągu ostatniego miesiąca i mogą swobodnie wziąć udział w badaniu (tj. mogą zobowiązać się do noszenia zegarka Actiwatch, oddać próbki śliny w "dzień wolny" i być obecni na testach wydajności w określonych godzinach (patrz punkt 2.1)).</li>
	<li>Zaproś uczestników, którzy spełnią kryteria włączenia, do wzięcia udziału w wstępnym spotkaniu w celu uzyskania zgody, zebrania danych z kwestionariusza, odbycia szkolenia w zakresie pobierania próbek śliny w domu oraz wyposażenia w urządzenie aktygraficzne i dziennik snu. Na tym spotkaniu należy zapoznać uczestników z fizjologicznymi protokołami pobierania próbek, aby upewnić się, że rozumieją, co jest wymagane (patrz sekcja 3).</li>
	<li>Poproś uczestników o wypełnienie Monachijskiego Kwestionariusza Chronotypu (MCTQ), który ocenia indywidualne różnice w zmiennych snu/czuwania oraz ekspozycji na światło w pracy i dni wolne3. Pozwala to na obliczenie skorygowanych czasów snu w środku snu w dni wolne (MSFsc), używanych jako znacznik chronotypu.</li>
</ol>
2. Aktygrafia i dzienniki snu
<ol>
	<li>Przez co najmniej dwa tygodnie19 (mogą to być dłuższe okresy czasu, w zależności od celów badania), poproś uczestników o noszenie monitora aktywności na nadgarstku lub "aktygrafu", aby zbierać wzorce odpoczynku/aktywności i dane świetlne (1-32 000 luksów) przez cały okres badania.</li>
	<li>Podaj każdemu uczestnikowi szczegółowe informacje o tym, jak korzystać z aktygrafów, w tym zdejmowanie ich do kąpieli/prysznica (jeśli nie są wodoodporne) i zapobieganie zakrywaniu ich rękawami, aby umożliwić zebranie danych świetlnych. Upewnij się, że aktygrafy są noszone na niedominującym nadgarstku.</li>
	<li>W połączeniu z aktygrafią i w celu ułatwienia analizy snu i czuwania pochodzącej z danych aktygraficznych, daj każdemu uczestnikowi dziennik snu do codziennego wypełniania. Upewnij się, że zadawane pytania obejmują pory snu, pory snu, przebudzenia w nocy, godziny pobudzenia, jakość snu, drzemki i godziny, w których aktygrafy zostały usunięte.</li>
	<li>Zbierz dane aktygraficzne do analizy spoczynku/aktywności, ustalając parametry zgodnie z tym, co jest wymagane (w tym badaniu wykorzystano częstotliwość próbkowania 30 Hz i ustawienie średniej czułości). Wyodrębnij szczegóły dotyczące codziennych pór snu i wstawania z dzienników snu i danych wejściowych do oprogramowania producenta lub alternatywy (np. kodu zweryfikowanego przez open source w celu uzyskania zmiennych aktygraficznych istotnych dla badania).</li>
</ol>
3. Pobieranie próbek fizjologicznych
<ol>
	<li>Wstępnie przygotuj pakiety do pobierania próbek, oznaczając polipropylenowe probówki do pobierania lub śliny (w tym badaniu należy użyć 7 ml plastikowego biżu). Oznacz probówki numerem identyfikacyjnym uczestnika, porannymi lub wieczornymi numerami próbek oraz indywidualnymi numerami próbek. Dołącz "zapasową" rurkę do użycia w przypadku błędów.</li>
	<li>Przygotuj kartę zapisu pobierania próbek zarówno dla protokołu porannego, jak i wieczornego, aby umożliwić uczestnikom oznaczenie czasowe pobrania próbek (np. próbka poranna 1, czas pobrania = gg:mm, próbka poranna 2, czas pobrania = gg:mm). Podaj numer identyfikacyjny uczestnika, datę uzyskania informacji sezonowych i lokalizację do obliczenia fotoperiodu. 
	UWAGA: Bardzo ważne jest, aby czas wojskowy był wykorzystywany, aby upewnić się, że nie ma problemów z poranną / popołudniową wiadomością. Do rozróżnienia próbek można również użyć różnych kolorowych etykiet dla porannych i wieczornych probówek do pobierania próbek.</li>
	<li>Podczas szkolenia należy przekazać uczestnikom odpowiednie protokoły pobierania próbek fizjologicznych oraz gotowe pakiety dotyczące pobierania próbek śliny w środowisku domowym/zawodowym.</li>
	<li>Poinformuj uczestnika, że próbki muszą zostać pobrane w wolny dzień, kiedy uczestnicy mogą położyć się spać i obudzić się o preferowanych porach (tj. bez konieczności alarmu). Aby zapewnić wiarygodne obliczenia DLMO, uczestnicy nie powinni wykonywać wieczornego protokołu pobierania próbek śliny dzień przed testem wydajności ze względu na konieczność pozostania w stanie czuwania po zwykłej porze snu.</li>
	<li>Poproś uczestników, aby przeznaczyli jeden poranek i jeden wieczór (tego samego dnia) w drugim tygodniu badania, kiedy są w stanie zobowiązać się do oddania próbek śliny. Poinformuj uczestników, aby pobrali próbki rano, a następnie wieczorem tego samego dnia. 
	UWAGA: Należy przestrzegać kolejności pobierania próbek (rano, a następnie wieczorem), aby upewnić się, że wszelkie zmiany w czasie snu nie wpływają na wyniki (jeśli najpierw pobierane są próbki wieczorne, które wymagają pozostania w stanie czuwania po zwykłej porze snu, może to mieć wpływ na poranne próbki, jeśli zostaną pobrane następnego dnia).</li>
	<li>Poranny protokół pobierania próbek w celu uzyskania odpowiedzi na przebudzenie kortyzolu
	<ol>
		<li>Upewnij się, że próbki śliny są pobierane w momencie pierwszego przebudzenia (jeszcze w łóżku), co 15 minut przez pierwszą godzinę, a następnie co 30 minut przez następne 1 do 2 godzin. Próbki śliny należy pobierać, wypluwając je do odpowiednio oznakowanej fiolki (zaczynając od nr 1, 2, 3 itd.).</li>
		<li>W tym okresie należy upewnić się, że uczestnicy: powstrzymali się od napojów alkoholowych, napojów zawierających sztuczne barwniki i żywności na czas badania oraz powstrzymali się od mycia zębów, z pastą do zębów lub bez pasty do zębów w okresie pobierania próbek.</li>
		<li>Po dostarczeniu wszystkich próbek należy upewnić się, że uczestnicy przechowują je w zamrażarce w temperaturze -20 °C do czasu ich pobrania przez zespół badawczy. 
		UWAGA: Jeśli to możliwe, najlepiej jest przechowywać próbki zamrożone, ale pozostaną one żywe, jeśli będą przechowywane w lodówce do momentu odbioru następnego dnia. Zgodnie z ustawą o tkankach ludzkich (HTA) z 2004 r. próbki muszą zostać pobrane i przetworzone w ciągu siedmiu dni od pobrania, aby stały się bezkomórkowe, chyba że instytucja przeprowadzająca analizę posiada licencję HTA.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Wieczorny protokół pobierania próbek w przypadku wystąpienia melatoniny w słabym świetle
	<ol>
		<li>Upewnij się, że próbki śliny są pobierane co 30 minut od 3 do 4 godzin przed zwykłym snem do 1 do 2 godzin po zwykłej porze snu (np. jeśli nawykowa pora snu to 22:00, uczestnik zacznie od 18:00/19:00 do 23:00/00:00). Pobrać próbki śliny, wypluwając je do odpowiednio oznakowanej fiolki (zaczynając od nr 1, następnie 2, 3 itd.).</li>
		<li>W tym okresie upewnij się, że uczestnicy: powstrzymali się od napojów zawierających kofeinę (np. herbaty, kawy, coca-coli) od 6 godzin przed zwykłą porą snu (np. jeśli nawykowa pora snu to 22:00, spożycie kofeiny powinno zakończyć się o godzinie 16:00 w dniu odbioru).</li>
		<li>Upewnij się, że uczestnicy siedzą w pomieszczeniu przy słabym oświetleniu (< 10 luksów, np. pojedyncza lampa stołowa, najlepiej czerwone światło, po drugiej stronie pomieszczenia, bez górnych świateł, bez ekranów elektronicznych, zasłony zasunięte). Upewnij się, że uczestnicy unikają picia napojów zawierających alkohol lub sztuczne barwniki i powstrzymają się od mycia zębów, pastą do zębów lub bez, w okresie pobierania próbek.</li>
		<li>Jeśli uczestnicy chcą coś zjeść, udać się do toalety lub przygotować napój bezkofeinowy, upewnij się, że zrobią to natychmiast po pobraniu próbki i spróbuj ponownie usiąść na 15 minut przed pobraniem następnej próbki. Jeśli pokarm jest spożywany między próbkami, upewnij się, że uczestnicy przepłukali usta wodą 15 minut przed pobraniem następnej próbki.</li>
		<li>Upewnij się, że wszystkie inne pomieszczenia mają takie same warunki oświetleniowe, tak aby uczestnik pozostawał w przyciemnionym świetle (najlepiej czerwonym świetle) przez cały okres próbkowania.</li>
		<li>Po dostarczeniu wszystkich próbek należy upewnić się, że uczestnicy przechowują je w zamrażarce w temperaturze -20 °C do czasu ich pobrania przez zespół badawczy. 
		UWAGA: Bardzo ważne jest, aby uczestnicy przestrzegali protokołu przyciemnionego światła. Tam, gdzie to możliwe, badacze powinni mierzyć warunki oświetleniowe, aby monitorować intensywność i skład spektralny.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
4. Test radioimmunologiczny
<ol>
	<li>Wykonaj RIA lub ELISA melatoniny i kortyzolu w ludzkiej ślinie, aby określić względne stężenia w każdym punkcie czasowym. 
	UWAGA: W procedurze w tych reprezentatywnych wynikach wykorzystano RIA ze znacznikiem znakowanym radioaktywnie jodem (125I) i separacją faz stałych. Protokół ten jest rutynowo stosowany w Laboratorium Chronobiologii, University of Surrey, UK20.</li>
	<li>Obliczyć poszczególne DLMO jako punkt czasowy, w którym stężenie melatoniny przekracza dwa odchylenia standardowe trzech miar podstawowych (pierwszych trzech próbek). 
	UWAGA: Ta metoda dostosowuje się do indywidualnych różnic linii bazowej w porównaniu z użyciem stężenia ryczałtowego14. Inne metody mogą być stosowane w zależności od punktów czasowych użytych w próbkowaniu (np. w okresie 24 godzin dla pełnego profilu14).</li>
	<li>Oblicz szczyt kortyzolu jako czas najwyższego stężenia kortyzolu zarejestrowany podczas porannej reakcji na przebudzenie kortyzolu.</li>
</ol>
5. Dobowe testy wydajności
UWAGA: Miary, które zostały użyte w tym protokole, to Zadanie Czujności Psychomotorycznej (PVT)21, oraz Skala Senności Karolinska (KSS)22. Jednak inne testy mogą być stosowane przy zachowaniu tego samego schematu w zależności od celu badania (np. jeśli badanie dotyczyło wpływu fenotypu okołodobowego na pamięć roboczą, wymagane byłoby zadanie pamięciowe).
<ol>
	<li>Poproś uczestników, aby w ciągu tygodnia poprzedzającego testowanie wykonali co najmniej jedną próbę próbną (w zależności od zadania), aby zapoznać się z konfiguracją. 
	UWAGA: Próby próbne mogą być wykonywane zdalnie, jeśli są monitorowane. Liczba testów praktycznych powinna być dostosowana w zależności od zadania lub zadań wykorzystywanych w badaniu. Na przykład bardziej złożone zadanie funkcji wykonawczych może wymagać wielu testów praktycznych, aby osiągnąć plateau w porównaniu z prostszym zadaniem.</li>
	<li>Zorganizuj sesje testowe zgodnie z hipotezami badania opartymi na liczbie badanych punktów czasowych w określonych godzinach zegarowych. 
	UWAGA: W zależności od projektu badania, testy wydajności można przeprowadzić w domu lub w laboratorium. Ze względu na wrażliwy na czas charakter protokołu, jeśli testy wydajności są wykonywane w środowisku domowym, zgodność musi być monitorowana, aby upewnić się, że uczestnicy przeprowadzają je sami, a także są oznaczeni godziną i datą.</li>
	<li>Przeprowadź testy na odpowiednim urządzeniu (w tym badaniu użyto DQ67OW, procesora i7-2600, 4 GB pamięci RAM, 32-bitowego pulpitu ze standardową klawiaturą i myszą). 
	UWAGA: Jeśli do testowania wymagany jest laptop, iPad lub inne urządzenie, upewnij się, że to samo urządzenie i ustawienia są używane przez cały czas trwania badania i podczas każdej sesji testowej ze względu na potencjalną zmienność odpowiedzi z myszy i gładzika a ekranu dotykowego.</li>
</ol>
6. Analiza
<ol>
	<li>Kategoryzuj grupy fenotypów okołodobowych na podstawie ich wartości dla pięciu zebranych zmiennych: MSFsc, czas budzenia, czas szczytu reakcji na przebudzenie kortyzolu, DLMO i początek snu (wartości graniczne podano w Tabeli 1).</li>
	<li>Przydziel wynik dla każdej zmiennej dla każdego uczestnika. Zmienna jest alokowana do 0, jeśli znajduje się w kategorii PPK, 1, jeśli znajduje się w kategorii ICP i 2, jeśli znajduje się w kategorii LCP. Na przykład, jeśli uczestnik znajduje się w kategorii LCP dla wszystkich zmiennych, uzyska wynik 10. Spośród całkowitego wyniku od 0 do 10 zidentyfikuj uczestników jako PPK (0-3), ICP (4-6) i LCP (7-10).</li>
	<li>Na podstawie całkowitego wyniku, podkategorie fenotypów okołodobowych można określić w następujący sposób: 0 = skrajne ECP, 1 = określone ECP, 2 = umiarkowane ECP, 3 = łagodne ECP, 4 = wczesne ICP, 5 = ICP, 6 = późne ICP, 7 = łagodne LCP, 8 = umiarkowane LCP, 9 = określone. 
	UWAGA: Analiza statystyczna powinna być ustalana na podstawie pytań badawczych dla poszczególnych badań. Badania nieparametryczne powinny być stosowane w przypadku, gdy dane nie są zgodne z rozkładem normalnym. Należy przeprowadzić testy post hoc w celu określenia wpływu pory dnia. W przypadku pomiaru szeregu parametrów należy dokonać dalszych korekt wielokrotnych porównań (np. korekta wartości p FDR).</li>
</ol>

<ol><li>de Souza, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Further+Validation+of+Actigraphy+for+Sleep+Studies%5BTitle%5D)+AND+%22Sleep%22%5BJournal%5D)">Further Validation of Actigraphy for Sleep Studies.</a> Sleep. 26 (1), 81-85 (2003).</li>
<li>Kushida, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+actigraphic%2C+polysomnographic%2C+and+subjective+assessment+of+sleep+parameters+in+sleep-disordered+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Sleep+Medicine%22%5BJournal%5D)">Comparison of actigraphic, polysomnographic, and subjective assessment of sleep parameters in sleep-disordered patients.</a> Sleep Medicine. 2 (5), 389-396 (2001).</li>
<li>Roenneberg, T., Wirz-Justice, A., Merrow, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Life+between+clocks%3A+daily+temporal+patterns+of+human+chronotypes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biological+Rhythms%22%5BJournal%5D)">Life between clocks: daily temporal patterns of human chronotypes.</a> Journal of Biological Rhythms. 18 (1), 80-90 (2003).</li>
<li>Horne, J. A., Ostberg, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+self-assessment+questionnaire+to+determine+morningness-eveningness+in+human+circadian+rhythms%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Chronobiology%22%5BJournal%5D)">A self-assessment questionnaire to determine morningness-eveningness in human circadian rhythms.</a> International Journal of Chronobiology. 4 (2), 97-110 (1976).</li>
<li>Brown, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+insights+into+human+daily+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Molecular insights into human daily behavior.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 105 (5), 1602-1607 (2008).</li>
<li>Allebrandt, K., Roenneberg, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+search+for+circadian+clock+components+in+humans%3A+new+perspectives+for+association+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Brazilian+Journal+of+Medical+and+Biological+Research%22%5BJournal%5D)">The search for circadian clock components in humans: new perspectives for association studies.</a> Brazilian Journal of Medical and Biological Research. 41 (8), 716-721 (2008).</li>
<li>Lane, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome-wide+association+analysis+identifies+novel+loci+for+chronotype+in+100%2C420+individuals+from+the+UK+Biobank%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Genome-wide association analysis identifies novel loci for chronotype in 100,420 individuals from the UK Biobank.</a> Nature Communications. 7, 10889(2016).</li>
<li>Gunn, P. J., Middleton, B., Davies, S. K., Revell, V. L., Skene, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+differences+in+the+circadian+profiles+of+melatonin+and+cortisol+in+plasma+and+urine+matrices+under+constant+routine+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Chronobiology+International%22%5BJournal%5D)">Sex differences in the circadian profiles of melatonin and cortisol in plasma and urine matrices under constant routine conditions.</a> Chronobiology International. 33 (1), 39-50 (2016).</li>
<li>Burgess, H. J., Fogg, L. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Individual+differences+in+the+amount+and+timing+of+salivary+melatonin+secretion%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Individual differences in the amount and timing of salivary melatonin secretion.</a> PLoS One. 3 (8), e3055(2008).</li>
<li>Voultsios, A., Kennaway, D. J., Dawson, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salivary+melatonin+as+a+circadian+phase+marker%3A+validation+and+comparison+to+plasma+melatonin%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biological+Rhythms%22%5BJournal%5D)">Salivary melatonin as a circadian phase marker: validation and comparison to plasma melatonin.</a> Journal of Biological Rhythms. 12 (5), 457-466 (1997).</li>
<li>Bailey, S. L., Heitkemper, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+rhythmicity+of+cortisol+and+body+temperature%3A+morningness-eveningness+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Chronobiology+International%22%5BJournal%5D)">Circadian rhythmicity of cortisol and body temperature: morningness-eveningness effects.</a> Chronobiology International. 18 (2), 249-261 (2001).</li>
<li>Kudielka, B. M., Federenko, I. S., Hellhammer, D. H., Wüst, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morningness+and+eveningness%3A+the+free+cortisol+rise+after+awakening+in+%22early+birds%22+and+%22night+owls%22%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+psychology%22%5BJournal%5D)">Morningness and eveningness: the free cortisol rise after awakening in "early birds" and "night owls".</a> Biological psychology. 72 (2), 141-146 (2006).</li>
<li>Baehr, E. K., Revelle, W., Eastman, C. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Individual+differences+in+the+phase+and+amplitude+of+the+human+circadian+temperature+rhythm%3A+with+an+emphasis+on+morningness-eveningness%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+sleep+research%22%5BJournal%5D)">Individual differences in the phase and amplitude of the human circadian temperature rhythm: with an emphasis on morningness-eveningness.</a> Journal of sleep research. 9 (2), 117-127 (2000).</li>
<li>Benloucif, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+melatonin+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Sleep+Medicine%22%5BJournal%5D)">Measuring melatonin in humans.</a> Journal of Clinical Sleep Medicine. 4 (1), 66-69 (2008).</li>
<li>Blatter, K., Cajochen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+rhythms+in+cognitive+performance%3A+Methodological+constraints%2C+protocols%2C+theoretical+underpinnings%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+%26+behavior%22%5BJournal%5D)">Circadian rhythms in cognitive performance: Methodological constraints, protocols, theoretical underpinnings.</a> Physiology & behavior. 90 (2-3), 196-208 (2007).</li>
<li>Facer-Childs, E., Brandstaetter, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Impact+of+Circadian+Phenotype+and+Time+since+Awakening+on+Diurnal+Performance+in+Athletes%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">The Impact of Circadian Phenotype and Time since Awakening on Diurnal Performance in Athletes.</a> Current Biology. 25 (4), 518-522 (2015).</li>
<li>Schmidt, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+preference+modulates+the+neural+substrate+of+conflict+processing+across+the+day%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Circadian preference modulates the neural substrate of conflict processing across the day.</a> PLoS One. 7 (1), e29658(2012).</li>
<li>Hofstra, W. A., de Weerd, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+to+assess+circadian+rhythm+in+humans%3A+a+review+of+literature%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsy+%26+Behavior%22%5BJournal%5D)">How to assess circadian rhythm in humans: a review of literature.</a> Epilepsy & Behavior. 13 (3), 438-444 (2008).</li>
<li>Van Someren, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+actigraphic+sleep+estimates+in+insomnia+and+dementia%3A+how+many+nights%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+sleep+research%22%5BJournal%5D)">Improving actigraphic sleep estimates in insomnia and dementia: how many nights?</a> Journal of sleep research. 16 (3), 269-275 (2007).</li>
<li>Moreno, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sleep+patterns+in+Amazon+rubber+tappers+with+and+without+electric+light+at+home%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Sleep patterns in Amazon rubber tappers with and without electric light at home.</a> Scientific Reports. 5, 14074(2015).</li>
<li>Dinges, D. F., Powell, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microcomputer+analyses+of+performance+on+a+portable%2C+simple+visual+RT+task+during+sustained+operations%5BTitle%5D)+AND+%22Behavior+Research+Methods%2C+Instruments%2C+%26+Computers%22%5BJournal%5D)">Microcomputer analyses of performance on a portable, simple visual RT task during sustained operations.</a> Behavior Research Methods, Instruments, & Computers. 17 (6), 652-655 (1985).</li>
<li>Åkerstedt, T., Gillberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subjective+and+objective+sleepiness+in+the+active+individual%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Subjective and objective sleepiness in the active individual.</a> International Journal of Neuroscience. 52 (1-2), 29-37 (1990).</li>
<li>Facer-Childs, E. R., Campos, B. M., Middleton, B., Skene, D. J., Bagshaw, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+phenotype+impacts+the+brain%27s+resting-state+functional+connectivity%2C+attentional+performance%2C+and+sleepiness%5BTitle%5D)+AND+%22Sleep%22%5BJournal%5D)">Circadian phenotype impacts the brain's resting-state functional connectivity, attentional performance, and sleepiness.</a> Sleep. 42 (5), (2019).</li>
<li>Benjamini, Y., Hochberg, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlling+the+false+discovery+rate%3A+a+practical+and+powerful+approach+to+multiple+testing%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+royal+statistical+society.+Series+B+%28Methodological%29%22%5BJournal%5D)">Controlling the false discovery rate: a practical and powerful approach to multiple testing.</a> Journal of the royal statistical society. Series B (Methodological). , 289-300 (1995).</li>
<li>Zee, P. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strategic+Opportunities+in+Sleep+and+Circadian+Research%3A+Report+of+the+Joint+Task+Force+of+the+Sleep+Research+Society+and+American+Academy+of+Sleep+Medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Sleep%22%5BJournal%5D)">Strategic Opportunities in Sleep and Circadian Research: Report of the Joint Task Force of the Sleep Research Society and American Academy of Sleep Medicine.</a> Sleep. 37 (2), 219-227 (2014).</li>
<li>Facer-Childs, E. R., Boiling, S., Balanos, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+time+of+day+and+chronotype+on+cognitive+and+physical+performance+in+healthy+volunteers%5BTitle%5D)+AND+%22Sports+Medicine+Open%22%5BJournal%5D)">The effects of time of day and chronotype on cognitive and physical performance in healthy volunteers.</a> Sports Medicine Open. 4 (1), 47(2018).</li>
<li>Facer-Childs, E. R., Middleton, B., Skene, D. J., Bagshaw, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resetting+the+late+timing+of+%27night+owls%27+has+a+positive+impact+on+mental+health+and+performance%5BTitle%5D)+AND+%22Sleep+Medicine%22%5BJournal%5D)">Resetting the late timing of 'night owls' has a positive impact on mental health and performance.</a> Sleep Medicine. , (2019).</li>
<li>Moreno, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sleep+patterns+in+Amazon+rubber+tappers+with+and+without+electric+light+at+home%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Sleep patterns in Amazon rubber tappers with and without electric light at home.</a> Scientific Reports. 5, 14074(2015).</li>
<li>Arendt, J., Middleton, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+seasonal+and+circadian+studies+in+Antarctica+%28Halley%2C+75+degrees+S%29%29%5BTitle%5D)+AND+%22General+and+Comparative+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Human seasonal and circadian studies in Antarctica (Halley, 75 degrees S)).</a> General and Comparative Endocrinology. 258, 250-258 (2018).</li>
<li>Basner, M., Dinges, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maximizing+sensitivity+of+the+psychomotor+vigilance+test+%28PVT%29+to+sleep+loss%5BTitle%5D)+AND+%22Sleep%22%5BJournal%5D)">Maximizing sensitivity of the psychomotor vigilance test (PVT) to sleep loss.</a> Sleep. 34 (5), 581-591 (2011).</li>
<li>Basner, M., Mollicone, D., Dinges, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validity+and+Sensitivity+of+a+Brief+Psychomotor+Vigilance+Test+%28PVT-B%29+to+Total+and+Partial+Sleep+Deprivation%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Astronautica%22%5BJournal%5D)">Validity and Sensitivity of a Brief Psychomotor Vigilance Test (PVT-B) to Total and Partial Sleep Deprivation.</a> Acta Astronautica. 69 (11-12), 949-959 (2011).</li>
<li>Loh, S., Lamond, N., Dorrian, J., Roach, G., Dawson, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+validity+of+psychomotor+vigilance+tasks+of+less+than+10-minute+duration%5BTitle%5D)+AND+%22Behaviour+research+methods+instruments+and+computers%22%5BJournal%5D)">The validity of psychomotor vigilance tasks of less than 10-minute duration.</a> Behaviour research methods instruments and computers. 36 (2), 339-346 (2004).</li>
</ol>

B.M. i D.J.S. są współdyrektorami Stockgrand Ltd. Autorzy deklarują brak innych konkurencyjnych interesów finansowych.

Ze względu na złożoną interakcję wpływów zależnych od okołodoby i snu na zachowanie, zbadanie względnego wkładu każdego z nich jest wyzwaniem. Protokoły laboratoryjne są w dużej mierze nierealistyczne i drogie, a zatem mają gorszą wartość zewnętrzną, jeśli chodzi o odniesienie wyników do codziennego funkcjonowania25. W związku z tym istnieje coraz większa potrzeba badania osób w ich środowisku domowym, aby promować możliwość uogólnienia na konteksty świata rzeczywistego. Chociaż badania terenowe nie pozwalają na kontrolę wpływów egzogennych, zintegrowane podejście może pomóc rzucić światło na to, jak zarówno czynniki biologiczne, jak i środowiskowe wpływają na zdrowie, fizjologię i wydajność 23,26,27. Protokół ten został zaprojektowany specjalnie, aby móc monitorować osoby w ich środowisku domowym podczas wykonywania ich zwykłych rutyn. Te protokoły pobierania próbek śliny zostały z powodzeniem przeprowadzone w trudnych warunkach, takich jak Amazonia28 i Antarktyda29, co ułatwia przeprowadzenie tego protokołu.
Kwestionariusze są przydatnym narzędziem w badaniach snu i okołodobowych, ponieważ pozwalają w szybki i prosty sposób zebrać szeroki zakres informacji. Jednak rozbieżności między subiektywnymi i obiektywnymi miarami mogą stwarzać trudności przy próbie badania różnic indywidualnych. W związku z tym możliwość zebrania wielu subiektywnych i obiektywnych miar może wzmocnić kategoryzację grup fenotypów okołodobowych. Ta kombinacja metod - MCTQ, aktygrafii, fizjologicznego pobierania próbek i testowania wydajności - pokazała, jak wyniki mogą być błędnie interpretowane, jeśli nie weźmie się pod uwagę indywidualnych różnic w fenotypach okołodobowych. Pomiar wszystkich tych zmiennych zapewnia najbardziej wiarygodną kategoryzację grup fenotypów okołodobowych, jednak istnieje potencjał do dalszego rozwoju metody, aby umożliwić mniejsze wymagania. Na przykład, chociaż niezawodność pozostaje do zbadania, aby obniżyć koszty, naukowcy mogą usunąć etap pobierania próbki kortyzolu lub użyć innego kwestionariusza. Warto jednak zauważyć, że ponieważ DLMO jest obecnie złotym standardem pomiaru czasu okołodobowego, a aktygrafia jest standardową metodą monitorowania wzorców odpoczynku/aktywności, byłyby to podstawowe zmienne, które należy uwzględnić w ocenach.
Planowanie testów wydajności w oparciu o czasy zegarowe zamiast opierania czasu na podstawie czasu względem indywidualnego (wewnętrznego czasu biologicznego) zwiększa wykonalność i pozwala na zastosowanie protokołu w warunkach rzeczywistych. Ograniczeniem tego projektu jest jednak brak możliwości określenia wpływu układu okołodobowego w porównaniu z wpływami homeostatycznymi. Staje się to wyzwaniem, ponieważ nie ma możliwości potwierdzenia konkretnych mechanizmów przyczyniających się do uzyskania wyników. Ponieważ jednak celem tego protokołu jest zbadanie tych grup w rzeczywistym scenariuszu, zmniejszenie mechanizmów zależnych od snu zminimalizowałoby zewnętrzną ważność wyników. Można zatem argumentować, że zastosowanie metody zintegrowanej jest bardziej odpowiednie i bardziej wykonalne w przypadku badań terenowych.
Bezpośrednie pomiary wydajności są bardzo istotne dla społeczeństwa, ale wydaje się, że bez uwzględnienia wielu czynników wpływających, zwłaszcza potrzeby grupowania osób według ich fenotypu okołodobowego i presji snu, w badaniach może brakować kluczowych wyników.
Jak wspomniano, PVT i KSS są szeroko stosowane w wielu dziedzinach badań. Prostota PVT i elastyczność w czasie trwania zadania sprawia, że jest to atrakcyjny test do wykorzystania w badaniach nad ograniczeniami okołodobowymi i snu, wymagającymi wielu testów i wykazano, że jest czułym markerem deprywacji snu 30,31. Chociaż dokładność testu i ogólny czas reakcji zwiększają się wraz z czasem trwania zadania, wszystkie zadania PVT trwające 2 minuty, 5 minut i 10 minut wykazują podobne zależności między porami dnia32.
Nasz projekt protokołu może być realizowany przy użyciu szeregu różnych zadań wydajnościowych i w razie potrzeby w częstszych punktach czasowych. Wcześniejsze badania wykazały wpływ pory dnia zarówno na wskaźniki wydajności fizycznej, jak i poznawczej, takie jak wydolność tlenowa15 i funkcje wykonawcze25. Wdrożenie tego protokołu i uwzględnienie różnic indywidualnych pozwoli lepiej zrozumieć, w jaki sposób badać mechanizmy przyczyniające się do wydajności, zwłaszcza w bardziej niszowych środowiskach, takich jak sporty elitarne. Podsumowując, protokół ten pozwala na rzeczywistą ocenę fenotypu okołodobowego i zapewnia wgląd w to, jak mierzyć wpływ pory dnia na wydajność.

Na poziomie behawioralnym, ocena indywidualnych wzorców odpoczynku/aktywności może być przeprowadzona za pomocą subiektywnych metod opartych na kwestionariuszu lub obiektywnego monitorowania za pomocą aktygrafii nadgarstka. Dane aktygraficzne zostały zweryfikowane pod kątem polisomnografii (PSG) dla różnych parametrów snu, w tym: całkowitego czasu snu, efektywności snu i budzenia się po rozpoczęciu snu1. Chociaż PSG jest znany jako złoty standard pomiaru snu, jest trudny do stosowania przez dłuższy czas poza laboratorium snu2. W związku z tym aktygrafy mają stanowić prostą, bardziej opłacalną alternatywę dla PSG i umożliwiać monitorowanie 24-godzinnego wzorca odpoczynku/aktywności. Subiektywne miary samoopisowe mogą definiować czyjś "chronotyp" za pomocą Monachijskiego Kwestionariusza Chronotypu (MCTQ)3, lub preferencji dobowej za pomocą Kwestionariusza Poranka-Wieczoru (MEQ)4. Grupy na obu końcach tego spektrum można określić jako wczesne fenotypy okołodobowe (ECP) i późne fenotypy okołodobowe (LCP), a te pomiędzy nimi jako pośrednie fenotypy okołodobowe (ICP).
Chociaż ECP i LCP są wyraźnie rozróżniane poprzez ich zachowanie (tj. wzorce snu/czuwania), te indywidualne różnice są również częściowo napędzane przez różnice w fizjologii5 i predyspozycje genetyczne6,7. Biomarkery fizjologiczne są często wykorzystywane do określenia fazy okołodobowej/czasu u danej osoby. Dwa z głównych hormonów wskazujących na czas okołodobowy to melatonina, która wzrasta wieczorem, aby osiągnąć szczyt w środku nocy, oraz kortyzol, który osiąga szczyt rano8. Korzystając z tych markerów fazy okołodobowej, można zidentyfikować indywidualne różnice we wzorcach snu i czuwania. Na przykład, początek melatoniny w słabym świetle (DLMO)9,10 i czas reakcji przebudzenia kortyzolu11,12 osiąga szczyt wcześniej w ECP, co jest odzwierciedlone przez dobowy rytm temperatury ciała13. Ślina umożliwia łatwe, bezpieczne i nieinwazyjne pobranie, z którego hormony te mogą być analizowane za pomocą testu radioimmunologicznego (RIA) lub testu immunoenzymatycznego (ELISA) bez konieczności ekstrakcji jakiegokolwiek materiału komórkowego. RIA i ELISA to czułe i specyficzne testy, które wykrywają stężenia antygenów w próbkach biologicznych (np. krwi, osoczu lub ślinie) poprzez reakcje antygen-przeciwciało z udziałem izotopów znakowanych radioaktywnie (np. jodu (125I) lub przeciwciał sprzężonych z enzymami14).
Ściśle kontrolowane protokoły laboratoryjne, takie jak stała rutyna (CR) i wymuszona desynchronizacja (FD), są złotym standardem w dziedzinie chronobiologii do badania endogennych rytmów okołodobowych15. Istnieje jednak coraz większa potrzeba badania osób w ich środowisku domowym poza sztucznymi warunkami laboratoryjnymi w celu zebrania danych kontekstowych i zwiększenia zewnętrznej trafności wyników. W związku z tym potrzebujemy lepszych sposobów kategoryzacji, mierzenia i oceny indywidualnych różnic w tej dziedzinie. Ponadto odkryto dzienne różnice w różnych pomiarach wydajności fizycznej (wydolność tlenowa, siła mięśni) i poznawczej (czas reakcji, trwała uwaga, funkcje wykonawcze), przy czym ECP osiągają lepsze wyniki wcześniej w ciągu dnia, a LCP wieczorem16,17. Podkreśla to, że pora dnia i fenotyp okołodobowy powinny być czynnikami, które są brane pod uwagę podczas przeprowadzania testów wydajności w badaniach naukowych.
Liczba różnych środków i protokołów stosowanych w badaniach laboratoryjnych pozwala na wdrożenie ściśle kontrolowanych warunków. Badania terenowe są zwykle trudniejsze ze względu na liczbę czynników wpływających. Dlatego stosowanie bardziej holistycznego podejścia poprzez łączenie wielu technik może zapewnić większą dokładność podczas monitorowania zachowania, psychologii i wydajności danej osoby w jej środowisku domowym18. W tym miejscu omawiamy metodę, którą można łatwo wdrożyć w terenie w celu identyfikacji indywidualnych różnic w fenotypach okołodobowych za pomocą MCTQ, aktygrafii i biomarkerów fizjologicznych. Stawiamy hipotezę, że zmienne te będą się znacznie różnić między grupami fenotypu okołodobowego i będą istotnie skorelowane z chronotypem (= skorygowany w połowie snu w dni wolne (MSFsc) zebrane z MCTQ). Ponadto sugerujemy sposoby pomiaru wydajności dobowej, podkreślając potrzebę analizy danych osobno dla każdej grupy fenotypu okołodobowego. Stawiamy hipotezę, że różnice w dobowym rytmie wydajności zostaną zatarte, jeśli dane będą analizowane tylko na poziomie całej populacji.

<table><tbody><tr><td>Actiwatch Light</td><td>Cambridge Neurotech Ltd</td><td></td><td>W zależności od tego, co jest wymagane, można stosować różne zatwierdzone urządzenia aktygraficzne</td></tr><tr><td>Oprogramowanie do analizy snu 7</td> Cambridge <td>Neurotech Ltd</td><td></td><td>W zależności od tego, co jest wymagane, można użyć różnych zweryfikowanych programów</td></tr> 7 <tr><td>ml plastiku</td><td></td><td></td> Można <td>użyć różnych probówek lub ślinek w zależności od tego, co jest wymagane</td></tr><tr><td>DQ67OW, procesor Intel Core i7-2600, 4 GB pamięci RAM, 32-bitowy system Windows 7</td><td></td><td></td><td>W zależności od wymagań można używać różnych urządzeń</td></tr></tbody></table>

fenotypowanie okołodobowe człowieka i dobowe testy wydajności w świecie rzeczywistym

Human Circadian Phenotyping and Diurnal Performance Testing in the Real World

W naszym stale rozwijającym się społeczeństwie 'całodobowym', istnieje potrzeba zwiększenia naszego zrozumienia, jak zmiany w biologii, fizjologii i psychologii wpływają na nasze zdrowie i wydajność. Z tym wyzwaniem wiąże się rosnąca potrzeba uwzględnienia indywidualnych różnic w rytmie snu i rytmu okołodobowego, a także zbadania wpływu pory dnia na wydajność w świecie rzeczywistym. Istnieje wiele sposobów pomiaru snu i rytmu okołodobowego, od subiektywnych metod opartych na kwestionariuszach po obiektywne monitorowanie snu i czuwania, aktygrafię i analizę próbek biologicznych. W niniejszym artykule zaproponowano protokół, który łączy wiele technik kategoryzacji osób na grupy wczesnego, średniego lub późnego fenotypu okołodobowego (ECP/ICP/LCP) i zalecono, jak przeprowadzać dobowe testy wydajności w terenie. Reprezentatywne wyniki pokazują duże różnice we wzorcach aktywności spoczynkowej wynikających z aktygrafii, fazy okołodobowej (początek melatoniny w słabym świetle i szczytowy czas reakcji przebudzenia kortyzolu) między fenotypami okołodobowymi. Ponadto znaczące różnice w dobowym rytmie wydajności między ECP i LCP podkreślają potrzebę uwzględnienia fenotypu okołodobowego. Podsumowując, pomimo trudności w kontrolowaniu czynników wpływających, protokół ten pozwala na rzeczywistą ocenę wpływu fenotypu okołodobowego na wydajność. W artykule przedstawiono prostą metodę oceny fenotypu okołodobowego w tej dziedzinie i wspiera potrzebę uwzględnienia pory dnia podczas projektowania badań wydajności.

Te wyniki uzyskane dla ECP i LCP zostały wcześniej opublikowane przez Facer-Childs, Campos et al.23. Wszystkie zezwolenia zostały uzyskane od wydawcy. Dla badań wymagających analizy wszystkich trzech grup (wczesnej, pośredniej i późnej) można zastosować te same metody i wartości odcięcia.
Fenotypowanie cyklu dobowego (Tabela 1, Tabela 2 oraz Rycina 1) 
Pierwsza z hipotez przedstawionych w niniejszym artykule zakładała, że grupy istotnie różniły się pod względem zmiennych dotyczących snu i cyklu dobowego. Spośród uczestników (n = 22) wzięli udział w tym badaniu, osoby sklasyfikowane jako ECP uzyskały wynik w zakresie 0–1, a wszystkie LCP – w zakresie 8–10 (wartości progowe podano w Tabela 1). Aby potwierdzić te wyniki, porównano średnie grupowe dla każdej zmiennej. MSFsc wynosił 02:24 ± 00:10 h u ECP w porównaniu do 06:52 ± 00:17 h u LCP (t(36) = 12,2, p &lt; 0,0001). Również wskaźniki fizjologiczne istotnie różniły się między obiema grupami. DLMO występował o 20:27 ± 00:16 h u ECP i o 23:55 ± 00:26 h u LCP (t(30) = 6,8, p &lt; 0,0001). Szczytowy czas odpowiedzi kortyzolu po przebudzeniu występował o 07:04 ± 00:16 h u ECP i o 11:13 ± 00:23 h u LCP (t(36) = 8,0, p &lt; 0,0001). Te same zależności zaobserwowano w przypadku zmiennych aktygraficznych dotyczących czasu zaśnięcia i czasu przebudzenia, przy czym średni czas zaśnięcia wynosił 22:57 ± 00:10 h u ECP i 02:27 ± 00:19 h u LCP (t(34) = 8,9, p &lt; 0,0001), a czas przebudzenia – 06:33 ± 0,10 h u ECP i 10:13 ± 00:18 h u LCP (t(34) = 9,9, p &lt; 0,0001). Inne zmienne dotyczące snu, w tym czas trwania, efektywność i czas uśnięcia, nie różniły się istotnie między grupami (Tabela 2).
Drugą hipotezą jest to, że MSFsc uzyskane z kwestionariusza MCTQ będą istotnie skorelowane ze złotym standardem aktygraficznym oraz biomarkerami fazy cyrkadiannej. Rycina 1 pokazuje, że MSFsc istotnie korelowały z DLMO (R2 = 0,65, p &lt; 0,0001), czasem szczytowym reakcji kortyzolu po przebudzeniu (R2 = 0,75, p &lt; 0,0001), momentem zaśnięcia (R2 = 0,80, p &lt; 0,0001) oraz czasem przebudzenia (R2 = 0,86, p &lt; 0,0001).
Te przedstawicielskie wyniki pokazują wyraźne różnice między poszczególnymi grupami fenotypów dobowych pod względem czasu zaśnięcia/wstania (czyli czasu obudzenia się), a także pod względem zmiennych fizjologicznych (DLMO oraz czasu szczytowego stężenia porannego kortyzolu).
Badania dobowe (Rycina 2) 
Postulowano, że poprzez wielokrotne testowanie w ciągu dnia możliwe będzie zidentyfikowanie dobowych rytmów subiektywnej senności i wydajności w każdej z grup (ECP/LCP). Dodatkowo postulowano, że jeśli nie uwzględni się fenotypów cyklicznych i dane zostaną przeanalizowane wyłącznie na poziomie całej grupy, to zmienności dobowe zostaną niepoprawnie przedstawione.
Na poziomie całej grupy stwierdzono istotne wahania dobowe w wynikach PVT i KSS. Wydajność w teście PVT w sesji o godzinie 08:00 była istotnie gorsza niż w teście o godzinie 14:00 (p = 0,027), podobnie jak subiektywna senność (p = 0,024). Istotnie gorszą wydajność w PVT stwierdzono również między godziną 08:00 a 20:00 (p = 0,041).
Gdy każdą grupę analizowano oddzielnie, stwierdzono istotne dobowe zmiany w wydajności w teście PVT u osób o późnym cyklu aktywności (LCP), ale nie u osób o wczesnym cyklu aktywności (ECP). Osoby z grupy LCP osiągały istotnie gorsze wyniki o godz. 08:00 w porównaniu do godz. 14:00 (p = 0,0079) oraz lepsze o godz. 20:00 w porównaniu do godz. 08:00 (p = 0,0006). Subiektywna senność wykazywała istotne dobowe wahania w obrębie każdej grupy. Osoby z grupy ECP zgłaszały większą senność o godz. 20:00 niż o godz. 08:00 (p = 0,0054). Przeciwna tendencja wystąpiła u osób z grupy LCP, które zgłaszały najwyższy poziom senności o godz. 08:00 i najniższy o godz. 20:00. Senność o godz. 08:00 była istotnie wyższa niż o godz. 14:00 i 20:00 u osób z grupy LCP (obie wartości p &lt; 0,0001).
<img alt="Wykresy korelacji między MSFsc a codziennymi parametrami fizjologicznymi, w tym szczytowym poziomem kortyzolu." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60448/60448fig1a.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Figure 1"> 
Rysunek 1: Analiza regresji liniowej pokazująca zależności między zmiennymi dotyczącymi snu i czuwania, ocenianymi za pomocą aktografii, oraz biomarkerami fizjologicznymi. Skorygowany czas połowy snu w dni wolne (MSFsc) przedstawiono jako godzinę doby (h) na osi x. Wczesne fenotypy cyrkadiane (ECP) pokazano w niebieskim polu, późne fenotypy cyrkadiane (LCP) – w czerwonym polu. (a) Czas szczytu odpowiedzi kortyzolowej po przebudzeniu (h), (b) Godzina wstawania (h), (c) Początek wydzielania melatoniny w stłumionym świetle (DLMO) (h), (d) Godzina zaśnięcia (h). Wartość R2 podano w prawym dolnym rogu, poziom istotności oznaczono jako **** = p &lt; 0,0001. Rysunek zmodyfikowano, za zgodą, z pracy Facer-Childs i wsp.23. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60448/60448fig1large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>
<img alt="Wykresy senności i wydajności w teście PVT w czasie; włączone wskaźniki istotności statystycznej." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60448/60448fig2a.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Figure 2"> 
Rycina 2: Krzywe dobowych zmian w Skali Senności Karolinskiej i wydajności w Zadaniu Psychomotorycznej Sprawności (PVT). Na osi x przedstawiono porę dnia (h). Wyniki całej grupy pokazano w pierwszej kolumnie, wczesne fenotypy cykliczne (ECP) w drugiej kolumnie, a późne fenotypy cykliczne (LCP) w trzeciej kolumnie. (a) Ocena subiektywnej senności (KSS), (b) Czas reakcji w teście PVT (s). Dopasowano krzywe nieliniowej regresji wielomianowej drugiego rzędu. Poziom istotności oznaczono jako ns (nieistotny), * (p &lt; 0,05), ** (p &lt; 0,01), *** (p &lt; 0,001) i **** (p &lt; 0,0001). Rycina została zmodyfikowana, za zgodą, z pracy Facer-Childs i wsp.23. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60448/60448fig2alarge.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić większą wersję tej ryciny.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Mierzona zmienna</td>
			<td>Kategoria ECP</td>
			<td>Kategoria ICP</td>
			<td>Kategoria LCP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Czas przebudzenia zapisany aktograficznie</td>
			<td>&lt; 07:30 h</td>
			<td>07:31 - 08:29 h</td>
			<td>&gt; 08:30 h</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Czas szczytowy porannego kortyzolu</td>
			<td>&lt; 08:00</td>
			<td>08:01 - 08:59 h</td>
			<td>&gt; 09:00 h</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Początek wydzielania melatoniny w stanie przygaszonego światła (DLMO)</td>
			<td>&lt; 21:30 h</td>
			<td>21:31 - 22:29 h</td>
			<td>&gt; 22.30 h</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Czas aktograficznego zaśnięcia</td>
			<td>&lt; 23:30 h</td>
			<td>23:31 - 00:29 h</td>
			<td>&gt; 00:30 h</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Skorygowany środek snu w dni wolne (MSFsc)</td>
			<td>&lt; 04:00 h</td>
			<td>04:01 - 04:59 h</td>
			<td>&gt; 05:00 h</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wynik za zmienną</td>
			<td>0</td>
			<td>1</td>
			<td>2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ŁĄCZNY WYNIK</td>
			<td>0 - 3</td>
			<td>4 - 6</td>
			<td>7 - 10</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="4"></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Podkategorie</td>
			<td>0 = skrajny ECP 
			1 = wyraźny ECP 
			2 = umiarkowany ECP 
			3 = łagodny ECP</td>
			<td>4 = wczesny ICP 
			5 = ICP 
			6 = późny ICP</td>
			<td>7 = łagodny LCP 
			8 = umiarkowany LCP 
			9 = wyraźny LCP 
			10 = skrajny LCP</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 1: Punkty odcięcia do klasyfikacji fenotypów cyrkadianych na grupy wczesną (ECP), pośrednią (ICP) i późną (LCP). Każdy parametr otrzymuje punktację dla uczestnika w zależności od wyniku, a łączna liczba punktów (0–10) pozwala na zaklasyfikowanie do poszczególnych grup i podkategorii.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Zmienna mierzona</td>
			<td>ECPs</td>
			<td>LCPs</td>
			<td>Znaczenie</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wielkość próby</td>
			<td>N = 16</td>
			<td>N = 22</td>
			<td>n/a</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">Liczba mężczyzn/kobiet</td>
			<td>M = 7</td>
			<td>M = 7</td>
			<td rowspan="2">p = 0.51c</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>F = 9</td>
			<td>F = 15</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wiek (lata)</td>
			<td>24,69 ± 4,60</td>
			<td>21,32 ± 3,27 lata</td>
			<td>p = 0,028a</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wzrost (cm)</td>
			<td>171,30 ± 1,97</td>
			<td>171,10 ± 2,38</td>
			<td>p = 0,97a</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Waga (kg)</td>
			<td>66,44 ± 2,78</td>
			<td>67,05 ± 2,10</td>
			<td>p = 0,88a</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MSFsc (gg:mm)</td>
			<td>02:24 ± 00:10</td>
			<td>06:52 ± 00:17</td>
			<td>p &lt; 0,0001a</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Czas zaśnięcia (gg:mm)</td>
			<td>22:57 ± 00:10</td>
			<td>02:27 ± 00:19</td>
			<td>p &lt; 0,0001a</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Czas wstawania (gg:mm)</td>
			<td>06:33 ± 0,10</td>
			<td>10:13 ± 00:18</td>
			<td>p &lt; 0,0001a</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Czas snu (h)</td>
			<td>7,59 ± 0,18</td>
			<td>7,70 ± 0,14</td>
			<td>p = 0,72a</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Efektywność snu (%)</td>
			<td>79,29 ± 1,96</td>
			<td>77,23 ± 1,14</td>
			<td>p = 0,46a</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Czas trwania uśpienia (gg:mm)</td>
			<td>00:25 ± 00:06</td>
			<td>00:25 ± 00:03</td>
			<td>p = 0,30b</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kąt fazowy (gg:mm)</td>
			<td>02:28 ± 00:16</td>
			<td>02:34 ± 00:18</td>
			<td>p = 0,84a</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Czas rozpoczęcia wydzielania melatoniny w stłumionym świetle (gg:mm)</td>
			<td>20:27 ± 00:16</td>
			<td>23:55 ± 00:26</td>
			<td>p &lt; 0,0001a</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Czas szczytu kortyzolu (gg:mm)</td>
			<td>07:04 ± 00:16</td>
			<td>11:13 ± 00:23</td>
			<td>p &lt; 0,0001a</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 2: Zmienne badawcze dla grup fenotypów cyrkadianych; wczesnych (ECPs) i późnych (LCPs). Wartości podano jako średnią ± SEM, z wyjątkiem wieku, który podano jako średnią ± SD. Skorygowany środek snu w dniach wolnych (MSFsc) obliczono na podstawie MCTQ. Rodzaje zastosowanych testów statystycznych pokazano jako indeks górny; testy parametrycznea, testy nieparametryczneb oraz test dokładny Fisherac. Kąt fazowy określono jako różnicę (h) między początkiem wydzielania melatoniny w stłumionym świetle (DLMO) a rozpoczęciem snu. Wszystkie wartości p zostały skorygowane metodą FDR24. Tabela została zmodyfikowana, za zgodą, z pracy Facer-Childs i in.23.

Tutaj prezentujemy metodę badania rytmów dobowych w wydajności po dokładnej kategoryzacji uczestników do grup fenotypów okołodobowych na podstawie Monachijskiego Kwestionariusza Chronotypu, złotego standardu biomarkerów fazy okołodobowej i miar aktygraficznych.

Fenotypowanie okołodobowe człowieka i dobowe testy wydajności w świecie rzeczywistym

In our continuously developing &#39;around the clock&#39; society, there is a need to increase our understanding of how changes in biology, physiology and ...

Istnieje niespójna terminologia i metodologia podczas mierzenia indywidualnych różnic w czasie, preferencjach i zachowaniu w rytmie okołodobowym. Protokół ten łączy w sobie złoty standard technik kategoryzacji fenotypów okołodobowych i przeprowadzania dobowych testów wydajności. Cóż, główną zaletą tego protokołu jest to, że możemy dokładnie ocenić fenotypy okołodobowe, patrząc zarówno na fazę okołodobową, jak i zachowanie podczas snu, a można to zrobić z osobami w ich środowisku domowym.Proces uczestnictwa zademonstruje Cheryl Isherwood z University of Surrey. Zaproś uczestników, którzy spełniają kryteria włączenia, do wzięcia udziału w pierwszym spotkaniu. I uzyskać pisemną świadomą zgodę od wszystkich uczestników zainteresowanych udziałem w eksperymencie.Poproś uczestników o wypełnienie Monachijskiego Kwestionariusza Chronotypu, który ocenia indywidualne różnice w zmiennych snu, czuwania i ekspozycji na światło w dni robocze i wolne. W celu pobrania próbki fizjologicznej należy wstępnie oznaczyć siedmiomililitrowe probówki do pobierania polipropylenu numerem identyfikacyjnym uczestnika, rano lub wieczorem, a następnie numerem indywidualnej próbki. Różnokolorowe etykiety mogą być również używane do porannych i wieczornych probówek do pobierania próbek, aby pomóc w rozróżnieniu próbek.Przygotuj arkusz zapisu pobierania próbek zarówno dla protokołów porannych, jak i wieczornych, aby umożliwić uczestnikom oznaczenie czasowe próbek po ich pobraniu, w tym numer identyfikacyjny uczestnika, datę informacji sezonowych i lokalizację do obliczenia okresu zdjęciowego. Bardzo ważne jest, aby używany był czas uniwersalny, aby upewnić się, że nie ma problemów z godzinami porannymi i popołudniowymi.kody czasowe. Zademonstruj, jak pobierać próbki śliny, informując uczestników, że ważne jest, aby pobrać próbki poranne natychmiast po przebudzeniu przed wstaniem z łóżka oraz że próbki wieczorne muszą być pobierane w słabym świetle, najlepiej czerwonym. Naukowcy powinni to zmierzyć, jeśli to możliwe.Poinstruuj uczestnika, aby pobrał próbki w wolny dzień, kiedy może położyć się spać i obudzić się o preferowanych porach, bez potrzeby alarmu. Daj każdemu uczestnikowi monitor aktywności na nadgarstku lub aktygraf, który będzie nosił przez co najmniej dwa tygodnie, aby zbierać wzorce odpoczynku i aktywności oraz dane dotyczące światła przez cały okres badania. Ustaw każdy aktygraf tak, aby zbierał dane aktygraficzne do analiz spoczynku i aktywności, ustawiając parametry zgodnie z tym, co jest wymagane.Poinstruuj uczestników, jak korzystać z aktygrafów, upewniając się, że noszą je na niedominującym nadgarstku i zapobiegając zakrywaniu urządzenia przez rękawy, aby umożliwić zbieranie danych świetlnych. W połączeniu z aktygrafią i w celu ułatwienia snu, analiza czuwania pochodząca z danych aktygraficznych, daj każdemu uczestnikowi dziennik snu do wypełniania codziennie. W celu porannego pobrania próbki w odpowiedzi na przebudzenie kortyzolu, poproś uczestników, aby zbierali próbki po przebudzeniu, będąc jeszcze w łóżku, do odpowiednio oznakowanych probówek z próbkami, co 15 minut przez pierwszą godzinę i ocenę co 30 minut przez następną godzinę do dwóch godzin.Po pobraniu wszystkich próbek, uczestnicy powinni przechowywać swoje próbki w zamrażarce w temperaturze minus 20 stopni Celsjusza do czasu ich pobrania przez zespół badawczy. W przypadku wystąpienia melatoniny w słabym świetle, uczestnik powinien siedzieć w pomieszczeniu w przyćmionym świetle i pobierać próbki śliny w odpowiedniej fiolce co 30 minut od trzech do czterech godzin przed zwykłym snem do jednej do dwóch godzin po zwykłej porze snu. Uczestnik powinien również rejestrować czas pobierania każdej próbki.Tam, gdzie to możliwe, badacze powinni mierzyć warunki oświetleniowe, aby monitorować intensywność i skład spektralny. W przypadku wieczornego pobierania próbek ważne jest, aby uczestnicy zrozumieli, jak ważne jest pozostanie w pozycji siedzącej w pomieszczeniu w warunkach słabego oświetlenia. Uczestnicy mogą korzystać z toalety lub spożywać napój bezkofeinowy między próbkami, pod warunkiem, że ponownie usiądą na 15 minut przed pobraniem następnej próbki.Upewnij się, że wszystkie inne pomieszczenia mają takie same warunki oświetleniowe, tak aby uczestnik pozostawał w przyciemnionym świetle, najlepiej czerwonym, przez cały okres próbkowania. Jeśli pokarm jest spożywany między próbkami, uczestnicy muszą przepłukać usta wodą 15 minut przed pobraniem następnej próbki. Po pobraniu wszystkich próbek, uczestnicy powinni przechowywać swoje próbki w zamrażarce w temperaturze minus 20 stopni Celsjusza do czasu ich pobrania przez zespół badawczy.Dobowe badanie wydajności może być przeprowadzone w domu lub w laboratorium i powinno być ułożone zgodnie z hipotezą badania opartą na liczbie badanych punktów czasowych o określonych godzinach zegarowych. Po pobraniu próbek śliny i dzienniczka snu należy wyodrębnić dzienną porę snu i pobudkę z dzienniczków snu, a następnie wprowadzić te dane do oprogramowania producenta, aby uzyskać zmienne aktygraficzne istotne dla badania. Aby określić stężenie melatoniny i kortyzolu w próbkach śliny uczestników w każdym punkcie czasowym, wykonaj test immunologiczny radiowy na próbkach każdego uczestnika zgodnie ze standardowymi protokołami.Obliczyć poszczególne DLMO jako punkty czasowe, w których stężenia melatoniny przekraczają dwa odchylenia standardowe z trzech początkowych zbiorów śliny na linii bazowej. Oblicz szczyt kortyzolu jako czas najwyższego stężenia kortyzolu zarejestrowanego podczas porannej reakcji na przebudzenie kortyzolu. Zmienna powinna być przypisana jako zero, jeśli znajduje się w kategorii wczesnego fenotypu okołodobowego, jeden, jeśli znajduje się w kategorii pośrednich fenotypów okołodobowych i dwa, jeśli znajduje się w kategorii późnego fenotypu okołodobowego.Oblicz całkowity wynik fenotypu okołodobowego na podstawie pięciu zebranych zmiennych. Na podstawie tego wyniku można również określić podkategorie, jak wskazano w tabeli. Wszyscy uczestnicy sklasyfikowani jako wczesne fenotypy okołodobowe mieli wynik od zera do jednego.Wszyscy uczestnicy późnego fenotypu okołodobowego mieli wyniki od 8 do 10. Aby potwierdzić wyniki tego reprezentatywnego eksperymentu, porównano średnie grupy dla każdej zmiennej fenotypu okołodobowego. Inne zmienne snu, w tym czas trwania snu, wydajność i opóźnienie, nie różniły się znacząco między grupami.Skorygowana połowa snu w dni wolne była istotnie skorelowana z początkiem melatoniny w słabym świetle, szczytowym czasem reakcji na przebudzenie kortyzolu, początkiem snu i czasem pobudki. Dane te wskazały, że różne grupy fenotypu okołodobowego wykazywały wyraźne różnice w zasypianiu, czasie przesunięcia, a także w zmiennych fizjologicznych. Istotne różnice dobowe zaobserwowano na poziomie całej grupy dla Skali Senności Karolinskiej i Zadania Czujności Psychomotorycznej.Gdy każda grupa była analizowana osobno, subiektywna senność wykazywała znaczne różnice dobowe, przy czym ECP zgłaszały wysoką senność wieczorem, a LCP najwyższą senność rano. W przypadku sprawności Czujności Psychomotorycznej stwierdzono znaczące dobowe różnice w LCP, ale nie w ECP. Ważne jest, aby jasno wyjaśnić każdy etap protokołu i upewnić się, że uczestnik rozumie podczas rozmowy wprowadzającej, aby zmaksymalizować zgodność badania.Gdy uczestnicy zostaną podzieleni na okołodobowe fenotypy, element testowania wydajności może zostać zmieniony, zmieniając czas, skalowany przez zwiększanie punktów czasowych lub zmieniany, za pomocą różnych zadań, w zależności od celów badania. Protokół ten może być stosowany w każdym badaniu wymagającym dokładnej i dokładnej oceny fenotypu okołodobowego jako narzędzie przesiewowe dla kryteriów włączenia i wyłączenia, a także do kontroli fenotypu okołodobowego w badaniach wrażliwych na czas. Podejście to zapewnia szczegółową metodę łączenia złotego standardu biologicznych markerów fazowych z obiektywnymi i subiektywnymi wzorcami snu w celu określenia indywidualnych fenotypów okołodobowych.

human-circadian-phenotyping-diurnal-performance-testing-real

Research

JoVE Journal

Behavior

Zachowanie

Opisujemy procedury rejestracji dobowych rytmów aktywności lokomocyjnej Drosophila oraz późniejszej analizy danych. Rytmy aktywności lokomocyjnej są wiarygodnym behawioralnym wskaźnikiem zegarów okołodobowych zwierząt i są wykorzystywane jako standardowy odczyt funkcji zegara podczas badania mutantów okołodobowych lub analizowania wpływu środowiska na regulację systemu okołodobowego.

Oznaczanie aktywności lokomotorycznej w celu badania rytmów okołodobowych i parametrów snu u Drosophila

W niniejszym artykule omówiono metody, które można wykorzystać do określenia funkcji okołodobowej oraz reaktywności na światło u myszy.

Pomiar reakcji okołodobowych i ostrych na światło u myszy z wykorzystaniem aktywności w kołowrotku

Rytmy okołodobowe w dobrowolnej aktywności biegania kołem u ssaków są ściśle powiązane z molekularnymi oscylacjami głównego zegara w mózgu.  W związku z tym te codzienne rytmy zachowania można wykorzystać do badania wpływu czynników genetycznych, farmakologicznych i środowiskowych na funkcjonowanie tego zegara okołodobowego.

Rejestracja i analiza rytmów okołodobowych w aktywności kół biegowych u gryzoni

Tutaj opisujemy ustawienia do równoległego monitorowania bioluminescencji okołodobowej i aktywności wydzielniczej ludzkich komórek wysp trzustkowych i pierwotnych miotub. W tym celu zastosowaliśmy dostarczanie genu lentiwirusowego za pomocą reportera zegara rdzeniowego lucyferazy, a następnie synchronizację in vitro i zbieranie pożywki odpływowej przez ciągłą peryfuzję komórek.

Równoległy pomiar ekspresji genów zegara okołodobowego i wydzielania hormonów w pierwotnych hodowlach komórkowych człowieka

Utrata snu i niewspółosiowość rytmu dobowego przyczyniają się do licznych wypadków i incydentów operacyjnych. Skuteczność środków zaradczych i projektów harmonogramu pracy mających na celu złagodzenie zmęczenia może być trudna do oceny w środowiskach operacyjnych. Ten manuskrypt podsumowuje podejście do zbierania danych dotyczących snu, okołodoby, zmęczenia i wydajności w złożonych środowiskach operacyjnych.

Gromadzenie danych dotyczących snu, okołodoby, zmęczenia i wydajności w złożonych środowiskach operacyjnych

Rytmy okołodobowe, które istnieją w większości organizmów, regulują czasową organizację organoidów biologicznych processes. 3D ostatnio pojawiły się jako fizjologicznie istotny model in vitro. Protokół ten opisuje zastosowanie bioluminescencyjnych reporterów do obserwacji rytmów okołodobowych w organoidach, umożliwiając badania in vitro rytmów okołodobowych w układach wielokomórkowych.

Monitorowanie oscylacji okołodobowych za pomocą reportera bioluminescencji w organoidach

Przedstawiamy tutaj metodę przenikającą przez ścianę, minimalnie inwazyjną metodę pobierania próbek krwi podczas snu w warunkach klinicznych.

Metoda pobierania próbek krwi przez ścianę, mająca na celu minimalizację zakłóceń snu w warunkach klinicznych

To badanie wprowadza strategie chemogenową i opartą na świetle fioletowym, aby umożliwić niezawodne przesunięcie fazy dobowej w ciągu dnia.

Wywoływanie przesunięć fazy dobowej za pomocą metod chemogenetycznych i spektralnych

Podstawową miarą wyników w badaniach klinicznych dotyczących zaburzeń nerwowo-mięśniowych jest ogólna poprawa funkcji mięśni. Dlatego ocena wpływu potencjalnych związków terapeutycznych na wydajność mięśni przed klinicznym badaniem w modelach mysich ma ogromne znaczenie. Poniżej opisujemy kilka testów funkcjonalnych, aby rozwiązać ten problem.

Ocena wydajności funkcjonalnej w modelu myszy Mdx

Długotrwałe i kompleksowe monitorowanie myszy w środowisku domowym pozwala na głębsze zrozumienie nieprawidłowych zachowań w mysich modelach chorób mózgu. W artykule opisano Zintegrowaną Stację Behawioralną (INBEST) jako kluczowy komponent współczesnej analizy behawioralnej.

Fenotypowanie behawioralne modeli chorób myszy za pomocą Zintegrowanej Stacji Behawioralnej (INBEST)

Poznaj metodę fenotypowania okołodobowego człowieka w warunkach domowych przy użyciu kwestionariusza MCTQ, analizy melatoniny i kortyzolu oraz aktygrafii. Protokół umożliwia dokładną ocenę rytmów dobowych i ich wpływu na wydajność.

Fenotypowanie okołodobowe człowieka i dobowe testy wydajności w świecie rzeczywistym

Przeglądaj więcej filmów