4 czerwca 2020
Artykuł ten demonstruje podejście zewnątrztwardówkowe polegające na zniszczeniu endolymfatycznego worka świnki morskiej i uszkodzeniu przewodu endolimfatycznego drobnym wykończkiem, aby wywołać eksperymentalne hydropsy endolimfatyczne.
Dzięki tej procedurze hydropsy endolymfatyczne mogą być stosunkowo szybko indukowane u świnek morskich z odpowiednim wskaźnikiem skuteczności. Główną zaletą tej techniki jest możliwość indukowania hydropsu endolimfatycznego przy minimalnym ryzyku wycieku płynu mózgowo-mogącego lub uszkodzenia tylnego kanału półkolistego. Po potwierdzeniu braku reakcji na odruch pedałowy wstrzyknąć 12-mililitrowy podskórny bolus płynu mlecznego roztworu Ringera do pleców znieczulonej świnki morskiej i ułożyć ją w pozycji leżącej na podkładce grzewczej.
Umieść igłę motylkową o grubości 27,5 gauge, potwierdzając prawidłowe umieszczenie na podstawie obecności powietrza tylko w końcówce igły, i umieść świnkę morską w pozycji leżącej. Zabezpiecz głowę w stereotaktycznym uchwytie i przymocuj pulsoksymetr na stopie bez pigmentacji. Użyj sondy odbytniczej i koca grzewającego, aby utrzymać temperaturę ciała na poziomie 38 stopni Celsjusza i nałóż maść na oczy zwierzęcia.
Nałóż kawałek taśmy maskującej na tył, aby zapewnić odpowiednie napięcie wzdłuż skóry nad potyczką i przymocuj końce taśmy do uchwytu stereotaktycznego. Następnie obficie przygotuj skórę na potyczce i tylnej szyi trzema kolejnymi peelingami jodowymi i 70% alkoholem i nałóż sterylną zasłonę na zwierzę. Rozpocznij zabieg od użycia ostrza z numerem 15, aby wykonać małe nacięcie w linii środkowej wzdłuż tylnej potyły prowadzącej aż do tylnej części szyi.
Po wejściu pod skórę użyj nożyczek do tęczówki, aby odłączyć prawe tylne mięśnie szyjne od kości potylicznej, kontrolując krwawienie naciskiem sterylnej waciczki. Za pomocą mikroskopu rozcinającego oraz kombinacji diamentowych zadziorów numer trzy, dwa i jeden milimetr z ssaniem 5-0 i sterylnym płukaniem, wykonuje się kraniektomię ograniczoną do zewnętrznego grzebienia potylicznego bocznie, grzbietu lambdoidalnego od góry, linii szwu potylicznej przyśrodkowo oraz grzbietowej krawędzi otworu wielkiego dolnego. I użyj diamentowego zadzioru o średnicy 0,5 milimetra, aby zkostlizować zatokę egiczną.
Delikatnie umieść pod kością mały kawałek waty zwilżonej solą fizjologiczną, oddzielając kość potyliczną od opona twardego. Ostrożnie usuń kość spoczywającą na zatoce i użyj wacika, aby delikatnie cofnąć zatokę igicową przyśrodkowo. Ostrożnie cofnij zatokę igowatą i zidentyfikuj operkulum jako strukturę przypominającą szczelinę zlokalizowaną w kości skroniowej o przepustku.
Zewnętrzną część worka endolifatycznego można sobie wyobrazić jako wyraźne, przypominające worek połączony między operkulum a oponą twardą nad zatoką egiową. Delikatne cofnięcie przyśrodkowe do zatoki egiowej należy zastosować wyraźną wizualizację części zewnętrznej worka endolimfatycznego i zwiększyć napięcie między częścią zewnątrzosealną a wewnątrzosadową. Używając drobnego kostka pod kątem, delikatnie usuń pośrednią część worka endolimfatycznego i szeroko zeskrobaj drobną kostkę wewnątrz operkulum wzdłuż wnętrza kości.
Dla powodzenia tego zabiegu kluczowe jest, aby nie pozostało widoczne powiązanie między oponą twardą a ostroupem. Użyj małej kirety, aby zeskrobać kość skroniową, aby uzyskać odłamki kości, i hojnie wypełnij operkulum odłamkami kości. Uszczelnij operkulum woskiem kostnym, uważając, aby nie wydostać się nadmiaru wosku do czaszki, i użyj wosku kostnego do zakrycia wady kraniektomii.
Następnie przybliżaj tylne mięśnie szyjne za pomocą 4-0 splecionych, chłonnych szwów w sposób przerwany i wykonuj dwuwarstwowe zamknięcie, przybliżając głęboką warstwę prostymi przerwanymi szwami oraz warstwę naskórną za pomocą zamknięcia podskórnego z warkoczonym szwem 4-0, który się wchłania. W tym reprezentatywnym eksperymencie analiza histologiczna kości skroniowych wykazała hydropsy endolimfatyczne w całej prawej ślimaku w porównaniu do lewej ślimaka u sześciu z siedmiu świnek morskich. Ilościowe określenie przekroju skali w każdym zakręcie wskazywało, że przekrój był zazwyczaj większy w uszach zwierząt, które przeżyły 30 dni po zniszczeniu worka endolimfatycznego w porównaniu do obserwowanego u zwierząt kontrolnych.
Progi przebiegu przebiegu nerwów słuchowych zostały zwiększone u zwierząt z hydropsami endolimfatycznymi, co wykazało obecność utraty słuchu niskiej częstotliwości, podczas gdy większość progów potencjału złożonego działania w ślimaku o wysokiej częstotliwości mieściła się w zakresie normalnym. Jeśli obszar między oponą twardą a spuszką jest suchy po usunięciu worka, spróbuj zastosować dodatkowe ukoszenie na zatokę esicową, aby upewnić się, że nie ma widocznego połączenia między nią a spuszką. Po tym zabiegu można przeprowadzić dalsze badania nad anatomią ślimakową i fizjologią, aby odpowiedzieć na ważne pytania badawcze dotyczące hydropsów endolimfatycznych.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych
Niniejszy artykuł przedstawia podejście zewnątrzoponowe w celu wywołania wodniczki błędnika u świnek morskich poprzez obliterację worka treściąchłonnego i uszkodzenie przewodu treściąchłonnego. Metoda ta umożliwia szybką indukcję przy minimalnym ryzyku, co ułatwia późniejsze badania anatomiczne i fizjologiczne istotne dla funkcji ślimaka.
Ten model chirurgiczny umożliwia wiarygodną indukcję wodniczki błędnika u świni guinea, zapewniając system przedkliniczny do badania mechanizmów utraty słuchu w zakresie niskich częstotliwości, istotnych dla choroby Meniere'a. Podejście to wspiera walidację celów terapeutycznych, oferując system relewantny dla choroby z mierzalnymi punktami końcowymi histopatologicznymi i funkcjonalnymi. Skuteczność na poziomie 86% oraz minimalne ryzyko wycieku płynu mózgowo-rdzeniowego zwiększają pewność prognostyczną w zakresie odkrywania translacyjnych biomarkerów i ograniczania ryzyka mechanistycznego w procesach badawczych skoncentrowanych na otologii.
Metoda ta integruje się z procesami badawczymi jako zwalidowany model przedkliniczny do walidacji celów terapeutycznych oraz opracowywania testów w badaniach otologicznych, stanowiąc pomost między wczesnym testowaniem hipotez a przedkliniczną oceną skuteczności.