Name: Rękawowa resekcja żołądka u myszy przy użyciu klipsów chirurgicznych (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-11-14T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 16 s
Description: Poznaj technikę rękawowej resekcji żołądka u myszy przy użyciu klipsów chirurgicznych. Ta metoda pozwala badać metaboliczne efekty i oporność na insulinę po operacji bariatrycznej.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dziękujemy Pani Isabelle Lu za angielską narrację.

Wszystkie procedury dotyczące wykorzystania zwierząt zostały zatwierdzone przez Narodowy Komitet ds. Opieki i Użytkowania Zwierząt Uniwersytetu Yang-Ming i były zgodne z "Przewodnikiem po opiece i użytkowaniu zwierząt laboratoryjnych.8 edycja, 2011". Zabieg znieczulenia został przeprowadzony zgodnie z wytycznymi dotyczącymi kontroli bólu, znieczulenia, opieki przedoperacyjnej i pooperacyjnej dla zwierząt doświadczalnych z National Yang Ming University, ICAUC-016, 2015, 1 edycja.
1. Przygotowanie zwierząt
<ol>
	<li>Zdobądź 20 8-tygodniowych samców myszy C57BL/6 typu dzikiego z National Laboratory Animal Center (NLAC), które ważą około 16-18 gramów. Losowo przypisz te myszy do SG lub pozorowanej grupy operacyjnej z 10 myszami każda.</li>
	<li>Rozpocznij u myszy karmienie lub dietę wysokotłuszczową (patrz <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60719/High tłuszcz diet.pdf" target="_blank">Plik uzupełniający</a>) przed operacjami bariatrycznymi lub pozorowanymi9. Wyprodukuj otyłość wywołaną dietą z co najmniej 2 tygodniami przedoperacyjnymi HFD.</li>
	<li>Trzymaj myszy w Narodowym Centrum Zwierząt Laboratoryjnych Uniwersytetu Yang-Ming w cyklu jasno-ciemnym o godzinie 12:12 z początkiem światła o godzinie 07:00 i pozwól na swobodne karmienie standardową karmą dla gryzoni i wodą.</li>
	<li>Ogranicz wszystkim zwierzętom dostęp do jedzenia, ale zapewnij swobodny dostęp do wody w noc przed zabiegiem.</li>
</ol>
2. Ogólne przygotowanie przedoperacyjne
<ol>
	<li>Pościć myszy przez co najmniej 6 godzin przed zabiegiem. Wywołaj znieczulenie w komorze indukcyjnej z 5% izofluranem i tlenem (oba 3-4 l/min).
	<ol>
		<li>Sprawdź głębokość znieczulenia, upewniając się, że stymulacja szczypania (, zakrzywione, ząbkowane, gładkie mikrokleszcze) tylnej łapy, przedniej łapy i ucha nie wywołuje żadnego odruchu motorycznego. Przed operacją należy podać antybiotyki (25 mg/kg cefazoliny) we wstrzyknięciach podskórnych.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Przypisz konkretną strefę roboczą do zabiegów chirurgicznych. Przed operacją oczyść obszar operacyjny i spryskaj stół operacyjny 75% roztworem alkoholu.</li>
	<li>Umieść mysz w stożku nosowym i utrzymuj znieczulenie 2% izofluranem (2 l/min) i tlenem (4 l/min).</li>
	<li>W przypadku rękawowej resekcji żołądka i operacji pozorowanej, po potwierdzeniu odpowiedniej głębokości znieczulenia poprzez stymulację palców u stóp, nałóż 0,2% żel pod oczy Carbomer na oczy myszy, aby zapobiec suchości oczu.</li>
	<li>Użyj elektrycznej maszynki do golenia, aby zgolić włosy od brzucha do mostka. Usuń i oczyść pozostałe włosy kremem do depilacji. Umieść i zamocuj mysz na stole operacyjnym w pozycji leżącej.</li>
	<li>Zdezynfekuj ścianę brzucha myszy roztworami powidonu i jodu na przemian z 75% alkoholem przez 3 aplikacje.</li>
</ol>
3. Rękawowa resekcja żołądka i zabiegi pozorowane
<ol>
	<li>Laparotomia medianowa
	<ol>
		<li>Użyj mikronożyczek, aby wykonać nacięcie linii środkowej o długości 1-1,5 cm w górnej części brzucha.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Eksternalizacja żołądka i jelit
	<ol>
		<li>Procedurę SG należy wykonać za pomocą powiększającego mikroskopu preparacyjnego lub lupy, w zależności od potrzeb, aby zapobiec nieprzewidywalnemu krwawieniu i wstrząsowi hipowolemicznemu.</li>
		<li>Użyj dwóch zakrzywionych, gładkich, ząbkowanych mikrokleszczyków, aby delikatnie przesunąć żołądek i całkowicie go uzewnętrznić.</li>
		<li>Ostrożnie podziel więzadło żołądkowo-śledzionowe łączące lewy żołądek ze śledzioną za pomocą sondy z bawełnianą końcówką i elektrokoagulacji w razie potrzeby, wycinając w ten sposób dno żołądka z otaczającej śledziony i innych narządów wewnętrznych.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
4. Izolacja żołądka i klips
UWAGA: SG dla myszy zostało przeprowadzone przy użyciu nowej techniki aplikacji klipsów, jak wcześniej opublikowano10.
<ol>
	<li>Rozciągnij dno i odźwiernik żołądka delikatnie i bocznie za pomocą kleszczy, zidentyfikuj linię środkową (<silna klasa = "xfig" >Rysunek 1 i <silna klasa = "xfig" >Rysunek 2) i ostrożnie przyłóż klipsy chirurgiczne do połowy przyśrodkowej strony linii środkowej żołądka od połączenia żołądkowo-przełykowego niżej i dolnego bieguna wyżej. Zacisnąć i wykluczyć około 75-80% żołądka, tworząc w ten sposób cały boczny rękaw żołądka (<silna klasa="xfig">Rysunek 1 i <silna klasa="xfig">Rysunek 2).</li>
	<li>Przenieś jelito do gołej skóry z boku i przykryj je gazą zwilżoną ciepłą solą fizjologiczną i w razie potrzeby wykonaj nawodnienie dootrzewnowe, aby zapobiec odwodnieniu i hipotermii.</li>
	<li>Wyciąć boczny przycięty żołądek, usunąć wykluczony rękaw żołądka za pomocą mikronożyczek, a następnie wysterylizować odciętą krawędź żołądka roztworem powidonu i jodu.</li>
	<li>Przeszyj żyłkę klipsa niewchłanialnym szwem z monofilamentu 5-0, aby zapewnić brak wycieków. Zapnij końce szwu i zakotwicz się w zaciskach na obu końcach.</li>
	<li>Przywróć żołądek i jelito do właściwej pozycji w jamie brzusznej i zamknij jamę brzuszną za pomocą biegnącego 5-0 monofilamentowego, niewchłanialnego, ciągłego i nieciągłego szwu do powięzi i ściany brzucha.</li>
	<li>Po całym zabiegu należy podawać dootrzewnowo leki przeciwbólowe z ketoprofenem (2-5 mg/kg) i antybiotyki z cefazoliną (25 mg/kg).</li>
</ol>
5. Fałszywa procedura SG
<ol>
	<li>Wykonaj podobną procedurę, jak opisano wcześniej, z laparotomią w linii środkowej i uzewnętrzniaj jelito i żołądek za pomocą mokrej, ciepłej gazy solnej o temperaturze 37 °C przez 5 minut.</li>
	<li>Przywróć żołądek i jelito do odpowiednich miejsc tych narządów wewnętrznych.</li>
	<li>Dokładnie zamknij ścianę brzucha, jak opisano wcześniej, za pomocą 2 warstw ciągłego i nieciągłego zamykania do powięzi i skóry za pomocą powolnych lub niewchłanialnych szwów monofilamentowych. Po całym zabiegu należy podawać dootrzewnowo leki przeciwbólowe z ketoprofenem (2-5 mg/kg) i antybiotyki z cefazoliną (25 mg/kg).</li>
</ol>
6. Ogólna opieka pooperacyjna
<ol>
	<li>Odstaw izofluran i kontynuuj przepływ powietrza w pomieszczeniu o natężeniu 3-5 l/min, aż mysz całkowicie się obudzi.</li>
	<li>Obserwuj mysz, która odzyskuje mobilność i zaczyna chodzić po klatce.</li>
	<li>Umieść mysz w niezależnym inkubatorze o temperaturze 30 °C na 5 dni. Upewnij się, że w klatce jest tylko jedna mysz, aby myszy nie zraniły się nawzajem.</li>
	<li>Zwróć bezpłatny dostęp do diety żelowej (dieta żelowa o wysokiej zawartości tłuszczu: 10% smalcu, 10% cukru płynnego, 57% wody) przez 3 dni po zabiegu i ponownie wprowadź poprzednio przypisaną dietę 3 dni po zabiegu.</li>
	<li>Podskórnie lub dootrzewnowo wstrzykiwać ketoprofen (2-5 mg/kg) i cefazolinę (25 mg/kg) przez 1 dzień po operacji.</li>
	<li>Oceniaj masę ciała myszy co tydzień przez cały okres badania. Podawać ketoprofen (2-5 mg/kg) we wstrzyknięciu dootrzewnowym w celu kontroli bólu raz na dobę, w razie potrzeby, jeśli zwierzę jest w niebezpieczeństwie po operacji. 
	UWAGA: W tym przypadku wskaźnik przeżycia SG wynosił 90% po okresie uczenia się.</li>
</ol>
7. Ocena parametrów metabolicznych
<ol>
	<li>Poszcz myszy przez 6 godzin i pobierz wyjściowe próbki krwi (0 min). Zdobądź wszystkie próbki krwi z czubka żyły ogonowej swobodnie poruszających się myszy11,12.</li>
	<li>Dostarczyć 1 mg/g 50% dekstrozy we wstrzyknięciu dootrzewnowym w celu wykonania testu tolerancji glukozy.</li>
	<li>Zmierz poziom glukozy we krwi z końcówek żył ogonowych swobodnie poruszających się myszy po 0, 5, 15, 30, 60 i 120 minutach po podaniu glukozy na zduplikowanych próbkach za pomocą glukometrów i pasków testowych.</li>
	<li>Próbkę krwi pełnej (n = 10 dla każdej grupy) należy przechowywać w temperaturze pokojowej z krzepnięciem przez 30 minut.</li>
	<li>Odwirować próbkę krwi o stężeniu 3 000 x g przez 10 minut w temperaturze 4 °C.</li>
	<li>Przenieść osocze do oddzielnych probówek bez naruszania zakrzepów krwi i przechowywać w temperaturze -80 °C.</li>
	<li>Zbadaj próbki osocza pod koniec badania przy użyciu komercyjnych zestawów ELISA dla myszy pod kątem poziomu hemoglobiny A1c (HBA1c), glukozy, cholesterolu i insuliny zgodnie z wytycznymi producenta.</li>
</ol>

<ol><li>WHO. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Obesity+and+overweight%5BTitle%5D)+AND+%22WHO%22%5BJournal%5D)">Obesity and overweight.</a> WHO. , (2018).</li>
<li>Buchwald, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bariatric+surgery%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Medical+Association%22%5BJournal%5D)">Bariatric surgery: a systematic review and meta-analysis.</a> Journal of the American Medical Association. 292 (14), 1724-1737 (2004).</li>
<li>Schauer, D. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bariatric+Surgery+and+the+Risk+of+Cancer+in+a+Large+Multisite+Cohort%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Bariatric Surgery and the Risk of Cancer in a Large Multisite Cohort.</a> Annals of Surgery. 269 (1), 95-101 (2019).</li>
<li>Wei, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+surgery+ameliorates+cardiovascular+risk+in+obese+diabetic+patients%3A+Influence+of+different+surgical+procedures%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery+for+Obesity+and+Related+Diseases%22%5BJournal%5D)">Metabolic surgery ameliorates cardiovascular risk in obese diabetic patients: Influence of different surgical procedures.</a> Surgery for Obesity and Related Diseases. 14 (12), 1832-1840 (2018).</li>
<li>Lee, W. J., Aung, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+Surgery+for+Type+2+Diabetes+Mellitus%3A+Experience+from+Asia%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Metabolic Surgery for Type 2 Diabetes Mellitus: Experience from Asia.</a> Diabetes & Metabolism. 40 (6), 433-443 (2016).</li>
<li>Yin, D. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+different+bariatric+surgeries+in+the+treatment+of+obesity+and+insulin+resistance+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Assessment of different bariatric surgeries in the treatment of obesity and insulin resistance in mice.</a> Annals of Surgery. 254 (1), 73-82 (2011).</li>
<li>Abraham, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trends+in+Bariatric+Surgery%3A+Procedure+Selection%2C+Revisional+Surgeries%2C+and+Readmissions%5BTitle%5D)+AND+%22Obesity+Surgery%22%5BJournal%5D)">Trends in Bariatric Surgery: Procedure Selection, Revisional Surgeries, and Readmissions.</a> Obesity Surgery. 26 (7), 1371-1377 (2016).</li>
<li>Varela, J. E., Nguyen, N. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laparoscopic+sleeve+gastrectomy+leads+the+U.S.+utilization+of+bariatric+surgery+at+academic+medical+centers%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery+for+Obesity+and+Related+Diseases%22%5BJournal%5D)">Laparoscopic sleeve gastrectomy leads the U.S. utilization of bariatric surgery at academic medical centers.</a> Surgery for Obesity and Related Diseases. 11 (5), 987-990 (2015).</li>
<li>Surwit, R. S., Kuhn, C. M., Cochrane, C., McCubbin, J. A., Feinglos, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diet-induced+type+II+diabetes+in+C57BL%2F6J+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Diet-induced type II diabetes in C57BL/6J mice.</a> Diabetes. 37 (9), 1163-1167 (1988).</li>
<li>Schlager, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+for+sleeve+gastrectomy%3A+applications+for+diabetes+research%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">A mouse model for sleeve gastrectomy: applications for diabetes research.</a> Microsurgery. 31 (1), 66-71 (2011).</li>
<li>Pressler, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vertical+sleeve+gastrectomy+restores+glucose+homeostasis+in+apolipoprotein+A-IV+KO+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Vertical sleeve gastrectomy restores glucose homeostasis in apolipoprotein A-IV KO mice.</a> Diabetes. 64 (2), 498-507 (2015).</li>
<li>Williams, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+development+of+diet-induced+obesity+and+glucose+intolerance+in+C57BL%2F6+mice+on+a+high-fat+diet+consists+of+distinct+phases%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The development of diet-induced obesity and glucose intolerance in C57BL/6 mice on a high-fat diet consists of distinct phases.</a> PLoS One. 9 (8), 106159(2014).</li>
<li>Huang, R., Ding, X., Fu, H., Cai, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+mechanisms+of+sleeve+gastrectomy+for+reducing+weight+and+improving+metabolism+in+patients+with+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery+for+Obesity+and+Related+Diseases%22%5BJournal%5D)">Potential mechanisms of sleeve gastrectomy for reducing weight and improving metabolism in patients with obesity.</a> Surgery for Obesity and Related Diseases. 15 (10), 1861-1871 (2019).</li>
<li>Bender, R., Zeeb, H., Schwarz, M., Jockel, K. H., Berger, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Causes+of+death+in+obesity%3A+relevant+increase+in+cardiovascular+but+not+in+all-cancer+mortality%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Epidemiology%22%5BJournal%5D)">Causes of death in obesity: relevant increase in cardiovascular but not in all-cancer mortality.</a> Journal of Clinical Epidemiology. 59 (10), 1064-1071 (2006).</li>
<li>Vest, A. R., Heneghan, H. M., Agarwal, S., Schauer, P. R., Young, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bariatric+surgery+and+cardiovascular+outcomes%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Heart%22%5BJournal%5D)">Bariatric surgery and cardiovascular outcomes: a systematic review.</a> Heart. 98 (24), 1763-1777 (2012).</li>
<li>Ionut, V., Burch, M., Youdim, A., Bergman, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gastrointestinal+hormones+and+bariatric+surgery-induced+weight+loss%5BTitle%5D)+AND+%22Obesity+%28Silver+Spring%29%22%5BJournal%5D)">Gastrointestinal hormones and bariatric surgery-induced weight loss.</a> Obesity (Silver Spring). 21 (6), 1093-1103 (2013).</li>
<li>Arble, D. M., Sandoval, D. A., Seeley, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+underlying+weight+loss+and+metabolic+improvements+in+rodent+models+of+bariatric+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">Mechanisms underlying weight loss and metabolic improvements in rodent models of bariatric surgery.</a> Diabetologia. 58 (2), 211-220 (2015).</li>
<li>Schneck, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+sleeve+gastrectomy+in+high+fat+diet-induced+obese+mice%3A+respective+role+of+reduced+caloric+intake%2C+white+adipose+tissue+inflammation+and+changes+in+adipose+tissue+and+ectopic+fat+depots%5BTitle%5D)+AND+%22Surgical+Endoscopy%22%5BJournal%5D)">Effects of sleeve gastrectomy in high fat diet-induced obese mice: respective role of reduced caloric intake, white adipose tissue inflammation and changes in adipose tissue and ectopic fat depots.</a> Surgical Endoscopy. 28 (2), 592-602 (2014).</li>
<li>Rubino, F., R'Bibo, S. L., del Genio, F., Mazumdar, M., McGraw, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+surgery%3A+the+role+of+the+gastrointestinal+tract+in+diabetes+mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Metabolic surgery: the role of the gastrointestinal tract in diabetes mellitus.</a> Nature Reviews Endocrinology. 6 (2), 102-109 (2010).</li>
<li>Wilson-Perez, H. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vertical+sleeve+gastrectomy+is+effective+in+two+genetic+mouse+models+of+glucagon-like+Peptide+1+receptor+deficiency%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Vertical sleeve gastrectomy is effective in two genetic mouse models of glucagon-like Peptide 1 receptor deficiency.</a> Diabetes. 62 (7), 2380-2385 (2013).</li>
<li>Lopez, P. P., Nicholson, S. E., Burkhardt, G. E., Johnson, R. A., Johnson, F. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+sleeve+gastrectomy+weight+loss+model+in+obese+Zucker+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Development of a sleeve gastrectomy weight loss model in obese Zucker rats.</a> Journal of Surgical Research. 157 (2), 243-250 (2009).</li>
<li>Koch, T. R., Shope, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laparoscopic+Vertical+Sleeve+Gastrectomy+as+a+Treatment+Option+for+Adults+with+Diabetes+Mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Experimental+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Laparoscopic Vertical Sleeve Gastrectomy as a Treatment Option for Adults with Diabetes Mellitus.</a> Advances in Experimental Medicine and Biology. , (2020).</li>
</ol>

Autorzy deklarują brak konfliktu interesów.

Większość prospektywnych badań kohortowych potwierdziła, że zwiększenie wskaźnika masy ciała wiąże się ze wzrostem śmiertelności. Otyłość wiąże się z wyższym ryzykiem cukrzycy, chorób sercowo-naczyniowych (CVD) i zgonu u obu płci. Specyficzne procesy patologiczne ustaliły związek między cukrzycą, otyłością i śmiertelnością14. Przeglądy systematyczne wskazują na korzyści płynące z chirurgii bariatrycznej w zmniejszaniu czynników ryzyka chorób sercowo-naczyniowych, z dowodami na regresję przerostu k...

Częstość występowania otyłości wzrosła prawie trzykrotnie na całym świecie od 1975 roku. W 2016 roku ponad 1,9 miliarda dorosłych w wieku powyżej 18 lat miało nadwagę, a ponad 650 milionów dorosłych było otyłych. Częstość występowania cukrzycy typu 2 w populacji dorosłych również się podwoiła z 4,7% do 8,5%, przy czym liczba ta wzrosła ze 108 milionów do 422 milionów dorosłych w latach 1980-2014 na całym świecie1. Większość operacji bariatrycznych skutkuje znaczną utratą wagi, redukcją tkanki tłuszczowej oraz poprawą tolerancji glukozy, insulinooporności i kontroli cukrzycy2. Oprócz utraty masy ciała i remisji cukrzycy typu 2, chirurgia bariatryczna przynosi dodatkowe korzyści zdrowotne, takie jak kontrola nadciśnienia tętniczego i mniejsza częstość występowania niektórych rodzajów rozwoju i progresji raka związanego z otyłością3. Chirurgia bariatryczna indukuje również trwałą, całkowitą, częściową remisję cukrzycy typu 2 i zmniejsza ryzyko dziesięcioletniej poważnej choroby niedokrwiennej serca (CHD) i pewien stopień ryzyka naczyń mózgowych. Jednak mechanizmy leżące u podstaw tego zjawiska nie są w pełni zrozumiałe4.
Istnieje kilka procedur chirurgii bariatrycznej/metabolicznej. Zarówno restrykcyjne, jak i pomostowe operacje pomostowania przewodu pokarmowego mają pozytywny wpływ na metabolizm5. Spośród bariatrycznych modeli chirurgicznych, SG i zmodyfikowane obejście żołądka Roux-en-Y mają wyższy sukces i niższe wskaźniki śmiertelności oraz wykazują wiarygodne modele operacji pomostowania restrykcyjnego i żołądkowo-jelitowego u myszy6. Chociaż operacja pomostowania przewodu pokarmowego zapewnia większą utratę masy ciała i znaczną poprawę tolerancji glukozy i stłuszczenia wątroby niż procedura restrykcyjna w dłuższej perspektywie, SG nadal zapewnia dobrą kontrolę masy ciała i poziomu glukozy oraz jest łatwa do wykonania przy niskiej częstości występowania powikłań6. W latach 2008-2014 odsetek SG wzrósł z 30% do 54%, a operacja pomostowania żołądka metodą Roux-en-Y zmniejszyła się z 52% do 32%7. Obecnie laparoskopowa SG jest najczęściej wykonywanym zabiegiem bariatrycznym na poziomie krajowym w ośrodkach akademickich w Stanach Zjednoczonych8. Chociaż opublikowano wiele doniesień dotyczących procesów patofizjologicznych między chirurgią bariatryczną, cukrzycą i otyłością, potrzebujemy więcej eksperymentów na zwierzętach, aby dalej badać nieznane mechanizmy.
Ten protokół ma na celu stworzenie metody zwierzęcej do badania mechanizmów leżących u podstaw wyników obserwowanych po operacji bariatrycznej u ludzi. Obecne badanie translacyjne może dostarczyć informacji na temat mechanizmu otyłości i leczenia cukrzycy typu 2 z SG.

<table><tbody><tr><td>0,9% soli fizjologicznej</td><td>Chiny Chemical & Pharmaceutical Co., Sp. z o.o.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Szew monofilamentowy 5-0</td><td>Shineteh Inc. Tajwan</td><td></td><td>Ethicon</td></tr><tr><td>Alm</td><td>Shineteh Inc. Tajwan</td><td>ST-A072PK</td><td>UNIK</td></tr><tr><td>Technologia kroku znieczulenia zwierząt</td><td></td><td>0712VAP11076</td><td>Kleszcze Matrx</td></tr><tr><td>Barraqer-Troutman</td><td>Shineteh Inc. Tajwan</td><td>ST-N309(H-4410)</td><td>UNIK</td></tr><tr><td>cefazolin</td><td>Tajwańska firma farmaceutyczna weteranów</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dieta chow</td><td>Diety</td><td></td><td></td>badawcze</tr><tr><td>Paski glukozy i glukometr</td><td>BeneCheck</td><td>BKM13-1</td><td>Zestaw BeneCheck</td></tr><tr><td>HbA1c</td><td></td><td></td> System hematologiczny poziomu OKEH00661 <td></td></tr><tr><td>Fuji</td><td></td><td>FUJI DRI-CHEM 4000i</td><td>Europa</td></tr><tr><td>Dieta wysokotłuszczowa</td><td>Diety badawcze</td><td>1810724</td><td>LabDiet</td></tr><tr><td>Kleszcze do tęczówki</td><td>Shineteh Inc. Tajwan</td><td>ST-1210</td><td>UNIK</td></tr><tr><td>Nożyczki do irysa</td><td>Shineteh Inc. Tajwan</td><td>ST-S011</td><td>UNIK</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Panion & BF biotech INC</td><td>8547</td><td>Panion & BF</td></tr><tr><td>Ketoprofen</td><td>Sigma</td><td>22071154</td><td>Sigma-Aldrich</td></tr><tr><td>Mikroskop stereoskopowy</td><td>MicroTech</td><td>SZ-5T</td><td>MicroTech</td></tr><tr><td>Klips chirurgiczny (M)</td><td>Echicon Inc., Somerville, NJ</td><td></td><td>Rozmiar M, 5mm</td></tr><tr><td>Żel Vidisic</td><td>Dr. Gerhard Mann Chem.-pharm. Fabrik GmbH</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

rękawowa resekcja żołądka u myszy przy użyciu klipsów chirurgicznych

Sleeve Gastrectomy in Mice using Surgical Clips

Liczba osób z nadwagą i otyłością stale rośnie, zarówno w populacji dorosłych, jak i młodzieży. Zbiega się to ze wzrostem powszechnego zjawiska cukrzycy typu 2 (T2D) i innych problemów metabolicznych. Chirurgia bariatryczna, taka jak SG, jest obecnie jedną z najskuteczniejszych i najpowszechniej stosowanych długoterminowych metod leczenia otyłości i cukrzycy typu 2, ale związek między nimi nie jest jeszcze w pełni zbadany. Mechanizmy leżące u podstaw wyników obserwowanych po operacji bariatrycznej u ludzi można zbadać na podstawie przedklinicznych badań na zwierzętach. SG zmniejsza masę ciała, poziom glukozy i wiele parametrów metabolicznych, a także jest łatwy do wykonania przy niskiej częstości występowania powikłań. Celem tej pracy jest dostarczenie naukowcom prostej metody i nieskomplikowanego modelu przedklinicznego chirurgii bariatrycznej u zwierząt.

Wyniki operacji przedstawiono na Ryc. 3 oraz Ryc. 4. Przeżywalność w badaniu wyniosła 90%. Jedna mysz w grupie pozorowanej padła z powodu osłabienia, a kolejna mysz w grupie SG padła w trzeciej dobie po operacji z nieznanych przyczyn. Wyniki dotyczące utraty masy ciała (Ryc. 3A) po operacji (w 3. tygodniu) u myszy karmionych dietą HFD były dość zbliżone do tych obserwowanych u ludzi, z końcową utratą masy ciała wynoszącą około 15-20...

Częstość występowania cukrzycy i otyłości stale rośnie na całym świecie. Mechanizmy między cukrzycą, otyłością i związaną z nimi śmiertelnością i chorobami współistniejącymi wymagają dalszych badań. W niniejszej pracy przedstawiono protokół rękawowej resekcji żołądka (SG) u zwierząt jako nieskomplikowany model przedkliniczny chirurgii bariatrycznej.

Rękawowa resekcja żołądka u myszy przy użyciu klipsów chirurgicznych

The number of people who are overweight and obese is continually increasing both in the adult and adolescent populations. This coincides with the ...

Głównym celem interwencji chirurgicznej jest pomiar efektów metabolicznych i insulinooporności rękawowej resekcji żołądka w łatwiejszym do oceny modelu mysim. Protokół ten ma na celu stworzenie modelu zwierzęcego do badań nad mechanizmami, które podkreślają wyniki obserwowane po operacji bariatrycznej u ludzi, co może dostarczyć informacji na temat patogenezy otyłości i leczenia cukrzycy typu 2. W przypadku rękawowej resekcji żołądka i operacji pozorowanej, po potwierdzeniu odpowiedniej głębokości znieczulenia poprzez stymulację palców u stóp, nałóż żel do oczu Carbomer 0,2% na oczy myszy, aby zapobiec wysuszeniu oczu.Mysz jest umieszczana i mocowana na stole operacyjnym. Usuń i oczyść pozostałe włosy kremem do depilacji. Zdezynfekuj brzuch myszy roztworami jodu powidonu na przemian z alkoholem przez trzy aplikacje.Wykonaj procedurę SG za pomocą powiększającego mikroskopu preparacyjnego lub lupy, jeśli jest to konieczne, aby zapobiec nieprzewidywalnemu krwawieniu i wstrząsowi hipowolemicznemu. Wykonaj nacięcie linii środkowej o długości od jednego do 1,5 centymetra w górnej części brzucha. Użyj dwóch zakrzywionych, gładkich, ząbkowanych mikrokleszczyków, aby delikatnie przesunąć żołądek i całkowicie go uzewnętrznić.Przenieś jelito do gołej skóry z boku i przykryj je ciepłą gazą zwilżoną solą fizjologiczną, aby zapobiec odwodnieniu. Ostrożnie podziel więzadło żołądkowo-śledzionowe łączące lewy żołądek ze śledzioną za pomocą sondy z bawełnianą końcówką i elektrokoagulacji w razie potrzeby, wycinając w ten sposób dno żołądka z otaczającej śledziony i innych narządów wewnętrznych. Delikatnie i bocznie rozciągnąć dno i odźwiernik żołądka za pomocą kleszczy, określić linię środkową żołądka i ostrożnie przyłożyć dwa klipsy chirurgiczne za pomocą aplikatora LIGACLIP do 15% przyśrodkowego odcinka żołądka od połączenia żołądkowo-przełykowego poniżej i odźwiernika górnego.Zaciśnij i odizoluj około 75-80% żołądka, tworząc w ten sposób cały boczny rękaw żołądka. Wytnij boczny izolowany żołądek za pomocą mikronożyczek. Użyj bawełnianych wacików, aby usunąć resztki jedzenia z żołądka, a następnie oczyść odciętą krawędź żołądka wodnym roztworem powidonu i jodu.Przeszyj żyłkę klipsa niewchłanialnym szwem z monofilamentu 5-0, aby upewnić się, że nie ma przeciekania. Zapnij końce szwu i zakotwicz się w zaciskach na obu końcach. Przywróć żołądek i jelito do właściwej pozycji w jamie brzusznej i zamknij jamę brzuszną niewchłanialnym szwem monofilamentowym 5-0 do ściany brzucha.W przypadku pozorowanej procedury SG należy wykonać podobną procedurę, jak opisano wcześniej, z laparotomią w linii środkowej, uzewnętrznić jelito i żołądek za pomocą mokrej, ciepłej gazy z soli fizjologicznej o temperaturze 37 stopni Celsjusza przez pięć minut. Przywróć żołądek i jelito do odpowiednich miejsc tych narządów wewnętrznych. Podawać ketoprofen od dwóch do pięciu miligramów na kilogram i cefazolinę 25 miligramów na kilogram podskórnie lub dootrzewnowo po operacji w celu kontroli bólu i zapobiegania infekcjom.Zatrzymaj izofluran i kontynuuj przepływ powietrza w pomieszczeniu od trzech do pięciu litrów na minutę, aż mysz całkowicie się obudzi. Obserwuj mysz, która odzyskuje mobilność i zaczyna chodzić po klatce. Umieść mysz w niezależnym inkubatorze w temperaturze około 30 stopni Celsjusza na pięć dni, upewniając się, że w klatce jest tylko jedna mysz.W naszych doświadczonych rękach wskaźnik sukcesu SG wynosił około 90% po okresie nauki. Masa ciała myszy pozorowanych i karmionych dietą wysokotłuszczową stale przybierała na sile. Ale rękawowa resekcja żołądka i myszy karmione dietą wysokotłuszczową stale się zmniejszały.Różnica w poziomie cholesterolu była istotna między myszami karmionymi dietą wysokotłuszczową z pozorowaną i rękawową resekcją żołądka. Może to wskazywać na poprawę stresu oksydacyjnego po rękawowej resekcji żołądka. Różnica w poziomach hemoglobiny A1C i IPGTT była również znacząca.Pomiędzy dietą wysokotłuszczową karmioną myszami z pozorowaną i rękawową resekcją żołądka oraz wskazując na insulinooporność i poprawę kontroli cukru po rękawowej resekcji żołądka. Ten model zwierzęcy może pomóc nam w zbadaniu klinicznego znaczenia cukrzycy i otyłości przy użyciu krótkiego zabiegu chirurgicznego z rękawową resekcją żołądka. Ta procedura może skrócić czas operacji i poprawić wskaźnik przeżycia chirurgicznego.Główną zaletą tego badania jest naśladowanie wyników klinicznych chirurgii bariatrycznej u pacjentów przy użyciu prostego chirurgicznego modelu mysiego.

sleeve-gastrectomy-in-mice-using-surgical-clips

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

W tym filmie procedura pionowej rękawowej resekcji żołądka jest wykonywana na eksperymentalnym modelu myszy. Ta procedura pomaga usunąć znaczną część żołądka wzdłuż jego większej krzywizny.

Mysia pionowa rękawowa resekcja żołądka: zabieg chirurgiczny mający na celu zmniejszenie rozmiaru żołądka w eksperymentalnych modelach mysich

Chirurgia bariatryczna jest najskuteczniejszym sposobem na zmniejszenie masy ciała i śmiertelnych powikłań metabolicznych (cukrzyca, otyłość i dyslipidemia) często związanych z chorobliwą otyłością. Mysie modele chirurgii bariatrycznej stanowią unikalny atut w rozszyfrowywaniu mechanizmów molekularnych stojących za korzystnym wpływem tych operacji na cukrzycę, nadciśnienie i dyslipidemię.

Techniki rękawowej resekcji żołądka i zmodyfikowanego obejścia żołądka Roux-en-Y u myszy

Poniżej opisano skuteczność pionowej rękawowej resekcji żołądka u myszy. Jest to rodzaj operacji odchudzającej, która polega na usunięciu około 70% żołądka.

Mysi model pionowej rękawowej resekcji żołądka

Jednoczęściowe obejście dwunastnicy i jelita krętego (SADI-S) to nowa procedura bariatryczna o ważnych efektach metabolicznych. W tym artykule przedstawiamy wiarygodny i powtarzalny model SADI-S u myszy.

Pomostowanie dwunastnicy i jelita krętego z pojedynczym zespoleniem z rękawowym modelem resekcji żołądka u myszy

Przedstawiono technikę chirurgiczną implantacji dostępnych komercyjnie nadajników telemetrycznych służących do ciągłego pomiaru biopotencjału (jednokanałowe EKG), częstotliwości akcji serca, wewnętrznej temperatury ciała oraz aktywności ruchowej u swobodnie poruszających się myszy. Zaprezentowano również zalecenia i protokoły dotyczące opieki pooperacyjnej i uśmierzania bólu w celu poprawy procesu rekonwalescencji, dobrostanu oraz przeżywalności zwierząt.

Implantacja nadajników radiotelemetrycznych umożliwiających pozyskiwanie danych dotyczących EKG, częstości akcji serca, wewnętrznej temperatury ciała i aktywności u swobodnie poruszających się myszy laboratoryjnych

Myszy transgeniczne okazały się niezwykle użyteczne w przypisywaniu funkcji fizjologicznych konkretnym genom. W związku z tym badania ogólne, a w szczególności studia funkcjonalne dróg oddechowych, przeszły znaczący zwrot w stronę modeli mysich. W niniejszym materiale przedstawiamy protokoły badań skurczu tchawicy in vitro w celu oceny funkcji mięśni gładkich w drogach oddechowych myszy.

In vitro pomiary skurczu tchawki u myszy

Opisano wysoce powtarzalny model zawału mięśnia sercowego u myszy z minimalnymi inwazyjnymi manipulacjami. Model można łatwo wykonać, co skutkuje wysoką odtwarzalnością i wskaźnikiem przeżycia. W związku z tym opisany model zmniejszy liczbę wymaganych zwierząt, zgodnie z zasadą 3R (Replacement, Refinement and Reduction).

Minimalnie inwazyjny zabieg chirurgiczny indukcji zawału mięśnia sercowego u myszy

Ten artykuł demonstruje zabiegi chirurgiczne refluksu żołądkowo-przełykowego u myszy. Modele te są przydatnymi narzędziami do badań nad mechanizmami i leczeniem choroby refluksowej przełyku, a potencjalnie również choroby Barretta i raka przełyku.

Modele chirurgiczne refluksu gastroezofagoidalnego z użyciem myszy

Ten artykuł opisuje wykorzystanie ilościowego pomiaru ruchów gałek ocznych w połączeniu ze stymulacją ogniskowych obszarów głębokiego mózgu w celu zbadania fizjologii, patofizjologii i mechanizmów głębokiej stymulacji mózgu.

Wykorzystanie sakadometrii z głęboką stymulacją mózgu do badania prawidłowych i patologicznych funkcji mózgu

Aby zrozumieć patofizjologię udaru, ważne jest korzystanie z wiarygodnych modeli. W artykule opisano jeden z najczęściej stosowanych modeli udaru u myszy, określany jako model niedrożności tętnicy środkowej mózgu (MCAo) (określany również jako model włókna śródświetlnego lub szewu) z reperfuzją.

Podejście chirurgiczne do niedrożności tętnicy środkowej mózgu i udaru wywołanego reperfuzją u myszy

Poznaj technikę rękawowej resekcji żołądka u myszy przy użyciu klipsów chirurgicznych. Ta metoda pozwala badać metaboliczne efekty i oporność na insulinę po operacji bariatrycznej.

Rękawowa resekcja żołądka u myszy przy użyciu klipsów chirurgicznych

Przeglądaj więcej filmów