Name: Powtarzalny test schodkowy w celu uzyskania dostępu do allelopatycznego potencjału chwastów ryżu (Oryza sativa ssp.) (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-01-28T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min
Description: Poznaj metodę schodkowego testowania allelopatii w dzikich odmianach ryżu Oryza sativa w celu identyfikacji związków chemicznych hamujących chwasty. Technika ta umożliwia selekcję roślin o potencjale bioherbicydowym bez zakłóceń konkurencji o zasoby.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Finansowanie tego projektu zostało zapewnione przez Special Research Initiative Grant sponsorowany przez Mississippi Agricultural and Forestry Experiment Station i opiera się na pracy wspieranej przez National Institute of Food and Agriculture, U.S. Department of Agriculture, projekt Hatch pod numerem akcesyjnym 230060.

1. Budowa stelaża
UWAGA: Wymiary drewna podano jako grubość (cm) x szerokość (cm) x długość (m).
<ol>
	<li>Przyciąć drewno na odpowiednie wymiary i w odpowiedniej ilości w następujący sposób: pięć drewnianych elementów o wymiarach 10,16 cm x 5,08 cm x 0,91 m, trzy drewniane elementy o wymiarach 10,16 cm x 5,08 cm x 0,76 m, trzy drewniane elementy o wymiarach 10,16 cm x 5,08 cm x 0,61 m, pięć drewnianych elementów o wymiarach 10,16 cm x 5,08 cm x 0,46 m, trzy drewniane elementy o wymiarach 10,16 cm x 5,08 cm x 0,3 m oraz trzy drewniane elementy o wymiarach 10,16 cm x 5,08 cm x 0,15 m.</li>
	<li>W przypadku najwyższego poziomu, ustawić jedną deskę o długości 2,4 m na dwóch elementach o długości 0,91 m umieszczonych na brzegach każdego z końców i wkręcić dwa wkręty pionowo w każdy z elementów 0,91 m. W celu wzmocnienia przykręcić kolejny element 0,91 m w odległości 1,22 m od każdego końca, a następnie umieścić deskę 2,4 m z tyłu podpór 0,91 m i przykręcić ją dla stabilizacji. 
	UWAGA: Osiem desek o wymiarach 3,175 cm x 15,24 cm x 2,4 m pozostawia się w niezmienionej formie, bez docinania, aby służyły jako blaty dla każdego poziomu stelaża.</li>
	<li>Powtórzyć krok 1.2 dla kolejnego poziomu stelaża, używając elementów o długości 0,76 m.</li>
	<li>Powtórzyć krok 1.2 dla kolejnych poziomów, używając elementów 0,61 m, aż do szóstego poziomu o wysokości 0,15 m. 
	UWAGA: Dla poziomów 3–6 nie jest wymagana wspierająca deska 2,4 m. Końcowy stelaż posiada sześć poziomów z trzema wspornikami pionowymi dla każdego z nich: jednym na każdym końcu i jednym w środku.</li>
	<li>Ustawić poziomy w kolejności malejącej wysokości, tak aby wystający brzeg był skierowany do tyłu i dotykał poziomu powyżej, pozostawiając przerwę między poziomami.</li>
	<li>Przykręcić deskę 0,91 cm do każdej z dolnych krawędzi poziomów wzdłuż podłoża i przymocować poziomy wkrętami.</li>
	<li>Przykręcić poziomo deskę o długości 0,46 m dla stabilizacji trzech najwyższych poziomów po każdej stronie konstrukcji, 0,61 m nad ziemią.</li>
	<li>Przykręcić trzy kątowniki do końców frontowych oraz do środka najwyższego poziomu.</li>
	<li>Przykręcić drewniany element o wymiarach 2,54 cm x 5,08 cm x 20,32 cm poprzecznie do kątowników, 2,54 cm od podstawy poziomu. 
	UWAGA: Wykonać jedną konstrukcję o wymiarach 0,91 m x 0,91 m x 2,4 m. Końcowy produkt bazowy przedstawiono na Rysunku 1. Wymiary mogą ulegać zmianie w zależności od potrzeb eksperymentalnych. Opisana konstrukcja została zaprojektowana dla doniczek o średnicy 15,24 cm. Odległości między poziomami zostały dostosowane do doniczek i materiału roślinnego użytego w tym eksperymencie, aby zapewnić stały przepływ allelokemikaliów i roztworu z jednej doniczki do drugiej w dół stelaża pod wpływem grawitacji.</li>
</ol>
<img alt="Konstrukcja drewnianej ławki, wykonana do użytku zewnętrznego w warunkach szklarniowych." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60764/60764fig1a.jpg" data-altupdatedat="1788282455000" data-alt="Rycina 1"> 
Rysunek 1: Widok z przodu drewnianej podstawy. Drewniana podstawa służy jako stojak dla próbek roślin. Materiały do systemu należy złożyć i dodać w zależności od liczby próbek wymaganych do eksperymentu. W niniejszym badaniu dwa stojaki posłużyły jako podstawa dla 31 próbek. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60764/60764fig1alarge.jpg" target="_blank">Proszę kliknąć tutaj, aby wyświetlić większą wersję tej figury.</a>
2. Montaż systemu
<ol>
	<li>Zdejmij zakrętkę z butelki po napoju o pojemności 1 L i pomaluj butelkę czarną farbą w sprayu. 
	UWAGA: Butelki po napojach będą służyć jako zbiorniki u góry systemu dla jednej kolumny. Farba stanowi blokadę dla światła, ograniczając lub zapobiegając wzrostowi glonów.</li>
	<li>W dnie każdej butelki wywierć mały otwór, na tyle duży, aby można było osadzić plastikową rurkę PVC o średnicy wewnętrznej (ID) 0,35 cm, średnicy zewnętrznej (OD) 0,64 cm i długości 5,08 cm.</li>
	<li>Po włożeniu rurki nałóż wokół krawędzi otworu warstwę wodoodpornego uszczelniacza silikonowego, aby zapobiec wyciekom. Pozostaw do całkowitego wyschnięcia.</li>
	<li>Powtórz kroki 2.2 i 2.3 dla każdego z plastikowych naczyń używanych do trzymania doniczek. 
	UWAGA: Do jednej kolumny potrzebne będą cztery naczynia.</li>
	<li>Zdejmij pokrywkę i pomaluj czarną farbą w sprayu zewnętrzną stronę plastikowych kanistrów o pojemności 2,27 L. Kanistry te będą służyć jako zbiorniki kolektory u podstawy każdej kolumny.</li>
	<li>Wywierć mały otwór w górnej tylnej części kanistra. 
	UWAGA: Materiały wymienione w krokach 2.1–2.6 pozwalają na stworzenie jednej kolumny. Liczba kolumn zależy od liczby próbek wymaganych dla planowanego eksperymentu. Do jednej próbki potrzebne są dwie kolumny. Wszystkie wymiary mogą ulec zmianie w zależności od potrzeb eksperymentalnych.</li>
	<li>Po przygotowaniu i wysuszeniu materiałów ustaw butelkę na najwyższym blacie tak, aby rurka PVC zwisała nad krawędzią w stronę schodów.</li>
	<li>Bezpośrednio pod butelką, na następnym blacie, ustaw jedno plastikowe naczynie z rurką zwisającą nad krawędzią blatu.</li>
	<li>Powtórz krok 2.8 dla dwóch kolejnych blatów.</li>
	<li>Ustaw kanister na najniższym blacie otworem skierowanym do tyłu.</li>
	<li>Połącz kanister z naczyniem znajdującym się powyżej, przeciągając rurkę z naczynia przez otwór w tylnej części kanistra.</li>
	<li>Nałóż wodoodporny uszczelniacz wokół krawędzi kanistra w miejscu, przez które przechodzi rurka, aby zapobiec wyciekom.</li>
	<li>Umieść zanurzalną pompę elektryczną 21 W o wydajności 1 0 L/h w dolnym kanistrze.</li>
	<li>Do dyszy pompy elektrycznej podłącz rurkę PVC o długości 1,07 m, średnicy wewnętrznej (ID) 1,27 cm i średnicy zewnętrznej (OD) 1,59 cm.</li>
	<li>Przeciągnij rurkę przez szczelinę między blatami i nad tyłem butelki znajdującej się na szczycie systemu.</li>
	<li>Podłącz pompę do cyfrowego programatora czasowego i ustaw go zgodnie z potrzebami. 
	UWAGA: Programator został ustawiony na pracę przez 1 min co 3 h przez cały czas trwania eksperymentu. Wybrany czas pozwolił na cyrkulację maksymalnej ilości cieczy w zbiorniku kolektora oraz zapewnił około 10 min przepływu przy każdym uruchomieniu pompy, zapobiegając jednocześnie zalewaniu i przelewaniu.</li>
</ol>
3. Sadzenie
<ol>
	<li>Sterylizujemy wszystkie potrzebne nasiona ryżu, płucząc je w 70% etanolu przez 30 s, mocząc w 5% wybielaczu przez 20 min i płucząc 6 razy wodą destylowaną.</li>
	<li>Wykiełkowujemy wysterylizowane nasiona ryżu w szalkach Petriego wyłożonych papierem filtracyjnym i wypełnionych 5 mL wody destylowanej, w komorze wzrostowej ustawionej na 25 °C.</li>
	<li>Po wykiełkowaniu nasion wyściełamy dno każdej doniczki dwoma dużymi filtrami do kawy, umieszczając je w doniczkach w ich naturalnym, wklęsłym kształcie.</li>
	<li>Wypełniamy każdą doniczkę do górnej krawędzi filtra (około 75% objętości doniczki) autoklawowanym, przemywanym i przesianym, specjalistycznym piaskiem kwarcowym. Nawilżamy piasek wodą destylowaną, wlewając ją od góry lub umieszczając doniczki w tackach do sadzenia wypełnionych niewielką ilością wody destylowanej, aby doniczki mogły wchłonąć wodę i pozostać wilgotne. Przesadzamy sześć wykiełkowanych siewek roślin dawców do piasku, rozmieszczając je równomiernie.</li>
	<li>Przykrywamy siewki piaskiem.</li>
	<li>Pozostawiamy siewki do ukorzenienia się na 3 tygodnie. 
	UWAGA: Piasek bardzo szybko wysycha. Dlatego umieszczanie doniczek w tackach jest efektywną techniką podlewania. Częsta wymiana wody pomoże zapobiec powstawaniu pleśni.</li>
	<li>Wykiełkowujemy siewki roślin biorców (E. crus-galli) w szalkach Petriట్లో 3 tygodnie po zasadzeniu roślin dawców, wyściełając dno szalki papierem filtracyjnym i dodając 5 mL wody destylowanej. Umieszczamy szalki w komorze wzrostowej w temperaturze 25 °C na 3–5 dni.</li>
	<li>Przygotowujemy doniczki zgodnie z opisem w krokach 3.1–3.2.</li>
	<li>Po wykiełkowaniu siewek przesadzamy trzy siewki do przygotowanych doniczek i przykrywamy piaskiem. 
	UWAGA: Eksperyment rozpoczyna się jeden dzień po traktowaniu (DAT), czyli w dniu, w którym siewki roślin biorców wykiełkują, zostaną przesadzone i umieszczone w systemie.</li>
</ol>
4. Umieszczanie próbek
<ol>
	<li>Umieść cztery doniczki jednego akcesji roślin dawców w czterech naczyniach w kolumnie 1, po jednej doniczce na rząd. Kolumna 1 składa się wyłącznie z roślin dawców.</li>
	<li>Umieść dwie doniczki tej samej akcesji roślin dawców w naczyniach w kolumnie 2, w pierwszym i trzecim rzędzie kolumny.</li>
	<li>Umieść dwie doniczki roślin odbiorców w naczyniach w kolumnie 2, w drugim i czwartym rzędzie kolumny.</li>
	<li>W przypadku każdej powtórki upewnij się, że dodano tylko jeden rząd roślin odbiorców. Dwie kolumny – pierwsza składająca się wyłącznie z roślin dawców, a druga z naprzemiennie rozmieszczonych dawców i odbiorców – stanowią jedną próbę (Rysunek 2).</li>
</ol>
<img alt="Koncepcja przepływu odcieku w rzędach traktowanych i kontrolnych; schemat przedstawia układ eksperymentu wymywania." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60764/60764fig2a.jpg" data-altupdatedat="1788282455000" data-alt="Rysunek 2"> 
Rycina 2: Mapa rozmieszczenia. Schemat przedstawiający rozmieszczenie roślin dawców (WR/R) i odbiorców (BYG) na odpowiednich pozycjach w systemie schodkowym. Jedna jednostka eksperymentalna obejmuje dwie kolumny systemu schodkowego z rozmieszczonymi roślinami. Pojedyncza kolumna roślin odbiorców służyła jako kontrola dla jednej powtórki (skrajna prawa), pojedyncza kolumna roślin dawców jako kontrola dla każdego ekotypu (środek), a kolumna eksperymentalna składała się z naprzemiennie ułożonych roślin dawców i odbiorców (skrajna lewa). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60764/60764fig2alarge.jpg" target="_blank">Prosimy kliknąć tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.</a>
<ol start="5">
	<li>Powtórz kroki 4.1–4.4 dla każdego wariantu traktowania lub linii rośliny donora (Rycina 3). 
	UWAGA: Każda replikacja wymaga jednej kolumny próbek roślin biorców, która będzie służyć jako kontrola dla danej replikacji. Traktowania powtórzono 3-krotnie w zrandomizowanym pełnym układzie blokowym.</li>
</ol>
<img alt="Schemat układu hydroponicznego z siewkami w doniczkach; obserwacja eksperymentu dotyczącego wzrostu roślin." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60764/60764fig3a.jpg" data-altupdatedat="1788282455000" data-alt="Rysunek 3"> 
Rysunek 3: Końcowa struktura schodkowa. System schodkowy z zamontowanymi roślinami. System zawierał cztery rzędy próbek roślin oraz zbiornik w dolnej części, umożliwiający cyrkulację roztworu z najniższego poziomu do górnej butelki, skąd spływał on grawitacyjnie przez kolejne doniczki. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60764/60764fig3alarge.jpg" target="_blank">Proszę kliknąć tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>
5. Obsługa
<ol>
	<li>W dniu DAT 1 napełnić zbiornik kolektorski u podstawy każdej kolumny około 1 50 mL połówkowym roztworem Hoaglanda17 w wodzie destylowanej.</li>
	<li>Ustawić programatory czasowe zgodnie z oczekiwaniami w trybie automatycznego wyłączania (auto off).</li>
	<li>Przykryć zbiorniki kolektorskie czarną folią plastikową, aby ograniczyć ekspozycję na światło oraz parowanie.</li>
	<li>Dopełniać zbiorniki co 2 dni 50 mL roztworem Hoaglanda, aby zapewnić ciągły przepływ w systemie.</li>
	<li>Utrzymywać temperaturę w szklarni na poziomie 28 °C w dzień i 24 °C w nocy przy cyklu 16/8 h oraz wilgotności 53%.</li>
</ol>
6. Gromadzenie danych
<ol>
	<li>Zmierz i zapisz wysokość każdej rośliny w systemie schodkowym w DAT 1 oraz raz w tygodniu aż do DAT 21, przykładając linijkę do podstawy każdej rośliny i odczytując wysokość najwyższego liścia.</li>
	<li>Zmierz i zapisz poziom chlorofilu w każdej roślinie w DAT 7 i 14, używając miernika zawartości chlorofilu.</li>
	<li>W ostatnim dniu eksperymentu (tj. DAT 21) opisz papierową torebkę dla każdej doniczki.</li>
	<li>Otnij próbki roślin u podstawy i umieść je w osobnych torebkach.</li>
	<li>Umieść wszystkie próbki w suszarce ustawionej na 60 °C na 48 h16.</li>
	<li>Wyjmij wysuszone próbki, wysyp zawartość każdej z nich na wagę i zapisz masę w gramach.</li>
</ol>
7. Analiza danych
<ol>
	<li>Oblicz potencjał allelopatyczny roślin donora na podstawie procentowego zahamowania wzrostu rośliny biorcy, korzystając z poniższego równania: 
	redukcja wysokości (%) = [wysokość kontrolna (cm) – wysokość rośliny traktowanej (cm)] × 10</li>
	<li>Oblicz redukcję wysokości rośliny donora w celu sprawdzenia ewentualnego odwrotnego efektu, jaki roślina biorcy może wywierać na rośliny docelowe.</li>
	<li>Analizuj akcesje jako efekt stały, podczas gdy powtórzenia i serie analiz traktuj jako efekty losowe18.</li>
	<li>Przeanalizuj dane za pomocą ogólnego modelu liniowego, rozdzielając wartości średnie przy użyciu testu najmniejszej istotnej różnicy Fishera (LSD) na poziomie istotności p ≤ 0,05 w oprogramowaniu statystycznym (np. JMP 14).</li>
	<li>Wizualizuj korelację między oryginalnymi zmiennymi, stosując analizę głównych składowych po przesłaniu danych.
	<ol>
		<li>W pasku narzędzi wybierz zakładkę Analyze, a następnie opcję Fit Y by X. W kolumnach zaznacz odpowiedź (tzn. procentową redukcję wysokości), a następnie kliknij Y, response, aby określić czynnik obserwowany dla Y (tzn. procentowa redukcja wysokości). W przypadku czynnika X zaznacz akcesję i kliknij X, factor, a następnie wybierz OK.</li>
		<li>W pasku Oneway Analysis wybierz czerwoną strzałkę w dół i zaznacz Means/ANOVA. Ponownie wybierz strzałkę w dół w pasku Oneway Analysis, zaznacz compare means, a następnie wybierz each pair, student's T.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Weston, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((History+and+Current+Trends+in+the+Use+of+Allelopathy+for+Weed+Management%5BTitle%5D)+AND+%22HortTechnology%22%5BJournal%5D)">History and Current Trends in the Use of Allelopathy for Weed Management.</a> HortTechnology. 15 (3), 529-534 (2005).</li>
<li>Pratley, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Allelopathy+in+annual+grasses%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Protection+Quarterly%22%5BJournal%5D)">Allelopathy in annual grasses.</a> Plant Protection Quarterly. 11, 213-214 (1996).</li>
<li>Bertin, C., Yang, X., Weston, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+root+exudates+and+allelochemicals+in+the+rhizosphere%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+and+Soil%22%5BJournal%5D)">The role of root exudates and allelochemicals in the rhizosphere.</a> Plant and Soil. 256 (1), 67-83 (2003).</li>
<li>Stevenson, G. R. Pesticide Use and World Food Production: Risks and Benefits. Environmental Fate and Effects of Pesticides. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aStevenson%2C+GR+%22American+Chemical+Society%22">American Chemical Society</a>. , Chapter 15 261-270 (2003).</li>
<li>Chopra, N., Tewari, G., Tewari, L. M., Upreti, B., Pandey, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Allelopathic+Effect+of+Echinochloa+colona+L.+and+Cyperus+iria+L.+Weed+Extracts+on+the+Seed+Germination+and+Seedling+Growth+of+Rice+and+Soybean%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Agriculture%22%5BJournal%5D)">Allelopathic Effect of Echinochloa colona L. and Cyperus iria L. Weed Extracts on the Seed Germination and Seedling Growth of Rice and Soybean.</a> Advances in Agriculture. 2017, 1-5 (2017).</li>
<li>Jabran, K., Mahajan, G., Sardana, V., Chauhan, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Allelopathy+for+weed+control+in+agricultural+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Crop+Protection%22%5BJournal%5D)">Allelopathy for weed control in agricultural systems.</a> Crop Protection. 72, 57-65 (2015).</li>
<li>Worthington, M., Reberg-Horton, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Breeding+Cereal+Crops+for+Enhanced+Weed+Suppression%3A+Optimizing+Allelopathy+and+Competitive+Ability%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chemical+Ecology%22%5BJournal%5D)">Breeding Cereal Crops for Enhanced Weed Suppression: Optimizing Allelopathy and Competitive Ability.</a> Journal of Chemical Ecology. 39, 213-231 (2013).</li>
<li>Sudianto, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corrigendum+to+%22Clearfield+%28R%29+rice%3A+Its+development%2C+success%2C+and+key+challenges+on+a+global+perspective.%22%5BTitle%5D)+AND+%22Crop+Protection%22%5BJournal%5D)">Corrigendum to "Clearfield (R) rice: Its development, success, and key challenges on a global perspective.".</a> Crop Protection. 55, 142-144 (2014).</li>
<li>Gressel, J., Valverde, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+strategy+to+provide+long-term+control+of+weedy+rice+while+mitigating+herbicide+resistance+transgene+flow%2C+and+its+potential+use+for+other+crops+with+related+weeds%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Management+Science%22%5BJournal%5D)">A strategy to provide long-term control of weedy rice while mitigating herbicide resistance transgene flow, and its potential use for other crops with related weeds.</a> Pest Management Science. 65, 723-731 (2009).</li>
<li>Muthayya, S., Sugimoto, J. D., Montgomery, S., Maberly, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+overview+of+global+rice+production%2C+supply%2C+trade%2C+and+consumption%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+the+New+York+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">An overview of global rice production, supply, trade, and consumption.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 1324, 7-14 (2014).</li>
<li>Chung, I. M., Kim, K. H., Ahn, J. K., Lee, S. B., Kim, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Allelopathy+Comparison+of+Allelopathic+Potential+of+Rice+Leaves%2C+Straw%2C+and+Hull+Extracts+on+Barnyardgrass%5BTitle%5D)+AND+%22Agronomy+Journal%22%5BJournal%5D)">Allelopathy Comparison of Allelopathic Potential of Rice Leaves, Straw, and Hull Extracts on Barnyardgrass.</a> Agronomy Journal. 95 (4), 1063-1070 (2003).</li>
<li>Olofsdotter, M., Jensen, L. B., Courtois, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+crop+competitive+ability+using+allelopathy+%C3%90+an+example+from+rice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Plant+Breeding%22%5BJournal%5D)">Improving crop competitive ability using allelopathy Ð an example from rice.</a> Journal of Plant Breeding. 121, 1-9 (2002).</li>
<li>Olofsdotter, M., Navarez, D., Rebulanan, M., Streibig, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Weed-suppressing+rice+cultivars-does+allelopathy+play+a+role%5BTitle%5D)+AND+%22Weed+Research%22%5BJournal%5D)">Weed-suppressing rice cultivars-does allelopathy play a role.</a> Weed Research. 39 (6), 441-454 (1999).</li>
<li>Jensen, L. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Locating+Genes+Controlling+Allelopathic+Effects+against+Barnyardgrass+in+Upland+Rice%5BTitle%5D)+AND+%22Agronomy+Journal%22%5BJournal%5D)">Locating Genes Controlling Allelopathic Effects against Barnyardgrass in Upland Rice.</a> Agronomy Journal. 93 (1), 21-26 (2001).</li>
<li>Kuijken, R. C., Eeuwijk, F. A. V., Marcelis, L. F., Bouwmeester, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Root+phenotyping%3A+from+component+trait+in+the+lab+to+breeding%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Botany%22%5BJournal%5D)">Root phenotyping: from component trait in the lab to breeding.</a> Journal of Experimental Botany. 66 (18), 5389(2015).</li>
<li>Lickfeldt, D. W., Voigt, T. B., Branham, B. E., Fermanian, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+allelopathy+in+cool+season+turfgrass+species%5BTitle%5D)+AND+%22International+Turfgrass+Society%22%5BJournal%5D)">Evaluation of allelopathy in cool season turfgrass species.</a> International Turfgrass Society. 9, 1013-1018 (2001).</li>
<li>Liu, D. L., Lovett, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biologically+active+secondary+metabolites+of+barley%3A+Developing+techniques+and+assessing+allelopathy+in+barley%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chemical+Ecology%22%5BJournal%5D)">Biologically active secondary metabolites of barley: Developing techniques and assessing allelopathy in barley.</a> Journal of Chemical Ecology. 19, 2217-2230 (1993).</li>
<li>Shrestha, S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Evaluation+of+Herbicide+Tolerance+and+Interference+Potential+among+Weedy+rice+germplasm%22">Evaluation of Herbicide Tolerance and Interference Potential among Weedy rice germplasm</a>. , (2018).</li>
<li>Kim, K. U., Shin, D. H. Rice allelopathy research in Korea. Allelopathy in Rice. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKim%2C+KU+%22IRRI%22">IRRI</a>. Olofsdotter, , Chapter 4 (1998).</li>
<li>Quasem, J. R., Hill, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+difficulties+with+allelopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Weed+Research%22%5BJournal%5D)">On difficulties with allelopathy.</a> Weed Research. 29, 345-347 (1989).</li>
<li>Singh, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+mulching%2C+intercropping+with+Sesbania+and+herbicide+use+for+weed+management+in+dry-seeded+rice+%28Oryza+sativa+L.%29%5BTitle%5D)+AND+%22Crop+Protection%22%5BJournal%5D)">Evaluation of mulching, intercropping with Sesbania and herbicide use for weed management in dry-seeded rice (Oryza sativa L.).</a> Crop Protection. 26, 518-524 (2007).</li>
<li>Kong, C. H., Li, H. B., Hu, F., Xu, X. H., Wang, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Allelochemicals+released+by+rice+roots+and+residues+in+soil%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+and+Soil%22%5BJournal%5D)">Allelochemicals released by rice roots and residues in soil.</a> Plant and Soil. 288 (1-2), 47-56 (2006).</li>
<li>Ervin, G. N., Wetzel, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Allelochemical+autotoxicity+in+the+emergent+wetland+macrophyte+Juncus+effusus+%28Juncaceae%29%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Botany%22%5BJournal%5D)">Allelochemical autotoxicity in the emergent wetland macrophyte Juncus effusus (Juncaceae).</a> American Journal of Botany. 87 (6), 853-860 (2000).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Wykorzystanie allelopatii może potencjalnie służyć jako biologiczna kontrola chwastów, które są trudne do zwalczania 1,7,13. Allelopatia wykazała ogromny potencjał jako możliwe rozwiązanie kryzysu związanego z chwastami w ryżu i służy jako alternatywa lub uzupełnienie chemikaliów i ręcznych praktyk zwalczania chwastów 5,13,19. Identyfik...

Allelopatia jest naturalnym i złożonym zjawiskiem, które było przedmiotem zainteresowania wielu naukowców zajmujących się roślinami w ciągu ostatnich kilku dekad. Mechanizmy związane z allelopatią w uprawach były przedmiotem wielu badań od lat 30. XX wieku, kiedy Molisch zaobserwował, że roślina ma bezpośredni lub pośredni wpływ na sąsiednią roślinę poprzez produkcję i wydzielanie związków chemicznych do środowiska1. Allelopatia to wytwarzanie metabolitów wtórnych, które działają hamująco na wzrost i kiełkowanie niektórych gatunków roślin. Uwolnione alopatyczne związki chemiczne pomagają zapewnić roślinom-dawcom przewagę konkurencyjną poprzez dodawanie fitotoksyn do otaczającego je środowiska2. Na aktywność allelopatyczną składa się wiele czynników. Jest selektywny pod względem skuteczności i różni się w zależności od odmiany, warunków środowiskowych, fazy wzrostu, stresu, środowiska i dostępności składników odżywczych3.
W ostatnich latach, allelopatia została podkreślona w badaniach jako możliwe uzupełnienie stałego i narastającego kryzysu zwalczania chwastów. Wraz z rosnącą populacją na świecie wzrosło zapotrzebowanie na zrównoważoną produkcję żywności i włókien4. Zwalczanie chwastów jest jednym z największych zagrożeń dla produkcji, z jakimi borykają się agronomowie5,6. Tradycyjne metody zwalczania chwastów koncentrują się na praktykach mechanicznych, chemicznych i kulturowych. Ciągłe stosowanie herbicydów, choć skuteczne, użyteczne i wydajne, przyczyniło się do ewolucji odpornych populacji chwastów w alarmująco szybkim tempie7. Inżynieria genetyczna i praktyki hodowlane zostały skutecznie wykorzystane do zapewnienia uprawom przewagi konkurencyjnej nad chwastami, projektując je tak, aby wytrzymywały zastosowania chemiczne, których ich sąsiedzi nie są w stanie przetrwać7,8. Chociaż technologie te są skuteczne, nie zawsze są zrównoważone i czasami stwarzają problemy związane z krzyżowaniem się9. Jeśli cel zwiększenia produkcji żywności ma zostać osiągnięty, należy wprowadzić uzupełniające praktyki zwalczania chwastów10. Allelopatia jest bardzo obiecująca jako nowe narzędzie obronne dla upraw, aby poprawić ich jakość i przetrwać swoich konkurentów1,7.
Allelochemikalia są często produktami wtórnymi, a ponieważ na ich produkcję duży wpływ mają czynniki środowiskowe, trudno jest zidentyfikować konkretne związki związane z tłumieniem roślin3. Czynniki produkcji obejmują genetykę i wspólne działanie metabolitów wtórnych, które mogą działać synergistycznie11,12. Oddzielenie aktywności allelopatycznej od konkurencji, która naturalnie istnieje w interakcjach między roślinami uprawnymi i chwastami, jest wyzwaniem, dlatego podczas badań przesiewowych w kierunku allelopatii musi istnieć standardowy zestaw wyników, które kwalifikują test jako ważny i powtarzalny. Poniżej znajduje się zestaw kryteriów, które kwalifikują wyniki allelopatii zgodnie z opisem Olofsdotter et al.12 1) Jedna roślina musi wykazywać tłumienie innej rośliny we wzorze; 2) Substancje chemiczne, które są uwalniane do środowiska w ilościach bioaktywnych, muszą być produkowane przez roślinę dawcę; 3) Wyprodukowane chemikalia muszą nadawać się do transportu do zakładu odbiorczego; 4) W instalacji odbiorczej musi być obecny pewien mechanizm absorpcji; 6) Zaobserwowany wzorzec hamowania nie może mieć innego wyłącznego wyjaśnienia (np. konkurencji o zasoby)12.
W celu pokonania bariery między brakiem wiedzy na temat mechanizmów wspierających allelopatię a rozwojem odmiany, cechy fenotypowe związane z odmianami allelopatycznym mogą być identyfikowane i wybierane do dalszych badań i zastosowań. Niektóre rośliny, o których wiadomo, że mają cechy allelopatyczne, to żyto, sorgo, ryż, słonecznik, rzepak i pszenica13. Podczas wczesnych obserwacji allelopatii w uprawach, ze względu na wyraźne granice wzrostu chwastów w doświadczeniach polowych, zaproponowano, że w grę wchodziły substancje chemiczne, a nie rywalizacja o zasoby14. Jednak większość badań była eksperymentami terenowymi, które uniemożliwiły wyeliminowanie konkurencji jako czynnika14. Wysiłki zmierzające do eliminacji konkurencji ustąpiły miejsca eksperymentom laboratoryjnym i szklarniowym w celu udowodnienia i ilościowego określenia aktywności allelopatycznej w ryżu i innych uprawach. Metody polowe i szklarniowe do badania roślin pod kątem allelopatii pokazują, że tendencje allelopatyczne są obecne w obu warunkach wzrostu11,15. Niektórzy krytycy uważają, że badania laboratoryjne mogą mieć ograniczoną wartość ze względu na brak warunków naturalnych, które mogą mieć wpływ na wyniki15.
Proponowana metoda badania potencjału allelopatycznego u roślin zapewnia odpowiednie zasoby i przestrzeń oraz eliminuje konkurencję o zasoby za pomocą struktury schodkowej11,17. Metoda została zaadaptowana i zmodyfikowana w stosunku do poprzednich eksperymentów badających allelopatię w trawach darniowych i jęczmieniu17,18. Badania te wykazały, że podobny system był w stanie uzyskać dokładne wyniki dotyczące potencjału allelopatycznego rośliny docelowej, jednocześnie usuwając wszelkie wątpliwości, że obserwacje można przypisać naturalnej konkurencji. Metoda schodkowa tworzy układ krążenia, w którym pożywka ze zbiornika może przepływać przez każdą roślinę do tacki inkubacyjnej w kilku krokach. Następnie pompa elektryczna zawraca roztwór wraz z wyprodukowanymi allelochemikaliami18. Metoda taka jak ta jest efektywna zarówno pod względem czasu, przestrzeni, jak i zasobów. Zapewnia również roślinom podobne warunki polowe i eliminuje wszelką konkurencję o zasoby. Metodami i narzędziami stosowanymi do badań przesiewowych można łatwo manipulować, aby dopasować je do pożądanych celów badania, warunków i konkretnych gatunków. Celem pracy jest potwierdzenie zachwaszczonej allelopatii ryżowej poprzez pomiary zahamowania wysokości na wiechlinie ogrodowej z zastosowaniem metody schodkowej.

<table><tbody><tr><td>1,25 cala na 6 cali na 8 stóp standardowa deska drewniana do trudnych warunków pogodowych</td><td>Lowe's, Mooresville, NC</td><td>489248</td><td>Nie dotyczy</td></tr> 2 <tr><td>cale na 4 cale na 8 stóp biały drewniany kołek</td><td>Lowe's, Mooresville, NC</td><td>6005</td><td>Przycięte na odpowiednie rozmiary</td></tr><tr><td>Szelki narożne 63 mm (2,5 cala)</td><td>Lowe's, Mooresville, NC</td><td>809449</td><td>Nie dotyczy</td></tr><tr><td>Asporto 16 uncji okrągłe czarne plastikowe pudełko na wynos - z przezroczystą pokrywką, nadające się do kuchenki mikrofalowej &ndash; 6,25 cala na 6,25 cala na 1,75 cala - 100 sztuk pudełka</td><td>Restaurantware.com, Chicago, IL</td><td>RWP0191B</td><td></td></tr><tr><td>plastikowa rurka spożywcza ATP z winylu i flexu, przezroczysta, 0,125 cala id na 0,25 cala OD, 100 stóp</td><td>Amazon, Seattle WA</td><td>B00E6BCV0G</td><td>N / A</td></tr><tr><td>Miernik zawartości chlorofilu Ccm-300</td><td>Opti-Sciences, Inc. Hudson, NH</td><td>ccm / 300</td><td>N/A</td></tr><tr><td>Wspólna deska sosnowa Lowe's 1 cal na 2 cale na 8 stóp</td><td>, Mooresville, NC</td><td>1408</td><td>Nie dotyczy Wykonawcy</td></tr><tr><td>wybór wykonawcy 24-pak 42-galonowy zewnętrzny plastikowy worek na śmieci</td><td>Lowe's, Mooresville, NC</td><td>224272</td><td>Przycięte do przykrycia zbiorniki zbiorcze</td></tr><tr><td>EURO POTS</td><td>Szklarnia Megastore, Danville, IL</td><td>CN-EU</td><td>15 cm krótki 6 o średnicy 4,25 wysokości 1,37 kwarty objętość</td></tr><tr><td>Szalka Petriego marki Fisher z przezroczystą pokrywką</td><td>Fisher Scientific, Waltham, MA</td><td>FB0857513</td><td>Nie dotyczy</td></tr><tr><td>Aexit Ac 220 V-240 V sprzęt elektryczny Wtyczka amerykańska 21 W 1,000 l / h uniwersalna pompa głębinowa</td><td>Amazon, Seattle WA</td><td>B07MBMYQNT</td><td>Rozmiar dyszy powinien pasować do rur i można go odbudować</td></tr><tr><td>Woods 50015 WD outdoor 7-dniowy wytrzymały cyfrowy wyłącznik</td> czasowy <td>Walmart, Bentonville, AR</td><td>565179767</td><td>20 ustawień</td></tr><tr><td>Silikon GE 2 + 10,1 uncji silikonowej uszczelki</td> <td>migdałowejLowe's, Mooresville, NC</td><td>48394</td><td>Uszczelniacz do krawędzi dowolnych dołączonych rurek</td></tr><tr><td>Woda destylowana o doskonałej wartości</td><td>Walmart, Bentonville, AR</td><td>565209428</td><td>Nie dotyczy</td></tr><tr><td>Filtry do kawy w doskonałej cenie White Basket 200 sztuk</td><td>Walmart, Bentonville, AR</td><td>562723371</td><td>Rozmiar może się różnić</td></tr><tr><td>Grip-rite primgaurd plus #9-3 w pollimerdex</td><td>Lowe's, Mooresville, NC</td><td>323974</td><td>Nie dotyczy</td></tr><tr><td>Hoagland" s nr 2 podstawowa mieszanina soli</td><td>Caisson Laboratories, INC. Smithfield, UT</td><td>HOP01/50LT</td><td>&frac12; współczynnik wytrzymałości</td></tr><tr><td>JMP (14)</td><td>SAS Institute Inc. Uniwersytet Stanowy Karoliny Północnej, Karolina Północna Nr</td><td></td><td>A</td></tr>. <tr><td>Źródło projektu płaska farba w sprayu</td><td>Lowe's, Mooresville, Karolina Północna</td><td>282254</td><td>Nie dotyczy</td></tr><tr><td>Źródło projektu Narzędzie 1,88 cala na 165 stóp szara taśma klejąca</td><td>Lowe's, Mooresville, NC</td><td>488070</td><td>Nie dotyczy</td></tr><tr><td>Rubbermaid 2 qt kwadratowy kanister do przechowywania żywności przezroczysty</td><td>Walmart, Bentonville, AR</td><td>555115144</td><td>Pojemnik na odpady</td></tr><tr><td>Szczelna, niewzmocniona przezroczysta rurka winylowa z PVC, klasa spożywcza .5 cala id na .625 in OD, 100 ft</td><td>Amazon, Seattle WA</td><td>B07D9CLGV3</td><td>Łączy się z pompą</td></tr><tr><td>Short Mountain Silica 50 lb Play sand</td><td>Lowe's, Mooresville, NC</td><td>10392</td><td>Piasek należy oczyścić</td></tr><tr><td>Butelki sodowe 1 l Steve'a Spanglera - 6 sztuk - do eksperymentu naukowego Użyj</td><td>Amazon, Seattle WA</td><td>UPC 192407667341</td><td>Górny stopień pokrywy do wyrzucania zbiornika</td></tr></tbody></table>

powtarzalny test schodkowy w celu uzyskania dostępu do allelopatycznego potencjału chwastów ryżu (oryza sativa ssp.)

Repeatable Stair-step Assay to Access the Allelopathic Potential of Weedy Rice (Oryza sativa ssp.)

Konkurencja chwastów znacząco przyczynia się do strat plonów w systemach upraw na całym świecie. Ewolucja odporności wielu gatunków chwastów na herbicydy stosowane w sposób ciągły spowodowała potrzebę opracowania dodatkowych metod zarządzania. Allelopatia to proces fizjologiczny, który posiadają niektóre gatunki roślin, który zapewnia roślinie przewagę nad sąsiadami. Allelopatyczne odmiany roślin uprawnych byłyby wyposażone w zdolność do hamowania wzrostu otaczających konkurentów, zmniejszając w ten sposób potencjalne straty plonów spowodowane ingerencją chwastów. Niniejsza praca koncentruje się na budowie i działaniu testu schodkowego stosowanego do badania przesiewowego potencjału allelopatycznego gatunku dawcy (Oryza sativa) przeciwko gatunkowi chwastów odbiorczych (Echinochloa crus-galli) w warunkach szklarniowych. Struktura opisana w tym artykule służy jako podstawa dla próbek roślin i zawiera system nawadniania w określonym czasie do akumulacji i dystrybucji allelochemikaliów. Allelochemikalia wytwarzane przez korzenie roślin mogą spływać w dół przez szereg czterech doniczek oddzielnie do zbiornika zbiorczego i są zawracane z powrotem do górnej rośliny za pomocą pomp elektrycznych. Ta metoda badań przesiewowych umożliwia allelochemikalia z rośliny dawcy dotarcie do roślin biorczych bez konkurencji o zasoby, umożliwiając w ten sposób ilościowy pomiar potencjału allelopatycznego wybranej rośliny dawcy. Potencjał allelopatyczny jest mierzalny poprzez redukcję wysokości roślin odbiorczych. Wstępne dane przesiewowe dotyczące skuteczności tej metody wykazały zmniejszenie wysokości u gatunku odbiorcy, wiechliny (E. crus-galli), a tym samym obecność pozostałości allelopatycznych z rośliny dawcy, ryżu zachwaszczonego (Oryza sativa).

Przeprowadzono dwa wstępne przesiewy z wykorzystaniem tej metody na dziewięciu accessionach ryżu dzikiego (B2, S3, B83, S97, S94, B81, B8, B34, B14) oraz pięciu liniach ryżu uprawnego (PI338046, Rex, Rondo, PI3127, CL163). Accessiony ryżu dzikiego i linie ryżu wybrano na podstawie ich wyników w poprzednich przesiewach allelopatycznych przeprowadzonych przez Shresthę (2018)18. Nasiona ryżu dzikiego zebrano z całego stanu Arkansas. Wybrane linie ryżu to powszechnie uprawiane w USA linie, z których n...

Allelopatia okazała się obiecująca jako użyteczna uzupełniająca strategia zwalczania chwastów w systemach upraw. Aby określić potencjał allelopatyczny pożądanego okazu rośliny, stosuje się metodę przesiewową schodkową.

Powtarzalny test schodkowy w celu uzyskania dostępu do allelopatycznego potencjału chwastów ryżu (Oryza sativa ssp.)

Weed competition contributes significantly to yield losses in cropping systems worldwide. The evolution of resistance in many weed species to continuously ...

System schodkowy pozwala nam określić, czy roślina jest allelopatyczna, czy nie, eliminując konkurencję między roślinami. Dodatkowo może również zidentyfikować allelochemikalia, które są zaangażowane lub związane z allelopatią. Ta metoda jest wydajna w czasie, przestrzeni i zasobach.Dodatkowo można dostosować ten test lub metodę do innych badań, które wymagają innego gatunku dawcy lub akceptora. Jednym z wyzwań w badaniach allelopatycznych jest wyizolowanie allelopatii. Jeśli rośliny nie konkurują o zasoby, a chwasty są nadal tłumione, musi to być spowodowane produkcją chemiczną.Analiza roztworu pozwala na identyfikację rzeczywistego związku lub związków, które są wytwarzane przez rośliny. Związki te mogą być stosowane jako potencjalne bioherbicydy. W szklarni walka z odrostem i pleśnią jest wyzwaniem.Używając wody destylowanej, nieprzezroczystych materiałów i autoklawowania piasku, można stłumić wyrostki w zbiornikach i rurach. Pociąć drewno na odpowiednie rozmiary i ilości, zgodnie z zapisem w protokole tekstowym. Aby uzyskać najwyższy poziom, postaw jedną deskę o długości 2,44 metra na dwóch kawałkach o długości 0,91 metra na każdym końcu krawędzi i wykręć pionowo dwie w każdym z 0,91 kawałka.Przykręć jeszcze jeden kawałek o długości 0,91 metra 1,22 metra od każdego końca, aby uzyskać podparcie. Następnie umieść deskę o długości 2.44 metra z tyłu stojaków o długości 0.91 metra i przykręć ją w celu podparcia. Powtórz te kroki dla następnego poziomu ławki z elementami o długości 0,76 metra, a następnie ponownie dla następnej ławki z elementami o długości 0,61 metra do szóstej ławki na wysokości 0,15 metra.W przypadku ławek od trzeciej do szóstej nie jest potrzebna nośna deska o długości 2,44 metra. Ławki liniowe w kolejności malejącej wysokości, z wystającą krawędzią skierowaną do tyłu, stykającą się z ławką nad nią, co pozwala na zachowanie odstępu między poziomami. Ułóż deskę o grubości 0,91 centymetra na każdej z dolnych krawędzi ławek wzdłuż ziemi i przykręć ławki na miejscu.Przykręć trzy narożne wsporniki do przednich końców i środka najwyższej ławki. Przykręć jeden drewniany element o wymiarach 2,54 cm na 5,08 cm na 20,32 cm w poprzek szelek w odległości 2,54 centymetra od podstawy ławki. Ostatnia trybuna składa się z sześciu ławek z trzema pionowymi podporami każda, po jednej na każdym końcu i jedną pośrodku.Na dnie każdej butelki po napojach wywierć mały otwór wystarczająco duży, aby osadzić plastikową rurkę PVC o średnicy wewnętrznej 0,35 centymetra, średnicy zewnętrznej 0,64 centymetra i długości 5,08 centymetra. Po włożeniu rurki rozsmaruj warstwę silikonowego wodoodpornego uszczelniacza wokół krawędzi otworu, aby zapobiec wyciekom. Pozostaw do całkowitego wyschnięcia.W ten sam sposób przygotuj plastikowe naczynia używane do trzymania garnków z rurkami. Do jednej kolumny potrzebne będą cztery naczynia. Wywierć mały otwór w górnej tylnej części kanistra.Po przygotowaniu i wysuszeniu zapasów umieść butelkę po napoju na najwyższej ławce, tak aby rurka PCV zwisała z krawędzi skierowanej w stronę schodów. Tuż pod butelką po napoju gazowanym na sąsiedniej ławce umieść jedno plastikowe naczynie z rurką zwisającą z krawędzi ławki. Powtórz ten krok dla następnych dwóch ławek.Umieść kanister na dolnej ławce z otworem skierowanym do tyłu. Połącz kanister z naczyniem znajdującym się nad nim, przeciągając rurkę z naczynia przez otwór w tylnej części kanistra. Rozsmaruj wodoodporne uszczelniacze wokół krawędzi kanistra, przez którą przechodzi rurka, aby zapobiec wyciekom.Umieść zatapialną pompę elektryczną o mocy 21 W i pojemności 1 000 litrów na godzinę w dolnym kanistrze. Podłącz rurkę PVC o długości 1.07 metra, średnicy wewnętrznej 1.27 cm i średnicy zewnętrznej 1.59 cm do dyszy pompy elektrycznej. Przeciągnij rurkę przez szczelinę między ławkami i nad tylną częścią butelki z napojem gazowanym w górnej części systemu.Podłącz pompę do zegara cyfrowego i ustaw timer zgodnie z potrzebami. Wykonaj sadzenie zgodnie z opisem w protokole tekstowym. Umieść cztery doniczki z jednym akcesorium roślin dawców w czterech szalkach w kolumnie pierwszej, po jednej doniczce w rzędzie.Kolumna pierwsza składa się wyłącznie z roślin dawców. Umieść dwie doniczki z tym samym akcesorium roślin dawcy w szalkach kolumny drugiej w pierwszym i trzecim rzędzie kolumny. Umieść dwie doniczki z roślinami odbiorczymi w naczyniach kolumny drugiej w drugim i czwartym rzędzie kolumny.Dwie kolumny, z których pierwsza składa się tylko z roślin dawczych, a druga z naprzemiennych dawców i biorców, wykonują jeden zabieg. Powtórzyć te kroki dla każdego zabiegu akcesji rośliny dawcy. Każda replikacja wymaga, aby jedna kolumna próbek instalacji odbiorczej służyła jako kontrola dla jednej replikacji.Zabiegi powtórzono trzykrotnie w randomizowanym, kompletnym projekcie blokowym. Następnego dnia po zabiegu należy napełnić zbiornik zbiorczy na dnie każdej kolumny roztworem Hoaglanda o połowie mocy w wodzie destylowanej o pojemności około 1 500 mililitrów. Ustaw timery tak, aby działały zgodnie z potrzebami w ustawieniu automatycznego wyłączania.Przykryj zbiorniki zbiorcze czarnym plastikiem, aby ograniczyć ekspozycję na światło i parowanie. Napełniaj zbiorniki co dwa dni 500 mililitrami roztworu Hoaglanda, aby utrzymać stały przepływ systemu. Utrzymuj temperaturę szklarni na poziomie odpowiednio 28 stopni Celsjusza w ciągu dnia i 24 stopni Celsjusza w nocy, z podziałem od 16 do ośmiu godzin i wilgotnością na poziomie 53%Zmierz i zapisz wysokość każdej rośliny w systemie schodów następnego dnia po zabiegu, umieszczając linijkę u podstawy każdej rośliny i obserwując najwyższy drzewostan liściowy.Kontynuuj zbieranie i analizę danych zgodnie z opisem w protokole tekstowym. Przeprowadzono dwa wstępne badania przesiewowe tą metodą na dziewięciu zachwaszczonych odmianach ryżu i pięciu liniach uprawy ryżu. Pomiary wysokości zarejestrowane w dniu po zabiegu 14 wykorzystano do obliczenia procentowego zmniejszenia wysokości trawy w obórze.Pięć zachwaszczonych akcesji ryżu wykazało bardziej znaczące zmniejszenie wysokości trawy podwórzowej niż rondo, allelopatyczny standard ryżu. Zachwaszczone akcesje ryżu B8, S97, B14, S33 zmniejszyły wysokość trawy podwórzowej o 25 do 30%Akcesja ryżu zachwaszczonego B81 wykazała najbardziej znaczące zmniejszenie wysokości trawy podwórkowej o 74%, co stanowiło prawie trzykrotność więcej niż standardowe allelopatyczne rondo ryżowe. Procent redukcji biomasy na podstawie danych zebranych dzień po zabiegu 21 wykazał zakres procentowego zmniejszenia biomasy trawy podwórzowej od 0 do 86%Wśród zachwaszczonych akcesji ryżu, które najbardziej zmniejszyły wysokość trawy podwórkowej, S33 najbardziej zmniejszył biomasę trawy podwórzowej na poziomie około 84% w porównaniu z rondem na poziomie 60%Ważne jest, aby w całym systemie nie było nieszczelności, ponieważ zakłóci to przepływ i spowoduje różnice w wynikach.Uprawa roślin w systemie hydroponicznym może być alternatywną i skuteczną metodą identyfikacji związków wytwarzanych przez roślinę i badanych pod kątem aktywności allelopatycznej. Technika ta utorowała drogę do zrozumienia, jakie geny kontrolują produkcję allelopatyczną w tych dobrze działających biotypach ryżu chwastowatego. Podczas korzystania z elektronarzędzi bardzo ważne jest używanie rękawic, okularów ochronnych i odpowiedniego obuwia.Dodatkowo upewnij się, że obszar jest dobrze wentylowany podczas malowania natryskowego zbiorników.

repeatable-stair-step-assay-to-access-allelopathic-potential-weedy

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Ten film demonstruje technikę wykrywania infekcji chorobotwórczego grzyba Magnaporthe grisea w liściach roślin ryżu. Zawiesinę konidiów grzybowych rozpyla się na odcinki liści ryżu, a postęp choroby ocenia się poprzez ocenę powstawania zmian martwiczych.

Technika inokulacji w sprayu w celu wywołania infekcji grzybiczej w liściach roślin ryżu

Ten film pokazuje zapoczątkowanie infekcji liści ryżu poprzez zranienie szczepionki grzybnią Magnaporthe grisea. Rurka zarodkowa pochodząca z zarodników grzybów przenika do warstwy naskórka, powodując infekcję tkanek i zmiany na liściach. Metoda ta wspomaga badania przesiewowe patotypów i poprawia zrozumienie odporności roślin na hodowlę molekularną.

Ustalenie infekcji liści ryżu poprzez inokulację grzybów poprzez zranienie

Ten film demonstruje test do wykrywania w czasie rzeczywistym produkcji reaktywnych form tlenu (ROS) w tkankach ryżu po wywołaniu wzorca molekularnego związanego z patogenem (PAMP). Przecięte segmenty pochwy i krążki liściowe są narażone na działanie peptydu pochodzącego z wici bakteryjnej, działającego jako PAMP. Po rozpoznaniu peptydu za pomocą receptorów rozpoznawania wzorców (PRR) na komórkach roślinnych następuje szybka i przejściowa produkcja ROS, która jest wykrywana za pomocą testu...

Test do wykrywania produkcji reaktywnych form tlenu w tkankach ryżowych po wywołaniu immunologicznym

Przedstawiono solidne i elastyczne podejście do potwierdzania odporności na herbicydy w populacjach chwastów. Protokół ten pozwala na określenie poziomów odporności na herbicydy i zastosowanie ich do szerokiej gamy gatunków chwastów i herbicydów z niewielkimi dostosowaniami.

Protokoły solidnych testów odporności na herbicydy u różnych gatunków chwastów

Ten manuskrypt opisuje, jak tempo metabolizmu herbicydów może być skutecznie określone ilościowo za pomocą wyciętych liści z chwastów dwuliściennych, zmniejszając w ten sposób zmienność i usuwając wszelkie możliwe zakłócające efekty pobierania lub translokacji herbicydów, zwykle obserwowane w testach na całej roślinie.

Pomiar tempa metabolizmu herbicydów w chwastach dwuskrzydłowych za pomocą testu wyciętych liści

Tutaj prezentujemy protokół do testowania zjadliwości roślin z patogenem roślinnym Magnaporthe grisea. Raport ten przyczyni się do zakrojonych na szeroką skalę badań przesiewowych patotypów izolatów grzybów i posłuży jako doskonały punkt wyjścia do zrozumienia mechanizmów oporności roślin podczas hodowli molekularnej.

Test infekcji roślin: inokulacja w sprayu i za pośrednictwem ran patogenem roślinnym Magnaporthe Grisea

Ten artykuł opisuje dwie metody ilościowego określania reakcji obronnych u Arabidopsis thaliana po ekspozycji na elicytory immunologiczne: przejściowy wybuch oksydacyjny i zahamowanie wzrostu siewki.

Testy wybuchu oksydacyjnego wywołanego wzorcem i zahamowania wzrostu siewek u Arabidopsis thaliana

Ten protokół pozwala na przygotowanie przekrojów nasion zbóż (np. ryżu) do analizy morfologii bielma i granulek skrobi za pomocą skaningowej mikroskopii elektronowej.

Przekroje poprzeczne dojrzałego ryżu (Oryza sativa L.) Ziarna do obrazowania w skaningowej mikroskopii elektronowej z wykorzystaniem końcówek do pipet jako wspomagania immobilizacji

Tutaj opisujemy metodę wykrywania w czasie rzeczywistym produkcji apoplastycznych reaktywnych form tlenu (ROS) w tkankach ryżu w odpowiedzi immunologicznej wywołanej przez patogen wywołany wzorcem molekularnym. Ta metoda jest prosta, ustandaryzowana i generuje wysoce powtarzalne wyniki w kontrolowanych warunkach.

Wykrywanie w czasie rzeczywistym produkcji reaktywnych form tlenu w odpowiedzi immunologicznej ryżu za pomocą testu chemiluminescencyjnego

Protokół opisuje hodowlę odpornych odmian ryżu skrobiowego za pomocą technologii edycji genomu w precyzyjny, wydajny i technicznie prosty sposób.

Hodowla według projektu funkcjonalnego ryżu z technologiami edycji genomu

Ten artykuł opisuje protokół generowania inokulum grzybów mikoryzowych (AM) w celu zbadania zwiększonej przez AM tolerancji na stres solny w ryżu.

Produkcja inokulum grzybów mikoryzowych arbuskularnych (AM) i ocena fenotypowa symbiozy ryżu i AM w warunkach zasolenia

Poznaj metodę schodkowego testowania allelopatii w dzikich odmianach ryżu Oryza sativa w celu identyfikacji związków chemicznych hamujących chwasty. Technika ta umożliwia selekcję roślin o potencjale bioherbicydowym bez zakłóceń konkurencji o zasoby.

Powtarzalny test schodkowy w celu uzyskania dostępu do allelopatycznego potencjału chwastów ryżu (Oryza sativa ssp.)

Przeglądaj więcej filmów