Test przesunięcia żelu acylo-pegylowego do ilościowego oznaczania palmitoylacji białek błony mózgowej

Ta metoda biochemiczna pozwala na określenie stanu palmitoilacji dowolnego białka błonowego ulegającego ekspresji w mózgu, dla którego dostępne jest odpowiednie przeciwciało. Główną zaletą tej techniki jest to, że nie wymaga ona oczyszczania powinowactwa, a zamiast tego wykorzystuje zmiany w ruchliwości żelu do określenia liczby modyfikacji białka będącego przedmiotem zainteresowania. Po wypreparowaniu mózgu należy go natychmiast homogenizować w 10 mililitrach buforu homogenizacyjnego w szklanym homogenizatorze na lodzie.

Używając około 12 pociągnięć, odwiruj lizaty przez 15 minut w temperaturze 1400 razy G i czterech stopniach Celsjusza. Przenieść supernatant do nowej probówki na lodzie. Zawiesić osad w 10 mililitrach buforu homogenizacyjnego.