Kwantyfikacja krążącego DNA specyficznego dla świni we krwi w modelu ksenotransplantacji

3.4K wyświetleń

Cytowano 2 razy

07:34 min.

22 września 2020

10.3791/61579-v

22 września 2020

3.4K wyświetleń

Yangyang Deng^*¹^,² , Ming Zhou^*¹^,³ , Ying Lu¹ , Jiao Chen¹ , Zuhui Pu⁴ , Dongjing Yu¹^,⁵ , Yifan Dai⁶ , Yongqiang Zhan⁷ , Lisha Mou¹

¹Shenzhen Xenotransplantation Medical Engineering Research and Development Center, Institute of Translational Medicine, Shenzhen University Health Science Center, Shenzhen University School of Medicine, First Affiliated Hospital of Shenzhen University, Shenzhen Second People's Hospital, ²Xianning Hospital of Traditional Chinese Medicine, ³Liver-biotechnology (Shenzhen) Co., Ltd., ⁴Department of Radiology, Shenzhen University Health Science Center, Shenzhen University School of Medicine, First Affiliated Hospital of Shenzhen University, Shenzhen Second People's Hospital, ⁵Department of Life Sciences, University of Toronto, ⁶Jiangsu Key Laboratory of Xenotransplantation, Nanjing Medical University, ⁷Department of Hepatopancreatobiliary Surgery, Shenzhen University Health Science Center, Shenzhen University School of Medicine, First Affiliated Hospital of Shenzhen University, Shenzhen Second People's Hospital

^* These authors contributed equally

W tym protokole zaprojektowano startery specyficzne dla świń, skonstruowano fragmenty DNA specyficzne dla świń zawierające plazmidy i ustalono standardowe krzywe do oznaczania ilościowego. Korzystając ze starterów specyficznych dla gatunku, cpsDNA określono ilościowo za pomocą qPCR w modelach przeszczepu komórek od świni do myszy oraz w modelach przeszczepu plam tętniczych od świni do małpy.

Przeglądaj więcej filmów

Wolnokrążące DNA

ilościowe PCR (qPCR)

przetwarzanie próbek krwi

elektroforeza w żelu agarozowym

przygotowanie krzywej wzorcowej

startery specyficzne dla gatunku

monitorowanie odrzucenia immunologicznego

zestaw do izolacji DNA

Chapters in this video

0:04

Introduction

0:52

Isolating Genomic DNA

2:20

Verification of Primer Specificity

3:42

Standard Curve of cpsDNA

4:45

Quantitation of Circulating Pig-specific DNA

5:55

Results: PCR Validation of Porcine Specific Primers

6:51

Conclusion

Prawa autorskie © 2026 MyJoVE Corporation. Wszelkie prawa zastrzeżone.