Name: Dozymetria do napromieniania komórek przy użyciu aparatury rentgenowskiej o ortonapięciu (40-300 kV) (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-02-20T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 51 s
Description: Poznaj protokół dozymetrii do napromieniania komórek przy użyciu aparatury rentgenowskiej o ortonapięciu. Ta metoda umożliwia precyzyjne określenie dawki otrzymywanej przez komórki w badaniach radiobiologicznych.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

1. Platforma do naświetlania i wyznaczanie parametrów naświetlania
<ol>
	<li>Należy użyć platformy do napromieniania dostarczającej promieni rentgenowskich o niskiej lub średniej energii. W celu zapewnienia rzetelności i powtarzalności eksperymentu radiobiologicznego należy określić następujące parametry: napięcie wysokiego napięcia, natężenie, filtrację (wbudowaną i dodatkową), warstwę połowiczną (HVL), energię efektywną, detektor użyty do pomiarów dosymetrycznych, odległość od źródła do próbki (SSD), pole napromieniania (kształt, rozmiar, geometria), wielkość dosymetryczną, metodę dosymetrii, moc dawki, pojemnik na komórki oraz ilość pożywki hodowlanej. Wszystkie parametry zastosowane w niniejszym protokole zostały podane w Tabeli 1.</li>
</ol>
2. Indeks jakości wiązki: oznaczenie warstwy połowicznej
UWAGA: HVL jest definiowane jako grubość attenuatora (zazwyczaj miedzi lub aluminium) niezbędna do zmniejszenia natężenia wiązki dwukrotnie w stosunku do wartości pierwotnej.
<ol>
	<li>Przygotuj sprzęt (podpórkę, kolimator, przysłonę, komorę jonizacyjną) wewnątrz obudowy do napromieniania, postępując zgodnie z instrukcjami zamieszczonymi na Rysunku 1. Na tym etapie nie stosuje się materiału tłumiącego.</li>
	<li>Upewnij się, że wszystkie odległości podane na Rysunku 1 są prawidłowe. Zmierz je za pomocą miary taśmowej.</li>
	<li>Umieść komorę jonizacyjną w pozycji poziomej. W tej pracy zastosowano cylindryczną komorę jonizacyjną model 31002 (odpowiednik 31010) skalibrowaną w kermie powietrza.</li>
	<li>Przeprowadź wstępne napromienianie komory jonizacyjnej przez 5 min i zmierz tło (krok ten można wykonać bez kolimatora).</li>
	<li>Wykonaj 10 pomiarów po 1 min każdy w trybie zbierania ładunku, odpowiadających wartości Mraw (wyrażonej w kulombach).</li>
	<li>Zmierz temperaturę i ciśnienie za pomocą odpowiedniego skalibrowanego sprzętu umieszczonego wewnątrz obudowy do napromieniania (jeśli nie jest to możliwe, umieść go w pobliżu stanowiska doświadczalnego). Skoryguj odczyt Mraw na elektrometrze za pomocą współczynnika korekcyjnego temperatury i ciśnienia zgodnie z poniższym wzorem: 
	<img alt="Wzór termodynamiczny: schemat równania \(K_{T,p}\) do analizy zależności temperatury od ciśnienia." src="/files/ftp_upload/61645/61645equ01.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 1"> 
	gdzie: T (°C) i P (hPa) to odpowiednio aktualna temperatura i ciśnienie. Tref i Pref to temperatura i ciśnienie referencyjne z momentu kalibracji jonizacji w laboratorium wzorcowym. Ciśnienie i temperaturę należy mierzyć przyrządami skalibrowanymi. Wartość uzyskana w trybie ładunku stanowi średnią wartość referencyjną M (w kulombach). 
	UWAGA: Krok ten nie jest ściśle wymagany do pomiaru HVL, ale jest zalecany.</li>
	<li>Umieść tłumik o określonej grubości nad przysłoną. Zestaw do pomiaru HVL składa się z folii o różnych grubościach (0,02, 0,05, 0,1, 0,2, 0,5, 1, 2, 5 i 10 mm miedzi) o wymiarach umożliwiających pokrycie całej wiązki (tutaj 80 x 80 mm).</li>
	<li>Wykonaj pomiar trwający 1 min (Mraw skorygowane o KT,P zgodnie z opisem powyżej).
	<ol>
		<li>Jeśli moc dawki zmniejszyła się dwukrotnie w stosunku do wartości początkowej, wyznaczono wartość HVL. Wykonaj 5 pomiarów po 1 min, aby oszacować średnią moc dawki.</li>
		<li>Jeśli moc dawki nie zmniejszyła się dwukrotnie w stosunku do wartości początkowej, zwiększ lub zmniejsz grubość tłumika i wykonaj kolejny pomiar. Dostosuj grubość tłumika w razie potrzeby.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Po znalezieniu grubości tłumika, która zmniejsza intensywność wiązki dwukrotnie, wykonaj 5 pomiarów po 1 min, aby potwierdzić HVL. 
	UWAGA: W większości przypadków dokładnej grubości tłumika nie można dobrać z dostępnych folii. W takim przypadku należy zastosować metodę bisekcji i interpolować wartość HVL.</li>
</ol>
3. Ocena pola naświetlania (bez szacowania dawki)
<ol>
	<li>Umieść folię EBT3 na podłożu używanym do napromieniowania.</li>
	<li>Naświetl folię tak, aby uzyskać wyraźnie zaznaczone pole napromieniowania (co najmniej 2 Gy).</li>
	<li>Zeskanuj folię EBT3 za pomocą dedykowanego skanera.</li>
	<li>Wykreśl profil dawki w programie Image J, korzystając z opcji Analyze, a następnie Plot Profile (Rysunek 2).</li>
	<li>Wyznacz rozmiar pola napromieniowania wykorzystywanego do irradiacji (obszar jednorodny, z wyłączeniem obszarów półcienia, patrz Rysunek 2).</li>
	<li>Zaznacz na podłożu używanym do napromieniowania punkty, które zapewnią prawidłowe ustawienie pojemnika z komórkami. 
	UWAGA: Na tym etapie wyznacza się rozmiar pola napromieniowania, a nie szacuje dawki. Pełna procedura odczytu i analizy folii została przedstawiona w sekcji 5. Należy również zachować marginesy, aby uniknąć błędów wynikających z pozycjonowania pojemnika z komórkami.</li>
</ol>
4. Pomiar mocy dawki za pomocą komory jonizacyjnej
<ol>
	<li>Należy wziąć pojemnik z komórkami i uszkodzić niewielki fragment na boku lub na dnie (w zależności od konkretnego pojemnika i użytej komory jonizacyjnej), aby móc umieścić komorę jonizacyjną wewnątrz (Rysunek 3, górna sekcja) lub poniżej (Rysunek 3, dolna sekcja) pojemnika. Przykłady przedstawiono na Rysunku 3 z użyciem różnych komór jonizacyjnych (cylindrycznych lub płaskich równoległych) oraz pojemników z komórkami. W tym przypadku użyto kolby T25 (Rysunek 3, czerwona ramka). 
	UWAGA: lutownica lub podgrzany skalpel stanowią dobrą alternatywę do wykonywania otworów w wyrobach z tworzywa sztucznego</li>
	<li>Umieść pojemnik wewnątrz obudowy na wsporniku używanym do naświetlania (tutaj płyta węglowa).</li>
	<li>Włóż komorę jonizacyjną do pojemnika (Rysunek 3, czerwona ramka) w odpowiedniej pozycji i podłącz ją do elektrometru.</li>
	<li>Upewnij się, że wszystkie parametry naświetlania wymienione w sekcji 1 są poprawne (wysokie napięcie, natężenie, dodatkowa filtracja, odległość źródła od próbki itp.).</li>
	<li>Przeprowadź wstępne naświetlanie komory jonizacyjnej przez 5 min i wykonaj zerowanie elektrometru.</li>
	<li>Wykonaj 10 pomiarów trwających 1 min, aby wyznaczyć średnią moc dawki w powietrzu (air kerma) (Gy.min-1). Wyznaczenie mocy dawki Kair oblicz w następujący sposób: 
	<img alt="Równanie dla równowagi statycznej, zawierające K_air = M × N_Kair × K_Q." src="/files/ftp_upload/61645/61645equ02.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 2"> 
	gdzie M jest odczytem dozymetru skorygowanym o temperaturę, ciśnienie, efekt polaryzacji, rekombinację jonów oraz kalibrację elektrometru. NKair oraz Kq to czynniki kalibracyjne i korekcyjne dla jakości promieniowania, których wartości są specyficzne dla każdej komory jonizacyjnej.</li>
</ol>
5. Pomiar tłumienia i rozpraszania ośrodków hodowli komórkowych
UWAGA: Przez cały czas trwania procedury należy obchodzić się z filmami EBT3 w rękawiczkach.
<ol>
	<li>Przygotowanie eksperymentu
	<ol>
		<li>Wyciąć małe kawałki folii EBT3 co najmniej 24 h przed napromienianiem.</li>
		<li>Określić rozmiar folii w zależności od naczynia hodowlanego używanego w eksperymentach radiobiologicznych (np. 4 x 4 cm dla kolby T25). 
		Wyciąć dwa zestawy folii radiochromowych: jeden zestaw do krzywych kalibracyjnych, składający się z trzech kawałków folii radiochromowej EBT3 na dawkę lub punkt czasowy (łącznie dziewięć punktów w niniejszej pracy) oraz jeden zestaw do ilościowego oznaczenia tłumienia przez pożywki do hodowli komórkowych, również po trzy kawałki na punkt.</li>
		<li>Ponumerować wszystkie folie w celu ich identyfikacji (tutaj w prawym górnym rogu) i zeskanować je w tej samej pozycji na skanerze.</li>
		<li>Przechowywać folie w ciemności.</li>
		<li>Przygotować naczynie hodowlane używane do pomiarów folii EBT3 i, jeśli to konieczne, wyciąć fragment, aby umieścić wewnątrz folię (przykład z kolbą T25 przedstawiono na Rysunku 4).</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Szacowanie mocy dawki
	<ol>
		<li>Zmierzyć moc dawki dla konfiguracji opisanej w poprzedniej sekcji.</li>
		<li>Zachować tę konfigurację podczas napromieniania folii radiochromowych EBT3 i używać tego samego typu naczynia hodowlanego.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Konstrukcja krzywej kalibracyjnej
	<ol>
		<li>Pobrać wstępnie docięte folie EBT3 do krzywej kalibracyjnej.</li>
		<li>Nie napromieniać trzech kawałków (0 Gy).</li>
		<li>Umieścić pierwszą folię w naczyniu hodowlanym w tej samej konfiguracji, co w przypadku napromieniania komórek.</li>
		<li>Napromieniać ją, aby uzyskać pierwsze punkty dawki.</li>
		<li>Powtórzyć tę operację, aby uzyskać trzy kawałki folii EBT3 napromieniowane tą samą dawką.</li>
		<li>Wykonać to dla każdego punktu dawki (w niniejszej pracy dziewięć punktów dawki (0, 0.25, 0.5, 0.75, 1, 1.5, 2, 2.5 i 3 Gy), jak zilustrowano na Rysunku 5).</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Ocena tłumienia przez pożywki do hodowli komórkowych oraz rozpraszania.
	<ol>
		<li>Wybrać taki sam czas napromieniania dla wszystkich irradiacji (np. 60 s).</li>
		<li>Napromieniać trzy kawałki folii EBT3 w naczyniu bez wody.</li>
		<li>Napromieniać trzy kawałki folii EBT3 w naczyniu z wodą w następujący sposób:
		<ol>
			<li>Umieścić folię wewnątrz naczynia.</li>
			<li>Wypełnić naczynie dokładną ilością wody reprezentującą pożywkę do hodowli komórkowej (tutaj 5 mL). Użyć małych kawałków taśmy, jeśli folie nie pozostają prawidłowo zanurzone.</li>
			<li>Umieścić naczynie hodowlane wewnątrz obudowy i upewnić się, że folia jest prawidłowo zanurzona.</li>
			<li>Po zakończeniu napromieniowania wyjąć folie EBT3, osuszyć je papierem chłonnym i przechowywać w ciemności.</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
6. Odczyt radiochromicznych folii EBT3
<ol>
	<li>Odczyt filmów EBT3 należy przeprowadzić co najmniej 24 h po naświetlaniu.</li>
	<li>Skanowanie filmów należy wykonać na dedykowanym skanerze.</li>
	<li>Parametry skanera należy ustawić następująco: 48-bitowy format TIFF RGB (red-green-blue), 150 dpi w trybie transmisji, bez korekcji obrazu.</li>
	<li>Rozgrzewanie skanera należy przeprowadzić w następujący sposób:
	<ol>
		<li>Umieścić nienaświetlony film w skanerze.</li>
		<li>Uruchomić podgląd skanowania.</li>
		<li>Uruchomić stoper i odczekać 30 s.</li>
		<li>Uruchomić skanowanie.</li>
		<li>Po zakończeniu skanowania uruchomić stoper i odczekać 90 s.</li>
		<li>Jednocześnie zarejestrować skan, otworzyć obraz w programie ImageJ, wyznaczyć kwadratowy obszar ROI (zawsze o tej samej wielkości i w tej samej pozycji) i zmierzyć średni poziom czerwieni pikseli w tym obszarze.</li>
		<li>Po upływie 90 s powtórzyć procedurę od kroku 2 (nie dotykając filmu wewnątrz skanera).</li>
		<li>Powtórzyć tę czynność co najmniej 30 razy, aby rozgrzać i ustabilizować skaner (do momentu braku zmian w średnim poziomie czerwieni pikseli w obszarze wybranym na nienaświetlonych filmach). Jeśli skaner, tj. średnia wartość czerwieni pikseli, nie ulegnie stabilizacji, należy kontynuować procedurę.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Skanowanie filmów EBT3:
	<ol>
		<li>Umieścić pierwszy film w centrum platformy skanera. Wyznaczyć obszar, aby zawsze umieszczać film w tym samym miejscu i w tej samej orientacji.</li>
		<li>Uruchomić podgląd skanowania.</li>
		<li>Uruchomić stoper i odczekać 30 s.</li>
		<li>Uruchomić skanowanie.</li>
		<li>Po zakończeniu skanowania uruchomić stoper i odczekać 90 s. W ciągu tych 90 s należy wymienić film EBT3. 
		UWAGA: Analiza radiochromowych filmów EBT3 została przeprowadzona przy użyciu własnego programu napisanego w języku C++. Do analizy filmów EBT3 można zastosować różne metody, takie jak metoda kanału czerwonego lub metoda trzech kanałów14,15. W tym przypadku zastosowano metodę kanału czerwonego bez odejmowania tła, a obrazy zostały przekształcone w gęstości optyczne, a następnie w dawkę przy użyciu naszego programu. Ponieważ metoda ta jest już dobrze zdefiniowana, nasz program C++ nie został tutaj dołączony. Ponadto do analizy filmów EBT3 można wykorzystać dedykowane oprogramowanie16.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
7. Wyznaczenie mocy dawki na poziomie monowarstwy komórek
<ol>
	<li>Przelicz średnią moc dawki uzyskaną za pomocą komory jonizacyjnej, skorygowaną o tłumienie i rozpraszanie przez pożywkę hodowlany komórek (K), na kerma w wodzie, wykorzystując stosunek średniego masowego współczynnika absorpcji energii dla wody do powietrza wyznaczony dla widma strumienia fotonów (μen/ρ). 
	<img alt="Schemat równania równowagi statycznej, Kwater=K×(μen/ρ)air dla badania środowiskowego." src="/files/ftp_upload/61645/61645equ03.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 3"> 
	Do obliczenia widma energii fotonów w powietrzu bez fantoma wykorzystano dedykowane oprogramowanie17, a do obliczenia średniego masowego współczynnika absorpcji energii posłużono się tabelą NIST18.</li>
</ol>

<ol><li>Zoetelief, J., Broerse, J. J., Davies, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+X-ray+dosimetry+EULEP.+Report+No.+Report+EUR+9507%5BTitle%5D)+AND+%22Commission+of+the+European+Communities%22%5BJournal%5D)">Protocol for X-ray dosimetry EULEP. Report No. Report EUR 9507.</a> Commission of the European Communities. , (1985).</li>
<li>Zoetelief, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+X-ray+dosimetry+in+radiobiology%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Radiation+Biology%22%5BJournal%5D)">Protocol for X-ray dosimetry in radiobiology.</a> International Journal of Radiation Biology. 77 (7), 817-835 (2001).</li>
<li>Zoetelief, J., Jansen, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calculated+energy+response+correction+factors+for+LiF+thermoluminescent+dosemeters+employed+in+the+seventh+EULEP+dosimetry+intercomparison%5BTitle%5D)+AND+%22Physics+in+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Calculated energy response correction factors for LiF thermoluminescent dosemeters employed in the seventh EULEP dosimetry intercomparison.</a> Physics in Medicine and Biology. 42 (8), 1491-1504 (1997).</li>
<li>Coleman, C. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Education+and+training+for+radiation+scientists%3A+radiation+research+program+and+American+Society+of+Therapeutic+Radiology+and+Oncology+Workshop%2C+Bethesda%2C+Maryland%5BTitle%5D)+AND+%22Radiation+Research%22%5BJournal%5D)">Education and training for radiation scientists: radiation research program and American Society of Therapeutic Radiology and Oncology Workshop, Bethesda, Maryland.</a> Radiation Research. 160 (6), 729-737 (2003).</li>
<li>Desrosiers, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+dosimetry+standardization+in+radiobiology%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Research+of+National+Institute+of+Standards+and+Technology%22%5BJournal%5D)">The importance of dosimetry standardization in radiobiology.</a> Journal of Research of National Institute of Standards and Technology. 118, 403-418 (2013).</li>
<li>DIN. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Klinische+Dosimetrie%3A+Teil+4%5BTitle%5D)+AND+%22Anwendung+von+R%C3%B6ntgenstrahlen+mit+R%C3%B6hrenspannungen+von+10+bis+100+kV+in+der+Strahlentherapie+und+in+der+Weichteildianostik%22%5BJournal%5D)">Klinische Dosimetrie: Teil 4.</a> Anwendung von Röntgenstrahlen mit Röhrenspannungen von 10 bis 100 kV in der Strahlentherapie und in der Weichteildianostik. , Report No. DIN 6809 (1988).</li>
<li>DIN. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Klinische+Dosimetrie%3A+Teil+5%5BTitle%5D)+AND+%22Anwendung+von+R%C3%B6ntgenstrahlen+mit+R%C3%B6hrenspannungen+von+100+bis+400+kV+in+der+Strahlentherapie%22%5BJournal%5D)">Klinische Dosimetrie: Teil 5.</a> Anwendung von Röntgenstrahlen mit Röhrenspannungen von 100 bis 400 kV in der Strahlentherapie. , Report No. DIN 6809-5 (1996).</li>
<li>NCS. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dosimetry+of+low+and+medium+energy+x-rays%3A+A+code+of+practice+for+use+in+radiotherapy+and+radiobiology%5BTitle%5D)+AND+%22NCS%22%5BJournal%5D)">Dosimetry of low and medium energy x-rays: A code of practice for use in radiotherapy and radiobiology.</a> NCS. , Report No. 10 (1997).</li>
<li>International Atomic Energy Agency. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Absorbed+Dose+Determination+in+External+Beam+Radiotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22International+Atomic+Energy+Agency%22%5BJournal%5D)">Absorbed Dose Determination in External Beam Radiotherapy.</a> International Atomic Energy Agency. , (2000).</li>
<li>Ma, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AAPM+protocol+for+40-300+kV+x-ray+beam+dosimetry+in+radiotherapy+and+radiobiology%5BTitle%5D)+AND+%22Medical+Physics%22%5BJournal%5D)">AAPM protocol for 40-300 kV x-ray beam dosimetry in radiotherapy and radiobiology.</a> Medical Physics. 28 (6), 868-893 (2001).</li>
<li>Peixoto, J. G., Andreo, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+absorbed+dose+to+water+in+reference+conditions+for+radiotherapy+kilovoltage+x-rays+between+10+and+300+kV%3A+a+comparison+of+the+data+in+the+IAEA%2C+IPEMB%2C+DIN+and+NCS+dosimetry+protocols%5BTitle%5D)+AND+%22Physics+in+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Determination of absorbed dose to water in reference conditions for radiotherapy kilovoltage x-rays between 10 and 300 kV: a comparison of the data in the IAEA, IPEMB, DIN and NCS dosimetry protocols.</a> Physics in Medicine and Biology. 45 (3), 563-575 (2000).</li>
<li>Pedersen, K. H., Kunugi, K. A., Hammer, C. G., Culberson, W. S., DeWerd, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiation+biology+irradiator+dose+verification+survey%5BTitle%5D)+AND+%22Radiation+Research%22%5BJournal%5D)">Radiation biology irradiator dose verification survey.</a> Radiation Research. 185 (2), 163-168 (2016).</li>
<li>Draeger, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+dose+of+reality%3A+how+20+years+of+incomplete+physics+and+dosimetry+reporting+in+radiobiology+studies+may+have+contributed+to+the+reproducibility+crisis%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Radiation+Oncology%2C+Biology%2C+Physics%22%5BJournal%5D)">A dose of reality: how 20 years of incomplete physics and dosimetry reporting in radiobiology studies may have contributed to the reproducibility crisis.</a> International Journal of Radiation Oncology, Biology, Physics. 106 (2), 243-252 (2020).</li>
<li>Devic, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Precise+radiochromic+film+dosimetry+using+a+flat-bed+document+scanner%5BTitle%5D)+AND+%22Medical+Physics%22%5BJournal%5D)">Precise radiochromic film dosimetry using a flat-bed document scanner.</a> Medical Physics. 32 (7), 2245-2253 (2005).</li>
<li>Micke, A., Lewis, D. F., Yu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multichannel+film+dosimetry+with+nonuniformity+correction%5BTitle%5D)+AND+%22Medical+Physics%22%5BJournal%5D)">Multichannel film dosimetry with nonuniformity correction.</a> Medical Physics. 38 (5), 2523-2534 (2011).</li>
<li>Filmqa Software. GAF Chromic.com. , Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.gafchromic.com/filmqa-software/filmqapro/index.asp">http://www.gafchromic.com/filmqa-software/filmqapro/index.asp</a> (2020).</li>
<li>Poludniowski, G., Landry, G., DeBlois, F., Evans, P. M., Verhaegen, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SpekCalc%3A+a+program+to+calculate+photon+spectra+from+tungsten+anode+x-ray+tubes%5BTitle%5D)+AND+%22Physics+in+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">SpekCalc: a program to calculate photon spectra from tungsten anode x-ray tubes.</a> Physics in Medicine and Biology. 54 (19), 433-438 (2009).</li>
<li>Hubbell, J. H., Seltzer, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((X-Ray+mass+attenuation+coefficients+-+Tables+of+X-ray+mass+attenuation+coefficients+and+mass+energy-absorption+coefficients+1+keV+to+20+MeV+for+elements+Z+%3D+1+to+92+and+48+additional+substances+of+dosimetric+interest+%28version+1.4%29%5BTitle%5D)+AND+%22NIST+Standard+Reference+Database%22%5BJournal%5D)">X-Ray mass attenuation coefficients - Tables of X-ray mass attenuation coefficients and mass energy-absorption coefficients 1 keV to 20 MeV for elements Z = 1 to 92 and 48 additional substances of dosimetric interest (version 1.4).</a> NIST Standard Reference Database. , 126(1995).</li>
<li>Wong, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution%2C+small+animal+radiation+research+platform+with+x-ray+tomographic+guidance+capabilities%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Radiation+Oncology%2C+Biology%2C+Physics%22%5BJournal%5D)">High-resolution, small animal radiation research platform with x-ray tomographic guidance capabilities.</a> International Journal of Radiation Oncology, Biology, Physics. 71 (5), 1591-1599 (2008).</li>
<li>Trompier, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigation+of+the+influence+of+calibration+practices+on+cytogenetic+laboratory+performance+for+dose+estimation%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Radiation+Biology%22%5BJournal%5D)">Investigation of the influence of calibration practices on cytogenetic laboratory performance for dose estimation.</a> International Journal of Radiation Biology. , 1-9 (2016).</li>
<li>Dos Santos, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Importance+of+dosimetry+protocol+for+cell+irradiation+on+a+low+X-rays+facility+and+consequences+for+the+biological+response%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Radiation+Biology%22%5BJournal%5D)">Importance of dosimetry protocol for cell irradiation on a low X-rays facility and consequences for the biological response.</a> International Journal of Radiation Biology. , 1-29 (2018).</li>
<li>Noblet, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Underestimation+of+dose+delivery+in+preclinical+irradiation+due+to+scattering+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Physica+Medica%22%5BJournal%5D)">Underestimation of dose delivery in preclinical irradiation due to scattering conditions.</a> Physica Medica. 30 (1), 63-68 (2014).</li>
<li>Paixao, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monte+Carlo+derivation+of+filtered+tungsten+anode+X-ray+spectra+for+dose+computation+in+digital+mammography%5BTitle%5D)+AND+%22Radiologia+Brasileira%22%5BJournal%5D)">Monte Carlo derivation of filtered tungsten anode X-ray spectra for dose computation in digital mammography.</a> Radiologia Brasileira. 48 (6), 363-367 (2015).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

W pracy przedstawiono protokół stosowany i wdrażany do napromieniania komórek za pomocą niskoenergetycznego aparatu rentgenowskiego. Obecnie wiele eksperymentów radiobiologicznych przeprowadza się przy użyciu tego typu promiennika, ponieważ są one łatwe w użyciu, opłacalne i mają bardzo niewiele ograniczeń w zakresie ochrony przed promieniowaniem, w porównaniu na przykład ze źródłem kobaltu. Chociaż te konfiguracje mają wiele zalet, ponieważ wykorzystują źródło energii o niskim poziomie promieniowania rentgenowskiego, mo...

Celem radiobiologii jest ustalenie powiązań między dostarczoną dawką a efektami biologicznymi; dozymetria jest kluczowym aspektem w projektowaniu eksperymentów radiobiologicznych. Od ponad 30 lat podkreśla się znaczenie standardów dozymetrycznych i harmonizację praktyk1,2,3,4,5. Aby ustalić odniesienie do dawki dawki, istnieje kilka protokołów6,7,8,9,10; jednakże, jak pokazują Peixoto i Andreo11 , mogą występować różnice do 7% w zależności od ilości dozymetrycznej użytej do określenia dawki dawki. Co więcej, nawet jeśli istnieją protokoły, czasami trudno jest określić, który protokół jest najbardziej odpowiedni dla konkretnego zastosowania, jeśli w ogóle, ponieważ szybkość dawki dla komórek zależy od takich parametrów, jak na przykład pojemnik na komórki, ilość pożywki do hodowli komórkowych lub jakość wiązki. Rozpraszanie i rozpraszanie wsteczne dla tego rodzaju napromieniowania jest również bardzo ważnym parametrem, który należy wziąć pod uwagę. Rzeczywiście, dla promieniowania rentgenowskiego o niskiej i średniej energii, w protokole referencyjnym AAPM TG-6110, dawka pochłonięta w wodzie jest mierzona na powierzchni fantomu wodnego. Biorąc pod uwagę bardzo specyficzne warunki napromieniania komórek, mała objętość pożywki do hodowli komórkowych otoczona powietrzem jest bliższa warunkom kerma niż te określone dla dawki pochłoniętej z dużym fantomem równoważnym z wodą, jak w protokole TG-61. W związku z tym zdecydowaliśmy się użyć kermy w wodzie jako ilości dozymetrycznej w celach informacyjnych, a nie dawki wchłoniętej w wodzie. W związku z tym proponujemy nowe podejście, aby zapewnić lepsze określenie rzeczywistej dawki dostarczanej do komórek.
Ponadto, kolejnym kluczowym aspektem dla badań radiobiologicznych jest pełne raportowanie metod i protokołów stosowanych do napromieniania, aby móc odtwarzać, interpretować i porównywać wyniki eksperymentalne. W 2016 roku Pedersen i wsp.12 zwrócili uwagę na niewystarczające raportowanie dozymetrii w przedklinicznych badaniach radiobiologicznych. Większe niedawne badanie przeprowadzone przez Draeger et al.13 podkreśliło, że chociaż niektóre parametry dozymetryczne, takie jak dawka, energia lub rodzaj źródła, są raportowane, brakuje dużej części parametrów fizycznych i dozymetrycznych, które są niezbędne do prawidłowego odtworzenia warunków napromieniowania. Ten obszerny przegląd, obejmujący ponad 1000 publikacji obejmujących ostatnie 20 lat, wykazuje znaczny brak raportowania warunków fizycznych i dozymetrycznych w badaniach radiobiologicznych. W związku z tym pełny opis protokołu i metody stosowanej w badaniach radiobiologicznych jest obowiązkowy w celu przeprowadzenia solidnych i powtarzalnych eksperymentów.
Biorąc pod uwagę te różne aspekty, dla eksperymentów radiobiologicznych przeprowadzanych w IRSN (Instytut Ochrony przed Promieniowaniem i Bezpieczeństwa Jądrowego), wdrożono rygorystyczny protokół napromieniania komórek w obiekcie ortonapięciowym. Ten protokół dozymetryczny został opracowany w celu jak największej symulacji rzeczywistych warunków napromieniania komórek, a tym samym określenia rzeczywistej dawki dostarczanej do komórek. W tym celu wymieniono wszystkie parametry napromieniowania, a wskaźnik jakości wiązki oceniono poprzez pomiar warstwy o połowie wartości (HVL), dla której dokonano pewnych adaptacji, ponieważ standardowe zalecenia z protokołu AAPM 10 nie mogą być przestrzegane. Pomiar bezwzględnej mocy dawki przeprowadzono następnie w komorze jonizacyjnej wewnątrz pojemnika komórkowego używanego do naświetlania komórek, a tłumienie i rozpraszanie pożywki do hodowli komórkowych również określono ilościowo za pomocą filmów radiochromowych EBT3. Ze względu na to, że modyfikacja tylko jednego parametru protokołu może mieć znaczący wpływ na oszacowanie dawki, dla każdej konfiguracji napromieniania komórek przeprowadza się dedykowaną dozymetrię. Ponadto wartość HVL musi być obliczona dla każdej kombinacji napięcie-filtr. W niniejszej pracy zastosowano napięcie 220 kV, natężenie 3 mA oraz filtrację wewnętrzną i dodatkową odpowiednio 0,8 mm i 0,15 mm berylu i miedzi. Wybraną konfigurację napromieniania komórek umieszcza się w kolbie T25, gdzie komórki napromieniowano 5 ml pożywki do hodowli komórkowych.

<table><tbody><tr><td>31010 komora jonizacyjna</td><td>PTW</td><td>jonizacja Promieniowanie, Detektory wraz z kodeksem postępowania, katalog 2019/2020, strona 14</td><td>https://www.ptwdosimetry.com/fileadmin/user_upload/DETECTORS_Cat_en_16522900_12/blaetterkatalog/index.html?startpage=1#page_14</td></tr><tr><td>Folie radiochromowe EBT3</td><td>Meditest</td><td>zapytanie ofertowe</td><td>https://www.meditest.fr/produit/ebt3-8x10/</td></tr> <tr><td>elektrometr UNIDOSEwebline</td><td>Katalog online PTW</td><td>, zapytanie ofertowe</td><td>https://www.ptwdosimetry.com/en/products/unidos-webline/?type=3451&downloadfile=1593&amp; cHash= 6096ddc2949f8bafe5d556e931e6c865</td></tr><tr><td>Materiał HVL (filtr, membrana)Katalog</td> online <td>PTW</td><td>, strona 70, zapytanie ofertowe</td><td>grubość folii: 0,02, 0,05, 0,1, 0,2, 0,5, 1, 2, 5 i 10 mm miedzi, https://www.ptwdosimetry.com/fileadmin/user_upload/Online_Catalog/Radiation_Medicine_Cat_en_ 58721100_11/blaetterkatalog/index.html#page_70</td></tr><tr><td>skaner do folii radiochromowych</td><td>Zapytanie</td><td>ofertowe</td><td>Epson Epson V700, seiko Epson corporation, Suwa, Japonia</td></tr><tr><td>pomiary temperatury i ciśnienia, Lufft OPUS20</td><td></td><td>zapytanie ofertowe</td><td>https://www.lufft.com/products/in-room-measurements-291/opus-20-thip-1983/</td></tr></tbody></table>

dozymetria do napromieniania komórek przy użyciu aparatury rentgenowskiej o ortonapięciu (40-300 kv)

Dosimetry for Cell Irradiation using Orthovoltage (40-300 kV) X-Ray Facilities

Znaczenie protokołów i standardów dozymetrycznych dla badań radiobiologicznych jest oczywiste. Zaproponowano kilka protokołów określania dawki przy użyciu niskoenergetycznych urządzeń rentgenowskich, ale w zależności od konfiguracji napromieniowania, próbek, materiałów lub jakości wiązki, czasami trudno jest określić, który protokół jest najbardziej odpowiedni do zastosowania. W związku z tym proponujemy protokół dozymetryczny do napromieniania komórek przy użyciu niskoenergetycznego aparatu rentgenowskiego. Celem tej metody jest oszacowanie dawki na poziomie monowarstwy komórki, tak aby była ona jak najbardziej zbliżona do rzeczywistych warunków napromieniania komórek. Poszczególne etapy protokołu są następujące: określenie parametrów napromieniowania (wysokie napięcie, intensywność, pojemnik ogniwa itp.), określenie wskaźnika jakości wiązki (para warstw wysokiego napięcia - połowa wartości), pomiar dawki za pomocą komory jonizacyjnej skalibrowanej w warunkach kermy powietrznej, kwantyfikacja tłumienia i rozpraszania pożywki do hodowli komórkowej za pomocą folii radiochromowych EBT3, i określenie wielkości dawki na poziomie komórkowym. Metodologię tę należy przeprowadzić dla każdej nowej konfiguracji napromieniania komórek, ponieważ modyfikacja tylko jednego parametru może mieć duży wpływ na rzeczywiste osadzanie dawki na poziomie monowarstwy ogniwa, szczególnie w przypadku promieniowania rentgenowskiego o niskiej energii.

W niniejszej pracy wykorzystano platformę przeznaczoną do napromieniowania małych zwierząt19; platforma ta może być jednak stosowana do napromieniowania innych rodzajów próbek, np. komórek. Źródłem promieniowania jest lampa rentgenowska Varian (NDI-225-22) z wbudowaną filtracją z berylu o grubości 0.8 mm, dużą wielkością plamki ogniskowej wynoszącą 3 mm, zakresem wysokiego napięcia od około 30 do 225 kV oraz maksymalną intensywnością 30 mA.
Parametry zastosowane w ninie...

Ten dokument opisuje nowy protokół dozymetryczny dla napromieniania komórek za pomocą niskoenergetycznego sprzętu rentgenowskiego. Pomiary wykonywane są w warunkach w miarę możliwości symulujących rzeczywiste warunki napromieniowania komórek.

Dozymetria do napromieniania komórek przy użyciu aparatury rentgenowskiej o ortonapięciu (40-300 kV)

The importance of dosimetry protocols and standards for radiobiological studies is self-evident. Several protocols have been proposed for dose ...

Protokół ten został opracowany, aby umożliwić wykonywanie pomiarów dozymetrycznych jak najbardziej zbliżonych do rzeczywistych warunków napromieniania komórek w badaniach radiobiologicznych. Dzięki temu protokołowi możemy określić dokładną dawkę otrzymywaną przez komórki, dzięki czemu ma on zastosowanie w wielu urządzeniach rentgenowskich i możemy uwzględnić wszystkie parametry i przełożyć je na dozymetrię. Wszystkie parametry napromieniowania muszą być ustawione wcześniej, aby umożliwić optymalne uzyskanie pomiaru dozymetrycznego, wymagającego ścisłej współpracy między fizykami a radiobiologiem.Aby przeprowadzić ocenę pola napromieniowania, należy umieścić samorozwijającą się folię dozymetryczną na podłożu używanym do napromieniania i napromieniować film co najmniej dwoma odcieniami szarości, aby uzyskać dobrze zaznaczone pole napromieniowania. Zeskanuj samodzielnie rozwijającą się folię dozymetryczną za pomocą dedykowanego skanera i użyj funkcji analizy i wykresu, aby wykreślić profil dawki w ImageJ. Następnie zaznacz powierzchnię nośną napromieniania, aby upewnić się, że pojemnik na ogniwa zostanie umieszczony we właściwej pozycji.Aby wykonać pomiar dawki natężenia, należy umieścić zmodyfikowany pojemnik na ogniwa w obudowie nośnika napromieniania i umieścić komorę jonizacyjną w pojemniku we właściwej pozycji, zgodnie z oznaczeniami wykonanymi na powierzchni podparcia. Upewnić się, że wszystkie parametry napromieniowania zostały odpowiednio ustawione i wstępnie napromieniować komorę jonizacyjną przez pięć minut. Wyzeruj elektrometr i uzyskaj 10 jednominutowych pomiarów.Następnie należy skorzystać ze wzoru, aby określić średnią dawkę w powietrzu kerma. Ponumeruj wszystkie filmy w celu ich dalszej identyfikacji. Co najmniej 24 godziny przed napromienianiem należy odciąć kawałki samorozwijającej się folii dozymetrycznej zgodnie z rozmiarem pojemnika na komórki.Aby skonstruować krzywą kalibracyjną, należy odłożyć na bok trzy kawałki folii na nienapromieniowane kontrole i umieścić pierwszą folię w pojemniku na komórkę. Następnie należy napromienić folię, aby uzyskać pierwszy punkt dawkowania. Po trzykrotnym napromienieniu wszystkich folii w odpowiednio dobranych dawkach można wygenerować krzywą kalibracyjną.Aby zmierzyć tłumienie i rozpraszanie pożywki do hodowli komórkowej, należy wybrać ten sam czas napromieniania dla wszystkich napromieniowań i napromienić trzy kawałki samorozwijających się filmów dozymetrycznych w pojemniku bez wody. Następnie umieść pojedynczy kawałek folii w pojemniku i napełnij pojemnik taką samą objętością wody, jaka objętość pożywki, która zostanie napromieniowana. W razie potrzeby używając małych kawałków taśmy, umieść pojemnik w obudowie.Po zakończeniu naświetlania osusz folie papierem chłonnym i przechowuj folie przed światłem. 24 godziny po ich naświetleniu na skanerze ustaw format TIFF na 48-bitowy czerwony zielony niebieski i tryb transmisji na 150 punktów na cal i wybierz brak korekcji obrazu. Aby rozgrzać skaner, umieść na skanerze nienaświetlizowaną folię i uruchom podgląd skanu.Na końcu podglądu uruchom minutnik i odczekaj 30 sekund przed rozpoczęciem skanowania. Po zakończeniu skanowania uruchom 90-sekundowy stoper. W tym samym czasie zarejestruj skanowanie i otwórz obraz w ImageJ.Śledź kwadratowy obszar zainteresowania w obrębie skanu i zmierz średni poziom czerwonych pikseli tego obszaru. Po upływie 90 sekund powtórz podgląd skanowania co najmniej 30 razy, aby rozgrzać i ustabilizować skaner. Po ustabilizowaniu skanera umieść film na środku stołu skanera i uruchom podgląd skanu.Odczekaj 30 sekund przed rozpoczęciem skanowania. Po zakończeniu skanowania odczekaj 90 sekund przed rozpoczęciem następnego skanowania. Następnie przeprowadzono pomiary w celu oszacowania grubości tłumika, a różne grubości tłumika zostały przetestowane, aby znaleźć grubość, która zmniejszyła intensywność wiązki dwukrotnie.Po wyznaczeniu tej grubości wykonano pięć pomiarów w celu oceny średniej wartości mRAW skorygowanej o współczynnik korekcji temperatury i ciśnienia. W tej konfiguracji znaleziono warstwę o połowie wartości 0,667 milimetra miedzi. W tej reprezentatywnej analizie napromieniono samodzielnie rozwijającą się folię dozymetryczną w celu określenia powierzchni, na której pole napromieniowania jest jednorodne, co pozwala na prawidłowe umieszczenie pojemnika na komórki.Aby określić dokładną dawkę dla komórek, zmierzoną szybkość dawki kermy powietrza przeliczono na karmę wodną przy użyciu stosunku średniego współczynnika absorpcji energii masowej dla wody do powietrza ocenianego w widmie fluencji fotonów, który dla tej analizy określono na 0,659 grejów na minutę. W tej analizie tłumienia i rozpraszania pożywki do hodowli komórkowych samorozwijające się dozymetryczne folie radiochromowe zostały najpierw skalibrowane między zerem a trzema szarościami z 0,25 krokami szarości między zerem a jedną szarością i 0,5 krokiem szarości między jednym a trzema szarościami. Punkty dawki zostały następnie wyposażone w krzywą wielomianową czwartego stopnia.Tutaj można obserwować reprezentatywną tabelę używaną do codziennego pomiaru. Upewnij się, że wszystkie parametry konfiguracyjne są przestrzegane, że szybkość dawkowania jest mierzona w odpowiednim pojemniku na komórki i że oceniany jest wpływ pożywki do hodowli komórkowych. Istnieje kilka protokołów umożliwiających ustalenie pomiaru dawki referencyjnej.Kluczową kwestią jest wybór odpowiedniego protokołu do konkretnego zastosowania, zwłaszcza w przypadku korzystania z urządzeń o niskim promieniowaniu rentgenowskim.

dosimetry-for-cell-irradiation-using-orthovoltage-40-300-kv-x-ray

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Pacjenci z guzami mózgu rutynowo poddawani są radioterapii czaszki, a choć metoda ta jest korzystna, często prowadzi do wyniszczających zaburzeń poznawczych. Ten poważny, nierozwiązany problem nie ma obecnie żadnego klinicznego lekarstwa, co skłoniło nas do podjęcia wysiłków w celu opracowania terapii opartych na komórkach macierzystych w celu przywrócenia funkcji poznawczych upośledzonych przez promieniowanie.

Strategie transplantacji komórek macierzystych w celu przywrócenia funkcji poznawczych upośledzonych przez radioterapię czaszki

Rosnąca liczba urządzeń do radioterapii oferuje tę zaletę, że dostarcza dawkę przez bardzo małe wiązki do guza, co pozwala na większą zgodność i wyższe dawki na frakcję. Do dozymetrii tych małych pól można użyć wielu różnych detektorów. W niniejszym badaniu badany jest wpływ rekombinacji jonów w komorze jonizacyjnej z cieczą przy użyciu systemu radioterapii stereotaktycznej.

Charakterystyka efektów rekombinacji w ciekłej komorze jonizacyjnej wykorzystywanej do dozymetrii akceleratora radiochirurgicznego

Prezentujemy metodę rozproszonej spektroskopii optycznej (DOS), która dostarcza ilościowych biomarkerów optycznych reakcji skóry na promieniowanie. Opisujemy projekt oprzyrządowania DOS, algorytmy ekstrakcji parametrów optycznych i procedury postępowania ze zwierzętami wymagane do uzyskania reprezentatywnych danych z przedklinicznego mysiego modelu rumienia wywołanego promieniowaniem.

Dyfuzyjna spektroskopia optyczna do ilościowej oceny ostrej toksyczności skórnej wywołanej promieniowaniem jonizującym przy użyciu modelu mysiego

Test cytogenetycznego chromosomu dicentrycznego (DC) określa ilościowo narażenie na promieniowanie jonizujące. Oprogramowanie Automated Dicentric Chromosome Identifier and Dose Estimator dokładnie i szybko szacuje dawkę biologiczną z DC w komórkach metafazy. Odróżnia monocentryczne chromosomy i inne obiekty od DC i szacuje dawkę promieniowania biologicznego na podstawie częstotliwości DC.

Przyspieszona biodozymetria promieniowania dzięki automatycznej identyfikacji chromosomów dicentrycznych (ADCI) i oszacowaniu dawki

Badania nad śmiercią komórek wywołaną promieniowaniem jonizującym (IR) są ważne dla zrozumienia wpływu IR na nowotwory złośliwe i normalne tkanki. Tutaj opisujemy jednoetapowy test do oceny głównych trybów indukowanej przez IR klonogennej śmierci komórek w oparciu o morfologię jąder barwionych dichlorowodorkiem 4',6-diamidino-2-fenyloindolu (DAPI) uwidocznionych za pomocą mikroskopii fluorescencyjnej.

Jednoetapowy protokół oceny sposobu klonogennej śmierci komórki wywołanej promieniowaniem za pomocą mikroskopii fluorescencyjnej

Kliniczne akceleratory liniowe mogą być używane do określania efektów biologicznych szerokiego zakresu dawek na komórki rakowe. Omówiliśmy, jak skonfigurować akcelerator liniowy do testów komórkowych i testów dla nowotworowych komórek macierzystych hodowanych jako guzy w zawiesinie i linii komórkowych hodowanych jako kultury adherentne.

Wykorzystanie akceleratora liniowego do przeprowadzania eksperymentów radiobiologicznych in vitro

Opisano konfigurację do pomiarów prądu indukowanego promieniowaniem rentgenowskim na liniach synchrotronowych. Przedstawiono w nim wyniki badań nad ogniwami słonecznymi w nanoskali i rozszerzono zestaw technik multimodalnej mikroskopii rentgenowskiej. Od okablowania po optymalizację sygnału do szumu, pokazano, jak wykonywać najnowocześniejsze pomiary XBIC na twardej mikrosondzie rentgenowskiej.

Pomiary prądu indukowanego wiązką promieniowania rentgenowskiego do multimodalnej mikroskopii rentgenowskiej ogniw słonecznych

Dozymetria promieniowania dostarcza techniki zwiększającej dokładność eksperymentów przedklinicznych i zapewniającej, że dostarczane dawki promieniowania są ściśle związane z parametrami klinicznymi. Protokół ten opisuje kroki, które należy podjąć w każdej fazie podczas przedklinicznych eksperymentów radiacyjnych, aby zapewnić prawidłowy projekt eksperymentu.

Uruchomienie promiennika i dozymetria do oceny parametrów α i β LQ, schematu dawkowania promieniowania oraz depozycji dawki in vivo

Ten protokół przedstawia przygotowanie preparatu i automatyczną ocenę testu ognisk γ-H2AX na limfocytach krwi obwodowej. Aby zilustrować metodę i czułość testu, izolowane limfocyty napromieniano in vitro. Ta zautomatyzowana metoda wykrywania DNA DSB jest przydatna w szybkich i wysokowydajnych zastosowaniach dozymetrii biologicznej.

Zautomatyzowana mikroskopowa metoda oceny ognisk γ-H2AX w ludzkich limfocytach krwi obwodowej

Wykorzystaliśmy synchrotronową tomografię rentgenowską w Europejskiej Instalacji Promieniowania Synchrotronowego (ESRF), aby nieinwazyjnie uzyskać trójwymiarowe zbiory danych tomograficznych o rozdzielczości piksela 0.7µm. Dzięki zastosowaniu oprogramowania do renderowania objętościowego możliwe jest zrekonstruowanie struktur wewnętrznych w ich stanie naturalnym, bez artefaktów powstających podczas sekcjonowania histologicznego.

Nieinwazyjna wizualizacja 3D z rozdzielczością submikronową z wykorzystaniem synchrotronowej tomografii rentgenowskiej

Poznaj protokół dozymetrii do napromieniania komórek przy użyciu aparatury rentgenowskiej o ortonapięciu. Ta metoda umożliwia precyzyjne określenie dawki otrzymywanej przez komórki w badaniach radiobiologicznych.

Dozymetria do napromieniania komórek przy użyciu aparatury rentgenowskiej o ortonapięciu (40-300 kV)

Przeglądaj więcej filmów