Name: Zachowanie płodności u pacjentek z ciężką dysfunkcją jajników (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-03-25T13:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 3 s
Description: Poznaj metodę bezlekowej aktywacji in vitro (IVA) jajników u pacjentek z ciężką dysfunkcją jajników. Technika zwiększa liczbę pobieranych komórek jajowych, poprawiając skuteczność zachowania płodności.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dziękujemy Tatsuji Ihanie, Sachiyo Kurimoto, Kazuko Takahasihowi, Yuki Yoshizawie, Maho Arashi, Kentaro Fujicie, Erinie Kudo, Yuka Kurimoto i Mayuko Wakatsuki za wsparcie procedury IVA bez leków oraz Prof. Aaronowi J.W. Hsueh (Stanford University School of Medicine, Stanford, CA) za krytyczną lekturę i redakcję manuskryptu. Dziękujemy również Rebecce Truman i Gregory'emu Trumanowi za wstawienie narracji w języku angielskim. Badanie to było wspierane przez Japońskie Towarzystwo Promocji Nauki (JSPS), Scientific Research B (19H03801) i Challenging Exploratory Research (18K19624).

Pisemna świadoma zgoda została uzyskana od każdej pacjentki POR z malejącą rezerwą jajnikową, która zapisała się do leczenia IVA bez leków. Badanie to zostało zatwierdzone przez komisję etyczną Międzynarodowego Uniwersytetu Zdrowia i Opieki Społecznej (nr 17-S-21). Badanie kliniczne zostało zarejestrowane pod numerem UMIN000034464 i przeprowadzone zgodnie z Kodeksem Etycznym Światowego Stowarzyszenia Lekarzy (Deklaracja Helsińska).
1. Ekstrakcja kory jajnikowej
<ol>
	<li>Usuń część kory jajnika (10 x 10 mm, grubość 2-3 mm) z jednego lub obu jajników w znieczuleniu ogólnym poprzez operację laparoskopową, jak opisano wcześniej19,20.</li>
	<li>Umieścić pobrane kory jajników w sterylnym pojemniku zawierającym 10 ml zmodyfikowanego HTF (mHTF) w temperaturze 37 °C.</li>
</ol>
2. Fragmentacja kory jajnikowej
UWAGA: Przed sekcją kory jajnikowej rozgrzej mHTF do 37 °C. Utrzymuj sterylne warunki przez cały czas trwania zabiegu. Wszystkie narzędzia do tej procedury są wymienione w Tabeli materiałów.
<ol>
	<li>Umieść pobrane kory jajników w plastikowym naczyniu zawierającym 5-10 ml mHTF w temperaturze 37 °C i umieść je na płytce grzewczej, aby utrzymać tkankę w temperaturze 37 °C (<klasa silna = "xfig">Rysunek 2A).</li>
	<li>Zrób zdjęcie każdej kory za pomocą aparatu cyfrowego z imieniem i nazwiskiem pacjenta przed rozpoczęciem następnego zabiegu, aby połączyć dane pacjenta.</li>
	<li>Umieść pojedynczą korę na sterylnej gazie zwilżonej mHTF (<silna klasa="xfig">Rysunek 2B). 
	UWAGA: Nałóż dodatkowy mHTF za pomocą jednorazowej pipety na gazę, aby zapobiec wysuszeniu powierzchni kory podczas tej procedury.</li>
	<li>Usuń resztki tkanki rdzenia w miejscu, w którym wygląda różowo, za pomocą mikronożyczek, tak aby grubość tkanki osiągnęła 1-2 mm (<silna klasa = "xfig">Rysunek 2C i D). 
	UWAGA: Aby uniknąć utraty pęcherzyków we wczesnym stadium, nie należy przygotowywać pasków korowych o grubości mniejszej niż 1 mm, ponieważ pęcherzyki we wczesnym stadium znajdują się w odległości 1-2 mm od powierzchni kory jajnikowej21.</li>
	<li>Wyciąć fragment tkanki o wymiarach 1 mm x 1 mm x 5 mm z każdego paska kory jajnika za pomocą cienkiego skalpela i poddać go analizie histologicznej w celu określenia obecności pęcherzyków resztkowych, jak opisano wcześniej18 (Rysunek 2E). 
	UWAGA: Wypreparowane tkanki do histologii zanurza się w mHTF i utrzymuje w temperaturze 4 °C aż do utrwalenia (<silna klasa = "xfig" >Rysunek 2F, patrz Krok 4).</li>
	<li>Przetnij korę na paski o wymiarach 1 mm x 1 mm x 10 mm za pomocą cienkiego skalpela (<silna klasa="xfig">Rysunek 2G). 
	UWAGA: Łatwiej jest ciąć, naciskając skalpel niż ciągnąc go.</li>
	<li>Pokrój te paski tkanek w małe kostki o wymiarach 1 mm x 1 mm x 1 mm (<silna klasa="xfig">Rysunek 2H). 
	UWAGA: Aby uniknąć zmian ciśnienia osmotycznego w pożywce, dodaj mHTF z umiarem przed autoprzeszczepem tkanki.</li>
</ol>
3. Autoprzeszczepienie fragmentów kory jajnikowej
<ol>
	<li>Otwórz opakowanie kaniuli IVA i połóż ją na sterylnym serwecie.</li>
	<li>Przepłukać wnętrze kaniuli IVA za pomocą mHTF, kilkakrotnie zasysając i rozładowując mHTF.</li>
	<li>Odessać 100-200 μl mHTF, aby napełnić końcówkę kaniuli IVA, aby uniknąć wysychania kostek korowych podczas ładowania (<silna klasa = "xfig" >Rysunek 3A).</li>
	<li>Załaduj kostki korowe do końcówki kaniuli IVA za pomocą cienkiej pęsety (<silna klasa = "xfig">Rysunek 3B-E). 
	UWAGA: Liczba kostek korowych do obciążenia zależy od miejsca szczepienia. Ogólnie rzecz biorąc, 20-30 kostek można przesadzić do ortotropowego pozostałego jajnika, podczas gdy 10-15 kostek można przesadzić do woreczka pod błoną surowiczą jajowodu.</li>
	<li>Po załadowaniu kostek korowych przytrzymaj palcami końcówkę kaniuli zawierającej kostki korowe, aż do przekazania kaniuli IVA chirurgowi. Pozwoli to uniknąć spadku temperatury kostki. 
	UWAGA: Szczegóły procedury autoprzeszczepu w ramach chirurgii laparoskopowej zostały zgłoszone wcześniej19. Do przeszczepiania kostek kory jajnikowej urządzenie w kształcie kaniuli (kaniula IVA) zostało opracowane przez naszego współpracownika, firmę Kitazato Corporation.</li>
</ol>
4. Analiza histologiczna kory jajnika
UWAGA: Aby policzyć liczbę pozostałych pęcherzyków, przeprowadź analizę histologiczną zgodnie z poprzednim opisem15.
<ol>
	<li>Oznacz powierzchnię paska korowego barwnikiem do znakowania tkanek przed utrwaleniem próbki. To wskaże stronę kory w pasku do histologii.</li>
	<li>Utrwalić paski tkanki na noc w temperaturze 4 °C za pomocą roztworu Bouina. 
	UWAGA: Aby wykryć pęcherzyki atretyczne, nie zalecamy stosowania paraformaldehydu do utrwalania, aby uniknąć kurczenia się cytoplazmy oocytów.</li>
	<li>Odwodnić i zanurzyć paski tkanek w parafinie.</li>
	<li>Wykonać szeregowe cięcie bloku parafiny zawierającego próbkę tkanki.</li>
	<li>Wybarwić każdą sekcję za pomocą hematoksyliny i eozyny, aby uwidocznić mieszki włosowe.</li>
	<li>Policz mieszki włosowe zgodnie z wcześniejszym opisem17.</li>
</ol>

<ol><li>Liang, T., Motan, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mature+Oocyte+Cryopreservation+for+Fertility+Preservation%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Experimental+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Mature Oocyte Cryopreservation for Fertility Preservation.</a> Advances in Experimental Medicine and Biology. 951, 155-161 (2016).</li>
<li>Yoon, T. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+births+after+vitrification+of+oocytes+in+a+stimulated+in+vitro+fertilization-embryo+transfer+program%5BTitle%5D)+AND+%22Fertility+and+Sterility%22%5BJournal%5D)">Live births after vitrification of oocytes in a stimulated in vitro fertilization-embryo transfer program.</a> Fertility and Sterility. 79 (6), 1323-1326 (2003).</li>
<li>Donnez, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Livebirth+after+orthotopic+transplantation+of+cryopreserved+ovarian+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Livebirth after orthotopic transplantation of cryopreserved ovarian tissue.</a> Lancet. 364 (9443), 1405-1410 (2004).</li>
<li>Meirow, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pregnancy+after+transplantation+of+cryopreserved+ovarian+tissue+in+a+patient+with+ovarian+failure+after+chemotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Pregnancy after transplantation of cryopreserved ovarian tissue in a patient with ovarian failure after chemotherapy.</a> New England Journal of Medicine. 353 (3), 318-321 (2005).</li>
<li>De Vos, M., Devroey, P., Fauser, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primary+ovarian+insufficiency%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Primary ovarian insufficiency.</a> Lancet. 376 (9744), 911-921 (2010).</li>
<li>Scott, R. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Follicle-stimulating+hormone+levels+on+cycle+day+3+are+predictive+of+in+vitro+fertilization+outcome%5BTitle%5D)+AND+%22Fertility+and+Sterility%22%5BJournal%5D)">Follicle-stimulating hormone levels on cycle day 3 are predictive of in vitro fertilization outcome.</a> Fertility and Sterility. 51 (4), 651-654 (1989).</li>
<li>Ferraretti, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ESHRE+consensus+on+the+definition+of+%27poor+response%27+to+ovarian+stimulation+for+in+vitro+fertilization%3A+the+Bologna+criteria%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">ESHRE consensus on the definition of 'poor response' to ovarian stimulation for in vitro fertilization: the Bologna criteria.</a> Human Reproduction. 26 (7), 1616-1624 (2011).</li>
<li>Huhtaniemi, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+the+Molecular+Pathophysiology%2C+Genetics%2C+and+Treatment+of+Primary+Ovarian+Insufficiency%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Endocrinology+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Advances in the Molecular Pathophysiology, Genetics, and Treatment of Primary Ovarian Insufficiency.</a> Trends in Endocrinology and Metabolism. 29 (6), 400-419 (2018).</li>
<li>Męczekalski, B., Maciejewska-Jeske, M., Podfigurna, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproduction+in+premature+ovarian+insufficiency+patients+-+from+latest+studies+to+therapeutic+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Prz+Menopauzalny%22%5BJournal%5D)">Reproduction in premature ovarian insufficiency patients - from latest studies to therapeutic approach.</a> Prz Menopauzalny. 17 (3), 117-119 (2018).</li>
<li>Baker, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Life+plans+and+family-building+options+for+women+with+primary+ovarian+insufficiency%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Reproductive+Medicine%22%5BJournal%5D)">Life plans and family-building options for women with primary ovarian insufficiency.</a> Seminars in Reproductive Medicine. 29 (4), 362-372 (2011).</li>
<li>Englert, Y., Govaerts, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oocyte+donation%3A+particular+technical+and+ethical+aspects%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">Oocyte donation: particular technical and ethical aspects.</a> Human Reproduction. 13, Suppl 2 90-97 (1998).</li>
<li>Englert, Y., Rodesch, C., Laruelle, C., Govoerts, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oocyte+donation%3A+ethical+aspects+related+to+the+donor%5BTitle%5D)+AND+%22Contraception%2C+Fertilite%2C+Sexualite%22%5BJournal%5D)">Oocyte donation: ethical aspects related to the donor.</a> Contraception, Fertilite, Sexualite. 25 (3), 251-257 (1997).</li>
<li>Storgaard, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Obstetric+and+neonatal+complications+in+pregnancies+conceived+after+oocyte+donation%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22BJOG%3A+An+International+Journal+of+Obstetrics+and+Gynaecology%22%5BJournal%5D)">Obstetric and neonatal complications in pregnancies conceived after oocyte donation: a systematic review and meta-analysis.</a> BJOG: An International Journal of Obstetrics and Gynaecology. 124 (4), 561-572 (2017).</li>
<li>Storgaard, M., Malchau, S., Loft, A., Larsen, E., Pinborg, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oocyte+donation+is+associated+with+an+increased+risk+of+complications+in+the+pregnant+woman+and+the+fetus%5BTitle%5D)+AND+%22Ugeskrift+for+Laeger%22%5BJournal%5D)">Oocyte donation is associated with an increased risk of complications in the pregnant woman and the fetus.</a> Ugeskrift for Laeger. 179 (11), (2017).</li>
<li>Kawamura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippo+signaling+disruption+and+Akt+stimulation+of+ovarian+follicles+for+infertility+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Hippo signaling disruption and Akt stimulation of ovarian follicles for infertility treatment.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 110 (43), 17474-17479 (2013).</li>
<li>Hsueh, A. J., Kawamura, K., Cheng, Y., Fauser, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraovarian+control+of+early+folliculogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrine+Reviews%22%5BJournal%5D)">Intraovarian control of early folliculogenesis.</a> Endocrine Reviews. 36 (1), 1-24 (2015).</li>
<li>Li, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+dormant+ovarian+follicles+to+generate+mature+eggs%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Activation of dormant ovarian follicles to generate mature eggs.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (22), 10280-10284 (2010).</li>
<li>Suzuki, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Successful+fertility+preservation+following+ovarian+tissue+vitrification+in+patients+with+primary+ovarian+insufficiency%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">Successful fertility preservation following ovarian tissue vitrification in patients with primary ovarian insufficiency.</a> Human Reproduction. 30 (3), 608-615 (2015).</li>
<li>Tanaka, Y., Hsueh, A. J., Kawamura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+approaches+of+drug-free+in+activation+and+laparoscopic+ovarian+incision+to+treat+patients+with+ovarian+infertility%5BTitle%5D)+AND+%22Fertility+and+Sterility%22%5BJournal%5D)">Surgical approaches of drug-free in activation and laparoscopic ovarian incision to treat patients with ovarian infertility.</a> Fertility and Sterility. , (2020).</li>
<li>Kawamura, K., Ishizuka, B., Hsueh, A. J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug-free+in-vitro+activation+of+follicles+for+infertility+treatment+in+poor+ovarian+response+patients+with+decreased+ovarian+reserve%5BTitle%5D)+AND+%22Reproductive+Biomedicine+Online%22%5BJournal%5D)">Drug-free in-vitro activation of follicles for infertility treatment in poor ovarian response patients with decreased ovarian reserve.</a> Reproductive Biomedicine Online. 40 (2), 245-253 (2020).</li>
<li>Haino, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+Follicular+Localization+in+Human+Ovarian+Cortex+for+Vitrification%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Adolescent+and+Young+Adult+Oncology%22%5BJournal%5D)">Determination of Follicular Localization in Human Ovarian Cortex for Vitrification.</a> Journal of Adolescent and Young Adult Oncology. 7 (1), 46-53 (2018).</li>
<li>Baird, D. T., Webb, R., Campbell, B. K., Harkness, L. M., Gosden, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+ovarian+function+in+sheep+after+ovariectomy+and+transplantation+of+autografts+stored+at+-196+C%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Long-term ovarian function in sheep after ovariectomy and transplantation of autografts stored at -196 C.</a> Endocrinology. 140 (1), 462-471 (1999).</li>
<li>Qin, Y., Jiao, X., Simpson, J. L., Chen, Z. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetics+of+primary+ovarian+insufficiency%3A+new+developments+and+opportunities%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction+Update%22%5BJournal%5D)">Genetics of primary ovarian insufficiency: new developments and opportunities.</a> Human Reproduction Update. 21 (6), 787-808 (2015).</li>
<li>Domniz, N., Meirow, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Premature+ovarian+insufficiency+and+autoimmune+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Best+Practice+%26+Research%3A+Clinical+Obstetrics+%26+Gynaecology%22%5BJournal%5D)">Premature ovarian insufficiency and autoimmune diseases.</a> Best Practice & Research: Clinical Obstetrics & Gynaecology. 60, 42-55 (2019).</li>
<li>Laven, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primary+Ovarian+Insufficiency%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Reproductive+Medicine%22%5BJournal%5D)">Primary Ovarian Insufficiency.</a> Seminars in Reproductive Medicine. 34 (4), 230-234 (2016).</li>
<li>Grynberg, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fertility+preservation+in+Turner+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Fertility+and+Sterility%22%5BJournal%5D)">Fertility preservation in Turner syndrome.</a> Fertility and Sterility. 105 (1), 13-19 (2016).</li>
<li>Tomao, F., Spinelli, G. P., Panici, P. B., Frati, L., Tomao, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovarian+function%2C+reproduction+and+strategies+for+fertility+preservation+after+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Reviews+in+Oncology%2FHematology%22%5BJournal%5D)">Ovarian function, reproduction and strategies for fertility preservation after breast cancer.</a> Critical Reviews in Oncology/Hematology. 76 (1), 1-12 (2010).</li>
<li>Kim, S., Lee, Y., Lee, S., Kim, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovarian+tissue+cryopreservation+and+transplantation+in+patients+with+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Obstetrics+%26+Gynecology+Science%22%5BJournal%5D)">Ovarian tissue cryopreservation and transplantation in patients with cancer.</a> Obstetrics & Gynecology Science. 61 (4), 431-442 (2018).</li>
<li>Donnez, J., Dolmans, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovarian+tissue+freezing%3A+current+status%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Obstetrics+and+Gynecology%22%5BJournal%5D)">Ovarian tissue freezing: current status.</a> Current Opinion in Obstetrics and Gynecology. 27 (3), 222-230 (2015).</li>
<li>Wu, R. C., Kuo, P. L., Lin, S. J., Liu, C. H., Tzeng, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((X+chromosome+mosaicism+in+patients+with+recurrent+abortion+or+premature+ovarian+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Formosan+Medical+Association%22%5BJournal%5D)">X chromosome mosaicism in patients with recurrent abortion or premature ovarian failure.</a> Journal of the Formosan Medical Association. 92 (11), 953-956 (1993).</li>
<li>De Munck, N., Vajta, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+and+efficiency+of+oocyte+vitrification%5BTitle%5D)+AND+%22Cryobiology%22%5BJournal%5D)">Safety and efficiency of oocyte vitrification.</a> Cryobiology. 78, 119-127 (2017).</li>
<li>Argyle, C. E., Harper, J. C., Davies, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oocyte+cryopreservation%3A+where+are+we+now%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction+Update%22%5BJournal%5D)">Oocyte cryopreservation: where are we now.</a> Human Reproduction Update. 22 (4), 440-449 (2016).</li>
</ol>

Autorzy potwierdzają, że nie ma dla nich konfliktu interesów.

W tym manuskrypcie pokazaliśmy szczegółowy protokół laboratoryjny dla IVA wolnego od leków. Lekowolne IVA to nowe podejście do leczenia niepłodności u pacjentki z POR ze zmniejszającą się rezerwą jajnikową w celu pobudzenia wzrostu pęcherzyków wtórnych, co skutkuje uzyskaniem bardziej dojrzałych oocytów po stymulacji jajników i zwiększeniem w udanej ciąży20. U 15 pacjentek z POR ze zmniejszającą się rezerwą jajnikową w ten sposób uzyskano jedną ciążę spontaniczną, zapłodnienie in vitro – transfer ...

Funkcja jajników stopniowo pogarsza się wraz ze starzeniem się i niektórymi stanami patofizjologicznymi, w tym nieprawidłowościami kariotypu, chorobami autoimmunologicznymi, chemioterapią i radioterapią oraz operacjami jajników. Zachowanie płodności jest jedną z najlepszych opcji dla niezamężnych kobiet z poważną dysfunkcją jajników, aby zachować ich potencjał do zajścia w ciążę w przyszłości. W celu zachowania płodności obecnie dostępne są dwie metody, głównie w dziedzinie onkopłodności. Kriokonserwacja oocytów jest dobrze ugruntowaną procedurą zachowania płodności i zgłoszono wiele udanych przypadków1,2. Z drugiej strony, kriokonserwacja tkanki jajnika została również opracowana w celu zachowania płodności u pacjentek z rakiem, ale nadal jest to strategia eksperymentalna3,4. W obu metodach do zajścia w ciążę potrzeba wielu dojrzałych oocytów. Ogólnie rzecz biorąc, pacjentki z przedwczesną niewydolnością jajników (POI), u których brak miesiączki pojawia się przed 40 rokiem życia, oraz kobiety w średnim wieku z niską rezerwą jajnikową wykazywały słabą odpowiedź jajników (POR) na stymulację jajników w celu uzyskania dojrzałych oocytów5,6,7. Co więcej, młode pacjentki z małą liczbą pęcherzyków antralnych wykazywały również POR w stosunku do stymulacji jajników7. Pacjentki te mają bardzo ograniczoną liczbę możliwych do pobrania komórek jajowych nawet po prawidłowej hiperstymulacji jajników, co wymaga wielu kosztownych zabiegów, aby zapewnić wystarczającą liczbę oocytów do zajścia w ciążę.
Dawstwo oocytów, a następnie zapłodnienie in vitro (IVF) z nasieniem męża i transferem zarodków (ET) jest jedyną opcją dla tych pacjentów POI i POR, którzy mają trudności z uzyskaniem własnych oocytów8,9,10. Jednak dawstwo oocytów jest skomplikowane ze względu na kwestie etyczne, a także powikłania autoimmunologiczne i ciążowe11,12,13,14. Aby rozwiązać te problemy, pożądane jest rozpoczęcie leczenia niepłodności przy użyciu własnych oocytów pacjentek. Dla pacjentek z POI opracowaliśmy metodę aktywacji in vitro (IVA), aby umożliwić pomyślny wzrost pęcherzyków jajnikowych i wytworzenie dojrzałych oocytów, co prowadzi do wielu ciąż i porodów15. W IVA podzieliliśmy korę jajników po usunięciu jajników pod chirurgią laparoskopową i hodowaliśmy je przez dwa dni, aby aktywować pęcherzyki za pomocą leków stymulujących Akt, a następnie przeprowadziliśmy heterotopowe przeszczepienie z powrotem do sztucznych woreczków wykonanych pod surowicą jajowodów pod drugą operacją laparoskopową15. Procedura ta promowała wzrost pierwotnych, pierwotnych i wtórnych pęcherzyków po fragmentacji kory jajnikowej, aby promować zakłócenie sygnalizacji Hippotam16, a następnie dwudniowa hodowla stymulatorami sygnalizacji Akt17.
W przeciwieństwie do ciężkich przypadków POI, pacjentki POR z obniżoną rezerwą jajnikową mają wiele pęcherzyków wtórnych. Ponieważ samo zakłócenie sygnalizacji Hippo jest skuteczne w promowaniu wtórnego wzrostu pęcherzyków16, niedawno wykazaliśmy udane ciąże i porody u pacjentek z POR przy użyciu bezlekowej procedury IVA obejmującej fragmentację kory mózgowej i przeszczep ortotopowy bez leczenia lekami stymulującymi Akt. Niefarmakologiczna IVA stymuluje wczesne stadium pęcherzyków jajnikowych do rozwoju do stadium pęcherzyka przedantralnego już po jednej operacji i zwiększa liczbę pobranych komórek jajowych do transferu zarodków IVF15,18. Bezlekowe podejście IVA ma kilka zalet w porównaniu z naszym oryginalnym IVA: 1) unikanie potencjalnej utraty pęcherzyków podczas posiewu, 2) minimalizacja inwazyjności i kosztów drugiej operacji, 3) polegające tylko na krótkotrwałym leżeniu w łóżku po operacji oraz 4) możliwość spontanicznej ciąży z powodu przeszczepu ortotopowego. Niedawno opublikowaliśmy artykuł wideo pokazujący procedury chirurgiczne w bezlekowym IVA19 oraz szczegółowe protokoły stymulacji jajników po operacji20. W tym miejscu przedstawiamy szczegółowe informacje na temat metod laboratoryjnych wymaganych do uzyskania IVA bez leków.

<table><tbody><tr><td>4.5 Pojemnik na próbki ONZ</td><td>FALCON</td><td>354013</td><td>Inne produkty mogą być również odpowiednie</td></tr><tr><td>Naczynie 60 mm</td><td>FALCON</td><td>351007</td><td>Inne produkty również mogą być odpowiednie</td></tr><tr><td>Sterylna serweta 50 x 50 cm</td><td>HOGY Medical</td><td>SR-823</td><td>Odpowiedni może być również każdy rodzaj sterylnych produktów</td></tr><tr><td>Pipeta jednorazowa</td><td>FALCON</td><td>357575</td><td>Inne produkty również mogą być odpowiednie</td></tr><tr><td>Cienkie nożyczki, zakrzywione</td><td>WPI</td><td>#14224-G</td><td>Chociaż inne produkty mogą być również odpowiednie, zdecydowanie zalecamy stosowanie tych produktów</td></tr><tr><td>Płyta grzewcza</td><td>TOKAI HIT</td><td>TPiE-SP</td><td>Stosować na sali operacyjnej w celu utrzymania temperatury naczyń zawierających tkankę jajnikową przed przeszczepem Roztwór</td></tr><tr><td>albuminy surowicy ludzkiej</td><td>Irvine Scientific</td><td>9988</td><td>Pożywka do obsługi</td></tr><tr><td>kaniuli</td> <td>IVA z tkanką jajnikaKITAZATO</td><td>446030 IVA-6030E</td><td>Specyficzna kaniula do autoprzeszczepu tkanek</td></tr><tr><td>KAI medical Skalpel jednorazowy</td><td>WPI</td><td>#5 10-A</td><td>Chociaż inne produkty mogą być również odpowiednie, zdecydowanie zalecamy stosowanie tych produktów</td></tr><tr><td>Mikronożyczki, zakrzywione</td><td>WPI</td><td>#503364</td><td>Chociaż inne produkty mogą być również odpowiednie, zdecydowanie zalecamy stosowanie tych produktów</td></tr><tr><td>Zmodyfikowany HTF Medium-HEPES</td><td>Irvine Scientific</td><td>90126</td><td>Podłoże do pracy z tkanką jajnikową</td></tr><tr><td>Sterylna gaza</td><td>Osaki Medical</td><td>15004</td><td>Każdy rodzaj sterylnych produktów może być również odpowiedni</td></tr><tr><td>Pęseta szwajcarska, zakrzywione końcówki</td><td></td> <td>KAI#504505</td><td>Chociaż inne produkty mogą być również odpowiednie, zdecydowanie zalecamy stosowanie tych produktów</td></tr></tbody></table>

zachowanie płodności u pacjentek z ciężką dysfunkcją jajników

Fertility Preservation in Patients with Severe Ovarian Dysfunction

Funkcja jajników stopniowo pogarsza się wraz z wiekiem i w niektórych stanach patofizjologicznych, takich jak nieprawidłowości kariotypu, choroby autoimmunologiczne, chemioterapie i radioterapie, a także operacje jajników. U niezamężnych kobiet z ciężką dysfunkcją jajników zachowanie płodności jest ważne dla przyszłych ciąż. Chociaż kriokonserwacja oocytów jest uznaną metodą zachowania płodności, pacjentki te mogły zachować tylko ograniczoną liczbę oocytów nawet po hiperstymulacji jajników, co prowadziło do powtarzających się stymulacji w celu zapewnienia wystarczającej liczby oocytów, aby zagwarantować przyszłą ciążę. Aby rozwiązać ten problem, opracowaliśmy niedawno bezlekową procedurę aktywacji in vitro (IVA), która umożliwia nam stymulację wczesnych stadiów pęcherzyków jajnikowych do rozwoju do stadium pęcherzyka przedantralnego. Te pęcherzyki przedantralne mogą reagować na unikalny protokół stymulacji gonadotropin, co skutkuje zwiększoną liczbą pobranych oocytów na stymulację jajników w celu kriokonserwacji. Bezlekowy IVA składał się z dostępu chirurgicznego i stymulacji jajników. Usunęliśmy część kory mózgowej z jednego lub obu jajników od pacjentek poddanych operacji laparoskopowej. Tkanki kory jajnikowej zostały pocięte na małe kostki, aby zakłócić szlak sygnałowy hipopotama i stymulować rozwój pęcherzyków we wczesnym stadium. Kostki te zostały przeszczepione ortotropowo do pozostałych jajników, a także pod błoną surowiczą obu jajowodów. Opublikowaliśmy już procedurę chirurgiczną bezlekowego IVA oraz protokół późniejszej stymulacji jajników, ale w niniejszym artykule przedstawiamy szczegóły metod laboratoryjnych wymaganych do uzyskania bezlekowego IVA.

W pierwszej publikacji dotyczącej metody IVA15 kostki korowe jajnika przeszczepialiśmy pojedynczo do miejsc graftingu podczas operacji laparoskopowej (Rysunek 1A). Ze względu na wykorzystanie 100-150 kostek jajnika, przeszczepianie tkanek metodą laparoskopową trwało 3-4 godziny. Ponadto część kostek jajnika ulegała zgubieniu przed przeszczepieniem. Ponieważ kaniula IVA umożliwia jednorazowy transport 20-30 kostek do miejsca graftingu (Rysunek 1B</...

Prezentujemy szczegóły procedur laboratoryjnych dla bezlekowej aktywacji in vitro (IVA) pęcherzyków jajnikowych u pacjentek z ciężką dysfunkcją jajników. Metoda ta może zwiększyć liczbę możliwych do pobrania oocytów na hiperstymulację jajników i korzystnie wpłynąć na zachowanie płodności u tych pacjentek.

Zachowanie płodności u pacjentek z ciężką dysfunkcją jajników

Ovarian function progressively declines during aging and in some pathophysiological conditions including karyotype abnormality, autoimmune diseases, ...

Celem tego filmu jest pokazanie procedury naszego nowego podejścia do pacjentek z dysfunkcją jajników. Funkcja jajników pogarsza się stopniowo wraz ze starzeniem się i niektórymi stanami patofizjologicznymi, w tym nieprawidłowościami kariotypu, chorobami autoimmunologicznymi, chemioterapią i radioterapią oraz operacjami jajników. Większość kobiet w średnim wieku z niską rezerwą jajnikową wykazywała słabą reakcję jajników na stymulację jajników w celu uzyskania dojrzałych komórek jajowych.Ponadto młode pacjentki z małą liczbą pęcherzyków antralnych wykazywały również słabą odpowiedź jajników na stymulację jajników. Zachowanie płodności jest ważne, aby zachować potencjalny OCS na przyszłą ciążę. W celu zachowania płodności ustalono kriokonserwację oocytów.Jednak te pacjentki ze słabą reakcją jajników mogły pobrać bardzo ograniczoną liczbę oocytów nawet po odpowiedniej stymulacji jajników, co prowadziło do konieczności powtarzania kosztownych procedur w celu zapewnienia wystarczającej liczby oocytów, aby zagwarantować jedno dziecko. Aby rozwiązać te problemy, opracowaliśmy niedawno procedurę aktywacji in vitro, IVA, która umożliwia nam stymulację wczesnego etapu pęcherzyków jajnikowych do stadium pęcherzyka przedantralnego. Oryginalna procedura IVA może sprzyjać pierwotnemu, pierwotnemu i wtórnemu wzrostowi pęcherzyków jajnikowych poprzez fragmentację kory jajników, co prowadzi do zakłócenia sygnalizacji hipopotama.Następnie następuje dwudniowa hodowla stymulatorem sygnalizacji Akt. Ta procedura jest odpowiednia dla pacjentów z UM z niewielką liczbą pęcherzyków resztkowych. Jednak ta procedura jest nadmiernym leczeniem dla pacjentów, którzy mają wiele pęcherzyków wtórnych.Dla pacjentów, którzy mają pewne resztkowe pęcherzyki wtórne, opracowaliśmy metodę zwaną IVA bez leków i już przetestowaliśmy możliwość promowania wzrostu pęcherzyków wtórnych poprzez zakłócanie szlaku sygnałowego hipopotama. Mieliśmy również kilka udanych przypadków porodu za pomocą IVA bez leków. Opublikowaliśmy już procedurę chirurgiczną IVA bez leku oraz protokół następującej stymulacji jajników.W tym filmie przedstawiamy szczegółowe informacje na temat metod laboratoryjnych wymaganych do uzyskania IVA bez leków. Rekrutację pacjentów do bezlekowego IVA przeprowadziliśmy w oparciu o kryteria bolońskie. Pacjenci mogą mieć wiele pęcherzyków wtórnych.Początkowo część kory została usunięta z jednego lub obu jajników za pomocą laparoskopii. Pacjentki z POR to te, które miały jajniki średniej wielkości. U większości pacjentek pobrano tylko część tkanek korowych z jajników po jednej lub obu stronach.Wyekstrahowane krytyczne tkanki natychmiast przeniesiono do szalki hodowlanej zawierającej pożywkę hodowlaną z buforem HEPES i rozcięto tę małą tkankę na małe kostki w celu zakłócenia sygnalizacji hipopotama. Szczegóły procedury zostaną pokazane w tym filmie. Szlak sygnałowy hipopotama jest niezbędny do utrzymania optymalnej wielkości narządu.Szlak ten składa się z kilku negatywnych regulatorów wzrostu. Gdy sygnalizacja hipopotama zostanie zakłócona, poziom fosforylacji YAP, jednego z negatywnych regulatorów wzrostu działających w kaskadzie kinazy, jest obniżony, a poziomy jądrowe YAP wzrastają. YAP działa w porozumieniu z czynnikami transkrypcyjnymi TEAD w celu zwiększenia czynnika wzrostu CCN.Z drugiej strony, polimeryzacja aktyny o działaniu globularnym, G-aktynie, do postaci nitkowatej, F-aktyny, jest ważna dla utrzymania kształtu komórki i lokomocji. Wcześniej zgłaszane indukcja tworzenia F-aktyny zakłóca sygnalizację hipopotama i indukuje przerost w ludzkich komórkach HeLa. Wcześniej informowaliśmy, że fragmentacja jajników zwiększa tworzenie F-aktyny i prowadzi do obniżenia poziomu fosforylacji YAP.Prowadzi to do zwiększonej ekspresji czynnika wzrostu CCN. Po wycięciu kostki te są przeszczepiane do pozostałego jajnika. Procedura ta może sprzyjać resztkowemu wzrostowi pęcherzyków wtórnych i prowadzić do zwiększenia liczby dojrzałych komórek jajowych.IVA bez leków składa się z czterech kroków. Opublikowaliśmy już procedurę chirurgiczną dla IVA bez leków. Proszę zapoznać się z tą literaturą, aby uzyskać informacje na temat ekstrakcji kory jajnikowej i automatycznego przeszczepu.Poniżej przedstawiamy szczegółowe procedury metod laboratoryjnych wymaganych do uzyskania IVA bez leków. W kroku pierwszym pokazujemy, jak przebiega fragmentacja kory jajnikowej. W kroku drugim pokazujemy, jak załadować kostki kory jajnika do urządzenia do przeszczepu, Tutaj pokażę fragmentację kory jajników.Badanie to zostało zatwierdzone przez komisję etyczną naszego instytutu, a wszystkie procedury zostały przeprowadzone zgodnie z Kodeksem Etycznym Światowego Stowarzyszenia Lekarzy. Fragmentacja kory jajnikowej. Następujące narzędzia wymagane do tego kroku: naczynie, sterylna gaza, cienkie nożyczki, cienkie kleszczyki i skalpel.Zwykle używamy tego typu naczynia i sterylnej gazy, ale inne produkty, takie jak plastikowa szalka Petriego, szklane naczynie i tak dalej, mogą być również odpowiednie do tej procedury, a każdy rodzaj sterylnej gazy jest również odpowiedni. Zdecydowanie zalecamy jednak stosowanie tego kształtu kleszczy i skalpela. Ponadto użyj płyty grzejnej do utrzymania temperatury naczyń zawierających chusteczki Umieść pod sterylnym serweratem.Tkanki korowe są natychmiast przenoszone do naczynia zawierającego mHTF. Zrób zdjęcie z imieniem i nazwiskiem pacjenta w celu skorelowania go z danymi pacjenta. Zapisz rozmiar, grubość i stan tkanki.Usuń resztki tkanki rdzenia. Przed fragmentacją tkanki należy usunąć tkankę rdzenia. Połóż korę na sterylnej gazie.Jak pokazano na filmie, gazę zwilża się podłożem. Podczas tej procedury nałóż pożywkę jednorazową pipetą, zanim powierzchnia kory zostanie wysuszona. Usuń resztki tkanek mikronożyczkami, aż grubość osiągnie jeden do dwóch milimetrów.U pacjentów z POR pęcherzyki wtórne znajdują się głębiej niż jeden milimetr od powierzchni kory, więc nie należy tworzyć tkanek o grubości mniejszej niż jeden milimetr. Przetnij jedną stronę kory każdej tkanki na pasek o wymiarach jeden po drugim na pięć milimetrów do analizy histologicznej w celu określenia obecności pozostałych pęcherzyków. Umieść ten pasek w 1,5 mililitrowej probówce z pożywką hodowlaną i utrzymuj w temperaturze czterech stopni Celsjusza do momentu utrwalenia.Przygotowanie kostek kory jajnikowej. Po usunięciu tkanki rdzenia kora jajnika ulega fragmentacji w celu zakłócenia sygnalizacji hipopotama. Najpierw pokrój korę na paski jeden po drugim na 10 milimetrów za pomocą skalpela.Następnie pokrój te paski w jedną milimetrową kostkę w kostkę. W podłożu tkanka jest śliska i trudna do cięcia. Aby ułatwić cięcie, odetnij paski, naciskając skalpel, a nie ciągnąc go.Po pokrojeniu policz liczbę kostek i przygotuj automatyczne szczepienie. Aby uniknąć zmian ciśnienia osmotycznego w pożywce, należy dodać pożywkę z umiarem przed automatycznym przeszczepem tkanki. W przypadku automatycznego przeszczepu jajników użycie urządzenia w kształcie kaniuli pozwala na łatwiejsze ładowanie.Ten krok składa się z dwóch kroków. Wcześniej fragmenty jajników przeszczepiano jeden po drugim za pomocą kleszczy pod laparoskopią. Jednak zakończenie operacji zajęło około trzech do czterech godzin.W tej procedurze używamy urządzenia w kształcie kaniuli wykonanego z wewnętrznej strzykawki i zewnętrznego cylindra. Jest to prosty kształt i lekkość. Ponadto końcówka tego urządzenia ma okrągły kształt.Nie ma ostrych końcówek, co pozwala uniknąć uszkodzenia miejsca przeszczepu. Korzystanie z tego typu urządzenia pozwala na sprowadzenie jednorazowo do miejsca implantacji od 20 do 30 kostek. Prowadzi to do efektywnego przeszczepu i skrócenia czasu operacji.Ładowanie fragmentów kory jajnikowej. Przygotowanie kaniuli IVA. Przygotuj kaniulę IVA i umyj to urządzenie w mHTF.Powtórzyć kilkakrotnie zasysanie i wyładowywanie pożywki. Napełnij końcówkę kangurki, zasysając około 100 mikrolitrów pożywki. Ma to na celu uniknięcie wyciągania się kostek podczas ładowania fragmentów tkanki.Ładowanie kostek korowych. Wybierz kostkę za pomocą cienkich kleszczy i włóż ją do końcówki kaniuli. Liczba automatycznie przeszczepionych kostek zależy od wielkości miejsca przeszczepu.Powtarzaj ładowanie kostek jedna po drugiej, aż osiągniesz liczbę docelową. Po załadowaniu kostek ostrożnie przekaż kaniulę chirurgowi. Jeśli miejsce szczepienia nie jest gotowe, część kanciastka, która zawiera kostki jajnika, należy trzymać palcami, aby uniknąć spadku temperatury kostek.Informowaliśmy już o wynikach klinicznych IVA bez leków. Prosimy o zapoznanie się z opublikowanym artykułem na temat wyników klinicznych. Ten protokół laboratoryjny wymagał od 30 do 50 minut dla jednego pacjenta.Średni czas wynosi od 10 do 20 minut w przypadku fragmentacji kory jajnika i od 20 do 30 minut w przypadku ładowania tych fragmentów do kaniuli IVA. Zależy to od wielkości tkanki, ale prawie wszyscy pacjenci mogą zostać wykończeni w tym średnim czasie. Wnioski. Lekologiczne IVA to nowe podejście do leczenia niepłodności u pacjentek z POR ze zmniejszającą się rezerwą jajnikową.Ten protokół laboratoryjny prowadzi do skrócenia zarówno czasu potrzebnego na operację, jak i utraty fragmentów podczas przeszczepu. Laboratoryjna technika bezlekowego IVA może stać się podstawą przyszłego zastosowania hodowli tkanek jajnikowych w celu uzyskania dojrzałych oocytów bez przeszczepiania.

fertility-preservation-in-patients-with-severe-ovarian-dysfunction

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Kriokonserwacja oocytów jest uznawana przez kilka międzynarodowych towarzystw naukowych za złoty standard zachowania płodności u kobiet po okresie dojrzewania. Odpowiednie strategie kliniczne i laboratoryjne zapewniają maksymalną skuteczność, efektywność i bezpieczeństwo zabiegów zachowujących płodność.

Zachowanie płodności poprzez witryfikację oocytów: perspektywy kliniczne i laboratoryjne

Dedykowany zespół może zaoferować pacjentkom Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser możliwość przeprowadzenia kontrolowanej stymulacji jajników i kriokonserwacji oocytów podczas laparoskopowej plastyki pochwy.

Laparoskopowe pobieranie komórek jajowych i kriokonserwacja podczas waginoplastyki w leczeniu zespołu Mayera-Rokitansky'ego-Kustera-Hausera

Obecny protokół opisuje metodę oceny rezerwy jajnikowej u pacjentek poniżej 25 roku życia, które wymagają zachowania płodności poprzez krioprezerwację tkanki jajnika. Metoda ta obejmuje: (1) ocenę histologiczną rezerwy jajnikowej w próbkach korowych, (2) porównanie z referencyjnym zbiorem danych oraz (3) obliczenie wskaźników Z.

Z-score do oceny rezerwy jajnikowej u młodych pacjentek poddawanych zabiegowi zachowania płodności

Przedstawiono protokół witryfikacji tkanki jajnikowej, jako alternatywną metodę kriokonserwacji do powszechnie stosowanego protokołu powolnego zamrażania.

Witryfikacja tkanki kory jajnika w celu uzyskania szklistego stanu agregacji

Protokół ten określa ustandaryzowane metody izolacji i przetwarzania płynu pęcherzykowego, komórek somatycznych oraz niedojrzałych oocytów z procedur IVF, umożliwiając wysokiej jakości analizy molekularne i komórkowe. Te podejścia wspierają badania translacyjne dotyczące płodności, starzenia się reprodukcyjnego i dysfunkcji jajników, wykorzystując materiały zwykle odrzucane w opiece klinicznej.

Pobieranie ludzkiego płynu pęcherzykowego, komórek somatycznych mieszków mieszkowych oraz niedojrzałych oocytów od osób poddawanych zapłodnieniu in vitro

Opisano model kontuzji ciężkiego uszkodzenia rdzenia kręgowego. Opisano szczegółowe etapy przedoperacyjne, operacyjne i pooperacyjne w celu uzyskania spójnego modelu.

Model stłuczenia ciężkiego uszkodzenia rdzenia kręgowego u szczurów

Osoby z chromaniem przestankowym wykazują słabą równowagę w porównaniu do zdrowych osób z grupy kontrolnej. Komputerowa posturografia dynamiczna jest obiektywną metodą pomiaru reakcji posturalnych danej osoby na zaburzenia równowagi. Zapewnia to obiektywne odzwierciedlenie zdolności osoby do reagowania na sytuacje, w których bodźce sensoryczne ulegają zmianie i pojawiają się nieoczekiwane perturbacje.

Komputerowa posturografia dynamiczna do oceny kontroli postawy u pacjentów z przerywanym kladykacją

Stopień dysfunkcji naczyń krwionośnych i przyczyniających się do nich mechanizmów fizjologicznych można ocenić u pacjentów z przewlekłą chorobą nerek, mierząc rozszerzenie zależne od przepływu tętnicy ramiennej, prędkość fali tętna aorty i ekspresję białka w komórkach śródbłonka naczyniowego.

Ocena funkcji naczyń krwionośnych u pacjentów z przewlekłą chorobą nerek

Tutaj prezentujemy protokół do przeprowadzenia wewnątrztorebkowej procedury rotary-cut (IRCP), zmodyfikowanej laparoskopowej miomektomii wewnątrztorebkowej, która sprzyja zachowaniu płodności.

Wprowadzenie wewnątrztorebkowych procedur rotary-cut (IRCP): zmodyfikowane procedury histeromyomektomii ułatwiające zachowanie płodności

[18F]-fluorodeoksyglukoza (FDG) pozytonowa tomografia emisyjna-tomografia komputerowa jest przydatna do badania metabolizmu glukozy związanego z funkcjonowaniem mózgu. W tym miejscu przedstawiamy protokół konfiguracji znacznika [18F] FDG i półilościowej oceny analizy regionu zainteresowania dla docelowych obszarów mózgu związanych z objawami klinicznymi u pacjentów z ciężkim urazowym uszkodzeniem mózgu.

Ocena półilościowa przy użyciu znacznika FDG [18F] u pacjentów z ciężkim uszkodzeniem mózgu

Poznaj metodę bezlekowej aktywacji in vitro (IVA) jajników u pacjentek z ciężką dysfunkcją jajników. Technika zwiększa liczbę pobieranych komórek jajowych, poprawiając skuteczność zachowania płodności.

Zachowanie płodności u pacjentek z ciężką dysfunkcją jajników

Przeglądaj więcej filmów