Name: Monitorowanie cyklu rujowego gryzoni za pomocą płukania pochwy: nie ma czegoś takiego jak normalny cykl (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-08-30T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 5 s
Description: Poznaj metodę płukania pochwy do monitorowania cyklu rujowego u szczurów samic. Ta technika umożliwia charakterystykę komórkową i zastosowanie w badaniach kardiologicznych oraz farmakologicznych.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

To badanie zostało przeprowadzone dzięki finansowanej przez NIH współpracy między Centrum Badań nad Urazami Mózgu Uniwersytetu Kalifornijskiego w Los Angeles (BIRC).

Autorzy nie mają do ujawnienia żadnych konfliktów interesów.

Kluczowe kroki i ważne kwestie do rozważenia Należy położyć nacisk na pewne krytyczne etapy w dostarczonym protokole, zwłaszcza w zakresie pobierania komórek pochwy. Podczas ekstrakcji płynu z pochwy zapewnienie odpowiedniego kąta i głębokości wprowadzenia strzykawki jest kluczem do uzyskania zadowalających rezultatów i ostatecznie zapobieżenia podrażnieniu, urazom lub stymulacji szyjki macicy zwierzęcia. Stymulacja szyjki macicy może być jednym ze źródeł indukcji ciąży rzekomej, na co wskazuje 12-1...

Nowatorskie wkłady 
Cykl rujowy gryzoni został zidentyfikowany jako istotny wskaźnik dobrego samopoczucia. Jednak nieświadome uprzedzenia badaczy i niedokładne interpretacje dotyczące kobiecego ciała utrudniają pracę społeczności naukowej. Już sama etymologia słowa "rujowy" sugeruje poczucie niższości i negatywności. Eurypides używał tego terminu do opisania "szaleństwa" lub szaleństwa, Homer do opisania paniki, a Platon do opisania irracjonalnego popędu. Badanie to podkreśla, w jaki sposób te pierwotne perspektywy wpływają na obecną społeczność naukową i rozwiązują te problemy za pomocą nowego paradygmatu mozaiki – zaktualizowanej kombinacji wcześniej badanych metod, rozszerzonej w celu uzyskania bardziej kompleksowego podejścia.
Po pierwsze, konieczne jest badanie i użycie tej techniki, ponieważ nie ma ustandaryzowanej i kompleksowej techniki monitorowania, a praktyki interpretacji danych mogą być niejasne. Po drugie, chociaż charakterystyka cyklu rujowego zależy od poszczególnych badanych szczurów, często jest ona uniwersalizowana. Po trzecie, podczas gdy cykle hormonalne są rutynowymi i korzystnymi procesami, są one otoczone niebezpiecznym stygmatyzacją omówioną w sekcji "Tłumaczenie na ludzi". Niniejsze badanie ma na celu rozwiązanie tych trzech problemów na trzy sposoby – (A) poprzez opisanie dogłębnej techniki monitorowania cyklu rujowego i wyjaśnienie, w jaki sposób można interpretować wyniki, (B) poprzez nakreślenie metod, które utrzymują integralność i indywidualność każdego cyklu, oraz (C) poprzez zwrócenie uwagi na błędne przekonania, które utrwalają nieuzasadnione praktyki.
To badanie jest również wyjątkowe, ponieważ skupia się na dorastających szczurach, okresie naznaczonym kluczowymi zmianami rozwojowymi, które rzucają światło na różne behawioralne, anatomiczne i fizjologiczne objawy w wieku dorosłym1. Zbudowanie ustandaryzowanego projektu eksperymentalnego do monitorowania cykli hormonalnych w niedostatecznie zbadanej populacji, przy jednoczesnej dekonstrukcji powszechnych uprzedzeń, pozwoli na opracowanie wiarygodnych i ważnych korelacji hormonalnych2,3,4 oraz określenie zakłóceń cyklu zależnych od stanu5,6,7,8,9,10. Ostatecznie te nowości służą rozszerzeniu kryteriów diagnostycznych, leczenia i interwencji w różnych problemach zdrowotnych.
Podstawowe definicje i zastosowania 
Cykl rujowy jest zbiorem dynamicznych procesów fizjologicznych, które zachodzą w odpowiedzi na trzy oscylujące żeńskie hormony steroidowe: estradiol, hormon leuteinizujący (LH) i progesteron (<silna klasa = "xfig">Rysunek 1A,B). Interakcje między układem hormonalnym a ośrodkowym układem nerwowym regulują cykl, który najczęściej trwa 4-5 dni i powtarza się od początku dojrzewania płciowego do starzenia się reprodukcyjnego i/lub ustania. Jest podzielony na osobne kategorie w zależności od poziomu hormonów - najczęściej na 4 etapy diestrus (DIE), proestrus (PRO), estrus (EST) i metestrus (MET), które postępują w sposób okrężny. Liczba podziałów może wynosić od 3 etapów11 do 13 etapów12, w zależności od charakteru badania13. Mniejsza liczba okręgów często nie obejmuje MET jako etapu i klasyfikuje go jako krótkoterminowy okres przejściowy. Wyższa liczba zazwyczaj zawiera podsekcje, które pozwalają na bliższe przyjrzenie się zjawiskom, takim jak rozwój guza lub spontaniczna ciąża rzekoma, fizjologiczny stan ciąży bez implantacji zarodka12,14,15.
W tym badaniu, etapy zostały zidentyfikowane na podstawie komponentów kanału pochwy, nazwanych 3 kategoriami determinantów - obecny typ komórek - układ komórek i ilość komórek (<silna klasa="xfig">Rysunek 2A-D). Chociaż stan płynu z pochwy nie był monitorowany w tym badaniu, zaleca się włączenie go jako czwartego składnika kategoryzacji. Więcej informacji na temat badania płynu dopochwowego można znaleźć na liście referencyjnej16. Składniki kategoryzujące można badać poprzez ekstrakcję komórek za pomocą płukania pochwy, co jest podstawową techniką zalecaną we współczesnym monitorowaniu cyklu rujowego. Chociaż dogłębne procesy fizjologiczne na każdym etapie wykraczają poza zakres tego badania, więcej informacji można znaleźć w literaturze17.
Wykorzystanie i ciągły rozwój tej techniki monitorowania cyklu rujowego jest zakorzenione w powiązaniach między hormonami steroidowymi płci a funkcjonowaniem układów organizmu, takich jak układ sercowo-naczyniowy18, endocrine system8, oraz centralny układ nerwowy19,20,21. Jednocześnie monitorowanie cyklu rujowego nie zawsze jest konieczne, gdy w grę wchodzą samice gryzoni22,23,24,25. Ważne jest raczej, aby najpierw rozważyć, czy różnice między płciami zostały zgłoszone w konkretnym obszarze badania, które można dokładniej zbadać w opublikowanych przeglądach22,23. Chociaż monitorowanie cyklu rujowego jest niezbędne w szerokim spektrum badań naukowych, nie powinno być postrzegane jako przeszkoda w włączaniu samic gryzoni do eksperymentów. Chociaż ta technika może wydawać się skomplikowana i czasochłonna, sama procedura może zająć mniej niż 15 minut, w zależności od badacza, i jest opłacalna. Ogólnie rzecz biorąc, włączenie samic gryzoni do badań naukowych jest korzystne dla zrozumienia układów organizmu, różnych stanów i patologii oraz ogólnego samopoczucia, ponieważ zmiany te opierają się głównie na szablonie męskiego ciała.
Uniwersalne parametry i naturalne zmienności u gryzoni<br />
Ustalenie zakresów dla aspektów postrzeganych jako "typowe" jest niezbędne do zdefiniowania standardowych wzorców cykli, ustawienia parametrów do celów porównawczych i analitycznych oraz wykrywania nieprawidłowości i wartości odstających. Jednocześnie ważne jest również, aby zdać sobie sprawę, że cykl każdego szczura jest unikalny i spodziewane są odchylenia w zależności od szczepu zwierzęcia, procesów fizjologicznych i warunków środowiskowych. W rzeczywistości jednym z najbardziej "normalnych" aspektów cyklu rujowego jest zmienność. Jest to widoczne w całkowitej długości cyklu, z zakresem 3-38 dni26,27; Wiek dojrzałości płciowej, który może wynosić od 32 do 34 dni do wielu tygodni28,29,30; Co jest uważane za acykliczne11, oraz wzorce determinantów kategoryzujących11,13. Ogólnie rzecz biorąc, nie ma uniwersalnego szablonu dla cyklu rujowego, a przełożenie go zarówno na społeczność naukową, jak i na ogół społeczeństwa jest ważną częścią procesu eksperymentalnego.
Eksperymentalne punkty czasowe i wiek rozwojowy 
Rozpoznanie tej zasady zmienności pomaga w zbudowaniu wiarygodnego i ważnego projektu eksperymentalnego. Na przykład rozpoczęcie monitorowania cykli rujowych zależy od anatomicznego i fizjologicznego rozwoju szczurów, który różni się w zależności od czynników środowiskowych i fizjologicznych. Monitorowanie nie może się rozpocząć, dopóki nie rozwinie się otwór pochwy (VO), który jest zewnętrznym otworem pochwy otoczonym sromem, który prowadzi do wewnętrznej części kanału pochwy (<silna klasa = "xfig" >Rysunek 3A-D). Podczas gdy dubbing często w pełni rozwija się w wieku od 32 do 34 dni, pozostaje zindywidualizowany dla każdego tematu, a wiele informacji na temat tego procesu pozostaje nieznanych. Ten otwór został wykorzystany do zidentyfikowania początku dojrzewania płciowego, które zostało powiązane ze wzrostem estradiolu31, dojrzewaniem osi podwzgórze-przysadka-jajnik32, oraz pierwszą owulacją u szczurów17, 33,34,35. Jednak ostatnie publikacje wykazały, że jest to tylko pośredni marker rozwoju reprodukcyjnego, ponieważ może zostać odłączony od zdarzeń hormonalnych i rozwojowych w niekorzystnym środowisku31 i może reprezentować zmiany w poziomie estradiolu, a nie dojrzewanie płciowe33. Dlatego zaleca się, aby nie polegać wyłącznie na VO w celu określenia wieku rozwojowego i jako kwalifikatora do monitorowania cyklu rujowego36, ale także wykorzystać pojawienie się pierwszego etapu EST i rogowacenie komórek nabłonka30, aby zaznaczyć początek dojrzewania płciowego.
Masa ciała jest wyraźnie skorelowana z wiekiem rozwojowym w okresie dojrzewania u gryzoni30,37 i dlatego może również pomóc w określeniu wieku rozwojowego w tym okresie. Proponowane mechanizmy związane z tym zjawiskiem obejmują stymulację hormonów niezbędnych do rozwoju reprodukcyjnego, takich jak hormon wzrostu, oraz hamowanie osi podwzgórze-przysadka nadnerczy (HPA) przez regulator apetytu, leptyna30. Nie zaleca się jednak stosowania tej miary jako jedynego wskaźnika wieku rozwojowego ze względu na dużą rozbieżność obserwowaną między szczurami między gatunkami i dostawcami38. Zmienność obserwowana w rozwoju VO i masy ciała ilustruje znaczenie tej koncepcji w całym procesie eksperymentalnym.
Tłumaczenie dla ludzi: konteksty kulturowe i naukowe 
Relacja translacyjna w badaniach reprodukcyjnych między zwierzętami a ludźmi jest dwukierunkowa. Wyniki badań na zwierzętach wpływają na to, jak procesy ludzkie są oceniane, podchodzimy do nich i analizujemy39. Postrzeganie ludzkiego układu rozrodczego i związanych z nim procesów wpływa na to, jak badane są zwierzęta. W rzeczywistości jednym z najgłośniejszych wskazań do dalszych badań w tej dziedzinie są tendencyjne przekonania społeczno-kulturowe związane z cyklami hormonalnymi, które wpływają na proces naukowy. Wiele z tych konwencji wywodzi się z ogólnej kulturowej niechęci do omawiania menstruacji, co doprowadziło do luki w danych w dobrze udokumentowanej wiedzy40,41. Ma to spektrum konsekwencji, od drobnych do śmiertelnych - od wysokości półki i rozmiaru smartfona po dopasowanie policyjnej kamizelki kuloodpornej i nietrafione diagnozy raka42.
Opis menstruacji jako niehigienicznej, destrukcyjnej i toksycznej - widoczny w szanowanych tekstach, mediach, słownikach i naukach medycznych - jest zachowany w publikacjach naukowych. Dzieje się tak poprzez niedokładne i tendencyjne opisy cykli hormonalnych, izolację układu rozrodczego od jego neuroendokrynnych odpowiedników i wpływów środowiskowych oraz redukcjonistyczną perspektywę zakończenia cyklu jako "niepowodzenia w poczęciu"43,44. Prowadzi to do tworzenia nierzetelnych praktyk eksperymentalnych, takich jak pomijanie zmiennych zewnętrznych, które wpływają na cykle hormonalne, określanie początku i końca wyłącznie na podstawie rozwoju anatomicznego oraz mierzenie postępu cyklu w sposób liniowy, a nie kołowy. Pomimo bezpośredniej korelacji między czynnikami społeczno-kulturowymi a konsekwencjami biologicznymi, nie jest ona często rozważana w literaturze naukowej. Dzięki przeglądowi bardziej holistycznych publikacji43,44,45, badacze mogą zdekonstruować te stygmaty i stworzyć bardziej wiarygodne i ważne projekty eksperymentalne.

<table><tbody><tr><td>Mikroskop studencki AmScope 40X-1000X LED + kamera USB 5MP</td> Numer części <td>AmScope</td><td>: M150C-E5 EAN: 0608729747796 Numer modelu: M150C-E5</td><td>https://www.amazon.com/AmScope-40X-1000X-Student-Microscope-Camera/dp/B00O9GNOTA/ref=sr_1_15?crid=2W9CHTG8YSOTV&amp; słowa kluczowe=USB+kamera+dla+mikroskopu& Amp; qid=1572477663& Amp; s=przemysłowy & Amp; sprefix=USB+kamera+dla+mikrofon%2Cindustrial%2C177& Amp; sr=1-15</td></tr><tr><td>Zestaw igieł BD PrecisionGlide, 20G x 1, krótki skos</td><td>Fischer Scientific</td><td>14-815-526</td><td></td></tr><tr><td>https://www.fishersci.com/shop/products/bd-precisionglide-single-use-needles-short-bevel-regular-wall-4/14815526#?keyword=BD%20PrecisionGlide%20Needle%20Pack,%2020G%20x%201 Łóżko O Cob 1/8</td><td>NEWCO</td><td>93009</td><td>https://andersonslabbedding.com/cob-products/bed-ocobs-8b/</td></tr><tr><td>Korning i handel; Zwykłe szkiełka mikroskopowe Zwykłe szkło wodno-białe</td><td>Fischer</td><td>Scientific 12-553-7A</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/corning-plain-microscope-slides-microscope-slides-75-x-25mm/125537a</td></tr><tr><td>Corning&trade; Prostokątne okulary korekcyjne</td><td>Fischer Scientific</td><td>12-553-464</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/corning-square-rectangular-cover-glasses-rectangle-no-1-thickness-0-13-0-17mm-size-24-x-50mm/12553464#?keyword=true</td></tr><tr><td>Kimberly-Clark Professional&trade; Nauka i handel Kimtech; Kimwipes&handel; Wycieraczki Delicate Task 1-warstwowe</td><td>Fischer Scientific</td><td>06-666</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/kimberly-clark-kimtech-science-kimwipes-delicate-task-wipers-7/p-211240?crossRef=kimwipes</td></tr><tr><td>Labdiet Rodent Lab Chow 50lb, 15001&nbsp;</td>Liniowa żarówka LED <td>NEWCO Specialty i LabDiet</td><td>5012</td><td>https://www.labdiet.com/products/standarddiets/rodents/index.html</td></tr><tr><td>, UL Typ A, T8, Medium Bi-Pin (G13), Temperatura barwowa 4,000 K, Lumeny 2550 lm</td><td>Grainger</td><td>36UX10</td><td>https://www.grainger.com/product/36UX10?gclid=CjwKCAjw_ LL2BRAkEiwAv2Y3SW1WdNdkf7 zdIxoT9R6n2DGnrToJHjv-pwCTca4ahQyExrrtWvbgwRoCi4 cQAvD_BwE& s_kwcid=AL!2966!3!335676016696 !p!! g!! led18et8%2F4%2F840& ef_id= CjwKCAjw_LL2BRAkEiwAv2Y3SW 1WdNdkf7zdIxoT9R6n2DGnrToJ Hjv-pwCTca4ahQyExrrtWvbgwRo Ci4cQAvD_BwE:G:s& s_kwcid=AL!2966!3!335676016696!p!! g!! led18et8%2F4%2F840& cm_mmc= PPC: +Google+PPC</td></tr><tr><td>Worki do wstrzykiwań chlorku sodu, 0,9%</td> <td>ABB079830939 bezpieczeństwa na żywo</td><td></td><td>https://www.liveactionsafety.com/injection-iv-solution-9-sodium-chloride-1000ml-bags/</td></tr> <tr><td>Strzykawka sterylna 1ml&nbsp; z końcówką Luer Slip - 100 strzykawek od BH</td><td>Supplies BH Supplies</td><td>ASIN: B07BQDRDC2 UPC: 638632928821</td><td>https://www.amazon.com/1ml-Syringe-Sterile-Luer-Slip/dp/B07BQDRDC2/ref=sr_1_1_sspa?crid=13S8EGEUK90G7&amp; słowa kluczowe=1ml+sterylne+strzykawka&; Amp; qid= 1572478649& Amp; s=przemysłowy & Amp; sprefix=1+ml+steri%2Cindustrial%2C187& Amp; sr=1-1-spons& Amp; psc=1& Amp; spLa= ZW5jcnlwdGVkUXVhbGlmaWVy PUEyRlo4NFdZWkJLWkxGJm VuY3J5cHRlZElkPUEwMDEzODQ yMjNWNzdWM0hTNzVBRCZlbmNy eXB0ZWRBZElkPUEwNDI3NzAzM< (br/> 0E5SzVKMkxaQVc2JndpZGdldE5h bWU9c3BfYXRmJmFjdGlvbj1jbGlja 1JlZGlyZWN0JmRvTm90TG9nQ2 xpY2s9dHJ1ZQ==</td></tr> <tr><td>Pokrywy druciane i podłogi Mysz Pokrywa z drutu ciążowegoUżywany z klatką dla szczurów (10 "X 19" x 8 "H) Całkowity wymiar</td><td>Allentown</td><td>LV40326013</td><td>https://www.labx.com/item/wire-lids-and-floors-mouse-maternity-wire-bar-lidused/LV40326013#description</td></tr><tr><td>Ultra lekka chusteczka higieniczno-plastikowa 17 'x 24' Jednorazowy podkład</td><td>Medline</td><td>EAN: 0480196288558 &nbsp; Globalny numer identyfikacyjny handlu: 40080196288558</td><td>https://www.amazon.com/Medline-Industries-MSC281224C-Lightweight-Disposable/dp/B00A2G67YU/ref=sr_1_4?keywords=medline+industries+surgical+pads&amp;qid=1572475853&amp; sr=8-4</td></tr></tbody></table>

monitorowanie cyklu rujowego gryzoni za pomocą płukania pochwy: nie ma czegoś takiego jak normalny cykl

Rodent Estrous Cycle Monitoring Utilizing Vaginal Lavage: No Such Thing As a Normal Cycle

Obecna metodologia ustanawia powtarzalne, ustandaryzowane i efektywne kosztowo podejście do monitorowania cyklu rujowego u dorastających samic szczurów Sprague Dawley (SD). Badanie to pokazuje złożoność cykli hormonalnych i szerokie spektrum wiedzy wymagane do skonstruowania wiarygodnej i ważnej techniki monitorowania. Poprzez dogłębną analizę głównego projektu eksperymentalnego i elementów proceduralnych, ten opis cyklu i jego podstawowych zasad zapewnia ramy dla dalszego zrozumienia i dekonstruuje błędne przekonania dotyczące przyszłej replikacji.
Wraz z zarysem procesu pobierania próbek z wykorzystaniem płukania pochwy, procedura opisuje mechanizm kategoryzacji danych do czterostopniowego modelu proestrus, estrus, metestrus i diestrus. Etapy te charakteryzują się nowym, proponowanym podejściem, wykorzystującym 4 kategoryzujące determinanty stanu płynu pochwowego, obecnego typu komórek (komórek), rozmieszczenia komórek i ilości komórek w momencie pobierania. Różnice poszczególnych etapów, korzystne i niekorzystne próby, rozróżnienie między cyklicznością a acyklicznością oraz graficzne przedstawienia zebranych komponentów kategoryzujących są prezentowane wraz z efektywnymi praktykami interpretacyjnymi i organizacyjnymi danych. Ogólnie rzecz biorąc, narzędzia te po raz pierwszy pozwalają na publikację wymiernych zakresów danych, co prowadzi do standaryzacji czynników kategoryzacji podczas replikacji.

Obecne dane odzwierciedlają wyniki uzyskane u samic szczurów SD z Międzynarodowego Programu Standaryzacji Genetycznej (IGS) w obecności samców szczurów SD. Zwierzęta te znajdowały się w laboratoriach Pepperdine University oraz UCLA w ramach wspólnego badania. Rysunek 5 przedstawia liczne warianty 4 etapów cyklu. Rysunek 5A1 został zidentyfikowany jako próbka z fazy diestrus z obecnością kilku typów komórek. Przykład ten pokazuje, że próbki z wię...

To badanie szczegółowo opisuje kluczowe czynniki, które należy wziąć pod uwagę w eksperymentalnych projektach z udziałem samic szczurów. W szerszym ujęciu dane te służą zmniejszeniu stygmatyzacji i pomagają w opracowaniu bardziej wszechstronnych narzędzi diagnostycznych i interwencyjnych.

Monitorowanie cyklu rujowego gryzoni za pomocą płukania pochwy: nie ma czegoś takiego jak normalny cykl

The current methodology establishes a reproducible, standardized, and cost-effective approach to monitoring the estrous cycle of female Sprague Dawley ...

Protokół ten jest istotny, ponieważ zapewnia zarówno kompleksową, jak i tanią technikę efektywną czasowo. Odpowiada na kluczowe elementy badań translacyjnych i kategoryzuje dane składowe zarówno na poziomie indywidualnym, jak i grupowym. Technika ta jest korzystna ze względu na całkowitą ilość informacji, które można uzyskać na temat ogólnego profilu zwierzęcia.Obejmuje to elementy kategoryzujące i wynikające z nich wnioski. Technika ta może zapewnić wgląd w szeroki zakres obszarów badawczych, w tym kardiologię, neurologię i farmakologię. Technika ta ma zastosowanie nie tylko w badaniach nad rozrodczością.Zacznij od obchodzenia się ze szczurem w sposób odpowiedni do wieku, taki jak chwyt w stylu kompresji dla dorastających szczurów, umieszczając obiekt w górnej części klatki piersiowej z nosem skierowanym w dół na ziemię. Odsłoń kanał pochwy pacjentki, delikatnie zginając ogon przed włożeniem strzykawki. Trzymając strzykawkę stabilnie palcem wskazującym i środkowym, włożyć końcówkę strzykawki do kanału pochwy pod kątem równoległym do niego, powoli wydalić chlorek sodu do kanału, wciskając tłok do środka kciukiem.Usunąć chlorek sodu z kanału pochwy, odciągając tłok strzykawki od bło

rodent-estrous-cycle-monitoring-utilizing-vaginal-lavage-no-such

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

W niniejszym materiale opisujemy sposób identyfikacji fazy cyklu rozrodczego myszy (proestrus, estrus, metestrus lub diestrus) poprzez prosty, nieinwazyjny pobór oraz ocenę cytologiczną wymazów z pochwy. Opisujemy również, w jaki sposób cytologia pochwy odzwierciedla poziomy krążących hormonów, które warunkują przejście przez poszczególne etapy cyklu rozrodczego myszy.

Wykonanie płukania pochwy, barwienia fioletem krystalicznym i cytologicznej oceny pochwy w celu identyfikacji fazy cyklu rujowego u myszy

Dwa paradygmaty ćwiczeń zostały przetestowane na nowo opracowanym chemicznie indukowanym modelu myszy menopauzalnej, aby zbadać wpływ menopauzy na zdolność do ćwiczeń i adaptację serca do ćwiczeń.

Metoda badania wpływu chemicznie wywołanej niewydolności jajników na wydolność wysiłkową i adaptację serca u myszy

Hormony gonadalne, takie jak estrogen, modulują tworzenie pamięci w wielu eksperymentalnych paradygmatach, w tym w pamięci wygaszania strachu. Protokół ten opisuje zestaw metod badania wpływu hormonów gonad, szczególnie podczas wymierania u naturalnie zmieniających się na cyklach samic, w tym monitorowanie cyklu rujowego i egzogenne podawanie estrogenów.

Protokół badania wygaszania uwarunkowanego strachu u naturalnie jeżdżących na rowerze samic szczurów

Ten manuskrypt opisuje użyteczność ultradźwięków wykonywanych na samicach szczurów do projektowania eksperymentalnych modeli do badań reprodukcyjnych i ginekologicznych. Pokazane jest wyjaśnienie krok po kroku, jak przeprowadzić ocenę ultrasonograficzną.

Ultrasonografia w eksperymentalnych badaniach reprodukcyjnych na szczurach

Skurcze macicy są ważne dla dobrego samopoczucia kobiet. Jednak patologicznie zwiększona kurczliwość może powodować bolesne miesiączkowanie, szczególnie u młodszych kobiet. W tym miejscu opisujemy prosty preparat ex vivo, pozwalający na szybką ocenę skuteczności leków zwiotczających mięśnie gładkie, które mogą być stosowane w leczeniu bolesnego miesiączkowania.

Metoda ex vivo do oceny spontanicznej ruchliwości układu rozrodczego myszy oraz algorytm śledzenia ruchu macicy oparty na MATLAB do analizy danych

Ten protokół opisuje budowę taniego systemu mikroiniekcji, jego stereotaktyczne wszczepianie w głębokie struktury mózgu oraz procedurę czasowych mikroiniekcji tetrodotoksyny u szczurów przytomnych i nieskrępowanych. Celem jest ujawnienie udziału struktur podwzgórza w regulacji owulacji poprzez hamowanie ich aktywności neuronalnej.

Odkrywanie roli dyskretnych obszarów mózgu szczura w regulacji owulacji poprzez odwracalną inaktywację za pomocą mikroiniekcji tetrodotoksyny

Przedstawiona metoda manipulacji szyjką macicy może wywołać pseudociążę u myszy bez potrzeby rozmnażania samic z samcami po wazektomii. Indukcja ciąży rzekomej jest niezbędna do powodzenia niechirurgicznego transferu zarodków i niechirurgicznego sztucznego zapłodnienia, które również zostały przedstawione.

Wywoływanie ciąży rzekomej u samic myszy bez konieczności wazektomii samców przed niechirurgicznym transferem zarodków lub sztucznym zapłodnieniem

Hormon folikulotropowy (FSH) w różnych tkankach i organach pozagonadalnych jest związany z patogenezą wielu chorób. Mysi model owariektomii i leczony FSH (OVF) może być wykorzystany do zbadania pozagonowego działania FSH.

Badanie niezależnych efektów hormonu folikulotropowego in vivo w modelu mysim

Pulsatywność hormonu luteinizującego (LH) jest cechą charakterystyczną funkcji rozrodczych. Opisujemy protokół zdalnej aktywacji określonych populacji neuronów związany z seryjnym automatycznym pobieraniem krwi. Technika ta pozwala na czasową modulację hormonalną, multipleksowanie i minimalizowanie efektów manipulacji na poziomie LH u przytomnych, swobodnie poruszających się i niezakłóconych zwierząt.

Zdalna aktywacja neuronów w połączeniu z automatycznym pobieraniem próbek krwi w celu indukcji i pomiaru krążącego hormonu luteinizującego u myszy

Reportery oparte na FRET są coraz częściej wykorzystywane do monitorowania aktywności kinaz i fosfataz w żywych komórkach. W niniejszej pracy opisujemy metodę wykorzystania reporterów opartych na FRET do oceny zmian w fosforylacji celu zależnych od cyklu komórkowego.

Monitorowanie aktywności kinaz i fosfataz w cyklu komórkowym za pomocą ratiometrycznego FRET

Poznaj metodę płukania pochwy do monitorowania cyklu rujowego u szczurów samic. Ta technika umożliwia charakterystykę komórkową i zastosowanie w badaniach kardiologicznych oraz farmakologicznych.

Monitorowanie cyklu rujowego gryzoni za pomocą płukania pochwy: nie ma czegoś takiego jak normalny cykl

Przeglądaj więcej filmów