Generowanie transgeników i nokautów u gatunków Strongyloides za pomocą mikroiniekcji

Wykorzystanie mikroiniekcji do dostarczania konstruktów DNA do Strongyloides pozwala nam generować nokauty i transgeniki, które można wykorzystać do badania, jak te robaki się rozwijają, poruszają się w swoim środowisku i pasożytują na żywicielach. Jak dotąd jest to jedyna skuteczna technika generowania nokautów i transgeników u tych pasożytów. Dzień przed mikrowstrzyknięciem dodaj 180 mikrolitrów roztworu agarozy na szkiełko nakrywkowe za pomocą szklanej pipety Pasteura, a następnie natychmiast upuść drugie szkiełko nakrywkowe na wierzch, aby spłaszczyć agarozę w cienką podkładkę.

Po 5 do 10 sekundach usuń górną szkiełko nakrywkowe, rozsuwając je i określ, na którym slajdzie znajduje się podkładka agarowa, a następnie połóż ją stroną zadrukowaną do góry. Następnie wybierz mały kawałek szkła z pękniętego szkiełka nakrywkowego i za pomocą kleszczy delikatnie wciśnij go w agar w pobliżu górnej krawędzi podkładki. W dniu mikroiniekcji należy wyłożyć uchwyt Baermann, który jest sitkiem wykonanym z dwóch plastikowych pierścieni z dwiema warstwami nylonowej siatki tuile zabezpieczonej między nimi trzema zachodzącymi na siebie kawałkami tkanki laboratoryjnej.