Name: Solidna platforma odkrywcza do identyfikacji nowych mediatorów przerzutów czerniaka (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-03-08T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 41 s
Description: Odkryj solidną platformę do identyfikacji nowych mediatorów przerzutów czerniaka przy użyciu standaryzowanych modeli in vivo. To podejście usprawnia odkrywanie celów terapeutycznych i rozwój terapii.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dziękujemy Wydziałowi Zaawansowanych Technologii Badawczych (DART) w NYU Langone Health, a w szczególności Laboratorium Badań nad Patologią Eksperymentalną, Centrum Technologii Genomu, Laboratorium Cytometrii i Sortowania Komórek, Rdzeniu Obrazowania Przedklinicznego, które są częściowo wspierane przez Perlmutter Cancer Center Support Grant NIH/NCI 5P30CA016087. Dziękujemy NYU Interdisciplinary Melanoma Cooperative Group (PI: Dr. Iman Osman) za zapewnienie dostępu do krótkoterminowych hodowli czerniaka pochodzących od pacjentów+ (10-230BM i 12-273BM), które zostały uzyskane za pomocą zatwierdzonych przez IRB protokołów (badanie Universal Consent #s16-00122 i badanie Interdisciplinary Melanoma Cooperative Group #10362). Dziękujemy dr Robertowi Kerbelowi (University of Toronto) za dostarczenie linii komórkowych czerniaka 113/6-4L i 131/4-5B1* oraz dr Meenhardowi Herlynowi (Wistar Institute) za dostarczenie krótkoterminowych hodowli czerniaka WM 4265-2, WM 4257s-1, WM 4257-2**. E.H. jest wspierany przez NIH/NCI R01CA243446, P01CA206980, American Cancer Society-Melanoma Research Alliance Team Science Award oraz NIH Melanoma SPORE (NCI P50 CA225450; PI: I.O.). Rysunek 1 został utworzony za pomocą Biorender.com.

<ol><li>Sung, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+Cancer+Statistics+2020%3A+GLOBOCAN+Estimates+of+incidence+and+mortality+worldwide+for+36+cancers+in+185+countries%5BTitle%5D)+AND+%22CA%3A+A+Cancer+Journal+for+Clinicians%22%5BJournal%5D)">Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN Estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries.</a> CA: A Cancer Journal for Clinicians. 71 (3), 209-249 (2021).</li>
<li>Adler, N. R., Haydon, A., McLean, C. A., Kelly, J. W., Mar, V. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metastatic+pathways+in+patients+with+cutaneous+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Pigment+Cell+Melanoma+Research%22%5BJournal%5D)">Metastatic pathways in patients with cutaneous melanoma.</a> Pigment Cell Melanoma Research. 30 (1), 13-27 (2017).</li>
<li>Platz, A., Egyhazi, S., Ringborg, U., Hansson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+cutaneous+melanoma%3B+a+review+of+NRAS+and+BRAF+mutation+frequencies+in+relation+to+histogenetic+subclass+and+body+site%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Oncology%22%5BJournal%5D)">Human cutaneous melanoma; a review of NRAS and BRAF mutation frequencies in relation to histogenetic subclass and body site.</a> Molecular Oncology. 1 (4), 395-405 (2008).</li>
<li>Alonso, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high-throughput+study+in+melanoma+identifies+epithelial-mesenchymal+transition+as+a+major+determinant+of+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">A high-throughput study in melanoma identifies epithelial-mesenchymal transition as a major determinant of metastasis.</a> Cancer Research. 67 (7), 3450-3460 (2007).</li>
<li>Rowe, C. J., Khosrotehrani, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+and+biological+determinants+of+melanoma+progression%3A+Should+all+be+considered+for+clinical+management%5BTitle%5D)+AND+%22Australasian+Journal+of+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Clinical and biological determinants of melanoma progression: Should all be considered for clinical management.</a> Australasian Journal of Dermatology. 57 (3), 175-181 (2016).</li>
<li>Plebanek, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pre-metastatic+cancer+exosomes+induce+immune+surveillance+by+patrolling+monocytes+at+the+metastatic+niche%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Pre-metastatic cancer exosomes induce immune surveillance by patrolling monocytes at the metastatic niche.</a> Nature Communications. 8 (1), 1319(2017).</li>
<li>Orgaz, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+pigment+epithelium-derived+factor+enables+migration%2C+invasion+and+metastatic+spread+of+human+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">Loss of pigment epithelium-derived factor enables migration, invasion and metastatic spread of human melanoma.</a> Oncogene. 28 (47), 4147-4161 (2009).</li>
<li>Ladhani, O., Sanchez-Martinez, C., Orgaz, J. L., Jimenez, B., Volpert, O. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pigment+epithelium-derived+factor+blocks+tumor+extravasation+by+suppressing+amoeboid+morphology+and+mesenchymal+proteolysis%5BTitle%5D)+AND+%22Neoplasia%22%5BJournal%5D)">Pigment epithelium-derived factor blocks tumor extravasation by suppressing amoeboid morphology and mesenchymal proteolysis.</a> Neoplasia. 13 (7), 633-642 (2011).</li>
<li>Ju, R. J., Stehbens, S. J., Haass, N. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+melanoma+cell-stroma+interaction+in+cell+motility%2C+invasion%2C+and+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Medicine+-+Dermatology%22%5BJournal%5D)">The role of melanoma cell-stroma interaction in cell motility, invasion, and metastasis.</a> Frontiers in Medicine - Dermatology. 5, 307(2018).</li>
<li>Wiley, H. E., Gonzalez, E. B., Maki, W., Wu, M. T., Hwang, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+CC+chemokine+receptor-7+and+regional+lymph+node+metastasis+of+B16+murine+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+National+Cancer+Institute%22%5BJournal%5D)">Expression of CC chemokine receptor-7 and regional lymph node metastasis of B16 murine melanoma.</a> Journal of the National Cancer Institute. 93 (21), 1638-1643 (2001).</li>
<li>Meier, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metastatic+pathways+and+time+courses+in+the+orderly+progression+of+cutaneous+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Metastatic pathways and time courses in the orderly progression of cutaneous melanoma.</a> British Journal of Dermatology. 147 (1), 62-70 (2002).</li>
<li>Turner, N., Ware, O., Bosenberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetics+of+metastasis%3A+melanoma+and+other+cancers%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+%26+Experimental+Metastasis%22%5BJournal%5D)">Genetics of metastasis: melanoma and other cancers.</a> Clinical & Experimental Metastasis. 35 (5-6), 379-391 (2018).</li>
<li>Ubellacker, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymph+protects+metastasizing+melanoma+cells+from+ferroptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Lymph protects metastasizing melanoma cells from ferroptosis.</a> Nature. 585 (7823), 113-118 (2020).</li>
<li>Cukierman, E., Pankov, R., Stevens, D. R., Yamada, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Taking+cell-matrix+adhesions+to+the+third+dimension%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Taking cell-matrix adhesions to the third dimension.</a> Science. 294 (5547), 1708-1712 (2001).</li>
<li>Cunningham, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Actin-binding+protein+requirement+for+cortical+stability+and+efficient+locomotion%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Actin-binding protein requirement for cortical stability and efficient locomotion.</a> Science. 255 (5042), 325-327 (1992).</li>
<li>Unger, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+human+carcinomas%3A+physiologically+relevant+3D+models+to+improve+anti-cancer+drug+development%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Drug+Delivery+Reviews%22%5BJournal%5D)">Modeling human carcinomas: physiologically relevant 3D models to improve anti-cancer drug development.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 79-80, 50-67 (2014).</li>
<li>Fong, E. L., Harrington, D. A., Farach-Carson, M. C., Yu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heralding+a+new+paradigm+in+3D+tumor+modeling%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Heralding a new paradigm in 3D tumor modeling.</a> Biomaterials. 108, 197-213 (2016).</li>
<li>Nakamura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+mouse+melanoma+cell+lines+by+their+mortal+malignancy+using+an+experimental+metastatic+model%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Science%22%5BJournal%5D)">Characterization of mouse melanoma cell lines by their mortal malignancy using an experimental metastatic model.</a> Life Science. 70 (7), 791-798 (2002).</li>
<li>Meeth, K., Wang, J. X., Micevic, G., Damsky, W., Bosenberg, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+YUMM+lines%3A+a+series+of+congenic+mouse+melanoma+cell+lines+with+defined+genetic+alterations%5BTitle%5D)+AND+%22Pigment+Cell+Melanoma+Research%22%5BJournal%5D)">The YUMM lines: a series of congenic mouse melanoma cell lines with defined genetic alterations.</a> Pigment Cell Melanoma Research. 29 (5), 590-597 (2016).</li>
<li>Koya, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((BRAF+inhibitor+vemurafenib+improves+the+antitumor+activity+of+adoptive+cell+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">BRAF inhibitor vemurafenib improves the antitumor activity of adoptive cell immunotherapy.</a> Cancer Research. 72 (16), 3928-3937 (2012).</li>
<li>Jenkins, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+murine+BRaf%28V600E%29+melanoma+cell+lines+with+sensitivity+to+PLX4032%5BTitle%5D)+AND+%22Pigment+Cell+Melanoma+Research%22%5BJournal%5D)">Multiple murine BRaf(V600E) melanoma cell lines with sensitivity to PLX4032.</a> Pigment Cell Melanoma Research. 27 (3), 495-501 (2014).</li>
<li>Tuncer, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SMAD+signaling+promotes+melanoma+metastasis+independently+of+phenotype+switching%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">SMAD signaling promotes melanoma metastasis independently of phenotype switching.</a> The Journal of Clinical Investigation. 129 (7), 2702-2716 (2019).</li>
<li>Schwartz, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incipient+Melanoma+Brain+Metastases+Instigate+Astrogliosis+and+Neuroinflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Incipient Melanoma Brain Metastases Instigate Astrogliosis and Neuroinflammation.</a> Cancer Research. 76 (15), 4359-4371 (2016).</li>
<li>Perez-Guijarro, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multimodel+preclinical+platform+predicts+clinical+response+of+melanoma+to+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">Multimodel preclinical platform predicts clinical response of melanoma to immunotherapy.</a> Nature Medicine. 26 (5), 781-791 (2020).</li>
<li>Krepler, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Comprehensive+Patient-Derived+Xenograft+Collection+Representing+the+Heterogeneity+of+Melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">A Comprehensive Patient-Derived Xenograft Collection Representing the Heterogeneity of Melanoma.</a> Cell Reports. 21 (7), 1953-1967 (2017).</li>
<li>Agrawal, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systems+biology+approach+identifies+FUT8+as+a+driver+of+melanoma+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">A systems biology approach identifies FUT8 as a driver of melanoma metastasis.</a> Cell. 31 (6), 804-819 (2017).</li>
<li>Hanniford, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epigenetic+silencing+of+CDR1as+drives+IGF2BP3-mediated+melanoma+invasion+and+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Epigenetic silencing of CDR1as drives IGF2BP3-mediated melanoma invasion and metastasis.</a> Cancer Cell. 37 (1), 55-70 (2020).</li>
<li>Kim, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PRMT5+control+of+cGAS%2FSTING+and+NLRC5+pathways+defines+melanoma+response+to+antitumor+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">PRMT5 control of cGAS/STING and NLRC5 pathways defines melanoma response to antitumor immunity.</a> Science Translational Medicine. 12 (551), (2020).</li>
<li>de Miera, E. V., Friedman, E. B., Greenwald, H. S., Perle, M. A., Osman, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+five+new+melanoma+low+passage+cell+lines+representing+the+clinical+and+genetic+profile+of+their+tumors+of+origin%5BTitle%5D)+AND+%22Pigment+Cell+Melanoma+Research%22%5BJournal%5D)">Development of five new melanoma low passage cell lines representing the clinical and genetic profile of their tumors of origin.</a> Pigment Cell Melanoma Research. 25 (3), 395-397 (2012).</li>
<li>Morsi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+characterization+of+a+clinically+relevant+mouse+model+of+melanoma+brain+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Pigment+Cell+Melanoma+Research%22%5BJournal%5D)">Development and characterization of a clinically relevant mouse model of melanoma brain metastasis.</a> Pigment Cell Melanoma Research. 26 (5), 743-745 (2013).</li>
<li>Huynh, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+in+vivo+microRNA+targeting+of+liver+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">Efficient in vivo microRNA targeting of liver metastasis.</a> Oncogene. 30 (12), 1481-1488 (2011).</li>
<li>Zou, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+variables+that+affect+human+hepatocyte+AAV+transduction+in+liver+chimeric+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Therapy+Methods+and+Clinical+Development%22%5BJournal%5D)">Experimental variables that affect human hepatocyte AAV transduction in liver chimeric mice.</a> Molecular Therapy Methods and Clinical Development. 18, 189-198 (2020).</li>
<li>Kleffman, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Melanoma-secreted+Amyloid+Beta+Suppresses+Neuroinflammation+and+Promotes+Brain+Metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Melanoma-secreted Amyloid Beta Suppresses Neuroinflammation and Promotes Brain Metastasis.</a> bioRxiv. , 854885(2019).</li>
<li>Curtis, A., Calabro, K., Galarneau, J. R., Bigio, I. J., Krucker, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+variations+of+skin+pigmentation+in+C57BL%2F6+mice+affect+optical+bioluminescence+quantitation%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Imaging+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Temporal variations of skin pigmentation in C57BL/6 mice affect optical bioluminescence quantitation.</a> Molecular Imaging and Biology. 13 (6), 1114-1123 (2011).</li>
<li>Sil, P., Wong, S. W., Martinez, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((More+than+skin+deep%3A+autophagy+is+vital+for+skin+barrier+function%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">More than skin deep: autophagy is vital for skin barrier function.</a> Frontiers in Immunology. 9, 1376(2018).</li>
<li>Chen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome-wide+CRISPR+screen+in+a+mouse+model+of+tumor+growth+and+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Genome-wide CRISPR screen in a mouse model of tumor growth and metastasis.</a> Cell. 160 (6), 1246-1260 (2015).</li>
<li>Hart, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+CRISPR+screens+reveal+fitness+genes+and+genotype-specific+cancer+liabilities%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">High-resolution CRISPR screens reveal fitness genes and genotype-specific cancer liabilities.</a> Cell. 163 (6), 1515-1526 (2015).</li>
<li>Wang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+characterization+of+essential+genes+in+the+human+genome%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Identification and characterization of essential genes in the human genome.</a> Science. 350 (6264), 1096-1101 (2015).</li>
<li>Edgar, R., Domrachev, M., Lash, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+Expression+Omnibus%3A+NCBI+gene+expression+and+hybridization+array+data+repository%5BTitle%5D)+AND+%22Nucleic+Acids+Research%22%5BJournal%5D)">Gene Expression Omnibus: NCBI gene expression and hybridization array data repository.</a> Nucleic Acids Research. 30 (1), 207-210 (2002).</li>
<li>Lappalainen, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+European+Genome-phenome+Archive+of+human+data+consented+for+biomedical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Genetics%22%5BJournal%5D)">The European Genome-phenome Archive of human data consented for biomedical research.</a> Nature Genetics. 47 (7), 692-695 (2015).</li>
<li>Cerami, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cBio+cancer+genomics+portal%3A+an+open+platform+for+exploring+multidimensional+cancer+genomics+data%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discovery%22%5BJournal%5D)">The cBio cancer genomics portal: an open platform for exploring multidimensional cancer genomics data.</a> Cancer Discovery. 2 (5), 401-404 (2012).</li>
<li>Grossman, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toward+a+shared+vision+for+cancer+genomic+data%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Toward a shared vision for cancer genomic data.</a> New England Journal of Medicine. 375 (12), 1109-1112 (2016).</li>
</ol>

Autorzy nie mają do zadeklarowania konfliktu interesów.

Celem tego raportu technicznego jest zaoferowanie ustandaryzowanego, kompleksowego przepływu pracy do badania potencjalnych aktorów w przerzutach czerniaka. Ponieważ eksperymenty in vivo mogą być kosztowne i czasochłonne, kluczowe znaczenie mają strategie maksymalizacji wydajności i zwiększenia wartości uzyskanych informacji.
Konieczne jest stosowanie uzupełniających się podejść w celu walidacji krzyżowej wyników w ramach tego samego eksperymentu. Na przykład zarówno barwienie immunoh...

Wysoka śmiertelność związana z przerzutowym czerniakiem w połączeniu z rosnącą częstością występowania czerniaka na całym świecie1 (szacowany wzrost o 7,86% do 2025 roku) wymaga nowych metod leczenia. Postępy w odkrywaniu celów opierają się na odtwarzalnych modelach przerzutów, które są bardzo złożonym procesem. Na wszystkich etapach kaskady przerzutów komórki czerniaka muszą pokonać niezliczone bariery, aby osiągnąć unik układu odpornościowego i kolonizację odległych tkanek2. Odporność i zdolności adaptacyjne komórek czerniaka wynikają z wielu czynników, w tym z ich wysokiego obciążenia mutacjami genetycznymi3 i ich pochodzenia grzebienia nerwowego, które nadają kluczową plastyczność fenotypową3,4,5. Na każdym etapie programy transkrypcyjne umożliwiają komórkom czerniaka z przerzutami przejście z jednego stanu w drugi w oparciu o wskazówki z przesłuchu z mikrośrodowiskiem, obejmującym układ odpornościowy6, środowisko zewnątrzkomórkowe7,8 oraz komórkową architekturę barier fizycznych9 z którymi się stykają. Na przykład komórki czerniaka unikają nadzoru immunologicznego poprzez obniżenie ekspresji ważnych czynników wydzielanych przez nowotwór 6.
Badania opisują "niszę premetastatyczną", w której komórki czerniaka wydzielają chemokiny i cytokiny, aby przygotować odległy "docelowy" narząd do przerzutów10. Odkrycia te rodzą ważne pytania dotyczące tropizmu narządowego komórek czerniaka z przerzutami i anatomicznej drogi, jaką pokonują, aby uzyskać dostęp do odległych tkanek. Wiadomo, że po wewnątrznaczynieniu komórki czerniaka dają przerzuty przez układ limfatyczny (rozprzestrzenianie się limfatyczne) i naczynia krwionośne (rozprzestrzenianie się krwiopochodne)2,11. Podczas gdy większość pacjentów ma zlokalizowaną chorobę, niewielka podgrupa przypadków objawia się odległą chorobą przerzutową i brakiem rozsiewu limfatycznego (ujemne zajęcie węzłów chłonnych)11, co sugeruje istnienie alternatywnych ścieżek przerzutów dla czerniaka.
Gdy komórki czerniaka kolonizują miejsce przerzutów, przechodzą adaptacje epigenetyczne i metaboliczne12,13. Aby uzyskać dostęp do nowych przedziałów i zaatakować je, komórki czerniaka wykorzystują proteazy14 i modyfikacje cytoszkieletu11,15, które umożliwiają im przejście do nowego miejsca i wzrost w nim. Trudność w celowaniu w komórki czerniaka polega na złożoności i liczbie takich adaptacji; W związku z tym dziedzina powinna dołożyć starań, aby eksperymentalnie odtworzyć jak najwięcej kroków i adaptacji. Pomimo licznych postępów w testach in vitro, takich jak organoidy i hodowle 3D16,17, modele te tylko nie w pełni podsumowują kaskadę przerzutów in vivo.
Mysie modele wykazały wartość, osiągając równowagę między odtwarzalnością, techniczną wykonalnością i symulacją ludzkiej choroby. Wewnątrznaczyniowe, ortotopowo i heterotopowo wszczepione komórki czerniaka z ksenoprzeszczepów pobranych od pacjentów lub krótkoterminowych hodowli myszom z obniżoną odpornością lub humanizowanym stanowią podstawę odkrycia celu w przerzutowym czerniaku. Jednak systemy te często nie mają kluczowego biologicznego ograniczenia przerzutów: układu odpornościowego. Modele przerzutów czerniaka syngenicznego, które mają to ograniczenie, są stosunkowo rzadkie w tej dziedzinie. Systemy te, opracowane u myszy immunokompetentnych, w tym B16-F1018, rodzina linii komórkowych YUMM19, SM120, D4M321, RIM322 lub ostatnio RMS23 i M1 (Mel114433), M3 (HCmel1274), M4 (B2905)24 linie komórkowe czerniaka, ułatwiają badanie złożonej roli odpowiedzi immunologicznej gospodarza w czerniaku postęp.
Tutaj przedstawiono proces identyfikacji celu przerzutów czerniaka. Wraz z rosnącą liczbą i większymi zbiorami danych "omicznych" generowanymi z kohort pacjentów z czerniakiem, postulujemy, że badania o największej potencjalności klinicznej to te, które wynikają z integracji dużych zbiorów danych, prowadząc do skrupulatnych funkcjonalnych i mechanistycznych przesłuchań25,26,27,28. Wykorzystując modele mysie do badania potencjalnych celów w procesie przerzutowym, można uwzględnić zdarzenia specyficzne dla in vivo i interakcje tkankowe, zwiększając w ten sposób prawdopodobieństwo translacji klinicznej. Przedstawiono wiele metod ilościowego określania obciążenia przerzutami, dostarczając uzupełniających się danych na temat wyników danego eksperymentu. Opisano protokół izolacji pojedynczych komórek z guzów w różnych narządach, aby pomóc w bezstronnej charakterystyce ekspresji genów w komórkach przerzutowych, które mogą poprzedzać sekwencjonowanie pojedynczej komórki lub masowego RNA.

<table><tbody><tr><td>#15 Ostrze Scapel&nbsp;</td><td>WPI</td><td>500242</td><td>Do zabiegów chirurgicznych</td></tr><tr><td>#3 Uchwyt Scapel</td><td>WPI</td><td>500236</td><td>Do zabiegów chirurgicznych</td></tr><tr><td>1 ml strzykawka tuberkulinowa, końcówka wsuwana&nbsp;</td><td>Strzykawka</td> <td>do wstrzykiwań BD</td><td>309626</td></tr><tr><td>10 ml, końcówka ślizgowa&nbsp;</td><td>BD</td><td>301029</td><td>Perfuzja</td></tr><tr><td>10% Formalina Bufor Sodu</td><td>EK Industries</td><td>4499-20L</td><td>Do perfuzji / utrwalacza tkankowego</td></tr><tr><td>15 ml Stożkowe</td><td>Corning&nbsp;</td><td>430052</td><td>Hodowla komórkowa</td></tr><tr><td>15 ml Stożkowe probówki wirówkowe z polipropylenu</td><td>Falcon</td><td>352196</td><td>Hodowla komórkowa</td></tr><tr><td>200 Proof Ethanol</td><td>Deacon Labs</td><td>04-355-223</td><td>Histologia</td></tr><tr><td>Igła 22G i ndash; 22mm</td><td>BD</td><td>305156</td><td>Perfuzja</td></tr><tr><td>4-0 Vicryl Szew</td><td>Ethicon</td><td>J464G</td><td>Szew</td></tr><tr><td>4% buforowany fosforanem Carsona paraformaldehyd&nbsp;</td><td>EMS</td><td>15733-10</td><td>Do perfuzji/utrwalacza tkankowego</td></tr><tr><td>40&micro; m</td><td>Corning</td><td>431750</td><td>Przetwarzanie tkanek</td></tr><tr><td>5-0 Szew wchłanialny&nbsp;</td><td>Ethicon</td><td>6542000</td><td>Zamknięcie</td></tr><tr><td>50 ml stożkowe&nbsp;</td><td>Corning&nbsp;</td><td>430828</td><td>Hodowla komórkowa</td></tr><tr><td>50 ml stożkowe probówki wirówkowe z polipropylenu</td><td>Falcon</td><td>352070</td><td>Hodowla komórkowa</td></tr><tr><td>7-0 Szew jedwabny&nbsp;</td><td>FST</td><td>18020-70</td><td>Ligatura</td></tr><tr><td>70&mikro; m</td><td>Corning</td><td>431751</td><td>Przetwarzanie tkanek</td></tr><tr><td>Antyblaknięcie mediów montażowych&nbsp; &nbsp;</td><td>Vector Labs</td><td>H-1000-10</td><td>Aproksymator immunofluorescencyjny</td></tr><tr><td>z kleszczami, 10cm&nbsp;</td><td>WPI</td><td>14189</td><td>Do zabiegów mikrochirurgicznych</td></tr><tr><td>Konsola Avance</td><td>Bruker</td><td>3 HD</td><td>NMR&nbsp;</td></tr><tr><td>Specyfikacja biologiczna 7030&nbsp;</td><td>Bruker</td><td>7030</td><td>Micro MRI</td></tr><tr><td>BSA</td><td>Bioreg</td><td>A941</td><td>NuMA Staining</td></tr><tr><td>Kleszcze do szycia Castroviejo, proste końcówki platforma do wiązania 5,5 mm, 11cm&nbsp;</td><td>WPI</td><td>WP5025501</td><td>Do zabiegów mikrochirurgicznych</td></tr><tr><td>Słoik do barwienia Coplin</td><td>Bel-Art&nbsp;</td><td>F44208-1000</td><td>Histologia</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D9542-1MG</td><td>Immunofluorescencja</td></tr><tr><td>dCas9-KRAB</td><td>Addgene</td><td>110820</td><td>Manipulacja genetyczna</td></tr><tr><td>DNaza I</td><td>NEB</td><td>M0303L</td><td>Przetwarzanie tkanek</td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Corning</td><td>21-030-CM</td><td>Przetwarzanie tkanek</td></tr><tr><td>Extra Sharp Uncoated Single Edge Blade</td><td>GEM</td><td>62-0167</td><td>Przetwarzanie tkanek</td></tr><tr><td>Podłoże macierzy zewnątrzkomórkowej&nbsp;</td><td>Corning</td><td>354234</td><td>rozważyć zredukowany czynnik wzrostu ( jako alternatywę&nbsp;</td></tr><tr><td>FBS</td><td>Cytiva</td><td>SH30910.03</td><td>Hodowla komórkowa</td></tr><tr><td>Fidżi Obraz J</td><td>Fidżi Obraz J</td><td>Oprogramowanie</td><td>Immunofluorescencja</td></tr><tr><td>Koza anty-królik HRP sprzężony multimer&nbsp;</td><td>Thermo Fisher</td><td>A16104</td><td>NuMA Barwienie</td></tr><tr><td>Koziej Surowicy</td><td>Gibco</td><td>PCN5000</td><td>Immunofluorescencja</td></tr><tr><td>HBSS</td><td>Corning</td><td>21-020-CV</td><td>Przetwarzanie tkanek</td></tr><tr><td>Hematoksylina&nbsp;</td><td>Richard-Allan Naukowy&nbsp;</td><td>7231</td><td></td></tr><tr><td>Histologia Illumina III&nbsp;</td><td>PerkinElmer</td><td>CLS136334</td><td>BLI Instrument</td></tr><tr><td>Strzykawka insulinowa 28G - igła 8mm</td><td>BD</td><td>329424</td><td>Zastrzyki</td></tr><tr><td>Strzykawka insulinowa 31G - igła 6mm&nbsp;</td><td>BD</td><td>326730</td><td>Kleszcze do iniekcji</td></tr><tr><td>tęczówki, 10,2 cm, pełna krzywa, ząbkowane</td><td>WPI</td><td>504478</td><td>Do zabiegów perfuzji i zabiegów chirurgicznych</td></tr><tr><td>Isoflurane USP</td><td>Covetrus</td><td>11695067772</td><td>Anesthesia</td></tr><tr><td>Jewelers #7 Kleszcze Tytan 11 cm 0,07 x 0,01 mm Końcówka</td><td>WPI</td><td>WP6570</td><td>Do zabiegów mikrochirurgicznych</td></tr><tr><td>Ketamina HCl 100mg/mL</td><td>Mylan Ind.</td><td>1049007</td><td>Anesthesia</td></tr><tr><td>lentiCRISPRv2</td><td>Addgene</td><td>98290</td><td>Manipulacja genetyczna</td></tr><tr><td>Lycopersicon Esculentum (Pomidor) Lectin, DyLight 649</td><td>Invitrogen</td><td>L32472</td><td>Marker komórek śródbłonka naczyń krwionośnych</td></tr><tr><td>MEM endogenne aminokwasy X 100</td><td>Corning</td><td>25-025-CI</td><td>Hodowla komórkowa</td></tr><tr><td>Metzenbaum Nożyczki</td><td>WPI</td><td>503269</td><td>Do chirurgii procedury</td></tr><tr><td>Jednostka do mikroiniekcji</td><td>KOPF</td><td>5000</td><td>Iniekcje dosercowe</td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Fisher</td><td>S25877&nbsp;</td><td>Barwienie NuMA</td></tr><tr><td>Igła 30G x 25mm</td><td>BD</td><td>305128</td><td>Igła do iniekcji dosercowych</td></tr><tr><td>33G x 15mm</td><td>Hamilton</td><td>7747-01</td> Uchwyt igły do <td>iniekcji doszyjnej</td></tr><tr><td>, Castroviejo, 14cm, z zamkiem, szczęki ząbkowane 1,2mm</td><td>WPI</td><td>14137-G</td><td>Do zabiegów mikrochirurgicznych</td></tr><tr><td>NOD. Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ</td><td>Myszy Laboratorium Jacksona</td><td>005557</td><td>Myszy</td></tr>, <tr><td>model mysi NU/J</td>, <td>Laboratorium Jacksona</td>, <td>model</td><td>mysi</td></tr><tr><td>002019 Jądrowy aparat mitotyczny Białko poliklonalny królik anty-ludzki&nbsp;</td><td>Abcam</td><td>97585</td><td>NuMA Barwienie</td></tr><tr><td>penicyliny-streptomycyny 10000U / ml</td><td>Gibco</td><td>15140122</td><td>Hodowla komórkowa</td></tr><tr><td>Percoll</td><td>GE</td><td>0891-01</td><td>roztwór do separacji gęstości&nbsp;</td></tr><tr><td>PI Klasyczne rękawice chirurgiczne</td><td>Cardinal Health</td><td>2D72PT75X</td><td>Chirurgia</td></tr><tr><td>pLKO Tet-On</td><td>Addgene</td><td>21915</td><td>Manipulacja genetyczna</td></tr><tr><td>Powidon-jod 10% roztwór Medline</td><td></td><td>MDS093943</td><td>Surgery Krople</td></tr><tr><td>proparakainy 0,5%</td><td>Akorn Pharma</td><td>AX0501</td><td>Okulistyczne znieczulenie miejscowe</td></tr><tr><td>Puralube Wazelina Maść okulistyczna</td><td>Dechra</td><td>83592</td> Żyletka <td>anestezjologiczna</td></tr><tr><td>Ostrza o podwójnej krawędzi&nbsp;</td><td>EMS</td><td>72000</td><td>Golenie i wibrotomowe krojenie mózgu&nbsp;</td></tr><tr><td>Klips Reflex 9mm EZ&nbsp;</td><td>Drzewo mózgowe</td><td>EZC-&nbsp; ZESTAW</td><td>Zamykanie ran</td></tr><tr><td>RPMI 1640&nbsp;</td><td>Corning</td><td>10-040-CM</td><td>Nożyczki do hodowli komórkowych</td></tr><tr><td>, sprężyna 10,5 cm Str, ostrza 8 mm</td><td>WPI</td><td>501235</td><td>Do zabiegów mikrochirurgicznych</td></tr><tr><td>Półautomatyczne wibrujące ostrze Mikrotom</td><td>Leica</td><td>VT1200</td><td>Brain Slice Immunofluorescencyjny</td></tr><tr><td>jednokanałowy system waporyzacji anestezjologicznej</td><td>Kent Scientific</td><td>VetFlo-1210S&nbsp;</td><td>znieczulenie</td></tr><tr><td>System komór stołowych Smartbox i dmuchawa wyciągowa</td><td>EZ Systems</td><td>TT4000</td><td>CO2 Eutanazja</td></tr><tr><td>Sterylna ozdobna jednorazowa serweta</td><td>Medline</td><td>NON21002</td><td>Surgery</td></tr><tr><td>Sterylne niewzmocnione fartuchy chirurgiczne Aurora z wszytymi rękawami</td><td>Medline</td><td>DYNJP2715</td><td></td></tr><tr><td>Surgery T25 Flask</td><td>Corning&nbsp;</td><td>430639</td><td>Hodowla komórkowa</td></tr><tr><td>Tris</td><td>Corning</td><td>46-031-CM</td><td>NuMA Barwienie</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>X100-500ML</td><td>Immunofluorescencyjne</td></tr><tr><td>kleszcze do wiązania Troutman, 10 cm, zakrzywiony wzór G, końcówka 0,52 mm z platformą do wiązania</td><td>WPI</td><td>WP505210</td><td>Do zabiegów mikrochirurgicznych</td></tr><tr><td>Klipsy do naczyń 10G Ciśnienie 5x 0,8 mm Szczęki, 5 / szt</td>. <td>WPI</td><td>15911</td><td>Do zabiegi mikrochirurgiczne</td></tr><tr><td>Visiopharm</td><td>Visiopharm</td><td>Visiopharm NuMA</td><td>Oprogramowanie do barwienia</td></tr><tr><td>Ksylazyna 100 mg / ml</td><td>Akorn Pharma</td><td>59399-111-50</td><td>Znieczulenie</td></tr><tr><td>Ksylen</td><td>Fisher</td><td>X3P-1GAL</td><td>Histologia</td></tr></tbody></table>

solidna platforma odkrywcza do identyfikacji nowych mediatorów przerzutów czerniaka

A Robust Discovery Platform for the Identification of Novel Mediators of Melanoma Metastasis

Przerzuty to złożony proces, wymagający od komórek pokonywania barier, które tylko nie są w pełni modelowane przez testy in vitro. Stworzono systematyczny przepływ pracy przy użyciu solidnych, powtarzalnych modeli in vivo i ustandaryzowanych metod w celu identyfikacji nowych czynników powodujących przerzuty czerniaka. Takie podejście pozwala na wnioskowanie o danych na określonych etapach eksperymentalnych w celu precyzyjnego scharakteryzowania roli genu w przerzutach. Modele są tworzone poprzez wprowadzenie genetycznie zmodyfikowanych komórek czerniaka za pomocą wstrzyknięć dosercowych, śródskórnych lub podskórnych u myszy, a następnie monitorowanie za pomocą seryjnego obrazowania in vivo. Po osiągnięciu wcześniej ustalonych punktów końcowych pobiera się guzy pierwotne i/lub narządy z przerzutami i przetwarza je w celu przeprowadzenia różnych analiz. Komórki nowotworowe mogą być sortowane i poddawane dowolnej z kilku platform "omicznych", w tym sekwencjonowaniu RNA pojedynczych komórek. Narządy poddawane są obrazowaniu i analizom immunohistopatologicznym w celu ilościowego określenia ogólnego obciążenia przerzutami i odwzorowania ich specyficznej lokalizacji anatomicznej. Ten zoptymalizowany potok, w tym ustandaryzowane protokoły wszczepiania, monitorowania, pobierania tkanek, przetwarzania i analizy, może być zaadaptowany do krótkoterminowych hodowli pochodzących od pacjentów oraz ustalonych ludzkich i mysich linii komórkowych różnych typów raka litego.

Poniższe rysunki ilustrują, w jaki sposób opisany przepływ pracy został zastosowany do identyfikacji nowych czynników powodujących przerzuty czerniaka. Rysunek 2 podsumowuje wyniki opublikowanego badania, w którym badano efekty wyciszenia fukozylotransferazy FUT8 w przerzutach czerniaka in vivo26. Krótko mówiąc, analiza danych glikomicznych (uzyskanych za pomocą macierzy lektynowych) i profilowanie transkryptomiczne wykazały zwiększone poziomy alfa-1,6-fukozy...

Ten artykuł opisuje przebieg techniki wykorzystywane do testowania nowych kandydatów na mediatory przerzutów czerniaka i ich mechanizm(y) działania.

Solidna platforma odkrywcza do identyfikacji nowych mediatorów przerzutów czerniaka

Metastasis is a complex process, requiring cells to overcome barriers that are only incompletely modeled by in vitro assays. A systematic workflow was ...

Protokół ten opisuje szereg technik w ramach ciągłego przepływu pracy, które można wykorzystać do oceny wpływu in vivo potencjalnych regulatorów przerzutów czerniaka, ale także przerzutów innych litych nowotworów złośliwych. Główną zaletą naszego systematycznego przepływu pracy jest zwiększona odtwarzalność danych dzięki solidnym i ustandaryzowanym modelom i technikom in vivo. Linia ta oferuje ścieżkę do odkrywania celów i opracowywania terapii poprzez testowanie kandydatów wywnioskowanych z danych omicznych lub testów in vitro w warunkach in vivo.Krzywa uczenia się związana z technikami przedstawionymi w tym protokole jest skracana poprzez korzystanie z dostarczonych materiałów i przestrzeganie szczegółowego opisu podczas ćwiczenia kroków. W zademonstrowaniu procedury pomogą Orlando Aristizabal, naukowiec z The Preclinical Imaging Core oraz Ran Moubarak, instruktor w moim laboratorium. W przypadku wstrzyknięć śródskórnych znieczulij i ogol ośmio- do 10-tygodniową mysz w komorze bezpieczeństwa biologicznego, zachowując warunki aseptyki.Następnie chwyć i cofnij skórę do tyłu w kierunku trajektorii ukłucia igłą i za pomocą igły do strzykawki insulinowej o długości sześciu milimetrów

a-robust-discovery-platform-for-identification-novel-mediators

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Badania nad rakiem

Niniejszy artykuł opisuje procedury eksperymentalnego testu przerzutowania, który jest wykorzystywany do określania potencjału metastatycznego ludzkich linii komórkowych raka.

Test eksperymentalny przerzutowania

Ten film opisuje protokół tworzenia mysiego modelu spontanicznych przerzutów ksenoprzeszczepów pochodzących od pacjentów z rakiem jelita grubego lub PDX. Te modele ksenoprzeszczepów częściowo naśladują cechy ludzkich nowotworów i rozumieją krytyczne aspekty nowotworów złośliwych u ludzi, w tym inwazję i przerzuty.

Mysie modele spontanicznych przerzutów: platforma do badania potencjału przerzutowego komórek raka jelita grubego wstrzykiwanych ortotopowo

W tym filmie komórki czerniaka są wstrzykiwane dożylnie przez żyłę ogonową w modelu mysim. Komórki czerniaka przemieszczają się dalej przez układ krążenia, przystosowując się do odległego mikrośrodowiska i powodując przerzuty w narządach, takich jak płuca.

Eksperymentalny mysi model czerniaka z przerzutami: platforma do badania potencjału przerzutowego komórek czerniaka w płucach

Ten protokół opisuje technikę przygotowania próbki poprzez kokulturację eksplantatów jajników z komórkami raka jajowodu. Próbki te są wizualizowane za pomocą obrazowej spektroskopii mas lub IMS w celu wykrycia wymiany małych cząsteczek między komórkami i tkankami, co prowadzi do rozwoju guza.

Modelowanie komunikacji raka jajnika do obrazowania analizy spektrometrii mas: metoda identyfikacji małocząsteczkowych komunikatorów chemicznych w rozwoju przerzutowego guza jajnika

Przerzuty odgrywają ogromną rolę w zjadliwości raka, odpowiadając za około 90% zgonów.  Przedstawiamy protokół dla modelu czerniaka z przerzutami u myszy, który jest przydatny do określenia skuteczności środków terapeutycznych przeciwko temu zjawisku klinicznemu.

Wstrzyknięcie syngenicznych komórek czerniaka myszy w celu określenia ich potencjału przerzutowego do płuc

Tutaj prezentujemy protokół generowania 3D organotypowego modelu skóry czerniaka sferoidalnego, który podsumowuje zarówno architekturę, jak i złożoność wielokomórkową narządu/guza in vivo, ale jednocześnie uwzględnia systematyczną interwencję eksperymentalną.

Organotypowy model sferoidalny czerniaka 3D

Przedstawiamy protokół do oceny poziomów ekspresji krążących mikroRNA (miRNA) w próbkach osocza od pacjentów z rakiem. W szczególności wykorzystaliśmy dostępny na rynku zestaw do cyrkulacji ekstrakcji miRNA i odwrotnej transkrypcji. Na koniec przeanalizowaliśmy panel 24 wybranych miRNA przy użyciu niestandardowych płytek sondy wstępnie wykrytej w czasie rzeczywistym.

Wykrywanie niestandardowego panelu krążącego mikroRNA u pacjentów z przerzutowym rakiem jelita grubego

W dobie immunoterapii i profilowania genomu pojedynczej komórki, biologia nowotworów wymaga nowatorskich narzędzi in vitro i obliczeniowych do badania interfejsu nowotworowo-immunologicznego we właściwym kontekście czasoprzestrzennym. Opisujemy protokoły wykorzystania kokultur mikroprzepływowych immunologicznych z nowotworami w warunkach 2D i 3D, kompatybilnych z dynamicznym, wieloparametrycznym monitorowaniem funkcji komórkowych.

Mikroprzepływowe modele kohodowli do analizy odpowiedzi immunologicznej w mikrośrodowiskach nowotworowych in vitro

To jest skuteczna metoda do wykrywania supresorów lub czynników powodujących przerzuty raka. Komórki, transdukowane biblioteką ekspresji, są wstrzykiwane do układu naczyniowego błony kosmówkowo-omoczniowej kurczaka w celu utworzenia kolonii przerzutowych. Kolonie o zmniejszonej lub zwiększonej inwazyjności są wycinane, namnażane, ponownie wstrzykiwane w celu potwierdzenia ich fenotypu, a na koniec analizowane przy użyciu sekwencjonowania o wysokiej przepustowości.

Odkrycie regulatorów przerzutów przy użyciu szybkiego i ilościowego modelu błony nazębiowej przyżyciowej kurcząt

Czerniak jest bardzo agresywną chorobą, która szybko rozprzestrzenia się na inne narządy. Protokół ten opisuje zastosowanie obrazowania ultrasonograficznego o ultrawysokiej częstotliwości, w połączeniu z renderowaniem 3D, do monitorowania objętości pachwinowych węzłów chłonnych w mysim modelu czerniaka z przerzutami Braf/Pten.

Analiza objętości węzłów chłonnych za pomocą obrazowania ultrasonograficznego o ultrawysokiej częstotliwości w genetycznie zmodyfikowanym mysim modelu czerniaka Braf/Pten

Tutaj prezentujemy protokół generowania organoidów pochodzących od pacjentów z czerniakiem poprzez hodowlę oddzielonych zawiesin komórkowych ze świeżych tkanek czerniaka. Organoidy te wiernie odwzorowują specyficzne dla pacjenta nowotwory in vitro, oferując innowacyjne podejście do badania mechanizmów immunosupresyjnych nowotworów, badań przesiewowych leków, mechanizmów oporności na leki i podejść do nadzoru nad rakiem.

Odkrywanie możliwości terapeutycznych dzięki modelom organoidowym pochodzącym od pacjentów z czerniakiem

Odkryj solidną platformę do identyfikacji nowych mediatorów przerzutów czerniaka przy użyciu standaryzowanych modeli in vivo. To podejście usprawnia odkrywanie celów terapeutycznych i rozwój terapii.

Solidna platforma odkrywcza do identyfikacji nowych mediatorów przerzutów czerniaka

Przeglądaj więcej filmów