<em>In Vivo</em> Vascular Permeability Detection in Mouse Submandibular Gland

Xiangdi Mao; Sainan Min; Qihua He; Xin Cong

doi:10.3791/64167

In vivo (in vivo) Wykrywanie przepuszczalności naczyń krwionośnych w mysim gruczole podż...

JoVE Journal
Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biology

In Vivo Vascular Permeability Detection in Mouse Submandibular Gland

In vivo (in vivo) Wykrywanie przepuszczalności naczyń krwionośnych w mysim gruczole podżuchwowym

Full Text

2,609 Views

07:10 min

August 4, 2022

DOI: 10.3791/64167-v

Xiangdi Mao¹, Sainan Min², Qihua He³, Xin Cong¹

¹Department of Physiology and Pathophysiology, Peking University School of Basic Medical Sciences, Key Laboratory of Molecular Cardiovascular Sciences,Ministry of Education, and Beijing Key Laboratory of Cardiovascular Receptors Research, ²Department of Oral and Maxillofacial Surgery,Peking University School and Hospital of Stomatology & National Center of Stomatology & National Clinical Reseah Center for Oral Diseases & National Engineering Research Center of Oral Biomaterials and Digital Medical Devices, ³State Key Laboratory of Natural and Biomimetic Drugs,Peking University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study evaluates the endothelial barrier function of the submandibular gland (SMG) using in vivo imaging techniques. Fluorescent tracers of varying molecular weights were injected into test animal models, demonstrating how molecular permeability can be assessed using two-photon laser scanning microscopy.

Key Study Components

Research Area

Endothelial barrier function
Vascular permeability studies
Fluorescent tracer application

Background

Importance of tight junctions in endothelial cells
Non-invasive imaging methods for tissue analysis
The role of submandibular glands in vascular studies

Methods Used

In vivo paracellular permeability detection
Mouse submandibular glands
Two-photon laser scanning microscopy

Main Results

Demonstrated varying leakage of fluorescent tracers based on molecular weight
Identified disruptions in endothelial barrier integrity due to duct ligation
Validated findings through fluorescence intensity quantification

Conclusions

The method provides insights into endothelial barrier function in tissues
Enhances understanding of vascular permeability related to physiological and pathological conditions

Frequently Asked Questions

What is the purpose of using different molecular weight tracers?

Using tracers of different molecular weights allows for assessing the permeability of tight junctions in endothelial cells.

How does two-photon laser scanning microscopy improve imaging?

This method enables deeper tissue imaging with less scattering compared to conventional techniques, providing clearer images.

What effects were observed when duct ligation was performed?

Duct ligation increased permeability, allowing larger molecular tracers to leak out, indicating a disruption in the endothelial barrier.

Why is proper SMG isolation critical in this protocol?

Careful isolation is essential to minimize artifacts and ensure accurate imaging and permeability assessments.

What are the applications of this imaging technique?

This technique can be applied to study vascular diseases, drug delivery systems, and tissue engineering.

What does the study reveal about vascular permeability in the SMG?

The findings provide a new understanding of how the SMG's endothelial barrier behaves under physiological challenges.

W obecnym protokole, funkcja bariery śródbłonkowej gruczołu podżuchwowego (SMG) została oceniona poprzez wstrzyknięcie różnych molekularnych znaczników fluorescencyjnych do żył kątowych badanych modeli zwierzęcych in vivo pod dwufotonowym laserowym mikroskopem skaningowym.

Niniejszy protokół opisuje pomiar przepuszczalności parakomórkowej in vivo w celu oceny funkcji ścisłych połączeń śródbłonkowych w gruczołach podżuchwowych myszy. Dwufotonowa laserowa mikroskopia skaningowa ma jednak nie tylko zalety konwencjonalnej mikroskopii konfokalnej, ale może być również wykorzystywana do wykrywania głębszych tkanek i wyraźniejszego obrazu. Eksperyment ten stanowi dobrą metodę oceny przepuszczalności naczyń krwionośnych różnych tkanek, zwłaszcza tkanek powierzchniowych i narządów zwierząt.

Zacznij od wyboru odpowiednich znaczników, takich jak fluoresceina, izotiocyjanian, znakowany dekstran i rodamina B, znakowany dekstran z wyraźnymi widmami emisji wzbudzenia, aby zminimalizować interferencję między sygnałami fluorescencji dla testu przepuszczalności. Rozcieńczyć śladowe ilości w sterylnym roztworze soli fizjologicznej buforowanej fosforanem w ilości 100 miligramów na mililitr i przechowywać podwielokrotności chronione przed światłem w temperaturze minus 20 stopni Celsjusza. Po znieczuleniu 8-10 tygodniowego samca myszy typu dzikiego, delikatnie przytrzymaj głowę i szyję myszy, aby jedna strona gałki ocznej lekko wystawała.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos