Name: Pomiar termogenezy mięśni szkieletowych u myszy i szczurów (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-07-27T14:40:00.000+00:00
Duration: 7 min 56 s
Description: Poznaj metodę pomiaru termogenezy mięśni szkieletowych u myszy i szczurów przy użyciu zdalnych transponderów temperatury. Technika umożliwia jednoczesne badanie wielu zwierząt z minimalnym zakłóceniem.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ta praca jest obsługiwana przez DK097644 R15 i DK108668 R15. Dziękujemy dr Chaitanyi K Gavini i dr Megan Rich za wcześniejszy wkład oraz dr Stanleyowi Dannemillerowi za zapewnienie zgodności z instytucjonalnymi wytycznymi dotyczącymi wykorzystywania zwierząt. Specjalne podziękowania dla dr Tima Bartnessa za dostarczenie podstawowych badań niezbędnych do zbudowania tej metody i powiązanych z nią badań. <silna klasa="xfig">Rysunki 1A, C, D i <silna klasa="xfig">Rysunek 2A zostały stworzone przy użyciu Biorender.com.

<ol><li>Periasamy, M., Herrera, J. L., Reis, F. C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletal+muscle+thermogenesis+and+its+role+in+whole+body+energy+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Metabolism+Journal%22%5BJournal%5D)">Skeletal muscle thermogenesis and its role in whole body energy metabolism.</a> Diabetes Metabolism Journal. 41 (5), 327-336 (2017).</li>
<li>Rowland, L. A., Bal, N. C., Periasamy, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+skeletal-muscle-based+thermogenic+mechanisms+in+vertebrate+endothermy%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Reviews+of+the+Cambridge+Philosophical+Society%22%5BJournal%5D)">The role of skeletal-muscle-based thermogenic mechanisms in vertebrate endothermy.</a> Biological Reviews of the Cambridge Philosophical Society. 90 (4), 1279-1297 (2015).</li>
<li>Maurya, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sarcolipin+is+a+key+determinant+of+the+basal+metabolic+rate%2C+and+its+overexpression+enhances+energy+expenditure+and+resistance+against+diet-induced+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biological+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Sarcolipin is a key determinant of the basal metabolic rate, and its overexpression enhances energy expenditure and resistance against diet-induced obesity.</a> Journal of Biological Chemistry. 290 (17), 10840-10849 (2015).</li>
<li>Grigg, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole-body+endothermy%3A+Ancient%2C+homologous+and+widespread+among+the+ancestors+of+mammals%2C+birds+and+crocodylians%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Reviews+of+the+Cambridge+Philosophical+Society%22%5BJournal%5D)">Whole-body endothermy: Ancient, homologous and widespread among the ancestors of mammals, birds and crocodylians.</a> Biological Reviews of the Cambridge Philosophical Society. 97 (2), 766-801 (2022).</li>
<li>Franck, J. P. C., Slight-Simcoe, E., Wegner, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothermy+in+the+smalleye+opah+%28Lampris+incognitus%29%3A+A+potential+role+for+the+uncoupling+protein+sarcolipin%5BTitle%5D)+AND+%22Comparative+Biochemistry+and+Physiology+-+Part+A%3A+Molecular+%26+Integrative+Physiology%22%5BJournal%5D)">Endothermy in the smalleye opah (Lampris incognitus): A potential role for the uncoupling protein sarcolipin.</a> Comparative Biochemistry and Physiology - Part A: Molecular & Integrative Physiology. 233, 48-52 (2019).</li>
<li>Nowack, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+nonshivering+thermogenesis+in+a+feral+mammal%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Muscle nonshivering thermogenesis in a feral mammal.</a> Scientific Reports. 9, 6378(2019).</li>
<li>Oliver, S. R., Anderson, K. J., Hunstiger, M. M., Andrews, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Turning+down+the+heat%3A+Down-regulation+of+sarcolipin+in+a+hibernating+mammal%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Turning down the heat: Down-regulation of sarcolipin in a hibernating mammal.</a> Neuroscience Letters. 696, 13-19 (2019).</li>
<li>Gorrell, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletal+muscle+thermogenesis+induction+by+exposure+to+predator+odor%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Skeletal muscle thermogenesis induction by exposure to predator odor.</a> The Journal of Experimental Biology. 223, Pt 8 (2020).</li>
<li>Gavini, C. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leanness+and+heightened+nonresting+energy+expenditure%3A+Role+of+skeletal+muscle+activity+thermogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Physiology+-+Endocrinology+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Leanness and heightened nonresting energy expenditure: Role of skeletal muscle activity thermogenesis.</a> The American Journal of Physiology - Endocrinology and Metabolism. 306 (6), 635-647 (2014).</li>
<li>Almundarij, T. I., Gavini, C. K., Novak, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suppressed+sympathetic+outflow+to+skeletal+muscle%2C+muscle+thermogenesis%2C+and+activity+energy+expenditure+with+calorie+restriction%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Reports%22%5BJournal%5D)">Suppressed sympathetic outflow to skeletal muscle, muscle thermogenesis, and activity energy expenditure with calorie restriction.</a> Physiological Reports. 5 (4), 13171(2017).</li>
<li>Harshaw, C., Lanzkowsky, J., Tran, A. D., Bradley, A. R., Jaime, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxytocin+and+%27social+hyperthermia%27%3A+Interaction+with+beta3-adrenergic+receptor-mediated+thermogenesis+and+significance+for+the+expression+of+social+behavior+in+male+and+female+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hormones+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Oxytocin and 'social hyperthermia': Interaction with beta3-adrenergic receptor-mediated thermogenesis and significance for the expression of social behavior in male and female mice.</a> Hormones and Behavior. 131, 104981(2021).</li>
<li>Caldwell, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxytocin+and+vasopressin%3A+Powerful+regulators+of+social+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22The+Neuroscientist%22%5BJournal%5D)">Oxytocin and vasopressin: Powerful regulators of social behavior.</a> The Neuroscientist. 23 (5), 517-528 (2017).</li>
<li>Harshaw, C., Leffel, J. K., Alberts, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxytocin+and+the+warm+outer+glow%3A+Thermoregulatory+deficits+cause+huddling+abnormalities+in+oxytocin-deficient+mouse+pups%5BTitle%5D)+AND+%22Hormones+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Oxytocin and the warm outer glow: Thermoregulatory deficits cause huddling abnormalities in oxytocin-deficient mouse pups.</a> Hormones and Behavior. 98, 145-158 (2018).</li>
<li>Gavini, C. K., Britton, S. L., Koch, L. G., Novak, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inherently+lean+rats+have+enhanced+activity+and+skeletal+muscle+response+to+central+melanocortin+receptors%5BTitle%5D)+AND+%22Obesity%22%5BJournal%5D)">Inherently lean rats have enhanced activity and skeletal muscle response to central melanocortin receptors.</a> Obesity. 26 (5), 885-894 (2018).</li>
<li>Gavini, C. K., Jones, W. C., Novak, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ventromedial+hypothalamic+melanocortin+receptor+activation%3A+regulation+of+activity+energy+expenditure+and+skeletal+muscle+thermogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Ventromedial hypothalamic melanocortin receptor activation: regulation of activity energy expenditure and skeletal muscle thermogenesis.</a> The Journal of Physiology. 594 (18), 5285-5301 (2016).</li>
<li>Zaretsky, D. V., Romanovsky, A. A., Zaretskaia, M. V., Molkov, Y. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+oxidative+metabolism+can+increase+the+difference+between+local+temperature+and+arterial+blood+temperature+by+up+to+1.3%28o%29C%3A+Implications+for+brain%2C+brown+adipose+tissue%2C+and+muscle+physiology%5BTitle%5D)+AND+%22Temperature%22%5BJournal%5D)">Tissue oxidative metabolism can increase the difference between local temperature and arterial blood temperature by up to 1.3(o)C: Implications for brain, brown adipose tissue, and muscle physiology.</a> Temperature. 5 (1), 22-35 (2018).</li>
<li>Yoo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exercise+activates+compensatory+thermoregulatory+reaction+in+rats%3A+A+modeling+study%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">Exercise activates compensatory thermoregulatory reaction in rats: A modeling study.</a> Journal of Applied Physiology. 119 (12), 1400-1410 (2015).</li>
<li>Langer, F., Fietz, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ways+to+measure+body+temperature+in+the+field%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thermal+Biology%22%5BJournal%5D)">Ways to measure body temperature in the field.</a> Journal of Thermal Biology. 42, 46-51 (2014).</li>
<li>Pence, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+apolipoprotein+A-IV+stimulates+thermogenesis+in+brown+adipose+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Central apolipoprotein A-IV stimulates thermogenesis in brown adipose tissue.</a> International Journal of Molecular Sciences. 22 (3), 1221(2021).</li>
<li>Li, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Homeostatic+disturbance+of+thermoregulatory+functions+in+rats+with+chronic+fatigue%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Research%22%5BJournal%5D)">Homeostatic disturbance of thermoregulatory functions in rats with chronic fatigue.</a> Journal of Neuroscience Research. 165, 45-50 (2021).</li>
<li>Carlier, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacodynamic+effects%2C+pharmacokinetics%2C+and+metabolism+of+the+synthetic+cannabinoid+AM-2201+in+male+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacology+and+Experimental+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Pharmacodynamic effects, pharmacokinetics, and metabolism of the synthetic cannabinoid AM-2201 in male rats.</a> Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 367 (3), 543-550 (2018).</li>
<li>Pato, A. M., Romero, D. M., Sosa Holt, C. S., Nemirovsky, S. I., Wolansky, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+subcutaneous+transponders+to+monitor+body+temperature+in+laboratory+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacological+and+Toxicological+Methods%22%5BJournal%5D)">Use of subcutaneous transponders to monitor body temperature in laboratory rats.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 114, 107145(2022).</li>
<li>Almeida, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lean+in+one+way%2C+in+obesity+another%3A+Effects+of+moderate+exercise+in+brown+adipose+tissue+of+early+overfed+male+Wistar+rats%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Obesity%22%5BJournal%5D)">Lean in one way, in obesity another: Effects of moderate exercise in brown adipose tissue of early overfed male Wistar rats.</a> International Journal of Obesity. 46 (1), 137-143 (2022).</li>
<li>Brito, M. N., Brito, N. A., Baro, D. J., Song, C. K., Bartness, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+activation+of+the+sympathetic+innervation+of+adipose+tissues+by+melanocortin+receptor+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Differential activation of the sympathetic innervation of adipose tissues by melanocortin receptor stimulation.</a> Endocrinology. 148 (11), 5339-5347 (2007).</li>
<li>Vaughan, C. H., Shrestha, Y. B., Bartness, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+a+novel+melanocortin+receptor-containing+node+in+the+SNS+outflow+circuitry+to+brown+adipose+tissue+involved+in+thermogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Characterization of a novel melanocortin receptor-containing node in the SNS outflow circuitry to brown adipose tissue involved in thermogenesis.</a> Brain Research. 1411, 17-27 (2011).</li>
<li>Kort, W. J., Hekking-Weijma, J. M., TenKate, M. T., Sorm, V., VanStrik, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+microchip+implant+system+as+a+method+to+determine+body+temperature+of+terminally+ill+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">A microchip implant system as a method to determine body temperature of terminally ill rats and mice.</a> Laboratory Animals. 32 (3), 260-269 (1998).</li>
<li>Mei, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Body+temperature+measurement+in+mice+during+acute+illness%3A+Implantable+temperature+transponder+versus+surface+infrared+thermometry%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Body temperature measurement in mice during acute illness: Implantable temperature transponder versus surface infrared thermometry.</a> Scientific Reports. 8, 3526(2018).</li>
<li>Warn, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infrared+body+temperature+measurement+of+mice+as+an+early+predictor+of+death+in+experimental+fungal+infections%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">Infrared body temperature measurement of mice as an early predictor of death in experimental fungal infections.</a> Laboratory Animals. 37 (2), 126-131 (2003).</li>
<li>Hargreaves, K., Dubner, R., Brown, F., Flores, C., Joris, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+and+sensitive+method+for+measuring+thermal+nociception+in+cutaneous+hyperalgesia%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia.</a> Pain. 32 (1), 77-88 (1988).</li>
<li>Fiebig, K., Jourdan, T., Kock, M. H., Merle, R., Thone-Reineke, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+infrared+thermography+for+temperature+measurement+in+adult+male+NMRI+nude+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Association+for+Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">Evaluation of infrared thermography for temperature measurement in adult male NMRI nude mice.</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 57 (6), 715-724 (2018).</li>
<li>Franco, N. H., Geros, A., Oliveira, L., Olsson, I. A. S., Aguiar, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ThermoLabAnimal+-+A+high-throughput+analysis+software+for+non-invasive+thermal+assessment+of+laboratory+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+%26+Behavior%22%5BJournal%5D)">ThermoLabAnimal - A high-throughput analysis software for non-invasive thermal assessment of laboratory mice.</a> Physiology & Behavior. 207, 113-121 (2019).</li>
<li>Koganti, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disruption+of+KATP+channel+expression+in+skeletal+muscle+by+targeted+oligonucleotide+delivery+promotes+activity-linked+thermogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Therapy%22%5BJournal%5D)">Disruption of KATP channel expression in skeletal muscle by targeted oligonucleotide delivery promotes activity-linked thermogenesis.</a> Molecular Therapy. 23 (4), 707-716 (2015).</li>
<li>Bal, N. C., Periasamy, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uncoupling+of+sarcoendoplasmic+reticulum+calcium+ATPase+pump+activity+by+sarcolipin+as+the+basis+for+muscle+non-shivering+thermogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Philosophical+Transactions+of+the+Royal+Society+B%22%5BJournal%5D)">Uncoupling of sarcoendoplasmic reticulum calcium ATPase pump activity by sarcolipin as the basis for muscle non-shivering thermogenesis.</a> Philosophical Transactions of the Royal Society B. 375 (1793), 20190135(2020).</li>
<li>Hicks, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Body+temperature+and+cardiac+changes+induced+by+peripherally+administered+oxytocin%2C+vasopressin+and+the+non-peptide+oxytocin+receptor+agonist+WAY+267%2C464%3A+a+biotelemetry+study+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Body temperature and cardiac changes induced by peripherally administered oxytocin, vasopressin and the non-peptide oxytocin receptor agonist WAY 267,464: a biotelemetry study in rats.</a> British Journal of Pharmacology. 171 (11), 2868-2887 (2014).</li>
<li>Kasahara, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxytocin+receptor+in+the+hypothalamus+is+sufficient+to+rescue+normal+thermoregulatory+function+in+male+oxytocin+receptor+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Oxytocin receptor in the hypothalamus is sufficient to rescue normal thermoregulatory function in male oxytocin receptor knockout mice.</a> Endocrinology. 154 (11), 4305-4315 (2013).</li>
<li>Kasahara, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+the+oxytocin+receptor+expressed+in+the+rostral+medullary+raphe+in+thermoregulation+during+cold+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Role of the oxytocin receptor expressed in the rostral medullary raphe in thermoregulation during cold conditions.</a> Frontiers in Endocrinology. 6, 180(2015).</li>
<li>Yuan, J., Zhang, R., Wu, R., Gu, Y., Lu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+oxytocin+to+rectify+metabolic+dysfunction+in+obese+mice+are+associated+with+increased+thermogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+and+Cellular+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">The effects of oxytocin to rectify metabolic dysfunction in obese mice are associated with increased thermogenesis.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 514, 110903(2020).</li>
<li>Scholl, J. L., Afzal, A., Fox, L. C., Watt, M. J., Forster, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+differences+in+anxiety-like+behaviors+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+%26+Behavior%22%5BJournal%5D)">Sex differences in anxiety-like behaviors in rats.</a> Physiology & Behavior. 211, 112670(2019).</li>
</ol>

Autorzy oświadczają, że nie pozostają w konflikcie interesów.

Ten protokół badania temperatury zapewnia pole do bezpośredniego pomiaru termogenezy mięśni szkieletowych. Ma to kluczowe znaczenie, ponieważ badania zagłębiają się w identyfikację mechanizmów leżących u podstaw termogenezy mięśni33. Metoda zapewnia dwa opłacalne protokoły pomiaru termogenezy mięśni szkieletowych w warunkach kontekstowych i farmakologicznych. Protokół ten podkreśla znaczenie zarówno habituacji, jak i aklimatyzacji w ramach tych procedur. Habituacja służy do wielokrotnego wprowadza...

W ramach badań metabolicznych, badanie termogenezy mięśni szkieletowych jest obiecującą nową drogą do badania homeostazy masy ciała. Opublikowana literatura potwierdza tezę, że reakcje termogeniczne jednego z największych układów narządów organizmu - mięśni szkieletowych - zapewniają drogę do zwiększenia wydatku energetycznego i innych efektów metabolicznych, tym samym skutecznie przywracając równowagę systemów w chorobach takich jak otyłość1,2,3. Jeśli mięsień można uznać za narząd termogeniczny, badania muszą wykorzystywać praktyczną metodologię badania zmian termogenicznych w obrębie tego narządu. Chęć zrozumienia endotermicznego wpływu mięśni szkieletowych i użyteczność tej metodologii do badania termogenezy mięśni bez dreszczy nie są specyficzne dla badań metabolicznych. Dyscypliny takie jak evolution4, fizjologia porównawcza5 i ekofizjologia6,7 wykazały zainteresowanie zrozumieniem, w jaki sposób termogeneza mięśni może przyczyniać się do endotermii i jak ten mechanizm dostosowuje się do środowiska. Przedstawiony protokół zawiera kluczowe metody niezbędne do odpowiedzi na te pytania.
Podana metoda może być wykorzystana do oceny zarówno kontekstowej, jak i farmakologicznej modulacji temperatury mięśni, w tym unikalnej techniki dostarczania zapachu drapieżnika (PO) w celu zmiany kontekstu w celu odtworzenia zagrożenia ze strony drapieżnika. Wcześniejsze doniesienia wykazały zdolność PO do szybkiego indukowania znacznego wzrostu termogenezy mięśni8. Co więcej, bodźce farmakologiczne mogą również zmieniać temperaturę mięśni. Wykazano to w kontekście termogenezy mięśni indukowanej PO, gdzie farmakologiczna blokada obwodowych receptorów β-adrenergicznych, przy użyciu nadololu, hamowała zdolność PO do indukowania termogenezy mięśni bez istotnego wpływu na termogenezę skurczową podczas chodzenia na bieżni8. Centralne podawanie agonistów receptora melanokortyny u szczurów było również wykorzystywane do rozpoznawania mechanizmów mózgowych zmieniających termogenezę9,10.
Podane tutaj jest wstępne badanie zdolności neurohormonu oksytocyny (Oxt) do zmiany termogenezy mięśni u myszy. Podobnie jak w przypadku zagrożenia ze strony drapieżnika, spotkania społeczne z przedstawicielami tego samego gatunku podnoszą temperaturę ciała, zjawisko określane jako hipertermia społeczna11. Biorąc pod uwagę znaczenie Oxt dla zachowań społecznych12, spekuluje się, że Oxt jest mediatorem hipertermii społecznej u myszy. Rzeczywiście, antagonista receptora oksytocyny zmniejsza hipertermię społeczną u myszy11, a młode myszy pozbawione Oxt wykazują deficyty w behawioralnych i fizjologicznych aspektach termoregulacji, w tym termogenezy13. Biorąc pod uwagę, że Harshaw i in. (2021) nie znaleźli dowodów potwierdzających termogenezę brązowej tkanki tłuszczowej zależnej od receptora β3 adrenergicznego (BAT) z hipertermią społeczną11, założono, że hipertermia społeczna może być napędzana przez indukcję termogenezy mięśni przez Oxt.
Aby zmierzyć termogenezę mięśni szkieletowych, poniższy protokół wykorzystuje implantację wstępnie zaprogramowanych transponderów IPTT-300 przylegających do interesującego mięśnia u myszy lub szczura8,10,14,15. Transpondery te są mikroczipami w szklanych obudowach, które są odczytywane za pomocą odpowiednich czytników transponderów. Niewiele lub żadne badania nie wykorzystywały tej technologii w tym charakterze, chociaż badania sugerowały potrzebę specyficzności zapewnianej przez tę metodę16,17. Wcześniejsze badania wykazały niezawodność tej metody i różnorodność sposobów wykorzystania transponderów temperatury w porównaniu z innymi metodami badania temperatury18 lub w połączeniu z metodami chirurgicznymi (np. kaniulacja19). Jednak badania tego rodzaju opierają się na różnych strategicznych umiejscowieniach do pomiaru ogólnej temperatury ciała20,21,22 lub określonych tkanek, takich jak BAT23,24,25.
Zamiast mierzyć temperaturę z tych miejsc lub podczas korzystania z termometrów dousznych lub doodbytniczych26, opisana tutaj metoda zapewnia specyficzność dla interesującego mięśnia. Zdolność do celowania w miejsce poprzez bezpośrednie wszczepianie transponderów przylegających do mięśni będących przedmiotem zainteresowania jest bardziej skuteczna w badaniu termogenezy mięśni. Zapewnia nową drogę oprócz tych zapewnianych przez powierzchniową termometrię w podczerwieni27,28 lub pomiary temperatury skóry za pomocą termopary29. Co więcej, dane dostarczone za pomocą tej metody oferują szereg ścieżek badawczych, unikając konieczności stosowania dużego, drogiego, zaawansowanego technologicznie sprzętu i oprogramowania, takiego jak termografia w podczerwieni30,31,32.
Ta metoda została z powodzeniem wykorzystana do pomiaru temperatury w mięśniu czworogłowym i brzuchatym łydce, zarówno jednostronnie, jak i dwustronnie. Ta metoda okazała się również skuteczna w połączeniu z chirurgią stereotaktyczną14,15. W odległości ~7-10 cm od ramienia transpondera służą przenośne czytniki transponderów (DAS-8027/DAS-7007R) do skanowania, pomiaru i wyświetlania temperatury. Ta odległość była krytyczna i cenna dla wcześniejszych badań8,9,10, ponieważ minimalizuje potencjalne czynniki stresogenne i zmienne zmieniające temperaturę, takie jak obchodzenie się ze zwierzętami podczas procedur testowych. Za pomocą timerów można następnie rejestrować i zbierać pomiary przez pewien czas bez bezpośredniej interakcji ze zwierzętami.
Aby jeszcze bardziej zminimalizować przeszkadzanie myszom podczas testowania, ta metoda opisuje montaż i użycie pionów z rur PVC, aby umożliwić eksperymentatorowi dostęp do dolnej części klatek domowych podczas testowania. Za pomocą taśm nośnych w połączeniu z czytnikiem cyfrowym można dokonywać pomiarów temperatury kończyny transpondera bez jakiejkolwiek interakcji ze zwierzętami po umieszczeniu bodźca. Przy minimalnych kosztach metoda ta może być stosowana w połączeniu z bodźcami farmakologicznymi i kontekstowymi, dzięki czemu jest dość dostępna dla badaczy. Dodatkowo, metoda ta może być stosowana ze znaczną liczbą badanych (~16 myszy lub ~12 szczurów) jednocześnie, oszczędzając czas na zwiększenie ogólnej przepustowości dla dowolnego projektu badawczego.
W tej metodzie wprowadzono stworzony mechanizm prezentowania zapachów myszom za pomocą kulek do zaparzania herbaty z siatki ze stali nierdzewnej, od teraz nazywanych "kulkami do herbaty". Chociaż te kulki do herbaty są idealne do przechowywania dowolnego materiału zapachowego, w tych badaniach ręczniki, które służyły jako ściółka w klatce przez 2-3 tygodnie dla fretek, naturalnego drapieżnika myszy i szczurów, są umieszczane w każdej kulce do herbaty. Każdy ręcznik jest cięty na kwadraty o wymiarach 5 cm x 5 cm. To poddawanie jest również powtarzane z identycznymi bezwonnymi ręcznikami kontrolnymi. Prezentowanie tych zapachów bez bariery (np. kulki herbaty) doprowadziło do tego, że myszy rozdrabniały włókna w swoich klatkach, zwiększając aktywność fizyczną. To zachowanie nie było tak wyraźne u szczurów. Kulki do herbaty zapewniają wentylowaną osłonę ręcznika, zapewniając pełny dostęp do zapachu, jednocześnie pozostając chronionym przez cały czas trwania badania eksperymentalnego. Te kulki do herbaty można odkażać zgodnie z protokołami użytkowania zwierząt, przygotowywać i wprowadzać bezpośrednio po operacji, aby rozpocząć przyzwyczajanie zwierząt do struktury wraz z bodźcem kontrolnym. Myszy mogą wtedy żyć z dodatkowym wzbogaceniem, zmniejszając znaczenie prezentacji ostrego bodźca.
Przyzwyczajenie do obecności kulki herbaty to tylko jeden aspekt przyzwyczajenia, który jest krytyczny dla tej metody. Opisany protokół habituacji składa się również z wielokrotnego wystawiania na działanie procedury testowej w celu normalizacji środowiska testowego (tj. personelu, transportu i przemieszczania się do miejsca testowania, ekspozycji na bodziec). Ta rozszerzona habituacja minimalizuje zniuansowane reakcje zwierząt i koncentruje pomiary na pożądanych zmiennych zależnych (np. bodźcach farmakologicznych lub kontekstowych). Poprzednia ocena tego protokołu zidentyfikowała cztery próby jako minimalną liczbę przyzwyczajeń niezbędną przed testem temperatury w klatkach domowych u szczurów8. Jeśli badania są oddzielone od siebie długimi okresami (ponad 2-3 tygodnie), zwierzęta muszą zostać ponownie przyzwyczajone. Do powtórnego przyzwyczajenia wystarczy co najmniej jedna lub dwie próby. Jeśli jednak testy temperaturowe są oddzielone dłuższymi okresami czasu, konieczne może być powtórzenie większej liczby prób.
W ciągłym wysiłku przyzwyczajenia myszy i szczurów do procedury testowej, okres aklimatyzacji przed prezentacją bodźca powinien być uwzględniony w każdej próbie eksperymentalnej. Ten czas aklimatyzacji ma kluczowe znaczenie dla przywrócenia równowagi temperatury i aktywności po przeniesieniu do miejsca testowania. Gryzonie mają tendencję do gwałtownego wzrostu temperatury z powodu translokacji. Aklimatyzacja powinna składać się z co najmniej 1 godziny bez interakcji ze strony eksperymentatora w dniu badania, przed jakimkolwiek dodaniem środka farmakologicznego lub bodźców kontekstowych. Jest to konieczne każdego dnia testowania.
W opisanych testach temperatury w klatce domowej, myszy mają wolny zasięg swojej klatki domowej do poruszania się w odpowiedzi na testowany bodziec. Może to powodować zmienne przesunięcia w aktywności, wpływając na dokładność odczytów temperatury, a tym samym na analizę efektów termogenicznych zmiennej niezależnej (np. bodźca farmakologicznego lub kontekstowego). Uznając potencjalne zmiany temperatury spowodowane poziomem aktywności, poniżej znajduje się protokół opisujący stosowanie temperatury podczas chodzenia na bieżni. Opublikowana literatura opisuje udane zastosowanie tej procedury u szczurów i jest ona obecnie stosowana u myszy8,10,14,15. Chodzenie na bieżni utrzymuje stałą prędkość aktywności osoby badanej. W tym badaniu bieżnie są ściśle używane do kontrolowania poziomu aktywności i dlatego są ustawione na najniższą dostępną prędkość na bieżni, aby promować chodzenie dla myszy i podobnie niskie ustawienie dla szczurów.
Poniższa procedura jest opisana do pomiaru temperatury jednostronnego brzuchatego łydki u myszy i prezentacji zapachu drapieżnika. Wzór może być stosowany w połączeniu ze środkami farmakologicznymi i można go przenieść na szczury i inne grupy mięśni szkieletowych (tj. Mięsień czworogłowy) u myszy. W przypadku szczurów transpondery można umieścić w mięśniu brzuchatym łydki obustronnie oraz w brunatnej tkance tłuszczowej. Ze względu na ograniczenia dotyczące rozmiaru i odległości, na jedną mysz można używać tylko jednego transpondera. Niewielkie modyfikacje (np. usunięcie bodźców kontekstowych) mogą być wprowadzone w celu oceny reakcji termogenicznych na środki farmakologiczne.

<table><tbody><tr><td>1012M-2 Modułowa zamknięta bieżnia metaboliczna dla myszy, 2 tory z Shock</td><td>Columbus Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>1012R-2 Modułowa zamknięta bieżnia metaboliczna dla szczurów, 2 tory z Shock</td><td>Columbus Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>1-1/4 cala. Nóż do PCV z grzechotką</td><td>BrassCraft</td><td></td><td></td></tr><tr><td>1 mL Strzykawki</td><td>Fisher Scientific</td><td>BD 309659</td><td></td></tr><tr><td>Waciki Betadine</td><td>Fisher Scientific</td><td>19-898-945</td><td></td></tr><tr><td>Cewka wzmacniająca</td><td>BioMedic Data Systems</td><td></td><td>Transponder Akcesorium</td></tr><tr><td>Elektryczne maszynki do strzyżenia</td><td>Andis</td><td></td><td>40 Ultraedge Clipper Blade</td></tr><tr><td>Elastyczne arkusze lustrzane</td><td>Amazon</td><td></td><td>Samoprzylepne nieszklane płytki lustrzane</td></tr><tr><td>Kleszcze</td><td>Fisher Scientific</td><td>89259-940</td><td></td></tr><tr><td>Komora indukcyjna</td><td></td> poduszki <td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td>grzewczej</td></tr> (izofluran)Kent Scientific VetFlo-0730 3.0 L Niskie koszty komory do tradycyjnych waporyzatorów <tr><td>Ketoprophen</td><td>Med-Vet Intl.</td><td>Paski magnetyczne RXKETO-50</td><td></td></tr> Amazon <tr><td>Magnesy</td><td>Amazon</td><td></td><td>DIYMAG Haczyki magnetyczne 40lbs</td></tr><tr><td></td><td></td> Igły Med-Vet Intl.<td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td>26400</td><td></td></tr><tr><td>Neomycyna/Polimixyna/Bacytracyna z hydrokortyzonem Maść okulistyczna, 3,5 g</td><td>Med-Vet Intl.</td><td>RXNPB-HC</td><td></td></tr><tr><td>Oasis Wchłanialny szew</td><td>Med-Vet Intl.</td><td>MV-H821-V</td><td></td></tr><tr><td>Ręczniki zapachowe Predator (fretka)</td> Marshall <td>BioResources</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rura</td><td></td><td></td><td></td>PVC</tr><tr><td>Odblask do usuwania ran</td><td>CellPoint Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Odruchowy klips do ran, 7 mm (mysz)</td><td>CellPoint Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Odruchowy klips do ran, 9 mm (szczur)</td><td>CellPoint Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Srerile Autoclip, 7 mm (mysz)</td><td>CellPoint Scientific</td><td></td><td>Wound Clip Applier (mysz)</td></tr><tr><td>Sitka ze stali nierdzewnej Przyprawy interwałowe Zaparzacz do herbaty</td><td>Amazon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sterylny Autoclip, 9 mm (szczur)</td><td>CellPoint Scientific</td><td></td><td>Wound Clip Applier (szczur)</td></tr><tr><td>Sterylna sól fizjologiczna</td><td>Med-Vet Intl.</td>Nożyczki chirurgiczne <td>RX0.9NACL-10</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Fisher Scientific</td><td>08-951-5</td><td></td></tr><tr><td>Prześcieradła</td><td></td><td></td><td></td>chirurgiczne</tr><tr><td>Ręczniki (kontrola/przyzwyczajenie)</td><td>Amazon</td><td></td><td>100% bawełniane ręczniki, białe</td></tr><tr><td>Transpondery</td><td>Modele systemów</td><td></td> danych BioMedic: Czytnik transponderów <td>IPTT-300</td></tr><tr><td></td><td>Modele systemów</td><td></td> danych BioMedic:<td> DAS-8027-IUS/ DAS-7007R</td></tr><tr><td>Versaclean</td><td>Fisher Scientific</td><td>18-200-700</td><td>płynny detergent</td></tr><tr><td>Webcol Alcohol Preps</td><td>Covidien</td><td>22-246-073&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Elementy klinowe do rur</td><td></td><td></td><td></td> PVC</tr></tbody></table>

pomiar termogenezy mięśni szkieletowych u myszy i szczurów

Measuring Skeletal Muscle Thermogenesis in Mice and Rats

Termogeneza mięśni szkieletowych stanowi potencjalną drogę do lepszego zrozumienia homeostazy metabolicznej i mechanizmów leżących u podstaw wydatkowania energii. Zaskakująco mało jest dostępnych dowodów na bezpośrednie powiązanie neuronalnych, mięśniowokomórkowych i molekularnych mechanizmów termogenezy z mierzalnymi zmianami temperatury mięśni. W artykule opisano metodę, w której transpondery temperatury są wykorzystywane do pobierania bezpośrednich pomiarów temperatury mięśni szkieletowych myszy i szczurów.
Zdalne transpondery są chirurgicznie wszczepiane w mięśnie myszy i szczurów, a zwierzęta mają czas na regenerację. Myszy i szczury muszą być następnie wielokrotnie przyzwyczajane do środowiska i procedury testowej. Zmiany temperatury mięśni są mierzone w odpowiedzi na bodźce farmakologiczne lub kontekstowe w klatce domowej. Temperaturę mięśni można również mierzyć podczas zalecanej aktywności fizycznej (tj. chodzenia na bieżni ze stałą prędkością), aby uwzględnić zmiany w aktywności jako czynniki przyczyniające się do zmian temperatury mięśni wywołanych przez te bodźce.
Ta metoda została z powodzeniem wykorzystana do wyjaśnienia mechanizmów leżących u podstaw kontroli termogenicznej mięśni na poziomie mózgu, układu współczulnego układu nerwowego i mięśni szkieletowych. Podano demonstracje tego sukcesu przy użyciu zapachu drapieżnika (PO; zapach fretki) jako bodźca kontekstowego i wstrzyknięć oksytocyny (Oxt) jako bodźca farmakologicznego, gdzie zapach drapieżnika indukuje termogenezę mięśni, a Oxt tłumi temperaturę mięśni. W ten sposób te zestawy danych pokazują skuteczność tej metody w wykrywaniu gwałtownych zmian temperatury mięśni.

Transpondery wszczepiono jednostronnie w prawy mięsień brzuchaty łydki u dziesięciu myszy typu dzikiego (WT) w wieku 4-6 miesięcy, wyhodowanych z linii SF1-Cre (Tg(Nr5a1-cre)7Lowl/J, Strain #012462, tło genetyczne C57BL/6J i FVB; samice N = 5; samce N = 5). Po rekonwalescencji myszy poddano habituacji do procedury pomiaru temperatury w klatce domowej, która nie obejmowała bodźca kontekstowego (np. PO). Pomiary temperatury za pomocą czytnika transponderów rejestrowano w pomieszczeniu zwierzęcym oraz po przeniesieniu do mi...

Myszy i szczury są chirurgicznie wszczepiane za pomocą zdalnych transponderów temperatury, a następnie przyzwyczajane do środowiska testowego i procedury. Zmiany temperatury mięśni są mierzone w odpowiedzi na bodźce farmakologiczne lub kontekstowe w klatce domowej lub podczas zalecanej aktywności fizycznej (np. chodzenie na bieżni ze stałą prędkością).

Pomiar termogenezy mięśni szkieletowych u myszy i szczurów

Skeletal muscle thermogenesis provides a potential avenue for better understanding metabolic homeostasis and the mechanisms underlying energy expenditure. ...

Protokół ten jest istotny, ponieważ zapewnia bezpośrednią i opłacalną metodę pomiaru temperatury mięśni szkieletowych. Co więcej, może być stosowany w różnych kontekstach i pod wpływem środków farmakologicznych. Główną zaletą tej techniki jest liczba zwierząt, które mogą być testowane jednocześnie.Opisane tutaj minimalne niepokojenie zwierząt pozwala uniknąć konieczności stosowania zaawansowanych technologicznie metod, takich jak termografia w podczerwieni. Osobniki mogą mieć trudności z pomiarem temperatury zwierząt w klatce domowej lub na bieżniach podczas ruchu. Można temu zapobiec, ćwicząc techniki pomiarowe podczas prób habituacji.Zacznij od ogrzania dołączonych transponderów między dłońmi w rękawiczkach i upewnij się, że zachowujesz sterylność podczas pracy z transponderami. Zmierz temperaturę za pomocą skanera temperatury i sprawdź, czy transponder odczytuje zmiany temperatury. Po znieczuleniu myszy zgodnie z opisem w manuskrypcie, użyj nożyczek chirurgicznych, aby wykonać płytkie nacięcie przez skórę na prawej tylnej kończynie.Umieść ostrą krawędź wstępnie zaprogramowanego i niezakorkowanego sterylnego transpondera w nacięciu, równolegle do mięśnia brzuchatego łydki. Upewnij się, że zielony tłok jest skierowany do góry i jest widoczny. Kontynuuj wciskanie aplikatora transpondera w nacięcie, aż otwór aplikatora transpondera przestanie być widoczny.Obróć aplikator o 180 stopni, tak aby zielony tłok był skierowany w dół w kierunku kończyny myszy i nie był już widoczny dla eksperymentatora. Gdy aplikator transpondera zostanie umieszczony obok lub częściowo zamknięty w brzuchatym łydce, popchnij zielony tłok, pozwalając, aby nacisk aplikatora odciągnął rękę badacza od myszy. Za pomocą kleszczy trzymaj otwartą skórę razem.Umieść klips do rany ze sterylnym automatycznym klipsem, w razie potrzeby zegnij. Użyj wchłanialnych szwów przed sterylnym autoclipem, aby zamknąć warstwę powięzi. Za pomocą czytnika transponderów sprawdź temperaturę mięśnia myszy.Po wyjęciu myszy ze znieczulenia umieść ją w czystej klatce domowej na poduszce grzewczej i upewnij się, że klatka domowa zawiera kulkę herbaty z bezwonnym ręcznikiem, aby rozpocząć przyzwyczajenie. Przypisz lokalizację do pionu w pomieszczeniu testowym, a aby uniknąć mylących zmiennych, oddziel taśmy ustawione na odbiór różnych bodźców kontekstowych na co najmniej dwa metry. Za pomocą pasków magnetycznych przymocuj arkusze chirurgiczne w poprzek pionu i stwórz barierę wizualną, aby zminimalizować wahania temperatury spowodowane aktywnością myszy w odpowiedzi na ruch eksperymentatora.Przygotuj kulki do herbaty z ręcznikami kontrolnymi i zapachowymi drapieżników. Przenieś zwierzę do przygotowanego pomieszczenia do badań. Umieść zwierzę w wyznaczonym miejscu na podstopnicy i unikaj zmiany położenia podstopnicy między procedurami habituacji i testowania.Wyjmij piłkę z klatki domowej z klatki domowej myszy. Odzyskaj klatkę za pomocą szmatki lub prześcieradła chirurgicznego i pozwól myszy zaaklimatyzować się w przestrzeni testowej przez jedną do dwóch godzin. Po zakończeniu aklimatyzacji użyj skanera, aby zmierzyć i zarejestrować temperaturę bazową obiektu.Otwórz klatkę i umieść kulkę herbaty na podłodze klatki domowej. Załóż pokrywę klatki i pokrycie z tkaniny. Uruchom stoper i zmierz temperaturę badanych w tej samej kolejności, w jakiej umieszczono kulki do herbaty.Zapisz temperatury i czas zegarowy pomiarów, podążając za żądanymi punktami czasowymi. Przygotuj bieżnie do testów, upewniając się, że amortyzatory są sprawne. Upewnij się, że zwierzęta używają tej samej bieżni do przyzwyczajania i procedur testowych.Przenieś mysz do pokoju testowego i pozwól jej zaaklimatyzować się przez jedną do dwóch godzin w klatce domowej. Przed przeniesieniem myszy na bieżnię zmierz i zapisz jej temperaturę bazową. Aby ułatwić zakładanie i zdejmowanie, przyklej ręczniki kontrolne lub przeciwzapachowe drapieżników do sufitu lub pod przodem bieżni.Skieruj mysz na przypisaną bieżnię. Włącz pas bieżni i amortyzator, uruchom stoper i wykonaj pomiary badanych w tej samej kolejności, w jakiej zostały ustawione na bieżniach. Zapisz temperatury i czas zegarowy pomiarów, podążając za żądanymi punktami czasowymi.Po zakończeniu testu wyłącz amortyzator i bieżnię, a następnie umieść mysz w klatce domowej. Wyczyść bieżnię za pomocą płynnego detergentu i wody i usuń resztki zapachu drapieżnika. Wielokrotne próby habituacji znacznie obniżyły temperaturę mięśni myszy, pokazując, że myszy są przyzwyczajone do środowiska testowego i protokołu.Połączona analiza płci w czwartym badaniu nie wykazała istotnej różnicy między pomiarami temperatury przed ruchem a pomiarami temperatury wyjściowej, co świadczy o skuteczności jednogodzinnej aklimatyzacji do kontekstu testowego. Stymulacja farmakologiczna przy użyciu oksytocyny u myszy wykazała obniżoną temperaturę mięśni w stosunku do wartości wyjściowej z maksymalnym spadkiem po 30 minutach. Temperatura mięśni została znormalizowana 60 minut po wstrzyknięciu oksytocyny.U szczurów Sprague Dawley zaobserwowano trwały wzrost temperatury mięśni po usunięciu zapachu drapieżnika jako bodźców kontekstowych. Szczury Sprague Dawley wykazywały silny wzrost temperatury w odpowiedzi na zapach fretki w porównaniu z zapachem kontrolnym. W obecności innych awersyjnych zapachów zapach fretki wytwarza i utrzymuje silną zmianę termogeniczną w porównaniu ze wszystkimi innymi warunkami.Podczas próby przeprowadzenia tej procedury bardzo ważne jest, aby przyzwyczaić zwierzęta do protokołu testowego i zaplanować od jednej do dwóch godzin aklimatyzacji każdego dnia testów.

measuring-skeletal-muscle-thermogenesis-in-mice-and-rats

Research

JoVE Journal

Behavior

Zachowanie

Opisano metodę obrazowania funkcjonalnego brunatnej tkanki tłuszczowej (BAT) u myszy, w której pobór 18F-fluorodeoksygukozy (FDG) przez BAT stymulowany zimnem jest oceniany nieinwazyjnie przy użyciu standaryzowanego protokołu micro-PET/CT. Metoda ta jest wiarygodna i czuła w wykrywaniu różnic w aktywności BAT w modelach mysich.

Obrazowanie funkcjonalne brunatnej tkanki tłuszczowej u myszy z wykorzystaniem micro-PET/CT z 18F-FDG

Ten protokół opisuje użycie analizatora składu ciała i systemu monitorowania metabolizmu zwierząt do charakteryzowania składu ciała i parametrów metabolicznych u myszy. Jako przykład zastosowania tych technik podaje się model otyłości wywołanej przez żywienie wysokotłuszczowe.

Analiza składu ciała i metabolicznego umieszczania w klatkach u myszy karmionych wysokotłuszczowo

Tutaj prezentujemy nową metodę dokładnego pomiaru różnic temperatur ciała w modelach myszy z pasywną anafilaksją układową (PSA) i alergią pokarmową za pomocą termometru na podczerwień. Procedura ta została dokładnie odwzorowana w poprzednich wynikach PSA.

Pomiar temperatury ciała myszy za pomocą termometru na podczerwień podczas pasywnej ogólnoustrojowej anafilaksji i oceny alergii pokarmowej

Nienaruszona regulacja wychwytu glukozy w mięśniach jest ważna dla utrzymania homeostazy glukozy w całym organizmie. Protokół ten przedstawia ocenę wychwytu glukozy stymulowanego insuliną i skurczem w izolowanych i inkubowanych dojrzałych mięśniach szkieletowych przy jednoczesnym określeniu wpływu różnych interwencji fizjologicznych na metabolizm glukozy w całym organizmie.

Pomiar wychwytu glukozy stymulowanego insuliną i skurczem w izolowanych i inkubowanych dojrzałych mięśniach szkieletowych myszy

Funkcjonalne obrazowanie i ilościowe określanie termogenicznych magazynów tłuszczu u myszy przy użyciu podejścia opartego na obrazowaniu mikro-PET/MR.

Wizualizacja i kwantyfikacja brązowych i beżowych tkanek tłuszczowych u myszy za pomocą obrazowania [18F]FDG Micro-PET/MR

Ten manuskrypt opisuje protokół do pomiaru podstawowej przemiany materii i zdolności oksydacyjnej termogenicznych adipocytów u otyłych myszy.

Określanie podstawowego wydatku energetycznego i zdolności adipocytów termogenicznych do wydatkowania energii u otyłych myszy

Tutaj prezentujemy protokół do ilościowego określenia fizjologicznego znaczenia wpływu aktywności brunatnej tkanki tłuszczowej (BAT) na metabolizm człowieka. Osiąga się to poprzez połączenie obciążenia węglowodanami i kalorymetrii pośredniej z pomiarami zmian temperatury nadobojczykowej. To nowatorskie podejście może pomóc w opracowaniu celu farmakologicznego dla termogenezy BAT u ludzi.

Wykorzystanie kombinacji kalorymetrii pośredniej, termografii w podczerwieni i poziomu glukozy we krwi do pomiaru termogenezy brunatnej tkanki tłuszczowej u ludzi

Tutaj prezentujemy protokół pomiaru aktywności brunatnej tkanki tłuszczowej po posiłku u ludzi i zwierząt laboratoryjnych.

Termografia w podczerwieni do wykrywania zmian w aktywności brunatnej tkanki tłuszczowej

W tym protokole przedstawiono metody istotne dla metabolomiki tętniczo-żylnej zoptymalizowanej pod kątem BAT przy użyciu GC-MS w modelu mysim. Metody te pozwalają na uzyskanie cennych informacji na temat wymiany metabolitów na poziomie organizmu, w której pośredniczy BAT.

Metabolomika tętniczo-żylna do pomiaru wymiany metabolitów in vivo w brunatnej tkance tłuszczowej

Tutaj opisujemy kompleksową metodę pomiaru mitochondrialnej fosforylacji oksydacyjnej w świeżych, przepuszczalnych włóknach mięśni szkieletowych z mięśni ludzkich lub myszy. Metoda ta pozwala na ilościowe określenie oddychania mitochondriów w czasie rzeczywistym oraz ocenę preferencji paliwowych i elastyczności metabolicznej przy jednoczesnym zachowaniu istniejących sieci mitochondrialnych i integralności błony.

Pomiar oddychania mitochondrialnego we włóknach mięśni szkieletowych ludzi i myszy za pomocą respirometrii o wysokiej rozdzielczości

Poznaj metodę pomiaru termogenezy mięśni szkieletowych u myszy i szczurów przy użyciu zdalnych transponderów temperatury. Technika umożliwia jednoczesne badanie wielu zwierząt z minimalnym zakłóceniem.

Pomiar termogenezy mięśni szkieletowych u myszy i szczurów

Przeglądaj więcej filmów